Coliform Es

COLIFOR
MES
Coliformes: Son un
bacterianas que tienen
bioqumicas en comn
intestino. Agrupa a todas
Escherichia
Salmonella
Shigella
Klebsiella
Enterobacter
Citrobacter
Yersinia
Serratia
Proteus
grupo de especies
ciertas caractersticas
y que colonizan el
las enterobacterias:
Caractersticas generales del

grupo:
Bacilos Gram (-).
Su tamao oscila entre 0.5 y 2.0 m de
ancho y de 2.0 a 4.0 m de largo.
Bordes rectos y extremos curvos.
Temperatura ptima de crecimiento: 37C.
Aerobias o anaerobias facultativas.
Mviles o inmviles
Poseen o no capsula.
Fermentan o no la lactosa.
Familia
8 Tribus con Enterobacteriaceae
los correspondientes gneros en cada una
de ellas
Tribu I: ESCHERICHIEAE: Gnero I: Escherichia /
Gnero II: Shigella
Tribu II: EDWARSIELLEAE : Gnero I: Edwarsiella

Tribu III: SALMONELLEAE: Gnero I : Salmonella
Tribu IV: CITROBACTEREAE : Gnero I : Citrobacter
Tribu V: KLEBSIELLEAE: Gnero I: Klebsiella / Gnero II:
Enterobacter
Gnero III: Hafnia/
Gnero IV: Serratia
Tribu VI: PROTEEAE: Gnero I: Proteus / Gnero II: Morganella
Gnero III: Providencia
Tribu VII: YERSINIEAE : Gnero I : Yersinia
Tribu VIII: ERWINIEAE : Gnero I: Erwinia
TIPIFICACIN
BIOTIPIFICACIN: CARACTERES BIOQUMICOS
SEROTIPIFICACIN: ANTGENOS O (SOMTICOS), K
Vi (CAPSULARES) y H (FLAGELARES)
SEROGRUPOS Y SEROTIPOS
FAGOTIPIFICACIN: DE VALOR EN Salmonella y E. coli
PATRN DE RESISTENCIA A LOS ANTIMICROBIANOS
GENOTIPIFICACIN MOLECULAR: GRUPOS
CLONALES, etc.
Antgenos de
Enterobacteriaceae
K Ag
Salmone
lla
Clasificaci
n:
Subgrupo
1
Subgru
po 2
Subgrupo
3
Subgrup Subgru
o4
po 5
Subgru
po 6
S. typhi
S.
choleraesui
s
S.
paratyphi
S.
gallinarum
S.
pullorum
S.
S.arizonae S.
S.
salamae S.
houtenae bongori
diarizonae
S. indica
CARACTERSTICAS DEL
GNERO:
Bacilos Gram (-).

Anaerobios facultativos.
Flagelos periticos.
No posee cpsula
No forma esporas
Mviles.
Producen H2S.
Glucosa (+).
Lactosa (-)
MORFOLOGA COLONIAL
Colonias
transparentes
MacConkey
EMB
Salmonella-Shigella Agar
Colonias
transparentes con
centro negro
Hektoen Enteric Agar
Colonias azulverdosas con centro

negro de H2S.
XLD Medium
Colonias rojas con

centro negro (H2S).
Agar sulfito de
bismuto
Colonias negras
con brillo
metlico.
PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO
KIA
GAS H2S
Salmonel
la
K/A
+ +
IND CIT
MO
V
LIS ARG
OR
N
- + + + +/- +
URE
Shigella
Clasificaci
Serogrup Serogrup
n:
oA
S.
dysenteriae
oB
S. flexneri
Serogrup Serogrupo
oC
D
S. boydii
S. sonnei
CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Bacilos Gram (-)
No forma esporas
Inmviles
Aerobios-anaerobios facultativos.
Citocromo-oxidasa negativos.
Fermentan la glucosa sin produccin
de gas.
No decarboxilan la lisina.
No fermentan la lactosa.
No utilizan el citrato como nica
fuente de carbono.
MORFOLOGA COLONIAL
Colonias transparentes
Agar Hektoen
entrico
Colonias verdosas y
plidas en la
periferia
Agar SalmonellaShigella
Colonias transparentes sin

ennegrecimiento,
traslcidas u opacas y lisas
XLD Medium
Colonias rojas transparentes
PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO
KIA GAS H2S
IND CIT
MO
V
LIS ARG
Shigella
Grupos
A,B y C.
K/A
-/
+
S.
sonnei
K/A
OR
N
URE
Klebsiella
Clasificaci
n:
K. oxytoca
K.
ornithinolytica
ESPECIES
K. planticola K. pneumoniae
Subespecies:
K. ozanae
K. rhinoscleromatis
K. terrigena

