Síntesis de proteínas cap33.

El proceso de la síntesis de proteínas se denomina traducción, por que, el lenguaje de la secuencia

de nucleótidos en el ARNm se traduce al lenguaje de una secuencia de aminoácidos.

Código genético.
Este es un diccionario que identifica la correspondencia entre una secuencia de bases de
nucleótidos y una secuencia de aminoácidos.

Codones.

• Se presentan en el lenguaje del ARNm de Adenina (A), Guanina (G), Citosina (C) y Uracilo
(U).
• Sus secuencias de nucleótidos se escriben siempre desde el extremo 5´ hacia el extremo 3´.
• Las cuatro bases de nucleótidos se usan para producir los codones de 3 bases, por
consiguiente, existen 64 combinaciones distintas de bases tomadas de tres en tres.
✓ Codón de iniciación: AUG.
✓ Codones de terminación: UAA, UAG y UGA estos no codifican aminoácidos, también
son llamados de parada o sin sentido.

Características.

Las características del código genético son las siguientes:

1. Especificidad: El código genético es especifico, es decir, un codón particular siempre codifica

el mismo aminoácido.
2. Universal: su especificidad se ha conservado desde las primeras etapas de la evolución.
3. Degeneración: Aunque cada codón corresponde a un único aminoácido, pueden haber más
de un triplete que codifique determinado aminoácido. Por ejemplo, la arginina (Arg) esta
codificada por 6 codones diferentes, solo Met y Trp tienen un solo triplete de codificación.
4. Ausencia de superposición y de comas: es decir, se lee a partir de un punto de inicio fijo
como una secuencia continua de bases, tomadas de tres en tres sin ninguna puntuación entre
codones. Por ejemplo, AGCUGGAUACAU se lee como AGC UGG AUA CAU.

Consecuencias de la alteración de la secuencia de nucleótidos.

1. Mutación silenciosa: el codón que contiene la base cambiada puede codificar el mismo
aminoácido, ejemplo, si el codón de serina (Ser) UCA se cambia a la tercera base y se
convierte en UCU, aún sigue codificando la serina.
 2. Mutación de contrasentido: el codón que contiene la base cambiada puede codificar un
aminoácido diferente. Ejemplo, si al codón UCA de la serina se le asigna una primera base
diferente y se convierte en CCA, este codificara en este caso la Prolina.
3. Mutación sin sentido: el codón que contiene la base cambiada puede convertirse en un
codón de terminación. Por ejemplo, si al codón UCA de la serina se le cambia la segunda
base y se convierte en UAA el nuevo codón causara la terminación prematura de la traducción
en ese punto la producción de una proteína acortada (truncada).
4. Mutación del sitio de corte y empalme: pueden alterar la forma de eliminación de los
intrones de la molécula de ARNm precursoras (pre-ARNm), produciendo en consecuencia
proteínas aberrantes, ejemplo, distrofia miotónica.
5. Mutaciones en el marco de lectura: se da cuando se quitan o se añaden uno o dos
nucleótidos a la región codificadora de un ARNm, por ejemplo, la fibrosis quística es una
enfermedad hereditaria crónica y progresiva que afecta principalmente a los sistemas
pulmonar y digestivo, esto por la pérdida de un canal de cloruro en las células epiteliales, su
perdida provoca una secreción espesa y pegajosa que daña los pulmones y provoca
deficiencias digestivas.
Esta es causada más común mente por la deleción de tres nucleótidos de la región
codificadora de un gene, lo que tiene como consecuencia la perdida de la fenilalanina.

Expansión por repetición de trinucleótidos.

Si esto se produce dentro de la región codificadora de un gen, la proteína contendrá muchas copias
extra de un aminoácido. Por ejemplo, la expansión del codón CAG en el exón 1 del gen para la
proteína huntingtina conduce la inserción de muchos residuos de glutamina adicionales en la
proteína, lo que causa el trastorno neurodegenerativo o enfermedad de Huntington.

Componentes para la traducción.

• Aminoácidos: si falta un aminoácido la traducción se detiene, por lo que, todos los
aminoácidos deben estar presentes en el momento de la síntesis de la proteína.
• ARN de transferencia (ARNt): se necesita al menos un tipo especifico por cada
aminoácido.
1. Sitio de unión de los aminoácidos: cada molécula de ARNt tiene un sitio de unión para
un aminoácido especifico en su extremo 3´, el grupo hidroxilo del aminoácido establece un
enlace éster con el hidroxilo 3´.
2. Anticodón: cada molécula de ARNt contiene tres bases, que se acoplan a un codón
especifico en el ARNm.
 • Aminoacil-ARNt sintetasas: son una familia de 20 enzimas diferentes es necesario para unir
los aminoácidos a su correspondiente ARNt, cada miembro de la misma reconoce un
aminoácido especifico y todo el ARNt que corresponde a ese aminoácido.
✓ La reacción precisa de ATP, que se escinde a AMP y pirofosfato inorgánico (PPi).
✓ Además de la síntesis estas tienen una actividad de corrección o edición que puede
eliminar aminoácidos incorrectos de la enzima o de la molécula del ARNt.
• ARNm: para la síntesis de la cadena polipeptídica deseada debe estar presente el ARNm
especifico necesario como plantilla; en eucariotas el ARNm se circulariza para usarse en la
transcripción.
• Ribosomas funcionalmente competentes:

Eucariotas. Procariotas.
Tamaño del ribosoma. 80S 70S
Tamaño de la subunidad 60S 50S
grande.
Numero de proteínas. 40 34
Tamaño de la subunidad 40S 30S
pequeña.
Numero de proteínas. 30 21

La subunidad ribosómica pequeña une el ARNm y determina la exactitud de la traducción, al

asegurar el correcto apareamiento de bases entre el codón del ARNm y el anticodón de la
molécula de ARNt.

1. ARN ribosómico (ARNr): los ARNr se generan a partir de un pre-ARNr a través de la acción
de las ribonucleasas y se modifican algunas bases y ribosas.
✓ Los ribosomas procariotas tienen 3 moléculas de ARNr.
✓ Los ribosomas eucariotas tienen 4 moléculas de ARNr.
2. Proteínas ribosómicas: están presentes en cantidades considerablemente mayores en los
ribosomas eucariotas.
3. Sitios A, P y E.
✓ Sitio A: en el se une un aminoacil-ARNt entrante, de acuerdo con la dirección del
codón que ocupa el sitio en ese momento.
 ✓ Sitio P: está ocupado por el Peptidil-ARNt, este transporta la cadena de aminoácido
que ya se ha sintetizado.
✓ Sitio E: esta ocupado por el ARNt vacío que ya va de salida del ribosoma.
4. Ubicación celular: en las células eucariotas, los ribosomas están libres en el citosol en
estrecha asociación con el RE.

• Factores proteínicos: se necesitan de factores de:

✓ Iniciación.
✓ Elongación.
✓ Terminación.

Algunos de estos factores proteínicos realizan una función catalítica, mientras que otros
parecen estabilizar la maquinaria sintética.

