Antibiograma

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Antibiograma

curso: microbiología

Alumna: Roció Collazos .M


Conceptos
 Antibiograma: son métodos in Vitro que determinan
la susceptibilidad de los microorganismos a una variedad
de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de
laboratorio específica y estandarizada.

 Concentración Mínima Inhibitoria (CIM): Es


la menor concentración de una gama de diluciones de
antibiótico que provoca una inhibición de cualquier
crecimiento bacteriano visible.

 Antibióticos: Son sustancias químicas producidas por


organismos vivientes, o sintetizados en el laboratorio
capaces de inhibir en pequeñas cantidades los procesos
vitales de microorganismos, destruyendo e impidiendo su
desarrollo y reproducción.
Clasificación de los Antibióticos
 ß-lactámicos: Penicilinas, Monobactam.
 Glicopéptidos: Vancomicina.

 Aminoglicòsidos: Gentamicina, Amikacina.

 Macrólidos: Eritromicina, Azitromicina,


Claritromicina.

 Quinolonas: Ciprofloxacino, Levofloxacino.

 Tetraciclinas

 Sulfonamidas y trimetoprim: bactrin ,


exazol.
Método de Difusiòn en Disco
(Baeur-Kirby)
 Es el mas difundido.
 Prueba la inhibición o resistencia de los
microorganismos, enfrentándolos con los
medicamentos que se encuentran impregnados
en pequeños discos.
Medio de cultivo utilizado
Mueller Hinton
 Su reproducibilidad
aceptable.
 Baja concentración de
inhibidores, condición
crítica para evaluar
sulfonamidas, trimetoprim
y tetraciclina.
 El crecimiento satisfactorio
de patógenos no
exigentes.
 Existir ya gran experiencia
en estudios de
susceptibilidad.
Factores que influyen en el
Agar
pH: El rango de pH va de 7,2 a 7,4.
variación de cationes divalentes:
Ca y Mg: Afectan los halos de inhibición para
aminoglucósidos y tetraciclinas en
Pseudomonas aeruginosa.
Profundidad del Agar: La profundidad
recomendada de la capa de agar es de 3 a
5 mm.
Preparación del Inóculo
 Se prepara el inóculo con ajuste a la
turbidez McFarland 0,5 que
corresponde aun diámetro de1.5 x10
UFC/ML, directo en caldo de colonias
frescas en agar no selectivo.


Inoculación de la placa
 Con un
hisopo estéril
en tres
direcciones
inocule toda
la placa
(giros de
60°).
Aplicación de sensidiscos

separación: los
discos deben de
estar separados24
mm (del centro de un
sensidisco al otro
más cercano).

Cantidad: 12
unidades en placas
de 150mm y 5
unidades en placas
se 100mm.
Lectura e interpretación de los
resultados
Categorías de interpretaron:
Sensible: El microorganismo
presenta un gran área de inhibición
causada por el fármaco. 95% éxito

Intermedio: Se presenta un halo de


inhibición mas reducido.

Resistente: Presenta muy poco o


casi nada de halo.
ANTIBIOGRAMA
Medición de los halos

Después de incuba las placas


del antibiograma se procederá
a la lectura de este.
Se usa una regla y se mide el
radio del halo de inhibición
partiendo de desde donde está
el disco de antibiótico hasta
donde se inhibió el crecimiento.
La longitud obtenida después
se compararán con estándares
que nos dirán si el
medicamento será efectivo o
no en el tratamiento.
Antibiótico Resistente Intermedia Susceptible

Ampicilina ≤ 13 14 - 16 ≥ 17

Amikacina ≤ 14 15 – 16 ≥ 17

Sulfisoxasol ≤ 12 13 - 16 ≥ 17

Gentamicina ≤ 12 13 – 14 ≥ 15

Cloranfenicol ≤ 12 13 - 17 ≥ 18

Ceftriaxona ≤ 12 14 – 20 ≥ 21

Ciprofloxacin
≤ 15 16 - 20 ≥ 21
a

Tetraciclina ≤ 14 15 - 18 ≥ 19

Acido
≤ 13 14 – 18 ≥ 19
Nalidixico

Estrptomicina ≤ 11 12 – 14 ≥ 15

anamicina ≤ 13 14 - 17 ≥ 18

Trimetroprim/
Sulfametoxas ≤ 10 11 – 15 ≥ 16
ol
Otros métodos
 Dilución en Caldo: En el método de dilución en
caldo, base de casi todos los métodos utilizados en la
actualidad, se colocan concentraciones decrecientes del
agente antimicrobiano, generalmente diluciones 1:2, en
tubos con un caldo de cultivo que sostendrá el desarrollo
del microorganismo
 Método de E-test:
Consiste en aplicar sobre un medio de
cultivo, donde se encuentra el
microorganismo a ensayar, tiras plásticas que
llevan incluidas un gradiente de
concentración de un determinado ATB. Luego
se incuba adecuadamente y se observa la
formación de una elipse de inhibición de
crecimiento.
Método Automatizado:

Este método se basa en


micro diluciones sobre micro
tubos. El crecimiento
bacteriano se va a observar
por la turbidez o fluorescencia
de los micro tubos.
Es útil para examinar una
gran cantidad de muestras
GRACIAS

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