FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

QUIMICO FARMACOBIÓLOGO

ASIGNATURA: PARASITOLOGIA
Manual de Practicas de Laboratorio

AUTOR:

DRA. MIRIAM DESIREÉ DÁVILA MEDINA

Saltillo, Coahuila Agosto - Diciembre 2024

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 PRACTICA # 1

COLECTA Y CLASIFICACIÓN DE ARTRÓPODOS DE INTERÉS MÉDICO.

INTRODUCCIÓN:

Los artrópodos tienen un papel indiscutible en la transmisión de enfermedades al

humano y sus animales, especialmente aquellos que funcionan como
ectoparásitos o bien comensales. Ejemplos de ello son los dípteros de la familia
Culicidae, transmisores de enfermedades tales como el paludismo, fiebre de las
rocallosas, fiebre amarilla y dengue entre otras. Así mismo encontramos otras
familias de la clase insecta como los hemípteros de la familia Reduvidae, como los
triatomas que son capaces de infectar al humano y otros mamíferos con el
protozoario Tripanosoma cruzi, los ácaros, transmisores de riquetsias y finalmente
pero no menos importantes, encontramos los comensales como las moscas,
cucarachas y demás insectos que sirven como forontes de múltiples
enfermedades.

OBJETIVO:

El alumno reconocerá mediante la captura y observación, las diferentes familias y

géneros de artrópodos de interés médico.

MATERIAL:
Alfileres entomológicos
Hoja de nieve seca
Etanol al 70%
Pinzas de disección
Etiquetas de 1.5 cm X 1 cm
Artrópodos colectados
Material para maqueta.

METODOLOGÍA:
1. Colectar al menos 10 géneros diferentes de artrópodos por equipo,
fijándolos en un frasco de boca ancha con tapa de rosca que contiene
etanol al 70%.
2. Buscar en bibliografía la familia y género al cual pertenecen estos
artrópodos
3. Situar al artrópodo mediante los alfileres entomológicos en una hoja de
nieve seca, de manera tal que pueda apreciarse su morfología y con ello
poder clasificarlos.
4. Una vez clasificados, colocar un letrero de cartoncillo de medidas 1.5 cm. X
1 cm. los datos de la familia y género al cual pertenecen.
5. Recrear el ambiente a manera de maqueta de los artrópodos atrapados
para su presentación al asesor.

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 PRÁCTICA # 2

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE PROTOZOARIOS DE INTERÉS MÉDICO

INTRODUCCIÓN:

La observación de las características morfológicas y tintoriales de los protozoos es

útil para el buen diagnóstico de las parasitosis humanas. Las características de las
diferentes etapas de vida del parásito, sirven de base para conocer sus ciclos
biológicos y su interacción con el micromedio que les brinda su condición parásita,
ya sea temporal o definitiva. La detección en muestras biológicas de parásitos es
el medio confirmativo del diagnóstico y prueba irrefutable de la relación
hospedador - parásito.

OBJETIVOS:

Mediante la observación microscópica, que el alumno aprenda y al final,

reconozca, la morfología de diferentes fases parasitarias, géneros y especies de
los principales protozoarios que infectan al humano.
MATERIAL:
Laminillas permanentes de diferentes parásitos protozoarios proporcionadas por el
asesor.
Microscopios ópticos compuestos
METODOLOGÍA:

El asesor colocará en los microscopios, laminillas con preparaciones permanentes

de protozoarios parásitos y explicará para cada microscopio, las claves de como
reconocer cada género y especie de acuerdo a sus características morfológicas,
para que el alumno las vea, dibuje el parásito, lo coloree, y anote estas
características.
Al final de la sesión, el alumno entregará sus observaciones al asesor para su
evaluación.
EJERCICIO
1. Describa el fundamento de las tinciones de Giemsa y Wright.
2. Describa el ciclo biológico de un hemoprotozoario
3. Mencione 2 protozoarios que se localicen dentro del globulo rojo y 2 que se
localicen fuera del mismo.
4. Mencione 3 protozoarios encontrados en sangre y especie a la que afectan
5. Mencione 3 hemoprotozoarios que sean zoonoticos, indicando la especie
animal que los transmite al humanO

