Biometría Hemática

Importancia de una biometría hemática:

La Biometría Hemática también denominada
Hemograma, es uno de los estudios de rutina de
mayor importancia, ya que la información que de
aquí se deriva nos proporciona una idea muy
confiable del estado general de la salud del
paciente.
Es conocer como están los valores dela persona del
THO. cuenta eritrocitaria, hg(esos son dela formula
roja) la formula banca es cuenta diferencial,
recuento de G.B y las plaquetas, también es
conocida como cartometría hemática, hemograma,
y citología hemática.
Pruebas y exámenes que se realizan en
una BH.
*Determinación del hematocrito.
*Cuenta eritrocitaria.
*Cuenta leucocitaria.
*Cuenta diferencial leucocitaria.
*Tinción de wright.
*Cuenta plaquetaria.
•Esun tejido fluido que circula
por CAPILARES, VENAS y
ARTERIAS.
•Su color ROJO característico es debido a la
presencia del pigmento hemoglobínico.

• Tiene una fase solida y una fase liquida.

• Es la distribución e integración sistemática, cuya
contención en los vasos sanguíneos admite su
distribución hacia casi todo el cuerpo.
Se compone de células y componentes
extracelulares. Estas dos fracciones tisulares
están representadas por:

•Loselementos formes : son elementos

semisolidos y particulados.

•El plasma sanguíneo: es un fluido traslucido

amarillento que representa la matriz
extracelular liquida.
•Constituyenalrededor del 45% de la sangre. El otro
55% esta representado por el plasma sanguíneo.

•Son variados en tamaño, estructura y función y se

agrupan en:
Células sanguíneas: que son los glóbulos blancos o
leucocitos, células que `` están de paso`` por la sangre para
cumplir su función en otros tejidos.

Derivados celulares: están representados por los

eritrocitos y las plaquetas; son los únicos que cumplen sus
funciones estrictamente dentro del espacio vascular.
•Constituye aprox. el 96% de los elementos
figurados.

•Su valor normal en la mujer es al rededor de

4.8 y en el varón 5.4 millones de hematíes por
mm³.
• Carecen de núcleo, contienen algunas vías
enzimáticas y su citoplasma está ocupado casi
en su totalidad por la hemoglobina.

• En la membrana plasmática de los eritrocitos

están las glicoproteínas.

• Tienen forma de disco, bicóncavo, deprimido en

el centro.
•Es una proteína conjugada.

•También transporta el dióxido de carbono.

•Losniveles normales están entre 12 y 18 g/dl de

sangre.

•Constituye el 90% de los eritrocitos y como pigmento,

otorga su color característico ROJO.

•Tiene una vida media de 120 días.

•Forman parte de los efectores celulares del sistema inmunitario y
son células con capacidad migratoria.

•Son los encargados de destruir los agentes infecciosos y las

células infectadas.

•También segregan sustancias protectoras como los anticuerpos.

•El conteo normal esta dentro de un rango de 4.5 y 11.5 mil

células por mm³ de sangre.
•
•Elrecuento porcentual de los diferentes tipos de leucocitos se
conoce como ``formula leucocitaria´´.
Según su citoplasma y su núcleo se dividen en :

•Los granulocitos : son los neutrófilos, basófilos y

eosinófilos; poseen un núcleo polimorfo y numerosos
gránulos en su citoplasma, con tinción diferencial según
los tipos celulares.

•Los agranulocitos: son los linfocitos y los monocitos;

carecen de gránulos en el citoplasma y tiene un núcleo
redondeado.
•NEUTROFILOS: presentes en sangre entre 2.5 y 7.5 mil células
por mm³. Son los mas numerosos, ocupando entre un 55 y 75 % de los
leucocitos.
•Se encargan de fagocitar sustancias extrañas que entran en el
organismo.
•Su núcleo característico posee de 3 a 5 lóbulos separados por
finas hebras de cromatina.

