TEMAS:

1. TEMA 1:
a. TEMA 1.1: ESTRUCTURA Y FUNCIÓN CELULAR.
b. TEMA 1.2: RELACIÓN ENTRE LAS CÉLULAS Y SU ENTORNO. SEÑALIZACIÓN.
RECEPTORES.
2. TEMA 2: MICROSCOPÍA Y TÉCNICAS BÁSICAS DE LABORATORIO
3. TEMA 3: MECANISMOS DE TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANA

1
 TEMA 1.1: ESTRUCTURA Y FUNCIÓN CELULAR
Descubrimiento de las células: las descubrió Robert Hooke en 1665, observó paredes vacías
de un tejido vegetal muerto, originalmente producidas por las células vivas (celdillas).

Anton Van Leeuwenhoek fue el primero en aplicar la microscopía a la biología. Examinó una
gota del estanque de “animalillos”, bacterias del agua remojada en pimienta y raspada de
sus dientes.

El experimento de Pasteur (1861) llevo a la refutación de la Generación Espontánea.

Matthias Schleiden (1838) descubrió que las plantas estaban constituidas de células. El
embrión de la planta tuvo su origen en una sola célula.

Theodor Schwamn (1839) trabajó acerca de las bases celulares de la vida animal. Las células
de las plantas y animales eran estructuras semejantes.

Rudolf Virchow (1821-1902) fue el primero en demostrar que la teoría celular se aplica tanto
a los tejidos enfermos como a los sanos, fue el pionero del concepto moderno del proceso
patológico. Estableción de la división celular como el fenómeno central en la reproducción
de los organismos.

Teoría celular:

 Todos los organismos están compuestos de una o más células.

 La célula es la unidad estructural de la vida.
 Las células solo pueden originar por división de una célula preexistente (sana o
enferma).

Evolución celular: los primeros seres vivos eran unicelulares, procariotas, anaerobios,
heterótrofos y con metabolismo fermentativo. A partir del progenote o protobionte
surgieron tres líneas evolutivas:

 Eubacteria: bacterias y cianobacterias.

 Archaea: arqueobacterias (extremófilas).
 Eukarya: eucariotas.

2
La mejora evolutiva implica un mayor grado de complejidad que deriva de la aparición de:

1. Sistema de endomembranas para compartimentalizar los procesos fisiológicos.

2. Envoltura nuclear para proteger el material genético.
3. Orgánulos energéticos (mitocondrias y cloroplastos)

TEORÍA ENDOSIMBIONTE: formación de células eucariotas a partir de incorporaciones

endosimbióticas de células procariotas mediante fagocitosis.

Las mitocondrias y los cloroplastos parecen derivar de procariotas porque su tamaño y

forma es similar a las bacterias, tienen ADN circular, tRNA y ribosomas propios y distintos,
tienen secuencias similares a genes bacterianos, doble y triple membrana y su división es
similar (fisión binaria).

Función de las células:

 Las células tienen una organización compleja.

 Poseen información genética muy comprimida con recursos propios para poder
codificarla y usarla.
 Las células tienen la capacidad de autorreplicarse.
 Captan y consumen energía.
 Son capaces de realizar reacciones químicas muy variadas.
 Son unidades estructurales con capacidad de respuesta a los estímulos.
 Muestran capacidad de autorregulación.
 Distinta tipología en función de la organización tisular, necesidades, entorno, etc.
 Adaptación: las células y los organismos son sensibles y responden a su entorno
externo.
 Homeostasis: dentro de una célula viva, parámetros como el pH, la temperatura, las
concentraciones de iones y las concentraciones de biomoléculas se mantienen

3
 dentro de límite estrechos mediante el transporte de las sustancias a través de las
membranas celulares y por un metabolismo interno regulado.
 Transmisión de información genética entre generaciones: la reproducción para
producir nuevas células u organismos es esencial para que una especie siga siendo
parte de la biosfera durante más de una generación.
 Adquisición de energía: para mantener tanto la complejidad como la homeostasis,
los sistemas vivos sufren una lucha constante para obtener energía de la luz solar, el
medio ambiente u otros organismos.
 Interacciones: cada célula vida interactúa con otras células y organismos y con su
entorno.
 Crecimiento, desarrollo y muerte: cada organismo tiene un ciclo de vida finito.

Célula procariota:

Célula eucariota:

Célula vegetal:

4
Célula animal:

Nucléolo: se encarga de la transcripción, procesamiento del ARNr (ARN polimerasa I) y del

ensamblaje de ribosomas (10 millones en cada división). Tiene las siguientes regiones:
centro fibrilar, componente fibrilar denso y componente granular (el tamaño depende de la
actividad metabólica celular, se encarga del ensamblaje de ribosomas).

Ribosomas: se encargan de la síntesis de proteínas. En la célula eucariota son 80s y en la

procariota son 70s. Están formados por dos subunidades que están formadas por proteínas
y ARNr, la cantidad está relacionada con el metabolismo celular.