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 PRACTICA # 3

COMPARACIÓN DE LOS MÉTODOS COPROPARASITOSCÓPICOS

CUALITATIVOS DE CONCENTRACIÓN (FLOTACIÓN –SEDIMENTACIÓN) EN
MUESTRAS DE COPRO PARASITADAS.
INTRODUCCIÓN:
El estudio coproparasitoscópico es muy útil en el diagnóstico de las diversas
parasitosis intestinales en el humano. Este estudio en su forma simple, muestra
las formas de los posibles parásitos en una muestra de excremento, sin embargo,
dado que esta muestra simple no siempre cumple con ser una muestra
representativa y además que los ciclos biológicos de los parásitos no siempre
ocurren en determinados períodos, se hace necesario el uso de métodos
coproparasitoscópicos que incluyen más de una muestra pudiendo ser estos de
hasta 6 muestras, aunque el común es de 3. Estos métodos se adaptan bien a
ciertas fases de algunos de los parásitos intestinales y pueden ser clasificados
como cualitativos o cuantitativos. En esta práctica se emplearán los cualitativos
por ser los más comunes e indispensables para dar un diagnóstico del tipo de
parásito y el estadio del mismo pudiendo ser el método por sedimentación cuyo
fundamento estriba en la densidad de la sustancia reactivo y la densidad del
parásito observando su presencia si la hubiere en el fondo del tubo o bien el
método de flotación que conlleva un reactivo con mayor densidad que la del
parásito y por tanto poder encontrar las formas parasitarias en la superficie del
reactivo.
OBJETIVO: El alumno comparará a través de los resultados que obtenga, 2
métodos coproparasitoscópicos de concentración, el de flotación de Faust y el de
sedimentación de Ritchie.
MATERIAL:
Biológico:
 Muestra de materia fecal (5-10g) lo mas “fresca” posible (de reciente
emisión) en frasco de vidrio o de plástico de boca ancha con tapa hermética
sin líquidos. Rotularla con los datos del paciente y la fecha de muestra.
Instrumental:
 Centrífuga clínica
 Microscopio óptico.
 Balanza granataria
 Abatelenguas de madera
 Pizeta de 250 ml.
 Reloj
 Gradilla
 Probetas
 Agitador magnético
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Tubos de 13X100
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  Pipetas Pasteur con bulbo
 Malla de alambre galvanizado o gasa

Reactivos:
Ver apartado de reactivos
METODOLOGÍA:
Método de Ritchie
1. Preservar las muestras en formaldehido al 5% en relación 1:3 de muestra:
formaldehido. Reposar por 30 min.
2. Homogenizar la muestra agitándola por 1 a 2 min. Y destapar el frasco para
vaciar el contenido en un tubo de ensayo previamente etiquetado y llenarlo
hasta 2/3 partes del mismo.
3. Añadir NaCl al 0.9 % hasta casi llenar el tubo.
4. Centrifugar 10 min. a 500g o 2500 RPM.
5. Decantar el sobrenadante en la tarja.
6. Añadir 5ml. de acetato de etilo.
7. Agitar vigorosamente pero con mucha precaución los tubos mediante papel
parafilm en un lapso de 30 segundos.
8. Dejar reposar el tubo entre 15 y 30 seg. y destaparlo.
9. Centrifugar a 2500rpm. por 10 min.
10. Se observarán 4 capas: 1) Acetato de etilo en la superficie; 2) Un tapón de
restos fecales; 3) Formaldehido; 4) Sedimento en el fondo del tubo
conteniendo los elementos parasitarios.
11. Desprender las 3 capas superiores con un aplicador de madera y decantar
de un solo movimiento.
12. Con pipeta Pasteur mezclar el sedimento con la formalina remanente.
13. Si es muy espeso, añadir una gota de SSI. y mezclar.
14. Colocar una gota de yodo-lugol en un portaobjetos y a esta añadirle una
gota de la muestra. Colocar el cubreobjetos.
15. Observar al microscopio la preparación haciendo un “barrido” con el
objetivo de 10X y verificar formas sospechosas con el de 40X.