•BASOFILOS: se cuentan de 0.1 a 1.5 células por mm³ en sangre .

Comprendiendo de 0 a 1% .
•Segregan sustancias como la heparina y la histamina.
•Poseen un núcleo a menudo cubierto por los gránulos de secreción.
•EOSINOFILOS: presentes en la sangre de 50 a 500 células
por mm³ en sangre esto es entre 1 a 4% de los leucocitos.
•Su núcleo característico posee dos lóbulos unidos por una fina
hebra de cromatina y por ello también se les llama ´´células en
forma de antifaz´´.
•MONOCITOS: conteo normal entre 150 y 900 células por
mm³ esto es de 2 a 8% del total.

•Son celulas con núcleo definido y con forma de riñón.

•LINFOCITOS: su valor normal es entre 1.3 y 4.0 mil por mm³

esto es 24 a 32% del total.

•Son los efectores específicos del sistema inmunitario,

ejerciendo la inmunidad adquirida y la humoral.

•Hay dos tipos de linfocitos : los linfocitos T y los linfocitos B.

•LOS LINFOCITOS B están encargados de la inmunidad
humoral, esto es, la secreción de anticuerpos.
•También son celulas responsables de la producción de unos
componentes del suero de la sangre.

• LOS LINFOCITOS T reconocen las celulas infectadas por los

virus y las destruye con ayuda de los macrófagos.
•Constituyen el 70% de todos los linfocitos.
•Sonfragmentos celulares pequeños de 2 a 3 µm de
diámetro , ovales y sin núcleo.

•Se producen en la medula ósea.

•Su valor normal es de 150 a 450 mil plaquetas por mm³.

•Sirven para taponar las lesiones que pudieran afectar a

los vasos sanguíneo .

•En el proceso de formación del coagulación, las

plaquetas contribuyen a la formación del coagulo y son
las responsables del cierre de las heridas vasculares.
•Esla porción liquida de la sangre en la que están
inmersos los elementos formes.

•Essalado y de color amarillento translucido y es

mas denso que el agua.

•El volumen plasmático total se considera como

de 40-50 mL/kg peso.
•Es esencialmente una solucion
acuosa de composicion compleja
conteniendo 91% agua y 8% proteinas
y algunos rastros de otros materiales.

•Loscomponentes del plasma se

forman en el higado, las grandulas
endocrinas y otros en el intestino.

•Tambien llevan los alimentos y las

sustancias de desecho recogidas de
las celulas.
 Esun examen que mide el porcentaje
del volumen de toda la sangre que
está compuesta de glóbulos rojos.
 Microcentrifuga
 Plastilina
 T.capilar
 Muestra de sangre
 Carta de lectura hto.
 Gasa
1.Realizar la extracción sanguínea.

2.Mezclar bien la muestra, para homogenizar

la sangre con el EDTA y evitarla
coagulación de la misma.

3.Llenar el capilar apoyando uno de los

extremos sobre la sangre.(por capilaridad).
4.Al llenarse el capilar a ¾ partes de su
capacidad, tapar con el dedo índice
para parar el flujo de sangre.

5.Despues, es necesario taponear con

plastilina en 3 diferentes puntos
6.Centrifugar el capilar durante 5 min. A 12
000 rpm. En la micro centrifuga para
hematocrito.

7.Una vez centrifugado el capilar se

compara en la tabla de lectura para
conocer el resultado (%) tomando en
cuenta que el % de G.R con respecto al
total de sangre (100%).
hombre: 40-54 %

mujer:35-47 %
 No llenar correctamente el capilar
 No sellar bien nuestro extremo mas
próximo ala sangre
 No colocar de manera correcta los
capilares en la micro centrifuga.
 Colocar mal el capilar en la tabla de
referencia.
:
 VALORES DE REFERENCIA:

