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SUBJECT: LECTURE: DATE:

IMPORTANT (equations, laws, etc.)

Reacción en cadena de la polimerasa Per

DepuntoFinal qualitative

NOTES
termocicladores losciclos detemp en la per
Amplificación desegmentoespecíficode
una mezcla completa deADN
S
Era c copias aecaregión sequiere
que
En
Vitry amplificar o regiones moldes

Componentes necesarios e que limitaelexponencial ciclo


LAANTPSIvantidad
Desoxirribonucleosidos trifosfatados Losprimers
CANTPS LAADNpolimerasa
MoldedeADN cadenasimple

FIFI
Primers ccebadp.ro PMChiocroxido libre
m I
ua Fosfato nounida a otro
TELEb Eem L grupoFosfatolibres niciclos

El núcleotido queesta en el extremo opuesto sugra Como se visualizan losproductos deamplificación


po fosfato estáunido a otronúcleotido extremo3
hidroxilolibres Electroforesis deácidosnucleicos
Chacermovermoléculas queestar cargadas electricamente
la polimerasa usa al extremo hidroxilo librepara campoeletrico
hacer una reacción covalente y unir elproximo núe grupoFosfatol s
leotido.lva ser polimerisado
Ehi
b siiiiiii.net iiimi ha
ii'sanción estables
Mg cofactores estructuratercioriaz
1120
Geldeagarosa
Cada ciclo de amplificación consta de3 pasos porosde distintostamaños
las moléculas máspequeñas migranmás
1 Desnaturalización delADN doublecadena a195C Lasmásgrandes no migranmucho
separación delas hebras quiebrepuentesdehidrógeno
colorantes específicos Bromuro deetidio
Hibridación
2 delosprimers disminuye latemperaturapas altapropriedaddeunirse
fa50º 70C dependiendo dela composición delosprimers entrelasbases ycapacidad
Favorecer launión delosprimers y laregiónespecificade deflorecerseconluz
hebral ultraviol tamarcadores referenciados
ta

3 Elongación o síntesisde ADN 70752


SUBJECT: LECTURE: DATE:

IMPORTANT (equations, laws, etc.)

PCR entiempo real o GPCR cuantitativa

NOTES
visualizar la producción delos productos de
ampl ficación
porpar entiempo real encadauno delos
ciclos deamplificación
cuantitativa

SYBR green
termocichadores detecta la fluerencia de
cadatubo y generaun
grafica
intensidad deFluorecencia

numerodeciclos

sensibilidad de la maquina sensibilidad dedetección


tiempo de acumulación de productos unos sonmás
rápidos otrostardan más

cuantificar lacantidad delmolde


RT PCR retrotranscripción

transcriptasa reversa ADNpolimerasa familia


CADA copias delos ARN
CADNhacenuna
PCI
RT tb se lapar
PCRO hacencon

cuantittjEapey

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