• Fuente de energía: es necesario la escisión de 4 enlaces de alta energía:

✓ 2 ATP en la reacción de la aminoacil-ARNt sintetasa:
▪ 1 ATP en la eliminación del PPi.
▪ 1 ATP en la hidrolisis posterior del PPi a 2 Pi por la pirofosfatasa.
✓ 2 GTP:
▪ 1 GTP en la unión de la aminoacil-ARNt al sitio A.
▪ 1 GTP en la translocación.

Reconocimiento de los codones por los ARNt.

• Unión antiparalela entre el codón y el anticodón: el codón del ARNm es leído como 5´ a 3´
por el emparejamiento de anticodón en la dirección opuesta (dirección del anticodón es 3´a
5´).
• Hipótesis de bamboleo: es el mecanismo por el cual los ARNt pueden reconocer más de un
codón para un aminoácido especifico.

Etapas de la traducción.
• Iniciación: consiste en el montaje de los componentes del sistema de traducción antes de
que se produzcan enlaces peptídicos, estos componentes incluyen:
✓ Las 2 subunidades ribosómicas.
✓ El ARNm que se va a traducir.
✓ El aminoacil-ARNt especifico.
 ✓ El GTP.
✓ Los factores de iniciación, que son:
▪ En procariotas, IF-1, IF-2 e IF-3.
▪ En eucariotas son 10 y se representan como eIF.
1. Secuencia de Shine-Dalgarno: es en Escherichia coli, es una secuencia de bases de
nucleótidos rica en purinas, esta localiza de 6 a 10 bases en dirección 5´ del codón de
iniciación AUG en la molécula del ARNm.
2. Caperuza 5´: El ARNm eucariota no tiene secuencias de SD. La subunidad ribosómica
pequeña es auxiliada por los miembros de la familia eIF-4 de proteínas.
La iniciación independiente de a caperuza puede ocurrir si la subunidad 40S se une a un sitio
de entrada a un ribosoma interno cerca del codón de inicio.
3. Codón de iniciación: AUG es reconocido por un ARNt iniciador especial. El reconocimiento
es facilitado por el IF-2-GTP en procariotas y por el eIF-2-GTP en eucariotas.
El ARN iniciador es el único reconocido por el IF-2 y el único que va directamente al sitio P.
• Elongación: consiste en el alargamiento de la cadena polipeptídica por la adición de
aminoácidos al extremo carboxilo de la cadena creciente.
los factores de elongación:
▪ E. coli: EF-Tu-GTP y EF-Ts, necesitan la hidrolisis de GTP.
▪ Eucariotas: EF-1α-GTP y EF-1βγ.

Tanto EF-Ts como EF-1βγ funcionan en el intercambio de nucleótidos de guanina.

La formación de los enlaces polipeptídicos está catalizada por peptidiltransferasa una

actividad intrínseca del ARNr.

¿Qué es lo que se conoce como transpeptidación?

Cuando el péptido del ARNt que esta en el sitio P se transfiere al aminoácido en el ARNt del sitio A.

• Terminación: se produce cuando en el sitio A aparece alguno de los 3 codones de

terminación:
▪ E. coli estos codones son reconocidos por los factores de liberación: RF-1, que
reconoce a UAA y UAG, y RF-2 que reconoce UAG y UAA.
▪ Los eucariotas solo cuentan con un factor de liberación eRF, que reconoce los 3
codones de terminación y a eRF-3 que funciona como el RF-3 de los procariotas (el
eRF-3 y el RF-3 estimulan la segregación de los otros factores).
plegado de proteínas.

Estas deben plegarse para asumir su estado funcional nativo, el plegado puede ser espontaneo o
estar facilitado por chaperonas.

Direccionamiento de las proteínas.

Las proteínas secretadas se direccionan durante la síntesis (esto es llamado direccionamiento

cotraduccional), al RER por la presencia de la secuencia N-terminal.

La proteína se mueve a través del RER y el aparato de Golgi, se procesa, empaca en las vesículas y
se excreta.

Modificación postraduccional y cotraduccional.

• Recorte: muchas proteínas destinadas a la secreción por la célula se producen inicialmente
como grandes moléculas precursoras que no son funcionalmente activas. Las endoproteasas
especializadas pueden eliminar porciones de la cadena proteínica y provocar la liberación de
una molécula activa.
• Modificación covalente: son producidas por productos químicos, ejemplo de estas
modificaciones son las siguientes:
✓ Fosforilación: están catalizadas por una enzima de una familia de proteincinasa y
pueden anularse por la acción de las proteinfosfatasas.
✓ Glucosilación: son proteínas destinadas a formar parte de una membran o a ser
segregadas de la célula tienen cadenas de carbohidratos.
▪ La N-glucosilación ocurre en el RER.
▪ La O-glucosilación ocurre en el aparato de Golgi.
✓ Hidroxilación: los residuos de prolina y lisina de las cadenas α del colágeno se
hidroxilan ampliamente en el RE por parte de las hidroxilasas dependientes de
vitamina C.

Degradación de las proteínas.

las proteínas defectuosas o que están destinadas a un recambio rápido suelen estar marcadas para
ser destruidas mediante ubiquitinación, la unión covalente de una pequeña proteína muy
conservada llamada ubiquitina.

¿Qué es el proteasoma?
es un sistema macromolecular proteolítico dependiente de ATP localizado en el citosol.
Antibióticos inhibidores en la síntesis de proteínas.
Antibióticos Acción
Estreptomicina Inhibe la acción y origina una lectura
errónea del ARNm (en procariotas).
Tetraciclina Se une a la subunidad 30S e inhibe la unión
de los aminoacil-ARNt (en procariotas).
Cloranfenicol Inhibe la actividad peptidiltransferasa de la
subunidad ribosomal 50S (en procariotas).
Cicloheximida Inhibe la actividad peptidiltransferasa de la
subunidad ribosomal 60S (en eucariotas).
Eritromicina Se une a la subunidad 50S e inhibe la
translocación (en procariotas).
Provoca la terminación prematura de la
Puromicina cadena por actuar como análogo del
aminoacil-ARNt (en eucariotas y
procariotas).
 REGULACION DE LA BIOSNTESIS DE PROTEINAS
La secuencia reguladora del ADN actúan en cis por que
influyen en la expresión de os genes solo en el mismo
cromosoma que la secuencia reguladora.
Las moléculas reguladoras se conocen como de acción
trans por que pueden difundirse a través de la celula desde
su sitio de síntesis a sitio de unión al ADN
La regulación de la primera etapa en la expresión genética
es un enfoque eficaz, ya que no se gasta energía para
generar productos innecesarios del gene.
El control transcripcional en procariotas puede implicar la
iniciación o la terminación prematura de la transcripción.
Los operones bacterianos contienen un operador, un
segmento de ADN que regula la ctividad de los genes
estructurales del operon al unir de forma reversible una
proteína que se conoce como represor.
En presencia de glucosa y lactosa el operon LAC no esta
inducido y la transcripción es insignificante, aun que la
lactosa este elevada.
Con la atenuación la transcripción se inicia pero termina
bastante antes de completarse.
La trnascripcion y traducción son procesos acoplados en
los procariotas, la atenuación da lugar a la formación de
un producto peptídico truncado, no funcional que se
desgrada con rapidez. En eucariotas no hay atenuación por
que tienen un núcleo rodeado por membrana, y la
traducción y transcripción son procesos espacial y
temporalmente separados.
1. La etapa de la expresión genética es la transcripción,
ya que la replicación tiene como producto el ADN.
Tenemos la espresion constitutiva: que es la expresión
constante de genes no regulada, dando proteínas de igual
cantidad y de forma controlada. Aquí los genes son genes
constitutivos, domésticos o también llamados de
mantenimiento. La expresión genética no tiene regulados y
tampoco estimulos.
La inducción genética es el aumento de la expresión del
gen (los genes reciben el nombre de genes inducibles o
regulados).
La represión genética: es el proceso de disminuir la
expresión del gen hasta un nivel basal (aquí los genes son,
genes represibles).
Hay dos tipos de regulación genética:
REGULACION POSITIVA REGULACION NEGATIVA
Es la expresión de la información genética, La expresión de la información genética
se incrementa en forma cuantitativa por esta disminuida por presencia de un
presencia de un regulador especifico. regulador especifico.
El regulador se le llama regulador positivo El regulados es negativo o represor.
o activador.

