UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA DE LA SELVA

ESCUELA PROFESIONAL DE AGRONOMÍA

NEMATODOS BURSAPHELENCHUS

Elizabeth Y. Lijarza Rafaile

Tingo María
2018
Bursaphelenchus xylophilus (Steiner et Buhrer)
Es el nematodo de la madera del pino pertenece a la
clase de los Nematodos o gusanos cilíndricos, incluida
dentro de los invertebrados. Es un organismo
microscópico, de menos de 1 mm. de longitud total, por
lo que no es posible su detección a simple vista. Su
aspecto general, visto con ayuda del microscopio, es el
de un gusano alargado y con la cola terminada en punta,
llamada estilete, que utiliza para perforar las células de
los árboles de las que se alimenta. (6)
Según el Ministerio de Medio Ambiente, Medio Rural y Marino;
menciona que el nematodo Bursaphelenchus xylophilus dispone de
una situación geográfica, así:

 Mundial (excepto UE): China, Japón, Corea, Taiwán, Canadá,

México y Estados Unidos.

 Unión Europea: Zonas demarcadas en Portugal.

 España: Zona demarcada en Extremadura. (1)

Según FAO (2016)
Reino : Animalia
Filo : Nematoda
Clase : Rhabditida
Orden : Tylenchina
Suborden : Aphelenchoidea
Superfamilia : Aphelenchoididea
Familia : Parasitaphelenchidae
Género : Bursaphelenchus
Especie : Bursaphelenchus xylophilus (5)
El agente causal de la seca o marchitamiento de los pinos es
Bursaphelenchus xylophilus. Es un nematodo, especie de gusano
microscópico cilíndrico, de entre 0.4-1.5 mm de longitud total.
Posee la cutícula estriada y la región labial elevada y diferenciada
donde se localiza un robusto estilete (10-26 µm) que es empleado
para perforar las células vegetales de las que se alimenta. (8)
Glándula esofágica con lobo delgado, midiendo alrededor de 3 a
4 veces la anchura del cuerpo. Poro excretor al nivel de la unión
esófago-intestino, ocasionalmente en el mismo nivel del anillo
nervioso. El hemisferio con cerca de 0,67 de la anchura del
cuerpo, detrás del bulbo mediano. Vulva posterior, localizada en
el último cuarto corporal, con el labio anterior colgado formando
una lengüeta (pesa vulva). Tratamiento genital monoprodélico,
alargado. Los ovocitos desarrollados en fila simple, o única, en su
mayoría. Saco post-uterino bien desarrollado. Cola sub-
cilindroide con una punta bien redondeada. Mucro normalmente
ausente, pero algunas poblaciones pueden tener un moco muy
corto, midiendo 1 a 2 μm. (2)
Vulva de la hembra y detalle de la cola del género
Bursaphelenchus xylophilus.
Similar a la hembra en los aspectos generales. Espículas
grandes, fuertemente arcadas de modo que la barra
transversal prominente quede casi paralela al cuerpo,
cuando las espículas se retraen. El ápice es redondeado, sin
corte, con rostro prominente y agudo. La punta distal de
cada espícula se expande con un disco denominado
"cuculus". La cola es arcada con una punta que origina una
pequeña bursa o ala caudal. Siete papilas caudales están
presentes; un par adanal, una papila pre-anal ventral-
mediana y dos pares post-anales próximos a la cola, luego
antes del inicio de la bursa. (2)
Macho, detalle de la cola con la espícula en forma de
disco y la bursa, típica del género Bursaphelenchus.
 Fuente: Mamiya y Kiyohara (1972).

Bursaphelenchus xylophilus: A) hembra; B) macho; C) cola del macho; D) vista ventral de la

cola del macho, extremo con bursa; E) vista ventral de las espículas; F) hembra, región anterior;
G) vulva de la hembra; y H), I) y J) cola de la hembra.
Monochamus galloprovincialis