Método de Faust.
1. La materia fecal en formaldehido al 5% o fresca se resuspende en agua de
la llave.
2. Mezclar hasta homogenizar.
3. Pasar la suspensión por una malla de alambre galvanizado o gasa y
recoger en tubo de ensaye de 13X100.
4. Centrifugar a 500 g. o 2500 rpm. por 1 min. y decantar el sobrenadante.
5. Resuspender el sedimento con agua
6. Repetir la centrifugación.
7. Resuspender el sedimento con 2 ml. de solución de Sulfato de Zinc
(densidad 1.18), homogenizar completamente.
8. Agregar sulfato de zinc hasta 0.3 cm. por abajo del borde del tubo.
9. Volver a centrifugar con mucho cuidado.
10. Agregar al tubo sulfato de zinc hasta formar un menisco sobre la superficie
de la solución.
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 11. Colocar una gota de yodo-lugol en un portaobjetos limpio y desengrasado.
12. Colocar el cubreobjetos en la parte superior del tubo y depositarlo en el
portaobjetos con la sol. De yodo. Evitar la formación de burbujas.
13. En el microscopio, “barrer” la preparación con el objetivo de 10X y con el de
40X aquellos artefactos sospechosos.

Anotar resultados de ambas técnicas y hacer dibujos de las formas parasitarias.

Analizar los resultados y anotar conclusiones.

EJERCICIO
1. Describa la forma de preparar las soluciones saturadas: de azúcar, sal y de Zinc
2. Anote la densidad de las soluciones enlistadas a continuación:
· Saturada de azúcar
· Saturada de sal
· Saturada de zinc
3. Mencione las especies de Eimeria spp más patógenas en las siguientes
especies: Aves, Bovinos, Ovino

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 PRÁCTICA # 4

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE FASES DE GUSANOS PLANOS

(PLATHYHELMINTOS) DE INTERÉS MÉDICO

INTRODUCCIÓN:

La observación de las características morfológicas y tintoriales de los gusanos

planos es útil para el buen diagnóstico de las parasitosis humanas. Las
características de las diferentes etapas de vida del parásito, sirven de base para
conocer sus ciclos biológicos y su interacción con el micromedio que les brinda su
condición parásita, ya sea temporal o definitiva. La detección en muestras
biológicas de parásitos es el medio confirmativo del diagnóstico y prueba
irrefutable de la relación hospedador - parásito.

OBJETIVOS:

Mediante la observación microscópica, que el alumno aprenda y al final,

reconozca, la morfología de diferentes fases parasitarias, géneros y especies de
los principales plathyhelmintos que infectan al humano.

MATERIAL:

Laminillas permanentes de diferentes parásitos plathyhelmintos proporcionadas

por el asesor.
Microscopios ópticos compuestos

METODOLOGÍA:

El asesor colocará en los microscopios, laminillas con preparaciones

permanentes de plathyhelmintos parásitos y explicará para cada microscopio, las
claves de como reconocer cada género y especie de acuerdo a sus características
morfológicas, para que el alumno las vea, dibuje el parásito, lo coloree, y anote
estas características.
Al final de la sesión, el alumno entregará sus observaciones al asesor para su
evaluación.