Los genes costitutivos vas a constituir los genes necesarios

para lla formación básica de la proteína y por eso son
genes positivos y constantes, ya que codifican proteínas
importantes para el metabolismo, estos se sintetizan
constantemente (y son llamados genes domesticos).
Los genes reguladores se sintetizan en ciertas ocasiones,
son producto de ARN o proteínas, interactúan con el ADN
y afectan la traducción o transcripción.
OPERON: es un conjunto de genes estructurales que se
van a expresar o a dejar e expresar cuando son estimulados
únicamente. Y esta compuesto por varios genes:
Genes estruturales: Codifican proteinas implicadas en un
proceso, se transcriben sin interrupción, el
ARN mensajero lleva la información de
varios genes y se denomina policistronico,
ya que codifica para varias proteinas.
Promotor: Aquí se fija la polimerasa para construir
 una molecula de ARN mensaje, también
aquí se inicia la trascripción.
Operador: Regula la actividad de los genes
estructurales.
Gen Regulador: Codifica a la proteína que actúa como
represor.
Proteina Reguladora: Es codificada por el en regulador
Inductor: Sustancia que induce la expresión genetica

Operon: tiene genes estructurales, operador, regulador y

promotor. Y puede estar regulado por el promotor o región
reguladora.
El Cistron: es la unidad mas pequeña de la expresión
genética y codifica para la estructura de la subunidad de
una molécula de proteína.
OPERON DE LACTOSA: tiene 3 genes estructurales y
cada uno de ellos va a codificar una proteína.
Gen Lac Z: Codifica la B-gaactosidasa que hidroliza la
lactosa en galactosa y glucosa.
Gen Lac Y: Codifica una permeasa que facilita el
movimiento de la lactosa al interior de la
celula.
Gen Lac a: Codifica al tiogalactosido transacetilasa que
acetila a la lactosa.

Luego tenemos al gen Lac I, que codifica a la proteína

reguladora.
En presencia de de glucosa, se sintetiza una proteína
represora(sintetizada por el gen lac I) y esa se va a fijar al
operador. Con el fin que no haya lactosa debido a que hay
glucosa. Por lo tanto es una inducción represiva, ya que
evita el avance de la ARN polimerasa.
Sino hay glucosa pero hay lactosa, esta se convierte en
alolactosa, que se une al represor lacI y lo inactiva. Esto
permite que la ARN polimerasa transcriba los genes del
operón lac, promoviendo la metabolización de la lactosa.
La ARN polimerasa avanza y espresa todas las proteinas
necesarias para la lactosa.
OPERADOR DE TRIPTOFANO:
Cuando hay mucho triptófano no hay transcripción, por
que el mismo triptófano se une a la proteína represora y la
activa, al activarlo se una al receptor para que la ARN
polimerasa no avance, esto por que ya hay mucho
triptófano.
Cuando no hay triptófano la proteína receptora se
DESACTIVA y permite la expresión de las 5 proteinas
necesarias para formar el triptófano.
REGULACION ES EUCARIOTAS:
Tiene su regulación principal a nivel de la transcripción,
sin embargo la expresión genética esta regulada a
multiples niveles.
Los modos principales de regulación postranscripcional a
nivel del ARNmensaje son corte y empalme y la
poliadenilacion alternativos, el control de la estabilidad del
propio ARN mensajero y el control de la eficacia de la
traducción.
En eucariotas cada gen va a tener un promotor y señales
de termino.

1. Mutaciones transicionales y transversales:

Estas mutaciones ocurren en el ADN, donde un nucleótido
(A, T, C, G) es reemplazado por otro.
• Transicionales:

Una base se cambia por otra del mismo tipo:

o Purina (Adenina, Guanina) → Purina

o Pirimidina (Citosina, Timina) → Pirimidina

 Ejemplo: A → G o C → T
• Transversales:
Una base se cambia por una de tipo diferente:
o Purina → Pirimidina o Pirimidina → Purina

Ejemplo: A → T o C → G
2. Mutaciones puntuales:
Son cambios que ocurren en un solo nucleótido del ADN.
Pueden ser:
• Sustituciones (como las transicionales o transversales).

• Inserciones o deleciones de una sola base.

Aunque pequeñas, estas mutaciones pueden tener grandes

efectos dependiendo del contexto.

3. Mutaciones silenciosas:
Son mutaciones puntuales donde no hay cambio en la
proteína producida.
• Ocurren porque el código genético es degenerado

(varios codones codifican para el mismo

aminoácido).
Ejemplo:
o Codón original: UCU (Serina).

o Codón mutado: UCC (también Serina).

4. Mutaciones por cambio:

Estas alteran el significado del codón, lo que provoca un
cambio en el aminoácido de la proteína:
• También se llaman mutaciones de sentido erróneo

(missense).
Ejemplo:
o Codón original: UCA (Serina).

o Codón mutado: CCA (Prolina).

Este cambio puede afectar la función de la proteína,

dependiendo de qué tan importante sea ese aminoácido.
5. Mutaciones de finalización (nonsense):
Estas mutaciones convierten un codón que codifica un
aminoácido en un codón de parada.
• Resultado: la síntesis de la proteína se detiene antes de

tiempo, produciendo una proteína incompleta y,

generalmente, no funcional.
Ejemplo:
o Codón original: UCA (Serina).

o Codón mutado: UAA (Stop).

6. Mutaciones de corte y empalme (splicing):

Afectan los sitios donde el ARN mensajero (ARNm) es
cortado y empalmado para eliminar los intrones (partes no
codificantes) y unir los exones (partes codificantes).
• Si una mutación afecta estos sitios:

o Se pueden incluir intrones en el ARNm final

(donde no deberían estar).

o Se pueden excluir exones esenciales,

produciendo una proteína incorrecta.