Centríolo y centrosoma:

 Centrosoma: junto al núcleo en el centro de las células interfásicas. Es el centro de

organización e inicio del crecimiento de microtúbulos (células animales). Se ancla a
los extremos. Durante la mitosis, los centrosomas se duplican y separan a polos
opuestos.
 Centríolo: en células animales suele un par de centrosomas rodeados de material
pericentriolar amorfo. Cuerpos basales de cilios y flagelos. No son necesarios para la
organización de microtúbulos.

Citosol y citoplasma:

 Citosol: incluye todo el material del citoplasma (macromoléculas, solutos)

excluyendo los orgánulos los orgánulos membranosos (aunque si se incluyen
ribosomas, citoesqueleto y centrosoma) y el núcleo.
 Citoplasma: hace referencia a todo el contenido celular excepto el núcleo.

5
Membrana plasmática: define el límite de las células y separa su contenido interno del
medio externo (matriz extracelular). Es una barrera selectiva que determina la composición
del citoplasma (identidad celular). Controla las interacciones entre las células y su medio.

En las células animales está formada por una bicapa fosfolipídica asimétrica fluida,
glicolípidos (forman el glicocálix), colesterol y proteínas. La fosfatidilserina tiene carga neta
negativa en la cara citosólica. Los ácidos grasos no saturados aportan fluidez y el colesterol
aporte rigidez. Sigue el modelo de mosaico fluido.

MODELO DE MOSAICO FLUIDO: fluidos bidimensionales con proteínas y lípidos insertados

capaces de difundir lateralmente. Tiene proteínas periféricas (tto agentes polares) e
integrales de membrana (detergentes; proteínas transmembranosas). En la superficie de la
célula está el glicocálix formado por oligosacáridos de glicolípidos y glicoproteínas que
ofrecen protección frente al estrés iónico y mecánico; es una barrera frente a
microorganismos invasores. Balsas lipídicas: limitan el movimiento de proteínas y lípidos
dentro de la plataforma.

Matriz extracelular (no es lo mismo que glicocálix): es el conjunto de proteínas y

polisacáridos insolubles secretados al exterior de algunas células animales. Es un soporte
estructural y regulación del comportamiento celular. Se encarga de la señalización. Recibe el
nombre de lámina basal en células epiteliales, musculares, adiposas y nervios periféricos.
Tiene proteínas fibrosas (colágeno, elastina) embebidas en sustancia gelatinosa polisacárida
(GAG) y proteínas de adhesión (fibronectina, laminina).

Pared celular: está en bacterias y en células eucariotas (en hongos, algas y plantas
superiores). Determina la forma celular y protegen frente a cambios de presión osmótica. En
bacterias está formada por peptidoglicanos (polisacáridos entrelazados por péptidos cortos)
y en eucariotas está formada por polisacáridos (en hongos por quitina; en algas y plantas
superiores por celulosa y hemicelulosa embebidas en pectina).

6
CRECIMIENTO DE LAS CÉLULAS VEGETALES: la presión de la turgencia dirige la expansión de
las células vegetales durante el crecimiento mediante la entrada de agua, que se acumula
en una gran vacuola central.

Cubierta nuclear: tiene una doble membrana perforada por miles

de estructuras porosas de naturaleza proteica (complejos
nucleares) y una lámina nuclear (red fibrosa-soporte estructural).
Protege el nucleoplasma: ADN, proteínas (entramado fibroso que
actúa de scaffold para la cromatina). Tiene un espacio perinuclear
de 20-40nm que es una extensión del lumen del retículo
endoplasmático. Es una barrera con transporte bidireccional a
través de complejos de poro (ARNt, ARNr, ARNm, proteínas).

Dentro de la cubierta nuclear está la heterocromatina que es cromatina condesada de difícil

acceso y la eucromatina, ADN que si se va a transcribir.

Núcleo: contiene el material genético (cromosomas) y las enzimas necesarias para la

transcripción y exportación del ARN al citoplasma. Además, alberga los factores de
transcripción y factores de remodelación de la cromatina. Tiene estructuras subnucleares:
nucléolo y otras estructuras pequeñas (cuerpos de Cajal, GEMS, agrupación de gránulos de
intercromatina).

7
Retículo endoplasmático liso y rugoso: sistema membranoso más grande en células de
mamíferos; red de túbulos y sacos. Continuidad del lumen, pero morfología y función
diferentes.

 REL (retículo endoplasmático liso): movilización de glucosa desde glucógeno,

almacenaje de calcio, destoxificación de compuestos tóxicos y síntesis de lípidos.
 RER (retículo endoplasmático rugoso): procesamiento de 1/3 de las proteínas
celulares. Vía secretora.

Aparto de Golgi: reprocesamiento de proteínas procedentes del

retículo endoplasmático (glicosilación, 250 enzimas) y distribución a
destinos finales. Síntesis de glicolípidos y esfingomielina. En
vegetales, síntesis de polisacáridos complejos de la pared celular.