EJERCICIO
1. Describa y esquematice las características generales de los trematodos
2. Describa las etapas biológicas de las fasciolas encontradas en los hígados
3. Describa la morfología de Paramphistomun cervi en fase adulta
4. Mencione los trematodos que afectan a los animales domésticos
5. Esquematice el ciclo biológico de Fasciola hepatica

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 PRÁCTICA # 5

OBTENCIÓN Y OBSERVACIÓN DE PARÁSITOS INTESTINALES.

INTRODUCCIÓN:

En el manejo de productos biológicos radica el éxito o fracaso del diagnóstico de

enfermedades parasitarias. Es necesario seguir ciertos lineamientos
preestablecidos para cada producto. Una laminilla desengrasada insuficiente dará
por resultado, un frotis sanguíneo defectuoso, con el que difícilmente se hará un
diagnóstico adecuado. Una materia fecal colectada junto con orina, destruye los
embriones de uncinaria, etc; en suma, las muestras mal colectadas,
inadecuadamente conservadas y muy viejas, no servirán para observaciones y
estudios ulteriores e inclusive puede conducir a resultados erróneos o falsos.
Para la conservación de muestras podemos seleccionar entre los medios físicos,
como temperaturas bajas y los medios químicos, los cuales permiten la
conservación de muestras durante un tiempo mayor sin correr el riesgo de que las
formas parasitarias se deformen o autolisen. Ejemplos de estas soluciones son el
formaldehído al 5%, MIF (merthiolate, yodo y formol), Cloruro mercúrico (solución
de Schaudin), etc

OBJETIVOS:

El alumno empleará las técnicas de fijación y de concentración por flotación para

la obtención e identificación de posibles parásitos en materia fecal.

MATERIAL:

Centrífuga hematológica
Microscopio óptico
Tubos 13 X 100
Portaobjetos
Cubreobjetos de 22 x 22
Pipetas de 1, 5 y 10 ml.
Vasos de precipitados de 250 y 100 ml.
Probetas de 100 ml.
Frascos goteros y ámbar
Gasas
Cinta maskin tape
Marcador
Papel higiénico
Trapo de tela
Guantes
Aplicadores
Asa bacteriológica
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Barniz transparente
Agua destilada
Jabón de tocador
Detergente
Cloro al 5%
Solución de Willis
Solución de Faust
Solución de Sacarosa
Solución de MIF
Solución de PAF
Solución de formaldehído al 5%
Solución salina isotónica
Solución de yodo - lugol
Heces

METODOLOGIA:

1.- Preparar las soluciones fijadoras como formol al 5%, solución MIF, PAF y
Schaudin.
2.- Preparar soluciones de concentración por flotación: Faust, Salmuera (Willis), y
saturada de sacarosa.
3.- Las heces obtenidas serán tratadas con uno de los fijadores y tratadas para ser
analizadas de manera directa y por los 3 métodos de concentración propuestos.
4.- Para preparar los copros se requiere lavarlos con agua dos o tres veces
centrifugando en cada lavado, finalmente, la muestra lavada será dividida en tres
porciones para aforarse mediante la técnica de menisco invertida con los tres
reactivos de concentración preparados (Faust, salmuera y sacarosa). Para el
Faust y la Salmuera se requiere una centrifugación final de 1 minuto a 2500 RPM
no así para la sacarosa.
5.- El menisco invertido formado al aforar los tubos tiene que mantenerse en
reposo durante algún tiempo para posteriormente, con la ayuda de un
cubreobjetos o asa bacteriológica, tomarlo y colocar ésta gota en un portaobjetos
que tiene una gota del reactivo de yodo - lugol.
6.- Leer al microscopio en el objetivo de 10 X, observando rápidamente la
presencia en la preparación de formas parasitarias helmínticas (huevos o larvas)
para posteriormente hacer el “barrido” de la muestra en el objetivo de 40 x.
7.- Anotar resultados y hacer dibujos de las observaciones.