Ejemplo:
• Una mutación en el sitio de empalme podría dar lugar a

una proteína con regiones faltantes o extra, afectando

su función.
Hay 4 tipos de reparación del ADN
1. Reparación por apareamiento erroneo: se reconoce el
apareamiento erroneo por las proteinas MUT, luego
por acción de las endonucleasas eliminan un
fragmento de ADN y las exonucleasas lo extrae. La
polimerasa 3 que va en dirección 5-3 llena el espacio
correctamente y finalmente una ligasa sella.
2. Reparación por suprecion de nucleótidos: este
mecanismo repara daños que causan distorsiones
 grandes en la doble hélice del ADN, como: dímeros
de timina (causados por luz ultravioleta, UV) y daños
por químicos que generan bases modificadas. Se da el
mismo proceso anterior, si no hay reparación se
puede expresar como un cancer de piel.
3. Reparación por escisión de bases: repara daños
pequeños en el ADN, como: bases dañadas o
anómalas (causadas por oxidación, desaminación o
alquilación), ej: una citosina desaminada se convierte
en uracilo, lo cual es anormal en el ADN. • Una
ADN glicosilasa identifica la base dañada y la
elimina, dejando un sitio apurínico/apirimidínico
(AP). Una endonucleasa AP corta el esqueleto
fosfodiéster en el sitio AP.L a ADN polimerasa β
elimina nucleótidos cercanos dañados y rellena el
hueco. Una ADN ligasa sella la hebra reparada.
4. Reparación de rotura de cadena doble: Las roturas de
cadena doble son daños graves que afectan ambas
hebras del ADN, causadas por radiación ionizante,
químicos tóxicos o errores en la replicación.
Genoma humano y clonación
Ingeniería genética
Conjunto de técnicas de localización aislamiento
preparación y estudio de Pequeños segmentos de
DNA derivado de cromosomas principales
Es la tecnología de manipulación y transferencia del
ADN de unos organismos a otros que posibilita la
creación de nuevas especies la corrección de defectos
genéticos y la fabricación de numerosos compuestos
Proyecto genoma humano
Descubrimiento de las clases de restricción que
permiten la escisión de enormes moléculas de ADN en
fragmentos definidos
Desarrollo de las técnicas de clonación que fue
proporcionan una amplificación de secuencias de
nucleótidos
Capacidad para sintetizar sondas permitiendo la
manipulación de secuencias de nucleótidos
Endonucleasas de restricción
Encima bacterianas que descienden el ADN de doble
Cadena en fragmentos pequeños y más manejables
han abierto el camino al análisis del ADN dado que
cada enzima rompe el ADN en una secuencia
nucleótidos especifica se utilizan para obtener con
precisión segmentos de ADN definidos denominados
fragmentos de restricción
Reconoces segmentos cortos de ADN( 4 a 6 pares de
bases) que contiene secuencia de nucleótidos
específicos
Palíndromos: exhiben una simetría rotacional doble
Sitio de restricción: una secuencia de ADN que es
reconocida por una enzima de restricción
Los extremos cohesivos Se pueden covalentemente
unir por medio de la ADN ligaza otra ligasa puede unir
los extremos Romos
Clonación molecular
La introducción de una molécula de ADN extraño en
una célula que se está replicando permite la
amplificación de ADN el ADN humano para clonar se
puede obtenerse la sangre saliva y tejido sólidos
Clon población grande de moléculas bacterias o
células idénticas que surgen de un ancestro en común
Para clonar una secuencia de interés

Digerir la leyenda celular total con una encima de

restricción
Cada uno de los fragmentos de ADN se une una
molécula vectorial para formar un híbrido o una
molécula recombinante
Cada molécula de dna recombinante transporte su
fragmento de dna insertado a uno sobre los pedera
única donde se replica
A medida que se multiplican las células forma un Clon
en el cual cada bacteria transporta copia del mismo
fragmento de ADN infectado
El ADN clonado es finalmente liberado de su vector
por escisión y aislado
Vector: es una molécula de ADN a la cual se une un
fragmento de ADN que se va a clonar
Las propiedades de un vector son:
1 debe ser capaz de replicarse de manera Autónoma
dentro de una célula hospeda
2 debe contener al menos una secuencia de
nucleótidos específica reconocida por una
endonucleasa de restricción
3 debe llevar al menos un gen que confiara la
capacidad para seleccionar el vector como un gen de
resistencia a antibióticos

Genotecas o bancos de génes

es un conjunto de fragmentos de dna de restricción
clonados procedente de un organismo existen
Genotecas genómicas
Es el conjunto de fragmentos de dna de doble hebra
obtenido Por digestión del ADN total del organismo
con una endomeplaza de restricción y su posterior
ligadura a un vector
Se prepara a partir de una línea celular o de tejido
Las moléculas de ADN recombinante se replican
dentro de la bacteria hospedadora
Los fragmentos de dna amplificados representan el
genoma completo del organismo

Genotecas de ADN complementario

Contiene la secuencia de ADN que aparecen como
moléculas de ARN mensajero y hasta difieren de un
tipo de célula a otro
El ARN mensajero se utiliza como molde para
sintetizar una molécula complementaria de ADN de
doble hebra(DNAc) utilizando una transcriptasa
inversa
El ADNc puede amplificarse mediante clonación o
mediante la reacción en cadena de la polimeras
El ADNc clonado carece de los cintrones y las
regiones de control de genes que sí están presentes
en genotecas genomicas

Sondas:
• , fragmento corto de una sola hebra de dna
 marcado con un isotopo radiactivo como el 32p o
con una sonda no radioactiva como la biotina
• La secuencia de una sonda es complementaria a
la secuencia en el ADN de interés llamado ADN
Diana

Etapas de la PCR
1. Construcción del iniciador: se necesita conocer la
secuencia de nucleótidos de un segmento corto
situados a cada lado del ADN
2. desnaturalización del ADN: el ADN que va a
amplificarse se calienta para separar el ADN
bicatenario en cadenas sencillas
3. alineamiento de los iniciadores:
4. Las cadenas separadas se enfrían y los dos
iniciadores se alinean con una secuencia
complementaria de ADN
5. extensión de los iniciadores: síntesis de cadenas
nuevas complementarias del ADN original
Ventajas
• Sensibilidad
• Velocidad

Aplicaciones
• Comparación de un gen normal clonado con una
forma mutante no clonada del gen
• Detección de secuencias de ácidos nucleicos
pocos abundantes
• Análisis forense de las muestras de ADN
• Diagnóstico prenatal y detección de portadores de
fibrosis quística

