Microbiología Ambiental

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MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL

MICROBIOLOGIA
Ciencia que estudia los microorganismos, un amplio y diverso grupo de
organismos microscópicos unicelulares o pluricelulares, que incluye también a
los virus, viroides y priones.
MICROBIOLOGÍA AMBIENTAL

Estudio de las interacciones entre microorganismos y los componentes


bióticos y abióticos de su medioambiente para mantener una actividad
continua imprescindible para la vida en la biosfera. Incluye estudios de
ecología microbiana, geo-microbiología, diversidad microbiana y
biorremediación.
IMPORTANCIA DE LOS MICROORGANISMOS
IMPORTANCIA DE LA MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

• Las algas y cianobacterias contribuyen a la base energética de los ciclos


mediante la fotosíntesis.

• Los microorganismos reciclan la mayoría de los desechos orgánicos en


recursos reutilizables.

• Utilización de microorganismos en el tratamiento de las aguas residuales


para reciclar nutrientes, recuperación del metano.

• Los microbios limpian los desechos producidos por los animales domésticos.
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
(LIMPIEZA DE MATERIAL MICROBIOLÓGICO)
LIMPIEZA Y ESTERILIZACIÓN DEL MATERIAL MICROBIOLÓGICO

En el trabajo del laboratorio de Microbiología tienen importantísima aplicación


los procedimientos, técnicas y productos que suprimen o disminuyen la
vitalidad de los microorganismos patógenos.
Para asegurar el éxito de un proceso esterilizante es necesario considerar las
siguientes pautas:

1. Esterilización previa
2. Limpieza previa
3. Preparación del material de vidrio
1. ESTERILIZACIÓN PREVIA:

Será necesaria cuando el material y/ o equipos hayan sido utilizados con


material infeccioso o presunto infeccioso, por ejemplo placas de Petri
inoculadas, tubos conteniendo cultivos de microorganismos, etc. Serán
esterilizados en autoclave a 1 atm. de presión durante 15 – 30 minutos.

Para las pipetas, micropipetas y tubos de hemólisis puede emplearse este


método o sumergirlas inmediatamente después de ser utilizadas en solución
desinfectante de formol al 10 % durante una hora.
2. LIMPIEZA PREVIA:

Se realizará para eliminar las partes gruesas de suciedad o residuos no


infecciosos.

Se empleará el raspado con espátulas, cepillo, esponjas metálicas, paños,


etc. Se enjuagará repetidas veces bajo el chorro de agua corriente a presión
(conectando a la canilla un tapón perforado o tapando parcialmente con un
dedo). Se aconseja un último enjuague con agua destilada. Se dejará secar
en canasto o rejilla de alambre boca abajo a temperatura ambiente o estufa a
60 – 80 °C.
3. PREPARACIÓN DEL MATERIAL DE VIDRIO:

Este acondicionamiento debe realizarse de manera tal de asegurar la perfecta


esterilización del mismo en todos sus puntos y evitar la posterior
contaminación.

a. Placas de Petri: Se envuelven en papel craft (se esterilizan en estufa a


160- 180ºC durante dos o una hora respectivamente).
b. Tubos de ensayo: Se confecciona en tapón de algodón y se cubre con un
capuchón de papel aluminio. (se esterilizan en estufa).

c. Pipetas: Se obtura el extremo superior con un filtro de algodón y luego se


envuelven con tiras de 4 a 5 cm. de ancho de papel madera comenzando por
la punta de la misma. Debe rotularse cada una con la capacidad y graduación
correspondiente (se esterilizan en estufa).
ESTERILIZACIÓN DE MATERIALES
IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
(CULTIVO Y CRECIMIENTO DE MICRORGANISMOS)
MEDIO DE CULTIVO

El medio de cultivo químicamente definido


se prepara añadiendo cantidades precisas
de compuestos orgánicos e inorgánicos
puros a un volumen conocido de agua
destilada.
Tipos de medios de cultivo

Medios sólidos y líquidos


Los medios sólidos se preparan como los medios líquidos y se les
añade agar (1.5%) como agente gelificante.

El agar se funde durante el proceso de esterilización, el medio


fundido se vierte sobre placas Petri y se deja solidificar antes de su
uso.
Los medios sólidos inmovilizan a las células, permitiéndolas crecer y
formar masas aisladas visibles llamadas colonias.
Medios enriquecidos
Medios generales a los que se añaden nutrientes especiales para
mantener el crecimiento de microorganismos heterótrofos exigentes.
Ej., el agar sangre

Medios generales
Los medios generales mantienen el crecimiento de muchos
microorganismos. Ej., el caldo y agar nutritivo

Medios selectivos
Favorecen el crecimiento de microorganismos particulares. Ej.,agar
Levine (eosina-azul de metileno) y Agar MacConkey se emplean para
detectar enterobacterias. Contienen colorantes y sales biliares que
inhiben el crecimiento de las bacterias Gram positivas.
Medios diferenciales
Medios que diferencian entre grupos distintos de bacterias e incluso
permiten una identificación tentativa de los microorganismos según
sus características biológicas.
PREPARACIÓN DE UN MEDIO DE CULTIVO

Pesar la cantidad de medio de cultivo deseada.

Disolver los componentes del medio en agua


destilada.

Si el medio contiene un agente solidificante


hay que calentar el preparado hasta la
ebullición, removiéndolo constantemente.

Esterilizar la disolución. (Horno o incubadora)


PREPARACIÓN MEDIO DE CULTIVO (TUBOS)
PREPARACIÓN MEDIO DE CULTIVO (CAJAS PETRI)
INCUBACIÓN DE CULTIVOS
INÓCULOS (TUBOS)
OBTENCIÓN DE CULTIVOS
SIEMBRA EN PLACA

En una muestra de microorganismos tomada de la naturaleza encontraremos


diversos tipos mezclados.

Para poder caracterizar la actividad de cada uno de ellos debemos estudiar


cultivos que contengan un único tipo de microorganismo (cultivo puro).

Solamente con el sembrado en placa pueden obtenerse colonias aisladas.


SIEMBRA EN CAJAS PETRI

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