Sexo Valor mínimo Valor máximo

Hombre 13.8 17.2
Mujer 12.1 15.1
Unidades: g/dL (gramos por decilitro).
 MATERIALES:
• Tubos de ensayo de 13 x 100 ml
• Pipetas de 5ml
• Pipetas de Shalí
• Boquillas
• Gradillas
• Gasa
• Celdas para espectrofotómetro
• Sangre capilar o venosa con anticoagulante
 REACTIVOS:

• DRABKIN:
ferrocianuro de potasio
cianuro de potasio
bicarbonato de potasio
• MUESTRA PATRON
 PREPARACION DE LA MUESTRA:
1.- Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de
reactivo de Drabkin
2.- Homogeneizar bien la sangre
3.- Llenar en sangre hasta la marca de la pipeta
de Shali
4.-Mezclar la sangre con el disolvente
5.- Dejar Reposar 10 min. Para la formación de
cianometahemoglobina
 PREPARACION DE MTRA. PATRON
1.- Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de
reactivo de Drabkin
2.- Homogeneizar bien la muestra patrón
3.- Llenar hasta la marca de la pipeta de Shali
4.-Mezclar la sangre con el disolvente
5.- Dejar Reposar 10 min. Para la formación de
cianometahemoglobina
 PREPARAR UN BLANCO

• Colocar en una celda del

espectrofotómetro el
reactivo de Drabkin
 DETERMINACION DE HEMOGLOBINA
• CALIBRAR EL ESPECTOFOTOMETRO A 540nm
• TARAR A CERO CON EL BLANCO/REACTIVO
• MEDIR LA ABSORBANCIA DE LA MUESTRA PATRON
• TOMAR MEDIDA DE ABSORBACIA DE LA MUESTRA
PROBLEMA
• COMPARAR CON LA CURVA CALIBRADA DE
ESTÁNDARES
 CALCULO DE CURVA DE
ESTANDARES
FACTOR: CONCENTRACION PATRON /
ABSORBANCIA PATRON

HEMOGLOBINA (gr/dl):
factor x abs. muestra
Cuenta Eritrocitaria
 Material
 Tubos de ensaye
 Pipeta Thoma (GR)
 Cámara de Neubauer
 Boquilla
 Microscopio
 Gasa
 Gradilla
 Liquido de Hayem
 Sangre con anticoagulante
Procedimiento
 Llenar la pipeta de thoma (gr) hasta la
marca 0.5
 Se limpia con gasa la parte externa de la
pipeta
 Completar con liquido de hayem hasta la
marca 101
 Agitar por 3 min
 Colocar cubrehematimetro sobre la
cámara
 Desechar las 4-5 primeras gotas de la
pipeta & llenar la cámara por uno de los
bordes del cubrehematimetro
 Dejar reposar 3.5 minutos
 Observar con objetivo de 40x
Calculo
 N X 10, 000
Valores de referencia
 Mujeres: 4.5 a 5.8 millones / mm3
 Hombres: 4.3 a 5.0 millones / mm3
FORMULA
BLANCA
Recuento de leucocitos:
el método de referencia es el de recuento en cámara, que
tiene un coeficiente de variación que oscilan entre el 6.5% con recuentos
normales elevados y del 15% con recuentos leucocitarios bajos

Evaluación de infección, inflamación, intoxicación, anemia,

leucemia, desórdenes mielo y linfoproliferativos, inmunosupresión
de médula ósea, leucocitosis, leucopenias.

Los valores normales son de 5000 a 10000 celulas/mm3

MATERIALES:
• -Cámara de Neubauer
•-Micropipeta de 20 μl
•-Pipeta de 2 ml
•REACTIVOS: Líquido de Turk. Se prepara un volumen total de 100 ml agregando
2.0 ml de Ácido Acético Glacial a 98.0 ml de agua destilada.
•MUESTRA: Sangre entera anticoagulada con EDTA (Tubos tapa color lila)
 PROCEDIMIENTO