Importancia de la tecnología del DNA

recombinante
1 medicina
Producción de proteínas humanas en gran abundancia
con fines terapéuticos:, insulina, hormona del
crecimiento, factores de coagulación, vacunas ect.
Producción de proteínas para prueba diagnóstica
Diagnóstico de enfermedades existentes y
predisposición
Terapéutica genética
Célula falciforme
2 agricultura
Especie vegetales resistentes a sequías, cambio de
color, tamaño, resistencia a plagas, control de
maduración
3 ganadería
Mejoramiento de especies y mayor rendimiento de
leche ect
4 industria y ecologia
Sustitutos alimenticios
Tratamiento de desechos tóxicos
Producción de combustible que sustituyen el petróleo
5 campo forense
Identificación
 APOPTOSIS
Definición: mecanismo de protección
-muerte celular programada o fisiológica.
- es un proceso fisiológico por el cual el organismo elimina células normales innecesarias o
que han cumplido su función. (la involución del timo)
- se desencadenan por diversas señales, que pueden ser endógenas (adentro) o exógenas
(afuera)
Funciones de la apoptosis:
-Mantener un numero constante de células
-eliminación de células potencialmente peligrosas
-función inmune o de defensa
- remodelación de tejidos embrionarios y organogénesis.
En suma, las células que mueren por apoptosis son aquellas formadas en exceso, las
infectadas por virus, defectuosas o que presentan alteraciones que pueden significar un
peligro potencial para la economía y todas aquellas que han completado su función.
La característica de la apoptosis es que va a morir la célula sin provocar daño en su
alrededor ósea una forma silenciosa de morir.
MECANISMO DE LA APOPTOSIS (OJITO PORQUE DIJO QUE ERA LO QUE LE IMPORTABA
DE LA BIOQUIMICA)
Se lleva a cabo mediante unas enzimas y si recordamos las enzimas son proteínas.
Caspasas: el nombre deriva de la C cisteína y ASPASA se refiere a la acción catalítica de
hidrolisis que induce la cisteína sobre el acido aspártico. Recordemos que el ácido
aspártico o aspartato está presente en la mayor parte de las proteínas y entonces estas
caspasas van a buscar un ácido aspártico para ser atacado por el aminoácido cisteína.
El mecanismo de apoptosis va a descansar en la activación enzimática que tiene función de
cisteínas proteasas pertenecientes a la familia de las caspasas, las cuales desmantelan la
célula en forma rápida, controlada y silenciosa (sin causar daños en el entorno que den
signos de alarma e induzcan un proceso inflamatorio)
Se conocen 14 clases de caspasas de ellas 6 se relacionan con procesos inflamatorios y las
restantes con apoptosis (serian 8)
Las caspasas apoptóticas se dividen en: INICIADORAS (8, 9 Y 12) Y EJECUTORAS (2,3 Y 6)
Cuando la proteasa va hacer un efecto hidrolítico sobre la cadena peptídica de las
proteínas de la célula específicamente se va a dirigir al acido aspártico donde hay un ácido
aspártico se va romper ese enlace peptídico
Vías de la apoptosis

VIAS APOPTOTICA MEDIADOR

Vía receptores TNF-alfa y Fas- L
Vías de activación de genes • Activación del proto-oncogen Bcl
• Activación del gen supresor de
tumores p53
Vía sistema inmune Linfocitos T NK

1- Via de receptores de TNF-alfa (FACTOR DE NECROSIS TUMORAL ALFA) y Fas-L (FAS

LINGANDO)
TNF-alfa: se encuentra inmerso en los linfocitos CD4
Fas-L se origina de los linfocitos NK (natural killer) o linfocitos TD8
Tienen en común la presencia o dominio citoplasmático el dominio de reconocimiento de
muerte (DD)
Fas contiene su dominio citoplasmático FADD que activa a la proteína adaptadora DED
(proteína, este activara directamente a la caspasa 8) que activa a la caspasa 8 que este
activara la cascada de las caspasas.
Los receptores se encuentras en la membrana celular de las células que van a sufrir
apoptosis (muerte)
TNF-alfa cuando activa al receptor TNFR1 que tiene su dominio citoplasmático a TRADD
(TNF receptor asociado con la proteína DD) activa al DED siguiendo la vía de activación de
la apoptosis a través de la caspasa 8
¿Cuáles son los linfocitos que se encuentran ausentes o bajos en el VIH sida? Los CD4
¿Cuál de las dos células ataca el virus de la inmuno deficiencia humana? Los CD4
CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS DE LA CELULA
1) Cuando ya se da toda esta activación en varias horas se retrae en forma general al
compactarse su núcleo y citoplasma. (ósea que va perdiendo su forma redonda)
2) Desaparecen sus microvellosidades, como su apariencia superficial
3) Se desprende fragmentos citoplasmáticos de la superficie (hace pequeñas
vesículas)
4) Se condensa la cromatina nuclear
5) Las endonucleasas celulares rompen el ADN en segmentos
6) Al final la célula se desintegra en trozos pequeños llamados cuerpos apoptóticos
7) Estos cuerpos apoptóticos están rodeados de membrana que contiene moléculas
marcadoras en su superficie. (FOSDATIDILSERINA Y TROMBOSPONDINA)
¿para qué sirven los marcadores de superficie? Para ser reconocidos por el sistema
retículo endotelial y sean enguidos sin causar inflamación.
¿Cuáles son los marcadores de superficie? Dos proteínas la fosfatidilserina y
trombospondina
2- Vías de activación de genes
Vías de activación de genes que comprenden activación del proto-oncogen Bcl-2 (gen
b célula de leucemia 2)
Bcl-2 da nombre a una familia de oncogenes en los que se encuentran miembros que
favorecen la supervivencia celular ( Bcl-XL, Bcl-2 y Mcl-1 inhiben la apoptosis)
mientras que otros (Bid, Bad y Bax activan la apoptosis) ayudan al suicidio celular
La generación de apoptosis o anti apoptosis dependerá de predominio de las familias
Bcl-2 pro apoptóticas versus anti apoptóticas.
Las proteínas inhibidoras de la apoptosis que son Bcl-2, Bcl-XL y Mcl-1 se insertan
como proteínas integrales en la membrana del retículo endoplásmico, membrana
nuclear y membrana externa de las mitocondrias estabilizándolas, asegurando su
integridad evitando el aumento de permeabilidad y por ende de la apoptosis.

1) Bad, Bax y bid van a alterar la permeabilidad y formar poros para llegar a la
membrana y formar poros hasta llegar la matriz mitocondrial,
2) Cuando abren los poros cambian la permeabilidad y desestabilizan a la membrana
3) Cambian las cargas eléctricas, prácticamente reduciendo el potencial de membrana
4) Aumentan el volumen mitocondrial
5) Cuando abren permiten la salida del citocromo C
6) Saliendo hacia el plasma, se considera que el citocromo C es activador de la
apoptosis del citoplasma
7) Cuando a salido el citocromo C se une a la procaspasa 9 y se une a Apaf-1 (es un
marcador) se une a ATP dentro del citosol, a la unión de estas moléculas se le
llamara APOPTOSOMA
¿Cuál es la idea de formar un apoptosoma? Formar mediante la unión del citocromo C,
Apaf-1 a la procaspasa 9 y esta active a la caspasa 9 y ejecute la muerte celular
¿Por qué esta formado un apoptosoma? Citocromo C, Apaf-1, Procaspasa 9 y ATP
¿con que fin se activa un APOPTOSOMA? Con el fin de activar a la procaspasa 9
En el caso de las proteínas antiapoptoticas se unen a Apaf-1 para no permitir que la
apoptosoma active a la procaspasa 9 y no se dé la ejecución inhibitoria.
ACTIVADOR DEL GEN SUPRESOR P53
 La acción de radiaciones ionizantes (rayos-X, gamma, ultravioleta) drogas utilizadas en
quimioterapias del cancer, toxinas, hipoxia, infecciones virales y radiales libres inducen
daño irreversible al ADN, lo que activa el gen supresor de tumores p53 (interruptor
molecular que controla la vida o muerte de la celula)
Dicha actividad induce el aumento en la concentración de las proteínas p53 las que
activa la síntesis de la proteína p21(detiene para reparar) que a su vez inhibe a la
proteína quinada dependiente de ciclina, deteniendo el ciclo celular en G1, S O G2 con
el objetivo de dar tiempo para reparar ADN (ósea protege y repare)
Si no es posible la reparación de P53 induce apoptosis por dos mecanismos
1-activacion de la procaspasa 8
2-Aumento transitorio del número de receptores FAS
3-VIAS DEL SISTEMA INMUNE A TRAVES DE LOS LINFOCITOS T NK (NATURAL KILLER) O
CD8
Induce a la célula blanco aquella que está infectada por virus o que el ADN sufrió
mutaciones. Estos linfocitos van a hacer poros transmembrana por medios de unas
proteínas llamadas perforinas donde va introducir una proteína llamada GRAMZINA B al
interior de la célula, va a romper proteínas actuando sobre el ácido aspártico porque es
una caspasa.
Posteriormente va activas de una vez a la caspasa 3