Alimentación de los adultos jóvenes en ramillas

“Pine Wilt Disease”:
Enfermedad del marchitamiento del pino
En la fase primaria, el vector adulto introduce larvas dauer del nematodo (4º
estadio o forma resistente), a través de su alimentación de ramillos jóvenes. Los
nematodos alcanzan los canales resiníferos donde se alimentan de sus células, se
desarrollan, mudan a adultos, copulan y realizan la puesta. La tasa de
multiplicación y distribución de los nematodos por el árbol depende de la
susceptibilidad del mismo y de las condiciones de estrés en que se encuentra.
Cuando las condiciones son óptimas se inicia el proceso de dispersión, las larvas
son atraídas hasta alcanzar las cámaras pupales antes de que emerja el adulto de
Monochamus sp. Los nematodos mudan al cuarto estadio larval, especializado en
la dispersión y ligado a este estado pupal, y son transportados por los adultos
inmaduros del vector cuando emergen de la madera. En la transmisión secundaria
el vector, al depositar los huevos bajo la corteza de los árboles, introduce larvas
dauer del nematodo. En esta fase las larvas del vector se alimentan de células del
cambium y las del nematodo de las hifas de los hongos introducidos por el vector.
(3)
 Relación forética entre Monochamus galloprovincialis (Coleóptero:
cerambícido) y Bursaphelenchus xylophylus

(Wingfield, 1983)
Hasta el momento, sólo existe evidencia de una moralidad
extensiva en masas forestales del género Pinus de los
países asiáticos alcanzados por la enfermedad.
De acuerdo a la legislación específica vigente (Decisión
2006/133/CE), se considera “madera y corteza sensibles” a
la madera y a la corteza aislada de coníferas (Coniferales),
excepto la de Thuja L., y “plantas sensibles” a las plantas
(excepto los frutos y las semillas) de Abies Mill., Cedrus
Trew, Larix Mill., Picea A. Dietr., Pinus L., Pseudotsuga Carr.
y Tsuga Carr. (7)
Una vez que un árbol susceptible es infectado por B. xylophilus,
este organismo se multiplica rápidamente, lo que deriva en un
rápido marchitamiento de acículas, y muerte del árbol en pocos
meses o incluso semanas.
 En la fase inicial de la enfermedad los nematodos migran a través
de los canales resiníferos del córtex y xilema destruyendo las
células epiteliales que los rodean lo que provoca un descenso en
la exudación de resina. Los mecanismos que inducen la
cavitación todavía no han sido establecidos, pero las hipótesis
apuntan a la oclusión del lumen de las traqueidas y punteaduras
por la oleorresina de los canales resiníferos, la exudación de
terpenoides y la evacuación del contenido de las vacuolas de las
células parenquimáticas de los radios xilemáticos. (4)
 En la fase avanzada de la enfermedad, el flujo de
oleorresina cesa o sufre una severa reducción,
coincidiendo con el aumento de la población de
nematodos; se produce la muerte del cambium y un
embolismo en cascada que lleva a la disfunción de la
conducción hidráulica en todo el xilema produciendo una
disminución de la transpiración y, consecuentemente, de
la fotosíntesis. Esto hace que se produzca el síntoma
más característico de la enfermedad, un progresivo
amarilleamiento de las acículas que terminan en la
muerte del árbol. (4)
1.-Toma de muestras
Para la toma de muestras se procede a la realización de una ficha y toma de
muestras en los puntos seleccionados, con aplicación del Protocolo de muestreo
del 2002 (seguimiento de puntos de la Red de Nivel I susceptibles en zona
fronteriza hispano-portuguesa ante la aparición del nematodo de la madera del
pino en Portugal):

 Selección de zonas con daño reciente de pies secos. Se realiza la toma

de muestras con independencia de la presencia de síntomas.
 Realización de una ficha caracterizadora de la zona.
 Toma de muestras de cinco pies en bolsa hermética debidamente
codificada. Se marcan dichos pinos para su posible futura identificación.
Las muestras de aproximadamente 150 gramos de peso se toman con
barrena de carpintero. La barrena se desinfecta siempre después de cada
pie muestreado. Tras la perforación, se procede al sellado del orificio
realizado.
 Almacenaje de la muestra con temperaturas entre 5 y 30 ºC hasta su
entrega en laboratorio. (10)
2.- Capturas
Para la captura en trampas cebadas con atrayente cairomonal-feromonal de
Monochamus se han utilizado dos modelos de trampa:

