UNIVERSIDAD AUTÓNOMA

DE GUADALAJARA

INSTITUTO DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS

BOMBAS ATPasa
SESION 5

AUTOR: C.D. SERGIO JOAQUÍN LÓPEZ NIETO

 OBJETIVOS

 Enlistará las diferentes bombas ATPasa:

Na+ K+ ATPasa.
Ca++ ATPasa.
H+ K+ ATPasa.
 Precisará la función de la bomba ATPasa:
Na+ K+ ATPasa.
Ca++ ATPasa.
H+ K+ ATPasa.
 OBJETIVOS

 Ilustrará la estructura de las diferentes bombas

ATPasa:
Na+ K+ ATPasa.
Ca++ ATPasa.
H+ ATPasa.
 Precisará el mecanismo de acción de las bombas
ATPasa
Na+ K+ ATPasa.
Ca++ ATPasa.
H+ ATPasa de la mucosa gástrica.
 OBJETIVOS
 Enlistará los fármacos cardiacos que
utilizan como mecanismos de acción a la
bomba Na K ATPasa.
 INTRODUCCIÓN
 Esta proteína la caracterizó el danés Jens
Skou por casualidad en los años 50´, y
por ello recibió el premio Nóbel en 1997.
Desde entonces la investigación ha
determinado muchos de los aspectos
tanto de la estructura y funcionamiento de
la proteína, como de su función en la
fisiología, de tremenda importancia en
medicina.
 Definición de bomba Na+ K+
ATPasa
 Sistema enzimático acoplado a una
proteína integral de membrana que
transporta iones Na+ desde el interior de
la célula hasta el exterior y iones K+
desde el exterior al interior en contra de
sus respectivos gradientes de
concentración. Es un ejemplo
característico de transporte activo ya que
requiere la energía suministrada por el
ATP.
Precisará la función de la bomba
Na+K+ ATP asa
 El funcionamiento de la bomba
electrogénica de Na+/ K+(sodio-potasio) ,
se debe a un cambio de conformación en
la proteína que se produce cuando es
fosforilada por el ATP. Como el resultado
de la catálisis es el movimiento
transmembrana de cationes, y se consume
energía en forma de ATP, su función se
denomina transporte activo.
Precisará la función de la bomba
Na+K+ ATP asa
 La demanda energética es cubierta por la
molécula de ATP, que al ser hidrolizada,
separa un grupo fosfato, generando ADP
y liberando la energía necesaria para la
actividad enzimática.
Precisará la función de la bomba
Na+K+ ATP asa
 En las mitocondrias, el ADP es fosforilado
durante el proceso de respiración generándose
un reservorio continuo de ATP para los procesos
celulares que requieren energía. En este caso, la
energía liberada induce un cambio en la
conformación de la proteína una vez unidos los
tres cationes de sodio a sus lugares de unión
intracelular, lo que conlleva su expulsión al
exterior de la célula.
Precisará la función de la bomba
Na+K+ ATP asa
 Esto hace posible la unión de dos iones de
potasio en la cara extracelular que provoca la
desfosforilación de la ATP, y la posterior
traslocación para recuperar su estado inicial
liberando los dos iones de potasio en el medio
intracelular.
 Mecanismo de acción de la
bomba Na+K+ ATPasa
 Los procesos que tienen lugar en el
transporte son, secuencialmente:
a) Unión de tres Na+ a sus sitios activos.
b) Fosforilación de la cara citoplasmática de la
bomba que induce a un cambio de
conformación en la proteína. Esta fosforilación
se produce por la transferencia del grupo
terminal del ATP a un residuo de ácido
aspártico de la proteína.
 Mecanismo de acción de la
bomba Na+K+ ATPasa
d) Una vez liberado el Na+, se unen dos
moléculas de K+ a sus respectivos sitios de
unión de la cara extracelular de la proteína.
e) La proteína se desfosforila produciéndose un
cambio conformacional de esta, lo que
produce una transferencia de los iones de K+
al citosol.
Mecanismo de acción de la
bomba Na+K+ ATPasa
 ESTRUCTURA
 La bomba sodio potasio ATPasa (adenin-tri-
fosfatasa) es una proteína de membrana que
actúa como un transportador de intercambio
antiporte (transferencia simultánea de dos
solutos en diferentes direcciones) que hidroliza
ATP.
 Es una ATPasa de transporte tipo P, es decir,
sufre fosforilaciones reversibles durante el
proceso de transporte.
 ESTRUCTURA
 Está formada por dos subunidades, a y b, que
forman un tetrámero integrado en la membrana.
La subunidad a está compuesta por ocho
segmentos transmembrana y en ella se