8
 Lisosomas: degradación de polímeros biológicos (macromoléculas)
del exterior y propios gracias a unas 60 enzimas hidrolíticas. Vacuolas
esféricas densas de pH ácido (aproximadamente 5) con diversos
tamaños y formas (en función del material a degradar). Formación a
partir de la fusión de un endosoma tardío con las vesículas de la red
trans del Golgi (vía secretora y endocítica). Responsables de la
autofagia (metamorfosis, ausencia de nutrientes, estrés, muerte
celular programada): degradación gradual/recambio de los propios componentes de larga
duración de la célula.

Mitocondria:

Obtención de energía metabólica: fosforilación

oxidativa (HC y AG) con enzimas propias. Viabilidad
celular. No son orgánulos estáticos, se fusionan y se
dividen (fisión) continuamente. Doble membrana
(crestas en interna y porinas en externa) y matriz.
Las proteínas mitocondriales se traducen en
ribosomas citoplasmáticos. Mitorribosomas. Propio
ADN (ARNt y ARNr, proteínas mitocondriales –13). Código genético.

Peroxisomas: oxidación de lípidos celulares (ácidos grasos derivados de membrana

plasmática). Se replican por división celular y se pueden regenerar tras su pérdida. Origen
eucariota. Elevado contenido de catalasa y otras enzimas metabólicas. Funciones de
biosíntesis de glicerolípidos: fosfolípidos presentes en el corazón y en la vaina de mielina
(plasmalógenos) y síntesis de ácidos biliares a partir de colesterol (hígado). Defecto en
peroxisomas: síndrome Zellweger.

Cloroplastos: obtención de energía metabólica (ATP).

Conversión fotosintética de CO2 en carbohidratos: síntesis de
aa, AG y componentes lipídicos de sus propias membranas.
Reducción de nitrito (NO2-) a amoniaco (NH3-). Incorporación
de nitrógeno a compuestos orgánicos. Se replica por división.
Más grandes y complejos que las mitocondrias (envuelta,
tilacoides apilados en grana y estroma). Propio ADN circular
grande y complejo (ARNt y ARNr, proteínas). Código genético universal.

Citoesqueleto: red dinámica de filamentos de proteína que se extiende por el citoplasma.

Armazón estructural (forma y organización interna), movimiento celular y transporte.
Filamentos de actina, microtúbulos (tubulina) y filamentos intermedios (queratina) unidos a
la membrana plasmática por proteínas accesorias.

Filamentos de actina:
9
  Actina globular G (proteína mayoritaria), filamentos delgados y flexibles (7mm-mm),
actina filamentosa F=microfilamentos; forman haces o redes (gel semisólido).
 Ensamblaje y desensamblaje, uniones cruzados y asociados con otras estructuras
celulares -proteínas auxiliares de unión a la actina (formina, complejo Arp2/3).
 Polaridad diferenciada.
o Extremo positivo: afín con el ATP, lado por el que crece, protuberante. Con el
tiempo el ATP se hidroliza y se debe cambiar saliendo por el extremo
negativo.
o Extremo negativo: afín con el ADP, lado por el que decrece, puntiagudo.
 Ensamblaje: nucleación (3 monómeros)- adición reversible por los extremos (+
rápido que -) con consumo de ATP (aunque no necesario). Intercambio dinámico de
ADP por ATP de nuevo y proteínas de unión.

 Acciones contráctiles:

INTERACCIONES ENTRE ACTINA-MIOSINA: proteína que convierte energía química (ATP) en

energía mecánica (fuerza y movimiento), actividad motora.

 Células musculares: la miosina II se mueve a lo largo del filamento de actina en

dirección al extremo protuberante. Se da en el sarcómero (unidad estructural de los
músculos). La contracción del músculo esquelético es disparada por impulsos
nerviosos que estimulan la liberación de calcio desde el retículo sarcoplasmático.

 Células no musculares: división celular y transporte intracelular de vesículas y

orgánulos. No hay una organización en sarcómeros. Fibras de estrés (contracto entre

10
 sustrato-célula y célula-célula), cinturones de adhesión (forma capas de células
epiteliales durante el desarrollo embrionario) y citocinesis (anillo contráctil formado
tras la mitosis).

Microtúbulos:

 Varillas rígidas y huecas (25nm de diámetro) con gran dinamismo.

 Intervienen en la forma celular, movimiento, transporte intracelular y separación de
cromosomas.
 Proteína globular tubulina (formada por dos dímeros de polipéptidos α -tubulina y β -
tubulina) y tubulina en centrosoma (ensamblaje).
 Polimerización: 13 protofilamentos lineales ensamblados paralelamente alrededor
de un núcleo hueco cabeza-cola (polarización +/-).
o Extremo positivo: GTP
o Extremo negativo: GDP, aunque suele estar anclado a los centrosomas y se
realizarán ambos por el positivo.
 Hidrólisis de GTP de β -tubulina en el extremo positivo (en microtúbulos estabilizados
por el extremo negativo); inestabilidad dinámica (rescate-catástrofe) = rápida
remodelación dentro de las células-ç.
 El crecimiento o acortamiento del extremo positivo está regulado por proteínas
asociadas a microtúbulos (MAP):

TRANSPORTE DE MERCANCÍAS Y ORGANIZACIÓN INTRACELULAR:

 Movimiento a lo largo del microtúbulo. En general: dineínas hacia el extremo

negativo y quinesinas hacia el extremo positivo.
 Transporte selectivo de macromoléculas, vesículas de membrana y orgánulos

11
CILIOS Y FLAGELOS:

 Proyecciones de la membrana plasmática presente en casi todas las células animales.