• 1. Diluir la sangre 1:2 con una solucion hipotonica

acetilico que destruye a los eritrocitos.
• 2. Llenar la pipeta con sangre bien mezclada hasta la
marca 5
• 3.Limpiar cuidadosamente la pipeta por fuera
• 4. Aforar con solucion de Turk hasta la marca II
• 5. Agitar la pipeta por 3 min
• 6. Desechar las 4 primeras gotas y cargar la camara de
Neubauer
• 7. Dejar reposar la camara x 3 min.
• 8. Enfocar con objetivo 10x y contar leucocitos.
• 9. Multiplicar por 50 el promedio de leucocitos. Contar
los elementos presentes en los 4 cuadrados principales,
sumarlos.
CALCULO Leucocitos/mm3= Elementos contados x 50
 Recuento
diferencial
• El recuento diferencial
enumera cada tipo de
leucocito por cada 100
células contadas
Técnica:
 Procedimiento:
1. hacer un frotis sanguíneo
2. Fijar con alcohol metílico
3.Sumergir el porta objeto en eosina durante 5-
6 segundos
4.Lavar con buffer y sacudir para eliminar el
exceso
5. Ahora sumergir en azul de metileno de 5-7
segundos.
6.Lavare con buffer y dejar secar.
7.Agregar 1-2 gotas de aceite de inmercion
8.Enfocar en un microscopio en 40x y contar en
100x
Celula Descripcion Porcentaje
Neutroffilo Nucleo segmentado, 40%-75%
citoplasma incoloro, granos
grisaseos
Linfocito Citoplasma azul, cromatina 20%-45%
purpura azulado
Monocito Nucleo ariñonado, 2%-10%
citoplasma azul-grisaseo
Eosinofilo Nucleo de antifaz, granos 1%-6%
anaranjados
basofilo Nucleo en S, granulos 1%
grandes azules
PLAQUETAS
Jessica Rivera Garcia.
 Generalidades.
• Las plaquetas son pequeños fragmentos
citoplasmáticos derivados se sus células
precursoras llamadas megacariocitos.
• Su vida media oscila entre 8 y 12 dias.
• Estas juegan un papel fundamental en la
hemostasia.
 Conteo plaquetario.

El conteo de las plaquetas se puede

realizar para controlar o diagnosticar
enfermedades, o para identificar la
causa de un sangrado excesivo.
 Tinción de Wright.
Recursos:
Sangre sin anticoagulante.
Portaobjetos
Colorante de Wright (alcohol metílico, eosina, azul
de metileno)
Microscopio
Aceite de inmersión
 Metodología
Realizar por lo menos 4
extendidos en portaobjetos.

Fijar con alcohol de metileno.

Sumergir el portaobjetos en la eosina por
3-5 segundos

Sumergir en el azul de metileno por 3-5

segundos.
Enjuagar y dejar secar

Agregar 1-2 gotas de aceite de inmercion

Enfocar en 40x y contar en 100x

Las plaquetas se cuentan en 10 campos, se
suman y se multiplican por 1000
 Material

sangre venosa con EDTA al 10%

tubo de ensayo de 13 x 100ml
pipeta de Thoma para glóbulos rojos
cámara de Neubauer
caja de Petri
Gradilla
Colorante de azul de cresil brillante al 1%
 Metodologia.
Mezcle cuidadosamente 10 veces
la sangre anticoagulada.

Llene la pipeta con la muestra de sangre

hasta la marca 1.0
Elimine el exceso de sangre de las paredes
externas de la pipeta.

Aspire el líquido diluente hasta la marca

101 exactamente
deje la pipeta en reposo durante 3 minutos

Agite durante 10 minutos

Tirar las primeras 3 gotas de la disolución

Llene la cámara de Neubauer en ambos
lados y coloque en ambiente húmedo
por 10 minutos.

Coloque la cámara en el microscopio.

Enfoque con objetivo de 40X y observe.
 CALCULOS

Plaquetas /mm = Numero de plaquetas

contadas X 1000
 VALORES NORMALES.
El rango normal para el recuento de
plaquetas es de 150.000 a 400.000xmm