LAS PROCASPASAS PUEDEN SER ACTIVADAS E INDUCIR APOPTOSIS POR 4 VIAS

1- Vía procaspasa 8 mediante estímulos externos transportados por mensajeros
químicos y por estímulos internos a través de proteína p53
2- Vía procaspasa 9 por estímulos internos y externos que alteran la permeabilidad de
la membrana mitocondrial
3- Vía procaspasa 12 que se encuentra insertada en la membrana del RE cuya
alteración inducida por estímulos externos p internos inducen la fijación de bax y
bad.
 4- Vía procaspasa ejecutadora 3 por activación de ella mediante la granzima B

Diferencia entre apoptosis apoptosis Necrosis (oncosis)

y necrosis(muerte)
mecanismo Programada genéticamente Accidental ejemplo (un
infarto)
Tamaño disminuye Aumenta (la célula se
hincha y luego explota y
sale todo el contenido por
eso hay inflamación
Membrana Se mantiene Se rompe
organelos Se preservan Se desintegran
Fragmentación de ADN Temprana fragmentación Tardía fragmentación
Fragmentación celular En cuerpos apoptóticos Los contenidos de los
rodeados por membrana gránulos se liberan
Restos celulares Son reconocidos y Inducen inflamación local
fagocitados por medio de la
trombospondia y
fosfatidilserina

APOPTOSIS FISIOLOGICA: tiene que haber un equilibrio entre aquellas proteínas

inductoras apoptosis y aquellas que inhiben la apoptosis. Ejemplo
-si hay un defecto de la apoptosis y no se mueven las células puede haber un problema de
autoinmunidad o de cáncer
- en el caso de exceso por ejemplo en el sida los CD4 se mueren, también en el alzheimer
si las neuronas mueren por apoptosis hay problemas de una demencia
INHIBICION DE LA APOPTOSIS
1- Mediante proteínas codificadas por el proto-oncogen Bcl-2
2- A través de la proteína 14-3-3 que inhibe a bax, bad y bid
3- Mediante la unión de NK-BK a procaspasa 8
4- Por proteínas IAP codificadas por genes diferentes a Bcl las proteínas inhibidoras de
la apoptosis IAP fueron descubiertas a comienzos de 1990 se encuentran presentes
en el citoplasma e inhiben a la caspasa 3,7,8 y 9 siendo la proteina inhibitoria mas
potente la denominada XIAP de 57 KDa de peso molecular (9, 12,22)
 CARCINOGENESIS

Carcinogénesis: es el proceso por el que las células normales adquieren mutaciones y comienzan a reproducirse descontroladamente,
afectando el balance entre nacimiento y muerte celular.

Características de células cancerosas: perdida de control de la proliferación y de la capacidad de diferenciación; autonomía, capacidad
de hacer metástasis, perdida de cohesión y adhesión celular, no presentan apoptosis, son células irregulares dividiéndose, presentan
anaplasia y monoclonalidad.

Cuando se produce una alteración del ADN se advierten 3 posibilidades para la célula: reparación del daño, pasar a una molécula
iniciada o morir por apoptosis.

Mutágeno: agente físico, químico o biológico que altera o cambia la información genética de un organismo y esto incrementa la
frecuencia de mutaciones por encima del nivel natural.

Mutación: hace referencia a una alteración hereditaria en el genoma; las células que conducen al cáncer pueden mostrar en su mayoría
alteraciones o mutaciones en la secuencia de ADN.

Etapas de la carcinogénesis (3):

1. Iniciación: se lleva a cabo la alteración estructural del ADN que conlleva la activación del oncogén o la inactivación del gen
supresor; es un proceso irreversible y con memoria. Actúan a través de mutaciones.
2. Promoción: representa la etapa de crecimiento tisular con la formación del tumor, es una expansión de la población iniciada.
3. Progresión: implica la capacidad de invadir tejidos vecinos o a distancia, por parte de la célula tumoral maligna, es irreversible
y presenta resistencia farmacológica.

El cáncer aparece cuando la exposición al promotor sigue a la exposición del iniciador; hay una exposición al iniciador, esto implica que
se sigue la estimulación ya que el factor de riesgo persiste.

Genes supresores de la proliferación: inhiben la reproducción excesiva de células, la inactivación de los genes que inhiben la
proliferación celular puede ser un mecanismo importante de la transformación maligna.

Marcadores tumorales: sustancias producidas por las células cancerosas o por otras células del cuerpo como respuesta al cáncer o a
ciertas afecciones benignas. La mayoría son producidos por células normales como por células cancerosas; estas sustancias pueden
encontrarse en sangre, orina, heces, otros tejidos, etc. La mayoría son proteínas.

Utilidad de los marcadores: para detectar, diagnosticar y controlar algunos tipos de cáncer, se utilizan para establecer pronostico y
estibaje de algunos tipos de cáncer; la presencia de un marcador o su elevación no es un indicador único de cáncer.

Protooncogenes: son genes que promueven el crecimiento celular normal.

Oncogenes: resultan de la mutación de los protooncogenes, los cuales pierden mecanismos de regulación y favorecen el crecimiento
exagerado de células.

Acción de p53: la proteína supresora de tumores p53 induce el suicidio celular. Su pérdida o mutación induce cáncer.
Bioquimica y enfermedad
Objetivo: la bioquímica busca describir y explicar en
términos moleculares los procesos químicos de las células
vivas
Importancia: los estudios yo químicos contribuyen al
diagnóstico, pronóstico y tratamiento de la enfermedad
La salud depende del equilibrio armonioso de la creación del
propio químicas que ocurren en el cuerpo
un enfoque bioquímico es fundamental para aclarar las
causas de las enfermedades e idear terapéuticas apropiadas
máximos ejemplos:
• Carbohidratos-diabetes mellitus
• Lípidos-obesidad y ateroesclerosis
• Proteínas-anemia de células falciformes
• Ácidos nucleicos-alteraciones genéticas
la investigación bioquímica en relación con las
enfermedades puede resumirse en 5 categorías:
• demostración de sus causas
• sugerir tratamientos eficaces y racionales
• poner a disposición pruebas selectivas para el
diagnóstico temprano: glucosa verdadera, triglicéridos,
colesterol y acido úrico
• colaborar en la vigilancia del proceso
• ayudar a valorar la respuesta al tratamiento
Hidroximetil glutarin coenzima A
reductasa
las enfermedades tienen una base bioquímica por lo tanto se
clasifican según su causa y la molécula bioquímica afectada
en:
1. Agentes físicos
2. agentes químicos y fármacos
3. agentes biológicos
4. genéticos
5. ausencia de oxígeno
6. reacciones y inmunológicas
7. desequilibrio nutricional
8. desequilibrio endocrino
Alteraciones bioquímicas causantes de la enfermedad
1. determinadas por genes
2. biomoléculas aafectadas en: estructura, función y
cantidad
3. las perturbaciones bioquímicas pueden ocurrir con
rapidez o lentitud
(genes más factores ambientales igual a enfermedades
complejas)
4. causada por exceso o deficiencia de ciertas
 biomoléculas:
vitaminas: causa primaria de deficiencia: alimentación
causa secundaria: mala absorción,
requerimiento acelerado
utilización inadecuada y aumento de la
excreción