Diferentes a procariotas.
 Cilios: movimiento y/o detección de señales extracelulares. Primarios y móviles.
 Flagelos: móviles, más largos y laten en un patrón de longitud de onda. Protozoos y
espermatozoides.

MITOSIS:

 Los microtúbulos de las células interfásicas se disgregan y las subunidades libres de

tubulina se reensamblan; huso mitótico.
 Reorganización dirigida por el centrosoma (duplicación).
 Microtúbulos cinetocóricos, microtúbulos interpolares y microtúbulos astrales.

Filamentos intermedios:

 Diámetro intermedio (10-12nm) entre los filamentos de actina y los micrótubulos.

No están directamente implicados en movimientos celulares.
 Proporcionan fuerza mecánica a tejidos celulares y un medio para procesos
celulares.
 No están presentes en levaduras, plantas y algunos insectos.

12
  Distintas proteínas que se expresan en distintos tipos de células (>70 proteínas
diferentes).
 Ensamblaje: eje central α -hélice; funciones específicas: dominios variables de cabeza
y cola.

TEMA 1.2: RELACIÓN ENTRE LAS CÉLULAS Y SU ENTORNO. SEÑALIZACIÓN.

RECEPTORES
Interacciones célula-matriz extracelular. Glucoproteínas:

 Colágeno: glucoproteínas fibrosas. Muy resistentes a la tensión. Se produce en

células epiteliales y fibroblastos. 15 tipos; distribución específica.
 Proteoglicano: molécula proteica unida a CAG (glicosaminoglucano) con cargas
negativas (condroitín sulfato, queratán sulfato, ácido hialurónico, etc.)
 Fibronectina: importante en actividades dinámicas de desarrollo embrionario.
 Laminina: estructural, regulación de crecimiento y diferenciación de la célula.

Interacciones célula-metriz extracelular. Integrinas:

13
  Mediados por receptores superficiales: integrinas.
 Las integrinas son una familia de proteínas transmembrana (>24) se unen a
secuencias cortas de aa de la MEC.
 Unión simultánea al citoesqueleto: adhesiones focales y hemidesmosomas.

Interacciones célula-célula: interacciones célula-célula transitorias (sistema inmune) o

estables (láminas de las células epiteliales).

 Uniones adhesivas: selectividad; proteínas de adhesión celular (dependiente de

cationes).
 Uniones estrechas: previenen paso libre de moléculas y separan dominios apical-
basolateral.
 Uniones tipo gap: conexiones entre citoplasmas de células adyacentes (tejido).
 Plasmodesmas: adhesión entre células vegetales (paredes celulares). Lámina media.

Uniones adhesivas:

14
  Moléculas de adhesión celular (transmembrana): selectinas, integrinas, superfamilia
de inmunoglobulinas (Ig) y cadherinas. Requieren cationes divalentes (Ca+2, Mg+2 o
Mn+2).
 Selectinas: interacciones transitorias con leucocitos (L-selectina), células endoteliales
(E-selectina) y plaquetas (P-selectina).
 Cadherinas (N y P, interacción con otras células): uniones adherentes y desmosomas.

Uniones estrechas:

 Red de hebras proteicas transmembranosas alrededor de la célula.

 Sellos efectivos del espacio extracelular, pero proporcionan poca fuerza adhesiva-
complejo de unión (uniones adherentes y desmosomas).

Las uniones estrechas son filamentos

anastomados de complejos
multiproteicos. (A) Estrecha relación
entre la organización del complejo de
unión y la red terminal en el intestino
delgado. (B) Red de uniones estrechas
entre las células absorbentes del
intestino delgado de un Xenopus
laevis, estadio 57. (C) Dibujo lineal del
complejo de unión apical de una célula epitelial intestinal.

Uniones tipo gap:

15
  Uniones intercelulares comunicantes entre citoplasmas adyacentes.
 Canales para el transporte de iones y moléculas pequeñas (1.000 daltons).
 Acoplan actividades metabólicas y respuestas eléctricas (p.ej. miocardio).
 6 proteínas transmembrana (conexina) se ensamblan en un cilindro con un poro
acuoso (conexón).

Plasmodesmas:

 La lámina media (rica en pectina) de la pared vegetal actúa como pegamento.

 Las conexiones citoplasmáticas permiten la comunicación entre células adyacentes.
 Canal abierto entre citosoles de células vecinas, con extensión de retículo
endoplasmático.
 Formación por separación incompleto de células hijas y/o nueva formación.
 Estructuras dinámicas con respuesta a estímulos externos.

Señalización celular. Receptores: las moléculas de señalización intracelular son los ligandos,
que ejercen sus efectos mediante la interacción con receptores celulares específicos que
activan un efector que es el que lleva a cabo el cambio de la célula. Estos receptores pueden
ser canales iónicos, acoplados a proteínas G o acoplados a enzimas (A).

