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    AGAR BAIRD PARKER

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    Base de Agar Baird Parker ISO Cat.

    1100
    Para el aislamiento selectivo de estafilococos.

    Información práctica
    Aplicaciones Categorias
    Aislamiento selectivo Staphylococcus

    Industria: Clínica / Alimentación / Cosmética

    Regulaciones: ISO 11133 / ISO 22718 / ISO 6888

    Principios y usos
    La Base de Agar Baird Parker se utiliza para el aislamiento y recuento de estafilococos coagulasa-positivos en alimentos y otros materiales. Su fórmula
    se describe en la norma ISO 6888-1.

    El digerido pancreático de caseína, el extracto de carne y el extracto de levadura proporcionan nitrógeno, vitaminas y aminoácidos esenciales para el
    crecimiento. El cloruro de litio, el inhibidor de tripsina y el telurito potásico, inhiben la flora acompañante. La glicina y el piruvato de sodio facilitan el
    crecimiento de estafilococos. El agar bacteriológico es el agente solidicante.

    La ISO 6888-1 recomienda añadir el suplemento Emulsión de Yema de Huevo + Telurito (Cat. 5129) a la Base de Agar Baird Parker constituyendo así
    el medio completo Agar Baird Parker, para el caso general de recuento de estafilococos coagulasa-positivos en productos destinados al consumo
    humano o a la alimentación de los animales, mediante el recuento de las colonias obtenidas en un medio sólido. La identificación de Staphylococcus
    aureus aislados en Agar Baird Parker se debe confirmar con la reacción de coagulasa.

    La ISO 6888-2 recomienda añadir el suplemento RPF (Cat. 6024) a la Base de Agar Baird Parker, constituyendo así el medio completo Agar de Plasma
    de Conejo y Fibrinógeno (RPFA), para alimentos (como quesos hechos de leche cruda y ciertos productos cárnicos crudos) que puedan estar
    contaminados con: estafilococos que forman colonias no características en el medio Agar Baird Parker o con flora de base que pueda enmascarar las
    colonias buscadas. Se debe utilizar este medio inmediatamente después de su preparación.

    En el medio Baird Parker, las colonias características son negras o grises, brillantes y convexas y rodeadas de una zona clara. Puede aparecer tras 24
    h de incubación en la zona clara un anillo opalescente. Las colonias no características pueden ser negras brillantes o grises, con o sin un borde
    estrecho blanco, sin zona clara ni anillo opalescente.

    En el medio Agar de Plasma de Conejo y Fibrinógeno las colonias de estafilococos son pequeñas negras o grises, incluso blancas, rodeadas de un halo
    de precipitación indicando la actividad coagulásica. Al principio de la incubación, las colonias de Proteus pueden presentar características físicas
    similares a las colonias de Staphylococcus aureus. Sin embargo, después de 24 o 48 horas de incubación, pueden adquirir un color marrón, que se
    expande e invade la placa, lo cual permite distinguirlas de las colonias de estafilococos.

    Fórmula en g/L
    Agar bacteriológico 20 Glicina 12
    Extracto de carne 5 Digerido pancreático de caseína 10
    Piruvato sódico 10 Extracto de levadura 1
    Cloruro de litio 5
    Fórmula típica g / L * Ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.

    Preparación
    Suspender 63 gramos del medio en 1 litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver con calor y agitación frecuente. Hervir durante un minuto hasta
    disolver por completo. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC. Agregar asépticamente 5 ml de Emulsión de Yema de

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    Huevo con Telurito (Cat. 5129) por cada 100 ml de medio base, o un vial de Suplemento RPF ISO (Cat. 6024) a 90 ml de base medio. Homogenizar
    suavemente y dispensar en placas de Petri.

    Instrucciones de uso
    » Para diagnóstico clínico, el tipo de muestra es cualquier muestra de origen clínico.