encuentra el centro de unión del ATP que se
localiza en el lado citosólico de la membrana.
 También posee dos centros de unión al potasio
extracelulares y tres centros de unión al sodio
intracelulares que se encuentran accesibles para
los iones en función de si la proteína está
fosforilada.
 ESTRUCTURA
 La subunidad b contiene una sola región
helicoidal transmembrana y no parece ser
esencial para el transporte ni para la
actividad ATPasa.
 La enzima está glucosilada en la cara
externa y requiere de magnesio como
cofactor para su funcionamiento ya que es
una ATPasa.
ESTRUCTURA
 Bomba Ca++-ATPasa
 La bomba de calcio (o Ca++-ATPasa) de la
membrana plasmática se ha reconocido como la
enzima fundamental en la regulación de la
concentración citoplasmática basal de este
catión.
 Esta enzima que constituye el 80% de de las
proteínas de la membrana del retículo
sarcoplásmico, desempeña un papel importante
en la contracción muscular, que se dispara por
un aumento brusco del nivel de calcio en el,
citosol.
 Bomba Ca++-ATPasa
 La Ca++-ATPasa de la membrana
plasmática es estimulada por calmodulina
(CaM), su modulador proteico natural,
fosfolípidos acídicos y ácidos grasos poli-
insaturados de cadena larga.
 También puede ser estimulada mediante
fosforilación por la protein-quinasa A y por
la protein-quinasa C.
 Estructura
 ATP asa de Ca++ del retículo sarcoplásmico, consta de un
solo polipéptido de 110 Kd con un dominio
transmembranal que está formado por 10 hélices a.
Cerca de la mitad de la masa molecular de la proteína
está constituida por una gran cabeza citoplasmática que
contiene tres dominios distintos.
 Estos tres dominios de la bomba de Ca++ del retículo
sarcoplásmico tienen distintas funciones.
1.- Un dominio ( N) se une al nucleótido ATP.
2.- Otro (P) acepta el grupo fosforilo en el residuo de aspartato
conservado.
3.- Y en el tercero (A) podría ser un activador del dominio.
 La relación entre estos tres dominios cambia
significativamente con la hidrólisis de ATP.
 Mecanismo de acción
 Como resultado de los de su mecanismo de acción se
han revelado dos características comunes:
 La primera donde cada proteína puede ser fosforilada
en un residuo aspartato específico. Para la bomba de
Ca++ del retículo sarcoplásmico, esta reacción tiene lugar
en el Asp 351, sólo en presencia de concentraciones de
Ca++ relativamente altas.
 La segunda, que cada bomba puede pasar por, al
menos, dos conformaciones distintas denominadas E1 y
E2 . Así al menos, cuatro estados conformacionales
(E1,E1, P, E2, P, y E2) participan en el proceso de
transporte.
 Mecanismo de acción
 A partir de estos cuatro estados se propone un
mecanismo de acción de estas enzimas.
1.- La reacción cíclica propuesta inicia con ATP y
dos iones de Ca++ al estado E1.
2.- La enzima escinde el ATP y transfiere el grupo
fosforilo al residuo clave de aspartato. El calcio
debe estar unido a la enzima para que ocurra la
fosforilación.
3.- La transición del estado E1 al E2 provoca la
eversión de los centros de unión de iones de
tal forma que los iones pueden disociarse sólo
hacia la cara luminar de la membrana.
 Mecanismo de acción
4.- En el estado E2 –P, la enzima tiene una baja
afinidad por los iones de Ca++, de forma que se
liberan.
5.- Al liberarse el Ca++, se hidroliza el residuo
fosfoaspartato y se libera el grupo fosfato.
6.- La enzima cuando carece del grupo fosforilo
enlazada covalentemente, no es estable en la
forma E2. A través de eversión vuelve a la forma
E1, y completa así el ciclo.
 Bomba H+ ATPasa - Bomba de
Protones
 El jugo gástrico humano contiene una solución
de ácido clorhídrico (H+Cl-) 0.1 M. Este medio
fuertemente ácido desnaturaliza las proteínas
ingeridas, facilitando la digestión por las enzimas
proteolíticas, como la pepsina que funcionan a
pH ácido.
 El ácido clorhídrico es producido por las células
parietales que tapizan la mucosa gástrica. El
proceso implica una ATPasa situada en la
membrana apical de la célula, la parte que se
enfrenta al lumen del estómago.
 Bomba H+ ATPasa - Bomba de
Protones