16
  Moléculas de señalización grandes e hidrofílicas: interacción con los receptores de la
superficie celular.
 Moléculas de señalización pequeñas e hidrófobas: difunde fácilmente e interactúan
con los receptores situados en el interior de la célula (B).

Estos complejos ligando-receptor se unen a regiones reguladoras del ADN y promueven la

transcripción de nuevos productos génicos que alteran el comportamiento celular. Las
moléculas de señalización son versátiles e inducen respuestas diferenciales.

Los receptores principales son:

 Receptores acoplados a la proteína G.

 Receptores para citocinas.
 Receptor de tirosincinasa.
 Receptores TGFB.
 Receptores Hedgehog.
 Receptores Wnt.
 Receptores Notch.

Las proteínas receptoras muestran especificidad de unión del ligando y de efector. Las
moléculas de señalización son versátiles e inducen respuestas diferenciales.

En la glándula salival (A), la acetilcolina activa

un subtipo de receptor muscarínico, dando
lugar a la secreción.
En el músculo cardíaco (B), la activación
por la acetilcolina del mismo subtipo de
receptor muscarínico tiene un efecto biológico
diferente, que disminuye el ritmo y la fuerza de

17
contracción. En el músculo esquelético (C), la acetilcolina
activa un subtipo de receptor diferente, el receptor nicotínico, lo que provoca la
despolarización de la célula muscular y la contracción.

Las moléculas de señalización en los animales operan en diversas distancias:

 Corta distantica:
o Paracrina (A)
o Autocrina (B)
o Yuxtacrina (C)
 Larga distancia:
o Endocrina (D)
o Sinapsis (E)

18
Tipos de señalización célula-célula: interacción directa o a través de moléculas secretadas
(endocrina, paracrina, autocrina).

Señalización endocrina: las moléculas

señalizadoras (hormonas) son secretadas
por células endocrinas especializadas y se
transportan a través de la circulación,
actuando sobre células diana localizadas en
lugares alejados del organismo. Un ejemplo
clásico lo proporciona la hormona
esteroidea estrógeno, que es producida por
el ovario y estimula el desarrollo y mantenimiento del sistema reproductor femenino y de
los caracteres sexuales secundarios. En los animales se producen más de 50 hormonas
distintas por las glándulas endocrinas, entre las que se incluyen la pituitaria, tiroides,
paratiroides, páncreas, glándulas suprarrenales y gónadas.

A diferencia de las hormonas, algunas moléculas señalizadoras actúan localmente,

afectando al comportamiento de las células próximas.

Señalización autocrina: algunas células responden frente a señales que producen ellas
mismas. Un ejemplo importante es la respuesta de las células del sistema inmune de los
vertebrados frente a antígenos extraños. Algunos tipos de linfocitos T responden a la
estimulación antigénica sintetizando un factor de crecimiento que induce su propia
proliferación, lo que supone, por tanto, el aumento del número de linfocitos T con
capacidad de respuesta y la amplificación de la respuesta inmune. También merece la pena
destacar que una señalización autocrina anormal suele contribuir al crecimiento
incontrolado de las células cancerosas. En este caso, la célula cancerosa produce un factor

19
de crecimiento frente al que es
susceptible, induciendo
continuamente su proliferación
incontrolada.

Señalización paracrina: una

molécula liberada por una célula
actúa sobre las células dianas
vecinas. Un ejemplo lo proporciona la acción de los neurotransmisores que transportan la
señal entre células nerviosas en la sinapsis.

HISTAMINA: los mastocitos y los eosinófilos de la sangre

contienen un gran número de gránulos secretores llenos
de histamina. En el caso de una reacción alérgica, la
unión del alérgeno a un anticuerpo IgE inmovilizado en el
mastocito desencadena la liberación de gránulos que
contiene histamina.
La histamina liberada se une a los receptores H1
endoteliales y del músculo liso para inducir la
vasodilatación. Si las concentraciones son lo
suficientemente altas, la histamina actúa sobre los
receptores H4 de los eosinófilos para exacerbar la reacción liberando más histamina.

ÓXIDO NÍTRICO: es una molécula señalizadora

paracrina fundamental en los sistemas nervioso,
inmune y circulatorio. El NO es capaz de difundir
directamente a través de la membrana plasmática de
sus células diana. El NO altera la actividad de la enzima
diana intracelular guanilil ciclasa, estimulando la
síntesis del GMP cíclico dentro de la célula. Un ejemplo
es la señalización de la dilatación de los vasos
sanguíneos. El primer paso en este proceso es la liberación de neurotransmisores, como la
acelticolamina, desde los terminales de las células nerviosas a la pared de los vasos
sanguíneos.

Estos neurotransmisores actúan sobre las células endoteliales

estimulando la síntesis de NO. El NO difunde hasta las células vecinas
del músculo liso donde activa la guanilil ciclasa, resultando en la síntesis
de GMP cíclico, que induce la relajación de las células musculares y
dilatación de los vasos sanguíneos.