    - Las placas deben estar secas antes de la inoculación (el secado puede realizarse incubándose a 35±2 ºC durante aproximadamente 10 minutos antes
    de su uso).
    - Preparar la muestra en una solución adecuada, diluirla y colocar de 0,1 ml a 1,0 ml de la dilución adecuada en las placas.
    - Extender el inóculo sobre toda la superficie.
    - Incubar a 35±2 ºC durante 24-48 horas.

    » Para otros usos no amparados por el marcado CE:

    Enumeración de estafilococos coagulasa positivos mediante la técnica que utiliza Agar Baird-Parker:
    - Inocular 0,1 ml de la muestra líquida o 0,1 ml de la suspensión inicial. Inocular también la primera dilución decimal.
    - Extender el inóculo sobre la superficie de la placa lo más rápido posible.
    - Incubar las placas a una temperatura de 35-37 ºC durante 24±2 horas, luego volver a incubar durante 24±2 horas más a la misma temperatura.
    - Examinar las colonias características a las 24 horas y 48 horas.
    - Seleccionar un número definido de colonias características para confirmar en tubos de Infusión Cerebro Corazón e incubar a 35-37 ºC durante 24±12
    h.
    - Añadir 0,1 ml del cultivo obtenido a 0,3 ml de plasma de conejo e incubar a 35-37 ºC.
    - Observar la coagulación del plasma a las 4-6 horas. Si el ensayo es negativo, continuar incubando durante 24 horas.
    - La coagulación de la mitad del volumen del plasma se considera un resultado positivo.

    Enumeración de estafilococos coagulasa positivos mediante la técnica que utiliza Agar de Plasma de Conejo y Fibrinógeno (RPFA):
    - Inocular 1 ml de la muestra líquida o 1 ml de la suspensión inicial mediante el método de vertido en placa. Inocular también la primera dilución decimal.
    - Incubar las placas a una temperatura de 35-37 ºC durante 18-24 horas. Si es necesario, volver a incubar durante 18-24 horas más a la misma
    temperatura.
    - Contar las colonias características.

    Control de calidad
    Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
    Sin restos Polvo fino Ligeramente tostado Amarillo opalescente 7,2±0,2

    Test microbiológico
    De acuerdo a ISO 11133:
    Condiciones de incubación: Productividad, Especificidad (24±2 - 48±2 h / 37±1 ºC) / Selectividad (48±2 h / 37±1 ºC).
    Condiciones de inoculación: Productividad cuantitativa (100±20. Min. 50 cfu) / Selectividad (10^4-10^6 cfu) / Especificidad ( 10^3-10^4 cfu).
    Medio de referencia: TSA.

    Especificación Especificación Reacción característica


    Microrganismos Reacción característica (Baird-Parker)
    (Baird-parker) (RPFA) (RPFA)
    Staphylococcus epidermidis Colonias grises o negras sin reacción de Colonias grises o negras sin
    Crecimiento Crecimiento
    ATCC 12228 clarificación de yema de huevo halo de opacidad
    Staphylococcus saprophyticus Colonias grises o negras sin reacción de Colonias grises o negras sin
    Crecimiento Crecimiento
    ATCC 15305 clarificación de yema de huevo halo de opacidad
    Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición total (0) Inhibición toal (0)
    Colonias negras o grises con halo claro (
    Staphylococcus aureus ATCC Buen crecimiento Colonias negras o grises con
    Buen crecimiento >50% reacción de clarificación de yema de
    25923 >50% halo de opacidad
    huevo)
    Colonias negras o grises con halo claro (
    Staphylococcus aureus ATCC Buen crecimiento Colonias grises o negras con
    Buen crecimiento >50% reacción de clarifificación de yema de
    6538 >50% halo de opacidad
    huevo)

    Almacenamiento
    Temp. Min.:2 ºC
    Temp. Max.:25 ºC

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    Bibliografía
    Baird-Parker. I App. Bact. 25:12. 1962. Baird-Parker. J. Ann. Micromiol. 30:409, 1963.
    Sharp, Neave and Reider. J. App. Bact. 28:390. 1962. Baird-Parker and Devenport J. App. Bact. 28:390. 1965.Tardio and Bact. J. AOAC. 54:728, 1971.

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