 El transporte activo de H+ hacia el exterior de la

célula, ATP-dependiente, iría acompañado de un
transporte pasivo de Cl- para mantener la
electroneutralidad. Dicho transporte se haría a
través de una Cl-permeasa. El resultado neto
es que en el estómago hay una concentración
de HCl un millón de veces mayor que en
citoplasma de la célula.
 Bomba H+ ATPasa - Bomba de
Protones
 El protón excretado por la bomba de protones
proviene de la hidratación del CO2 por una
anhidrasa carbónica. El bicarbonato producido
es, a su vez intercambiado por cloro en una
proteína intercambiadora.
 Fármacos cardiacos que utilizan como
mecanismos de acción a la bomba Na K
ATPasa
 Las células conservan el contenido intracelular
de Na+ bajo y alto el de K+, junto con un
potencial eléctrico negativo dentro de ellas.
 La bomba que mantiene estos gradientes es
una ATPasa, que es activada por Na+ K+.
 La ATPasa es una proteína integral de
membrana y requiere fosfolípidos para la
actividad.
 La ATPasa tiene centros catalíticos para ATP y
Na+ en el lado citoplasmático de la membrana,
pero el sitio de unión de K+ se localiza en el
lado extracelular de la membrana.
 Fármacos cardiacos que utilizan como
mecanismos de acción a la bomba Na K
ATPasa
 La ouabaína o digitalis inhibe a esta ATPasa
mediante su unión a la región extracelular. El K+
extracelular puede ser antagonista de la
inhibición de la ATPasa por parte de la
ouabaína.
 La bomba de sodio-potasio encontrada en la
células del corazón es una diana importante
para los glucósidos cardiacos (como digoxina y
ouabaína), drogas inotrópicas ampliamente
usadas en la clínica para incrementar la fuerza
de contracción.
 Fármacos cardiacos que utilizan como
mecanismos de acción a la bomba Na K
ATPasa
 La digoxina es un glucósido cardiotónico, usado como
agente antiarrítmico en la insuficiencia cardiaca y otros
trastornos cardíacos. Actúa, como efecto directo,
inhibiendo la bomba Na+ K+ ATP asa en el corazón,
disminuyendo la salida de Na+ y aumentando la entrada
de Ca++, por lo que tiene un efecto inotrópico positivo,
aumentando la fuerza de contracción del músculo
cardiaco; y como efecto indirecto inhibe la bomba Na+
K+ ATPasa a nivel neural, creando una estimulación
vagal que disminuye la frecuencia cardiaca y la
estimulación simpática.
 CONCLUSIÓN

 Las bombas ATPasas son transductores de

energía, pues transforman una forma de energía
libre en otra. Dos tipos de bombas dirigidas por
ATP, las ATPasas tipo P y las bombas con
dominio de unión a ATP sufren cambios
conformacionales al unirse e hidrolizarse el
ATP, lo que provoca que un ion unido se
transporte a través de la membrana.
 CONCLUSIÓN
 Tanto las Ca++ ATPasa como la NaK* ATPasa
pertenecen al grupo de las ATPasas tipo P,
cuyas fosforilación y desfosforilación están
acopladas a cambios en la orientación y en la
afinidad de sus centros de unión a iones.
 BIBLIOGRAFÍA
 Bibliografía : Stryer (pag- 345-346-347-
348),
 Baynes (pag-95),
 Harper (pag- 478)