20
La arginina es un sustrato de la sintasa de óxido nítrico, que libera NO como uno de los
productos de oxidación de la arginina. Dilatación de vasos sanguíneos mediada por NO
unido a guanililciclasa: acción de nitroglicerina (dolor angina de pecho). Concentración más
elevada de sintasa en células nerviosas del cerebro y nervios raquídeos.

NEUTROTRANSMISORES: llevan las señales entre las neuronas

o desde las neuronas a algún otro tipo de célula diana. Son un
grupo diverso de moléculas pequeñas, hidrofílicas que incluye
a la acetilcolina, glicina, glutamato, dopamina, epinefrina
(adrenalina), norepinefrina, serotonina, histamina, y ácido j-
aminobutírico. La señal de liberación de los
neurotransmisores es la llegada de un potencial de acción al
terminal de la neurona. Los neurotransmisores luego
difunden a través del espacio sináptico para actuar en una célula diana. Debido a que son
hidrofílicos, no son capaces de atravesar la membrana plasmática de las células diana. Por
ello, y a diferencia del NO, el mecanismo de actuación de los neurotransmisores es
mediante la unión a receptores celulares de superficie.

Muchos receptores de neurotransmisores son canales

iónicos regulados por ligando. El neurotransmisor que
se une a estos receptores induce un cambio
conformacional tal que se abre el canal iónico, lo que
permite una variación del flujo de iones en la célula
diana. Otros receptores de neurotransmisores están
acoplados a proteínas G. En el caso de los receptores
de neurotransmisores, las proteínas G asociadas actúan regulando los canales iónicos.

Los neurotransmisores se liberan en la hendidura sináptica e interactúan con receptores

acoplados a proteínas G o con receptores de canales iónicos en la célula postsináptica. Sólo
se generará un potencial de acción en la célula postsináptica si los neuropéptidos producen
una despolarización suficiente.

Señalización proteínas G y AMP cíclico: la familia más numerosa de receptores de la

superficie celular transmite las señales al interior de la célula a través de proteínas que unen
nucleótidos de guanina, denominadas proteínas G. Entre los receptores asociados a
proteínas G identificados se incluyen los receptores para muchas hormonas y
neurotransmisores. Además, la familia de los receptores asociados a proteínas G incluye un
gran número de receptores responsables de las funciones de olfato, vista y gusto.

21
Los receptores asociados a proteínas G son un grupo de proteínas
relacionadas estructural y funcionalmente, caracterizadas por tener siete
hélices α transmembrana. La unión del ligando al dominio extracelular de
estos receptores induce un cambio conformacional que permite al
dominio citosólico del receptor activar a una proteína G unida a la cara
interna de la membrana plasmática. La proteína G activada se disocia del
receptor y transmite la señal a una diana intracelular, que puede ser una
enzima o un canal iónico.

El descubrimiento de las proteínas G se

produjo a partir del estudio de hormonas que
regulan la síntesis del AMP cíclico en las
células diana. El AMPc es un segundo
mensajero importante que actúa como
mediador de la respuesta celular a diversas
hormonas. El GTP es necesario para la
estimulación hormonal de la adenilato ciclasa.
Esto condujo al descubrimiento de que una
proteína que une nucleótidos de guanina era un intermediario de la activación de la
adenilato ciclasa. Se ha encontrado un vasto conjunto de proteínas G que actúan a modo de
interruptores fisiológicos, regulando la actividad de diversas dianas intracelulares en
respuesta a señales extracelulares.

Las proteínas G están constituidas por tres subunidades, designadas α , β y γ .

Frecuentemente se les denomina proteínas G heterotriméricas para distinguirlas de otras
proteínas que unen nucleótidos de guanina. El genoma humano codifica 21 subunidades α ,
6 subunidades β y 12 subunidades γ diferentes. Las subunidades α y βγ de otras proteínas G
actúan, sin embargo, inhibiendo a la adenilato ciclasa o regulando la actividad de otras
enzimas diana. Además, tanto la subunidad α como las βγ de algunas proteínas G regulan
directamente canales iónicos.

22
Proteínas G que reciben señales de receptores superficiales y las transmiten al interior
interaccionando con nucleótidos de Guanina. Transmisión a una diana intracelular: enzima o
canal iónico, después de que el receptor sufra cambio conformacional. Transmiten señales
relacionadas con hormonas, neurotransmisores, estímulos sensoriales (funciones de olfato,
gusto, vista). Proteínas G tienen 3 subunidades: α (21 subunidades), β (6) y γ (12);
heterotriméricas.

AMP cíclico: es el segundo mensajero en la señalización hormonal. El AMPc se forma a

partir de ATP por la acción de la adenilato ciclasa y se degrada a AMP por la AMPc
fosfodiesterasa.

La mayor parte de los efectos del AMPc en las células animales están mediados por la acción
de la proteína quinasa dependiente de AMPc. La proteína quinasa A es un tetrámero
consistentes en dos subunidades regulatorias y dos catalíticas. El AMPc se une a las
subunidades reguladoras, lo que lleva a su disociación de las subunidades catalíticas. Las
subunidades catalíticas libres se vuelven entonces activas enzimáticamente y adquieren
capacidad para fosforilar residuos de serina en sus proteínas objeto.