 Trampa multiembudo, compuesta por doce embudos que desvían

las capturas a un bote colector situado en la parte inferior de la
trampa.
 Trampa de intercepción de vuelo (en adelante TIV), compuesta por
dos vanos perpendiculares que vierten también a un bote colector.
(10)
Las muestras (virutas del tronco) recogidas durante las
prospecciones, una vez en el laboratorio, son incubadas
durante 15 días a 25 C; luego se procesan según el método
de extracción de Baerman y se determina bajo la lupa la
presencia de nematodos. La identificación de los géneros y
especies que aparecen en las muestras puede ser
morfológica, morfométrica o por técnicas moleculares. (11)
La presente sección contiene información sobre pruebas
moleculares que permiten la identificación de B. xylophilus en
nematodos aislados. Por lo general, las pruebas se realizan
después de un examen morfológico, a fin de confirmar el resultado
obtenido. En las siguientes subsecciones se presentan distintos
tipos de pruebas que abordan aspectos específicos, según se
describe al inicio de cada sección.
Se describen según el nivel inicial de sensibilidad, especificidad y/o
reproducibilidad adquirido. El uso de nombres de reactivos,
productos químicos o equipo en estos protocolos de diagnóstico no
implica su aprobación ni la exclusión de otros que también podrán
ser adecuados. Los procedimientos de laboratorio presentados en
los protocolos podrán ajustarse a las normas de los laboratorios
individuales, siempre que estén adecuadamente validadas. (5)
Las medidas clásicas de saneamiento son un componente
elemental de todos los planes de erradicación y contención de
EMP. Se basan en la destrucción tanto de árboles muertos
como de aquéllos en decaimiento. De este modo, se limita el
material disponible para la oviposición de su vector.
se realizan prospecciones anuales en las que todos los árboles
sintomáticos deben ser eliminados in situ mediante su
transformación en astilla o incineración, no dejando material
sensible mayor de 3 cm. Los árboles son destruidos durante los
meses de invierno, momento en el que tanto el nematodo como
las larvas de Monochamus se encuentran en el interior de la
madera. (4)
El uso de hongos y parasitoides, pese a que se encuentra en desarrollo, se
presenta como una alternativa potencial a los métodos químicos. En los
países asiáticos, diversos trabajos estudian el uso de parasitoides de
huevos o larvas de Monochamus. En cuanto a la utilización de hongos,
Trichoderma spp. parece ser el hongo más efectivo en la reducción del
número de nematodos con los que Monochamus emerge tras convertirse
en adulto. Asimismo, el hongo endoparásito Esteya vermicola ha mostrado
alta efectividad y gran potencial para el control de B. xylophilus. Del mismo
modo, el hongo entomopatógeno Beauveria bassiana, ha sido detectado
como el causante de la mortalidad natural de larvas de Monochamus en
campo, pudiendo ser utilizado como agente regulador de las poblaciones
del insecto. Por tanto, la inoculación combinada de ambos hongos, B.
bassiana y E. vermicola, podría llegar a ser un buen método de control,
aunque su aplicación todavía requiere más estudio. (4)
En países asiáticos como Japón, China y Corea el uso de
insecticidas para el control de las poblaciones del insecto vector es
una práctica muy extendida. Se aplican insecticidas organofosforados
como el fenitrotión y el fentión mediante aspersión aérea para el
tratamiento de grandes superficies arboladas. Este método es
preventivo, no detiene los daños, aunque parece retrasar el progreso
de la enfermedad y permitir una recuperación de las poblaciones de
pinos No obstante, su aplicación ha sido cuestionada por su relativa
eficacia, al ocasionar la destrucción de los enemigos naturales, y
suponer un peligro para la salud humana y el medio ambiente. De
hecho, en Europa la Directiva 2009/128/CEE prohíbe la pulverización
aérea de plaguicidas. (4)
Un método alternativo es la inyección de insecticidas o
nematicidas en el tronco, siendo el benzoato de emamectina
uno de los compuestos más utilizados. Es un método directo
para el control del patógeno; sin embargo, no es práctico para
ser utilizado en grandes masas, siendo únicamente idóneo para
su utilización en árboles singulares y/o de gran importancia para
la conservación (Shin 2008); además el tratamiento ha de
repetirse cada dos o tres años, en función de la dosis y el
compuesto utilizado. (4)
Decisión 2006/133/CE de la Comisión, de 13 de febrero de 2006, por
la que se exige a los Estados miembros que adopten, con carácter
temporal, medidas complementarias contra la propagación de
Bursaphelenchus xylophilus (Steiner et Buhrer) Nicle et al. (el
nematodo de la madera del pino), en lo que respecta a zonas de
Portugal distintas de aquellas en las que se haya comprobado su
ausencia. Modificada por:

•Decisión 2008/340/CE de la Comisión, de 25 de abril de 2008.

•Decisión 2008/378/CE de la Comisión de 15 de mayo de 2008.
•Decisión 2008/684/CE de la Comisión de 19 de agosto de 2008.
•ƒ
Decisión 2008/790/CE de la Comisión de 7 de octubre de 2008. (7)
 Tasa de invasión = (S / (I + S + A)) x 100 (%)

Diseño del bioensayo de doble elección. El conteo de nematodos se realiza de forma

separada por especie en: A: discos de agar de 21mm de diámetro bajo los segmentos
de ramillos, I: sección de 3mm de los ramillos, S: sección de 17mm de los ramillos. (9)
Número de nematodos recuperados en el Experimento 2 (2015) por especie en
segmentos de 20 cm, transformados con log10(x+1). PT: Pinus pinaster, R: P. radiata,
PA: P. pinea, H: P. halepensis, PS: Pseudotsuga menziesii.