Bacilos Gram (-)
Inmviles
Fermentadora fuerte de lactosa
Fermenta la glucosa
Poseen una prominente cpsula de
polisacridos
Descarboxilan la lisina
No decarboxilan la ornitina (excepto K.
ornithinolytica)
Hidrolizan lentamente la urea
Utilizan el citrato como fuente de
carbono
MORFOLOGA COLONIAL
MacConkey:Colonias
grandes mucoides de
color rosa fuerte
EMB:Colonias grandes
color prpura, aspecto
mucoide, sin brilo
XLD: Colonias amarillo

brillante por
fermentacin de ms
de un carbohidrato.
PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO
KIA
GAS
H2S
IND
CIT
MOV
LIS
ARG
ORN
URE
K.
pneumonia
e
A/A
++
K. oxytoca
A/A
++
Enteroba
cter
Clasificaci
n:
E. aerogenes
E.
amnigenus
E. asburiae
ESPECIES Y SUBESPECIES
E.
cancerogenus
E. cloacae
E.
sakazakii
E. gergoviae
E. hormaechei
E.
dissolvens
E.
intermedius
E. pyrinus
Bacilos Gram (-)

Movilidad por flagelos
Fermentadora de lactosa
Fermenta la glucosa
Decarboxilan la ornitina
Indol negativo
Utilizan el citrato como fuente
de carbono.
MORFOLOGA COLONIAL
E. Aerogenes y E. coli
K. pneumoniae y E. coli
EMB
E. Aerogenes
K. pneumoniae
XLD:
E.
aerogenes.
Colonias amarillas de 2-5
mm,
brillantes
y
prominentes.
PRUEBAS BIOQUMICAS
GENERO
KI
A
GAS
H2S
IND
CIT
MO
V
LIS
ARG
OR
N
URE
E.
Aerogen
es
A/A
E.
cloacae
A/A
+
+
+
+
+ -/+
Serratia
Clasificaci
n:
ESPECIES Y SUBESPECIES
S.
entomophila
S. ficaria
S. Fonticola
Gpo: S.
liquefaciens
S. grimesii
S. proteamaculans
S.
marcescens
S. plymuthica
S. rubidaea

Bacilos Gram (-)
Movilidad por flagelos
Productora de Dnasa, lipasa y gelatinasa
Algunas cepas son productoras de
pigmento rojo (S. marcescens).
Resistentes a la cefalotina y colistina.
No fermenta la lactosa.
Fermenta la glucosa.
Productora de gas.
XLD:
colonias
pequeas de borde
entero
con
pigmentacin roja y
halo amarillo.
Brillantes.
Serratia marcescens
Neisseria
gonorrhoeae
CUADRO CLNICO
Agente causal de la gonorrea
Hombre: uretritis; secrecin purulenta , prurito y
miccin dolorosa.
Mujer: endocervicitis; disuria, leucorrea, prurito
genital y dolor abdominal.
Infecciones no tratadas: bacteriemia gonocccica;
lesiones cutneas: ppulas o pstulas hemorrgicas.
Oftalmia neonatal gonocccica.
Diagnostico en
el laboratorio
Identificacin en medios de cultivo

Exigente a nivel nutricional.
Medios selectivos enriquecidos:
Thayer Martin modificado: vancomicina (3 g/ml), colistina
(7,5 g/ml),nistatina (12,5 g/ml) y lactato de trimetropim
(5 g/ml) .
New York City.
Agar Mueller Hinton modificado.
Agar Martin Lewis.
Medios enriquecidos:
Gelosa chocolate.
Se caracteriza por ser de difcil cultivo.
Se incuban a 35 C durante 24- 48 horas.
Atmsfera hmeda con 5% de CO2.
pH: 7.2 7.6.
Sensibles a las desecacin, luz UV, cambio de temperatura y
pH.
Morfologa colonial
Colonias pequeas
Elevadas
Convexas
Brillantes
Aspecto mucoide
Cremosas
Bordes enteros
Color blanco grisceo
Tamao de 0.5 a1 mm.
Cultivos clnicos o subcultivos selectivos: T1 y T2: colonias
brillantes y pequeas (0.5mm). Poseen pili.
Subcultivos no selectivos: T3, T4 y T5: colonias grandes( 1.0
1.2 mm), planas y casi incoloras y opacas(no poseen pili).
Morfologa microscpica.
Diplococos.
Gram (-).
Lados adyacentes planos .
Tamao (0.6 1 m) de dimetro.
Dispuestos aisladamente con apariencia de rin o
granos de caf.
Ttradas (colonias jvenes).
Intracelulares (PMN N).
Carece de cpsula.
Posee pilis (factor de virulencia).
Inmvil.
No forma esporas.
Identificacin presuntiva: Prueba de la oxidasa
Prueba de oxidasa
Utiliza reactivo de Kovac (una solucin al 1% (p/vol)
de
N,N,N,Ntetrametil-pdihidroclorofenilendiamina)
para
detectar
la
presencia de citocromo c en la cadena respiratoria
de un microorganismo bacteriano; si el reactivo de
oxidasa es catalizado, se torna color prpura.
Mtodo del hisopo.
Mtodo del papel de filtro humedecido.
Mtodo directo en placa.
Nota: Deben utilizarse en crecimientos de 24
horas.
los diplococcos gramnegativos, oxidasa positivos aislados en medios
selectivos para gonococos deben identificarse presuntivamente como
N. gonorrhoeae.
Pruebas suplementaria enzima-substrato: Prueba de la