En la regulación de la descomposición del glicógeno por la epinefrina, la diana principal de la

proteína quinasa A es otra proteína quinasa, la fosforilasa quinasa, que es fosforilada y
activada por la proteína quinasa A. La fosforilasa quinasa fosforila y activa la glicógeno
fosforilasa, que cataliza la descomposición de glicógeno en glucosa-1-fosfato.

Descubrimiento en 1958 por Sustherland-Epinefrina en células musculares. Segundo

mensajero citoplasmático en la señalización hormonal. Activa varias vías celulares. La mayor
parte de los efectos está mediada por proteína quinasa (PK) dependiente del AMPc. La
fosforilación de proteínas diana se revierte por las proteínas fosfatasas, regulando la

23
respuesta a la estimulación celular. Otros segundos mensajeros: GMPc, DAG, IP3, calcio y
fosfoinosítidos.

Tirosina-quinasa: los receptores tirosina quinasa incluyen los receptores de mayor parte de
los factores de crecimiento polipeptídicos, con lo que establecen claramente la fosforilación
de tirosinas como un mecanismo clave de señalización en la respuesta de las células a la
estimulación el factor de crecimiento.

La unión del ligando al dominio extracelular de estos receptores activa el dominio quinasa
citosólico, dando lugar a la fosforilación del propio receptor y de las proteínas diana
intracelulares, que propagan la señal iniciada por la unión del factor de crecimiento.

El primer paso del proceso de señalización en la mayoría de los receptores tirosina quinasas
es la dimerización del receptor inducida por ligando. Algunos factores de crecimiento son
dímeros constituidos por dos cadenas polipeptídicas idénticas; estos factores de crecimiento
inducen la polimerización a través de la unión simultánea a dos moléculas diferentes de
receptor. Otros factores de crecimiento son monómeros, pero desencadenan la
dimerización de receptores como resultado de la inducción de cambios conformacionales
que facilitan las interacciones proteína-proteína entre los polipéptidos de los receptores.

La dimerización inducida por ligando conduce a la autofosforilación del receptor ya que las
cadenas polipeptídicas del dímero se fosforilan la una a la otra de manera cruzada. La
autofosforilación desempeña dos papeles fundamentales en la señalización a través de
estos receptores. En primer lugar, la fosforilación de los residuos de tirosina del dominio
catalítico es un mecanismo de regulación ya que incrementa la actividad proteína quinasa
del receptor. En segundo lugar, la fosforilación de los residuos de tirosina que no
pertenecen al dominio catalítico supone la generación de sitios de unión específicos para
otras proteínas, a través de las que se transmitirá la señal al interior celular desde los
receptores activados.

 Receptores acoplados a enzima intracelulares. Fosforilan proteínas sustrato en los

residuos tirosina (C-terminal). Predominante en la señalización por factores de
crecimiento.

24
  Control de crecimiento y diferenciación de las células animales –desarrollo de
nuevos fármacos.
 La unión del ligando produce la dimerización del receptor y autofosforilación.
 La fosforilación del receptor crea sitios de unión para las moléculas de señalización
posteriores.

Vías de las quinasas MAP: la vía de las

quinasas MAP se refiere a una cascada
de proteína quinasas que está
altamente conservada en la evolución y
desempeña un papel central en la
transducción de señales en todas las
células eucariotas, desde las levaduras
hasta el ser humano. Los elementos
centrales de esta vía son una familia de proteína-serina/treonina quinasas denominadas
quinasas MAP que se activan en respuesta a diversos factores de crecimiento y a otras
moléculas señal. En las levaduras, las vías de las quinasas MAP controlan diversas respuestas
celulares, entre las que se incluyen el apareamiento, la forma celular y la esporulación. En
los eucariotas superiores las quinasas MAP son reguladores ubicuos del crecimiento y de la
diferenciación celular.

Las quinasas MAP que se caracterizan

inicialmente en células de mamíferos pertenecen
a la familia ERK. La principal función de la
señalización ERK en las células de mamíferos se
descubrió en estudios de las proteínas Ras. La
importancia de las Ras en la señalización intracelular quedó demostrada después por
experimentos que mostraban que la microinyección de proteína Ras activa induce
directamente la proliferación de células de mamíferos normales. Por el contrario, la
interferencia con la función Ras negativo dominante bloquea la proliferación celular
inducida por factores de crecimiento.

 El paso inicial en la señalización de las quinasas MAP desde los receptores de

factores de crecimiento es la activación de la proteína de unión a GTP, Ras.
 Las células eucariotas tienen múltiples vías de quinasas MAP que responden a
diferentes estímulos.
 Ras -proteína interruptore de GTPasa: alternancia estado activo (GTP unido) e
inactivo (GDP).