5. casi todos los organelos celulares pueden ser

involucrado en la genesis de alguna enfermedad

6. Mecanismos bioquímicos diferentes pueden producir

hallazgos patológicos clínicos y de laboratorio
reacciones patológicas principales
• inflamación aguda o crónica---infeccion
• Degeneración------ ejemplo: hígado graso por etanol
• crecimiento de un órgano-----crecimiento del hígado por
enfermedad de von gierke causada por deficiencia de
enzima glucosa 6 fosfatasa
• anemia-----deficiencia de hierro o vitamina
• muerte celular----infarto causado por falta de oxígeno
• fibrosis-----cirrosis por acumulación de colágeno
• formación de cálculos----ejemplo gota por acido urico
• cetosis-----en diabetes
biomoléculas afectadas por enfermedad

niveles a los que se analizan los efectos patológicos

en las enfermedades genéticas

-DNA : nuclear y mitocondrial

-RNA: participación alterada(talasemias)
-proteínas: a) encimas B) proteínas no enzimáticas:
transporte-albumina, protectoras-inmunoglobulinas,
 estructurales-colágeno, hormonal-insulina, receptores-
receptor del LDL

Transtornos en el metabolismo
• Deficiencia de producto
• acumulación de precursores tóxicos
• transtornos de regulación por retroalimentación
• función membranal alterada
• Compartementalización alterada
los errores congénitos del metabolismo están causado por
alteraciones hereditarias del DNA llamadas mutaciones, qué
generan proteínas anómalas, en las que la estructura y por
tanto la función es tan alterada. esto provoca el
funcionamiento erróneo de células y órganos
enfermedades genéticas
• Monogenéticas: se deben a genes con mutaciones
simples
A. autosómicas dominantes : cada persona afectada
debe tener al menos 1 de sus padres afectados
-hijos normales de un padre afectado tienen hijos y
nietos normales
-la enfermedad puede aparecer en cada generación
-ejemplos: enfermedad de Huntington,
hipercolesterolemia familiar, poliposis colonita
familiar
B. autosómicas recesivo : se expresa en
homocigotos
-persona afectada más heterocigoto= mitad
afectados y mitad heterocigotos
 -ejemplos: fenilcetonuria, anemia de células
falciformes, talasemias b, fibrosis quística y
enfermedad por almacenamiento de glucógeno
C. ligando al cromosoma x: puedes ser dominante o
recesiva
-madre portadora 50% de sus hijos serán afectados
y 50% de hijas portadoras
-padre afectado transmite a todas sus hijas
-ejemplos: hemofilia, lesh nihan, anemia
hemolítica por deficiencia de glucosa 6 fosfato.

• Transtornos cromosómicos:
A) en número: trisomías,monosomía y polisomías
(El síndrome down es un trastorno cromosómico
causado por un error en la división celular que
da como resultado la presencia de un tercer
cromosoma 21 adicional)

B) En la estructura:
-Deleccion: pérdida de una porción del
cromosoma
- translocación: transferencia del material
 cromosómico de un cromosoma a otro
-inversión: rompimiento de un cromosoma en:
de unión en forma invertida
-duplicación: presencia de material genético
extra en el mismo cromosoma

• multifactoriales o poli génicos: se deben a alteraciones

en varios genes, hoy se pueden presentar al nacimiento
o tarde en la vida, tienden a involucrar un solo órgano,
el riesgo de recurrencia es igual para el mismo defecto
ejemplos: cardiopatía isquémica, paladar hendido,
diabetes mellitus, hipertensión y enfermedades
alérgicas

pruebas para el diagnóstico de enfermedades

genéticas
-visualización del feto con USG hoy instrumento de
fibra óptica(fetoscopia)
-composición química del líquido amniótico
-células fetales obtenidas de líquido amniótico o biopsia
de las vellosidades coriónicas
-técnica de tinción y clasificación celular
-análisis del DNA fetal
 DISCUSION DE GRUPO Nº 5 TRASTORNO DEL METABOLISMO DE LAS
PURINAS, GOTA
Manifestaciones clínicas:
La incidencia de gota es relativamente alta presentándose en
alrededor de 0.3% de la población, mientras que la
incidencia familiar puede ser tan alta como 75 a 80% La
gota se clasifica en dos tipos: Primaria y secundaria.
La gota primaria es hereditaria, La gota primaria se
encuentra más frecuentemente en hombres mayores de 30
años de edad. En las mujeres puede ocurrir después de la
menopausia
la secundaria es debida a trastornos como la leucemia
(aumento de leucocitos) y a policitemia (aumento de la
cantidad de glóbulos rojos) o por antimetabolitos usados por
el tratamiento del cáncer, ocurre en ambos sexos y a edades
más jóvenes.
La gota primaria se asocia con defectos enzimáticos
conocidos, por ejemplo, las personas con deficiencia de
glucosa 6 fosfatasa desarrollan una enfermedad del
almacenamiento de glucógeno; debido a que ellos no pueden
formar glucosa a partir de azucares fosforilados, desarrollan
hipoglicemia.
GLUTATION REDUCTASA:
Algunas personas que tienen una variante dominante
autonómica del glutatión reductasa desarrollan gota, estas
variantes tienen un aumento de su actividad comparada con
la de la enzima normal.
El glutatión es un tripéptido ampliamente distribuido
(gamma-glutamil-cisteinil-glicina).
El péptido funciona en la reacción de intercambio de
disulfuro sulfhídrico que mantiene a las proteínas celulares
en sus formas reducidas.
También funciona protegiendo los grupos sulfhídricos
proteicos, sirviendo como sustratos para el glutatión
peroxidasa, una enzima que remueve el peróxido de
hidrogeno formada en ciertas reacciones de oxidasa. En
ausencia de glutatión, el peróxido de hidrogeno se acumula.
El glutatión se mantiene en estado reducido por el glutatión
reductasa. Las personas con la variante super activa de
glutatión reductasa dependen más de la vía de las pentosas
fosfato para producir NADPH que es usado por la reductasa.
Como resultado esto lleva a aumentar la producción de la
ribosa 5 fosfatos, y el 5-fosforribosilpirofosfato se produce
en exceso. El PRPP entonces lleva a la síntesis excesiva de
nucleótidos de purina, que deben ser catabolizados a ácido
úrico.