catalasa
Las cepas de N. gonorrhoeae

tienen una reaccin tpica muy
fuerte
(4+),explosiva
al
contacto
con
el
reactivo
superoxol.
Pruebas suplementarias bioqumicas
Reaccin de azcares en agar cistina tripticasa para la

produccin de cido de los carbohidratos por aislamientos de
Neisseria gonorrhoeae.
Chlamydia
trachomatis
Espectro clnico
Generalidades
Carecen de mecanismos para la produccin de energa (ATP).
Bacterias intracelulares obligadas aerobias e inmviles.
Poseen membrana interna y externa
Carecen de peptidoglicano.
Replicacin a travs de un ciclo de crecimiento nico.
Poseen un cuerpo elemental de 0.2-0.4 m (nunca se divide y es
infeccioso).
Poseen un cuerpo reticulado de 0.5-1.0 m (se multiplica al interior de
la vacuolas de la clula hospedera y no es infeccioso).
La replicacin intracitoplasmtica produce la formacin de inclusiones
compactas con una matriz de glucgeno en las cuales estn incluidos los
cuerpos elementales (cuerpos de inclusin).
Ciclo de desarrollo
DIAGNSTICO EN EL
LABORATORIO
DETECCIN
MUESTRAS:
DIRECTA
DE
LAS
Loscuerposdeinclusin deC. trachomatis contienenglucgeno,quesetien

con yodo y Giemsa, despus de incubar 48 a 72 h, los cubreobjetos se extraen y se
tien.
Las inclusiones se localizan dentro del citoplasma de las clulas epiteliales, a
menudosuubicacinesperinuclear.
Se requiere de microscopia especializada en las clulas epiteliales del raspado
conjuntival teido con anticuerpos fluorescentes o Giemsa. Sensible para el
diagnstico deinfeccionesocularesenrecinnacidosyenuretritis.
EL CULTIVO
Eselmtodomssensibleconsideradocomo lapruebadeoroparaeldiagnsticode
infeccionescausadas porC. trachomatis,deltractogenital.Sensibilidadde7085%.
Muestras uretrales de hombres y mujeres asintomticas, las nasofarngeas, rectales,
vaginales.
Las lneas celulares ms utilizadas son las clulas McCoy (fibroblastos de ratn),
HeLa 299 (carcinoma humano), las BHK21 (clulas de ovario de hmster) y
recientemente las clulas BGMK. Inoculacin en el saco vitelino de huevos de pollos
embrionadosde68 dasdeedad.
El cultivo se propaga en una monocapa sobre un cubreobjetos inoculado con las

muestras.
Si hay suficiente nmero de cuerpos elementales de clamidias ellos infectarn las
clulasycrecernenforma deinclusionescitoplsmicas,luegodeserinfectadas,las
inclusiones pueden observarse despus de 4872 h de incubacin y teidas con
anticuerposmarcadosconfluorescena.
La observacin directa de las inclusiones que posee una morfologa distintiva
contribuyeal100%deespecificidad.

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Caractersticas generales del

Gnero II: Shigella

Tribu II: EDWARSIELLEAE : Gnero I: Edwarsiella

Bacilos Gram (-).

Hektoen Enteric Agar

Colonias azulverdosas con centro

Colonias rojas con

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Colonias transparentes sin

KIA GAS H2S

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

XLD: Colonias amarillo

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Bacilos Gram (-)

CARACTERSTICAS DEL GNERO:

Oftalmia neonatal gonocccica.

Identificacin en medios de cultivo

Identificacin presuntiva: Prueba de la oxidasa

Pruebas suplementaria enzima-substrato: Prueba de la

Las cepas de N. gonorrhoeae

Pruebas suplementarias bioqumicas

Reaccin de azcares en agar cistina tripticasa para la

Loscuerposdeinclusin deC. trachomatis contienenglucgeno,quesetien

El cultivo se propaga en una monocapa sobre un cubreobjetos inoculado con las

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