En estas especies, transcurridas 3

semanas desde la inoculación tanto la
mediana como el máximo número de
nematodos fue mayor en el Experimento
2, destacando que la mediana en P. pinea
fue 15 veces mayor en el Experimento 2.
Todas las especies presentaron un mayor
número de nematodos tras 3 semanas
desde la inoculación con la excepción de
P. pinaster que a las 2 semanas alcanzó
el número máximo de nematodos. (9)
Número máximo (Máx), mínimo (Mín) y mediana del número de nematodos transcurridas 1, 2
y 3 semanas tras la inoculación en el experimento realizado en 2014 (Exp 1) y el experimento
realizado en 2015 (Exp 2).
1. MINISTERIO DE MEDIO AMBIENTE Y MEDIO RURAL Y MARINO. Ficha descriptiva de
organismos nocivos. file:///F:/nematodos/pdfs/bursaphelenchus_xylophilus.pdf.
2. BOLLETIN OEPP/EPPO. 2013. PM 7/4 (3) Bursaphelenchus xylophilus.
file:///F:/nematodos/pdfs/pm7-004-3-en.pdf.
3. GOBIERNO ARAGON. 2011. NEMATODO DE LA MADERA DE PINO Bursaphelenchus
xylophilus (Steiner et Buhrer) Nickle et al. Nematoda. Fam. Aphelenchoididae.
file:///F:/nematodos/pdfs/2011-4informacionestecnicas.pdf.
4. Menéndez G. María. 2017. Resistencia Pinus pinaster Ait. al marchitamiento del pino
causado por Bursaphelenchus xylophilus (Steiner & Burher), Nickle.
file:///F:/nematodos/pdfs/Resistencia_de_pinus_pinaster.pdf.
5. ORGANIZACIÓN DE LAS NACIONES UNIDAS ARA LA ALIENTACION Y LA
AGRICULTURA. 2016. PD10: Bursaphelenchus xylophilus.
file:///F:/nematodos/pdfs/DP_10_2016_Es_2018-01-15_RevLRG.pdf.
6. GOBIERNO DE CANTABRIA. 2019. Bursaphelenchus xylophilus (Steiner et Buhrer)
Nickle et al. (Nematodo de la madera del pino).
file:///F:/nematodos/pdfs/2%20Cantabria%20Tríptico.pdf.
7. JUNTA ANDALUCIA. 2008. Programa para la aplicación de la normativa fitosanitaria
relativa al nematodo de la madera del pino (Bursaphelenchus xylophilus).
file:///C:/Users/Compu.CHEX/Desktop/nematodos/pdfs/plan_andaluz_contingencia_burs
aphelenchus.pdf.
8. CONSEJERIA DE MEDIO AMBIENTE, CONSEJERIA DE AGRICULTURA Y PESCA.
2010. Seca de los pinos. file:///F:/nematodos/pdfs/seca_pinos.pdf.
9. GESTION DEL MONTE: SERVICIOS MABIENTALES Y BIOECONOMIA. 2017.
Metodologías para la determinación del grado de susceptibilidad de Pinus spp. frente a
Bursaphelenchus xylophilus.
file:///C:/Users/Compu.CHEX/Desktop/nematodos/pdfs/7CFE01-477.pdf.
10. MINISTERIO DE MEDIO AMBIENTE Y MEDIO RURAL Y MARINO. Ensayo de
compuesto cairomonal-feromonal para monochamus galloprovincialis (olivier, 1795) y
avance de resultados del muestreo sobre nemátodo del pino (Bursaphelenchus
xylophilus (steiner & buhrer, 1934) nickle, 1970) en el marco de la red europea de nivel I
y espacios gestionados por la age.
file:///C:/Users/Compu.CHEX/Desktop/nematodos/pdfs/Ensayo_compuesto_cairomonal-
feromonal_M.galloprovincialis_y_en_marco_de_nivel_I_(1).pdf.
11. DEUTACION PONTEVERA. Detección de nematodo del pino Bursaphelenchus
xilophilus en GALICIA.
file:///C:/Users/Compu.CHEX/Desktop/nematodos/pdfs/Ficha56_Bursaphelenchus_xilop
hilus.pdf.