DEFECTOS EN EL METABOLISMO DE LAS

PURINAS:
Se cree que la mayoría de los casos de gota primaria son
causados, más por síntesis excesiva de purinas, que por
aumento de la degradación de los nucleótidos de purina.
Consistente con este punto de vista se encuentra la
observación de que algunos pacientes gotosos tienen
aminotransferasas de PRPP que son resistentes a inhibición
por retroalimentación por los nucleótidos de purina.
Los sitios reguladores de esta enzima, como los de otras
enzimas alostéricas, se encuentran separados de los sitios
catalíticos. En consecuencia, un defecto en el sitio de
regulación como resultado de una mutación podría llevar a la
sobreproducción de purinas como se ve en la gota.
GOTA Y SINDROME DE LESCH-NYHAN:
Otra enfermedad caracterizada por una tremenda
sobreproducción de purinas es el síndrome de Lesch Nyhan.
Esta severa enfermedad ligada al cromosoma X tiene su
comienzo a edad temprana y está caracterizada por un
comportamiento excesivamente agresivo que generalmente
lleva a la automutilación; el defecto en esta enfermedad está
asociado con la enzima Hipoxantina Guanina Fosforribosil
Transferasa (HGPPT). Otro nombre para esta enzima es
GMP (IMP) fosforilasa.
Aparentemente la enzima tiene un papel esencial en los
tejidos extrahepáticos donde la síntesis de Novo de las
purinas ocurre en grado muy bajo. Los tejidos extrahepáticos
contienen la fosforribosil transferasa, pero dependen de las
bases purinicas circulantes o de los nucleótidos derivados del
hígado. Ellos toman las purinas circulantes y a través de la
reacción de la HGPRT forman nucleótidos.
El hombre puede desaminar la adenosina a inosina, pero no
la adenina a hipoxantina. Además, la purina nucleósido
fosforilada favorece a la guanina e inosina sobre la
adenosina.
Consecuentemente todas las purinas catabolizadas son
canalizadas a través de hipoxantina y guanina en ruta a ácido
úrico. Recuerde que la biosíntesis de nucleótidos de purina
es muy sensitiva a los niveles de reserva de GMP e IMP.
Esta sensibilidad ocurre a nivel de la reacción de la PRPP
amidotrasferasa, la primera enzima en la vía de las purinas.
En el síndrome de Lesch Nyhan, la síntesis excesiva de las
purinas puede resultar de dos defectos.
Los niveles de GMP e IMP pueden caer como resultado de
inhabilidad de la HGPPT defectuosa para rescatar guanina e
hipoxantina, consecuentemente la PRPP amidotrasferasa
puede responder produciendo una cantidad excesiva de 5-
fosf-D-ribulosamina.
Alternativamente, la HGPPT defectuosa podría causar la
acumulación de PRPP y llegar a ser capaz de estimular la
PRPP amidotrasferasa. En todo caso resultarían niveles altos
de 5-fofo-D-ribulosamina y la producción de purinas sería
excesiva.

La carencia de actividad de la HGPPT en pacientes con el

síndrome de Lesch Nyhan es completa, ya que muchos de
estos pacientes también desarrollan artritis gotosa y debido a
que esta enfermedad está ligada al cromosoma X y, por lo
tanto, limitada a hombres.
DIETA:
La mayoría de las bases purinicas de la dieta son convertidas
en ácido úrico por la xantina oxidasa intestinal y, por el riñón
también. Así una dieta que incluya 4gr de RNA de levadura
por día elevará los niveles sanguíneos de uratos a los
encontrados en la gota.
Una ingesta sostenida de grandes cantidades de alimentos
ricos en ácidos nucleicos, por ejemplo: Pan dulce, hígado,
levadura, anchoas, riñones, sardinas, etc. Podrían elevar los
niveles de uratos séricos arriba de 0.4 mmol/L (7mg/dl).
Por otro lado, si se da una dieta libre de purinas podrían
bajar los niveles de urato, pero solamente en 60 mmol/L
(1mg/dl), debido a que la mayoría de purinas en el cuerpo
son sintetizadas de Novo.
Se aconseja al tratar la enfermedad, una dieta adecuada pero
no alta en proteínas, los alimentos altamente ricos en
proteínas podrían también contribuir a la síntesis acelerada
de purinas, ya que se necesitan varios aminoácidos para ello.
Debe evitarse la obesidad y la deshidratación.
El alcohol al provocar diuresis lleva a la deshidratación. Un
alto grado del metabolismo del alcohol puede contribuir a la
acidosis láctica causando precipitación de los cristales de
uratos de sodio en las articulaciones.
La enzima alcohol deshidrogenasa promueve la producción
de NADH, que se utiliza para formar lactato a partir de
piruvato, la lactacidemia resultante suprime la secreción
tubular de ácido úrico que es altamente insoluble en su
forma no disociada.
TRATAMIENTO DE LA ARTRITIS GOTOSA:
Los cristales de urato de sodio inician una serie de
reacciones que producen la inflamación asociada con artritis
gotosa aguda. El primer paso probablemente la activación
del factor de Hageman, una proteasa activada, causa
infiltración de leucocitos y fagocitos de los cristales de urato.
La fagocitosis causa destrucción de los lisosomas y la
subsecuente liberación de enzimas hidrolíticas que causan
destrucción de células e inflamación.
Los cristales de urato encontrados en líquidos articulares se
encuentran a un pH neutro, y están compuestos mayormente
por urato monosódico, puesto que los PKa del ácido úrico
son de 5.7 y 10.3, por otro lado, debido a que la orina de los
pacientes gotosos puede tener un pH de 4.5 a 5.0 los cálculos
renales son probablemente cristales de ácido úrico.

LA COLCHICINA:
Se ha usado durante muchos años, es altamente específica
para la gota, pero su mecanismo de acción no está bien
entendido. La droga se une a las subunidades de proteínas
que constituyen los microtúbulos de los leucocitos
polimorfonucleares. La degradación de los microtúbulos
inhibe la locomoción de los leucocitos, adhesividad y
metabolismo durante la fagocitosis; aunque la colchicina
produce mejoría clínica, no mejora los niveles séricos de
uratos.
ALOPURINOL:
La droga que más efectivamente inhibe la formación de
uratos, un inhibidor competitivo de la enzima xantina
oxidasa. La hipoxantina y la xantina, que son más solubles
que el ácido úrico se excretan en la terapia con alopurinol.
Sin embargo, no son excretadas en cantidades
estequiométricas en relación con la disminución de ácido
úrico visto en pacientes gotosos que tienen niveles normales
de fosforribosil transferasa. En individuos deficientes de esta
enzima, la hipoxantina y xantina se excretan en lugar de
uratos.
El alopurinol al igual que la guanina y la hipoxantina,
pueden convertirse en el ribonucleótido de fosforribosil
transferasa.
Al disminuirse la formación de ácido úrico por la
administración de alopurinol se alivian los síntomas y se
disminuye la posibilidad de formación de cálculos renales;
sin embargo, el alopurinol es un análogo de las purinas y
deber ser utilizado con precaución en el tratamiento de la
gota secundaria.
En caso de pacientes con leucemia que están sometidos a
terapia con análogos de purina. Esto es particularmente
cierto cuando se administra oralmente análogo de purinas en
combinación con alopurinol.
La xantina oxidasa intestinal normalmente degrada muchos
de los análogos de purinas degradados, pero cuando es
inhibida por el alopurinol, muchos de los fármacos análogos
pueden entrar al sistema circulatorio. Esto puede ser
peligroso, ya que muchas antimetabolitos se utilizan a
niveles muy altos, justo en límites de sus concentraciones
toxicas.