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 PRÁCTICA # 6

OBSERVACIÓN MICROSCÓPICA DE FASES DE GUSANOS REDONDOS

(NEMÁTODOS) DE INTERÉS MÉDICO

INTRODUCCIÓN:

La observación de las características morfológicas y tintoriales de los gusanos

redondos es útil para el buen diagnóstico de las parasitosis humanas. Las
características de las diferentes etapas de vida del parásito, sirven de base para
conocer sus ciclos biológicos y su interacción con el micromedio que les brinda su
condición parásita, ya sea temporal o definitiva. La detección en muestras
biológicas de parásitos es el medio confirmativo del diagnóstico y prueba
irrefutable de la relación hospedador - parásito.

OBJETIVOS:

Mediante la observación microscópica, que el alumno aprenda y al final,

reconozca, la morfología de diferentes fases parasitarias, géneros y especies de
los principales nematodos que infectan al humano.

MATERIAL:

Laminillas permanentes de diferentes parásitos nematodos proporcionadas por el

asesor.
Microscopios ópticos compuestos

METODOLOGÍA:

El asesor colocará en los microscopios, laminillas con preparaciones

permanentes de nematodos parásitos y explicará para cada microscopio, las
claves de como reconocer cada género y especie de acuerdo a sus características
morfológicas, para que el alumno las vea, dibuje el parásito, lo coloree, y anote
estas características.
Al final de la sesión, el alumno entregará sus observaciones al asesor para su
evaluación.

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 PRÁCTICA # 7

TRANSMISORES, VECTORES Y ECTOPARÁSITOS.

INTRODUCCIÓN:

El parásito depende para su subsistencia del hospedador, de tal manera que si el

hospedador muere, también muere el parásito aunque de manera general, se
establece una relación ecológica en la cual se da un balance entre el parásito y su
hospedador. En base a su localización, los parásitos pueden clasificarse en 2
grupos :
 Endoparásitos: Aquellos que viven dentro del organismo de su hospedador
 Ectoparásitos: Aquellos que viven en la superficie externa del cuerpo del
hospedador.
Los parásitos pueden propagarse en un hospedador y luego transmitirse por muy
diversos mecanismos. En la transmisión pueden intervenir diversos factores como
la concentración de agua, el aire, el tipo de alimentos, el tipo de vector, la
asociación directa o indirecta con el hospedador final, etc. Finalmente, los vectores
pueden realizar la transmisión de forma mecánica, propagativa, ciclopropagativa,
inoculativa y contaminativa.

OBJETIVOS:

Que el alumno conozca algunos de los diferentes mecanismos de transmisión y

propagación de parásitos a partir de vectores insectos.
Conocerá, algunos detalles de la morfología interna y externa de los insectos
involucrados en la transmisión de patógenos.

MATERIAL:

Microscopio de disección
Microscopio óptico
Portaobjetos
Cubreobjetos
Cajas de Petri
Estuche de disección
Solución salina isotónica
Medios bacteriológicos preparados (Agar PDA, Staph- 110 y EMB)
Yodo - Lugol
Cucarachas de la especie Periplaneta americana

METODOLOGIA:
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1.- Cuidadosamente, amputar las alas de la cucaracha y hacer que ésta camine
por los diferentes agares
2.- Mediante disección, amputar las patas de la cucaracha, fijarla mediante
alfileres en la tapa de una caja de Petri que previamente fue preparada con cera y
abrir el abdomen introduciendo el bisturí o las tijeras entre los terguitos
abdominales.
3.- Extraer cuidadosamente algunos órganos como el intestino en sus porciones
anterior media y posterior así como los tubos de Malpigi, las glándulas salivales.
Observar en el microscopio de disección estas partes.
4.- Bañar frecuentemente al animal con solución salina a fin de no permitir que se
sequen los tejidos.
5.- Los órganos extraídos son colocados en portaobjetos con yodo lugol
6.- Las muestras son tratadas para finalmente ser observadas en el microscopio
óptico tratando de identificar protozoarios y/o larvas de helmintos.
7.- Hacer dibujos y anotar resultados.

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