25
  Ras no está ligada directamente a los receptores de la superficie celular. Activa
cascada PK.
 Después de translocarse al interior del núcleo, MAP quinasa puede fosforilar muchas
proteínas diferentes incluyendo factores de transcripción para expresión de
proteínas en ciclo celular y específicas en diferenciación (genes de respuesta
temprana).

Tirosina-quinasas no receptoras: muchos receptores actúan estimulando a proteína-tirosina

quinasas a las que no están unidas covalentemente. Estos no receptores tirosina quinasas
incluyen miembros de receptores (denominados superfamilia de receptores de citoquinas)
que comprenden los receptores para la mayor parte de las citoquinas y a los receptores de
algunas hormonas polipeptídicas. Están constituidos por un domino N-terminal,
extracelular, de unión a ligando, una única hélice α-transmembrana, y un dominio C-
terminal citosólico. Sin embargo, el dominio citosólico de los receptores de citoquinas
carece de actividad catalítica conocida. En vez de esto, los receptores de citoquinas actúan
en asociación con proteína-tirosina quinasas no receptoras, las cuales son activadas por la
unión del ligando al receptor.

Se piensa que el primer paso de la señalización a partir del receptor de citoquinas es la

dimerización del receptor inducida por ligando y la fosforilación cruzada de las tirosina
quinasas no receptoras asociadas. Estas quinasas activadas fosforilarán al receptor, lo que
proporcionará sitios de unión de fosfotirosina para las moléculas señal intracelulares que
tengan dominios SH2.

Las quinasas asociadas con receptores de citoquina pertenecen a la familia de las quinasas
de Janus (o JAK), que constan de cuatro no receptores de proteína-tirosina quinasas
relacionadas. Las dianas principales de las quinasas JAK son las proteínas STAT, que se
identificaron originalmente en estudios de señalización de receptores de citoquinas. Las
proteínas STAT forman una familia de siete factores de transcripción que contienen
dominios SH2. Permanecen inactivas en células no estimuladas, donde se localizan en el
citoplasma. La estimulación de receptores de citoquina lleva al reclutamiento de proteínas

26
STAT. Después de su asociación con receptores activados, las proteínas STAT son
fosforiladas por quinasas de la familia JAK. La fosforilación de las tirosinas promueve la
dimerización de proteínas STAT, que a continuación se translocan al núcleo, donde
estimulan la transcripción de sus genes diana. Los factores de transcripción STAT actúan, así
como enlaces directos entre las citoquinas y los receptores de los factores de crecimiento en
la superficie celular y en la regulación de la expresión génica en el núcleo.

Las tirosina quinasas no receptoras adicionales pertenecen a la familia Src. Los miembros de
la familia Src juegan papeles clave en la señalización desencadenada de receptores de
citoquinas, proteína-tirosina quinasas receptores, desde los receptores de antígeno en los
linfocitos B y T, y receptores que intervienen en las interacciones entre células y entre célula
y matriz.

 Se asocian con dominios citosólicos de receptores que carecen de actividad

enzimática intrínseca.
 Las quinasas JAK activan directamente los factores de transcripción STAT.
 Los miembros de la familia Src se asocian con receptores de citoquinas, receptores
de factores de crecimiento e integrinas.

Vías de PI 3-quinasa/Akt y mTOR: se basa en el empleo de un segundo mensajero obtenido

del fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2). El PIP2 es un componente de la membrana
plasmática, situado en la cara interna de la bicapa de fosfolípidos. Puede fosforita ese en la
posición 3 de inositol por la acción de la enzima fosfatidilinositido (PI) 3-quinasa.

La fosforilación de PIP2 produce el segundo mensajero fosfatidilinositol 3,4,5-trifosfato

(PIP3) que es fundamental para la señalización de la proliferación y la supervivencia de las
células. Una diana clave del PIP3 es una serina/treonina quinasa denominada Akt. El PIP3 se
une a un dominio de Akt conocido como dominio de homología de pleckstrina (PH). Esta
interacción recluta Akt en la cara interna de la membrana plasmática, donde es fosforilada y
activada por otra proteína quinasa (llamada PDK1 y mTRC2) que contiene también un
dominio PH y se une a PIP3. La formación de PIP3 produce así la asociación de Akt y PDK1
con la membrana plasmática, lo que lleva a la fosforilación y activación de Akt.

Una vez activada, la Akt fosforila diversas proteínas diana, entre ellas proteínas que son
reguladoras directas de la supervivencia celular, factores de
transcripción y otras proteínas quinasas.

 La PI-3 quinasa fosforila PIP2 para producir un segundo

mensajero PIP3, que lleva a la activación de Akt.

27
  La Akt fosforila proteínas que regulan la proliferación y supervivencia de las células.
 mTOR regula la síntesis de proteína y la autofagia en respuesta a la señalización de
Akt y la disponibilidad de energía y aminoácidos.

Dinámica y redes de señalización:

 Los bucles de retroalimentación regulan la duración y magnitud de las vías de

señalización, que pueden afectar la respuesta celular.
 Las actividades de las vías de señalización individuales se coordinan mediante
relaciones cruzadas.

TEMA 2: MICROSCOPÍA Y TÉCNICAS BÁSICAS DE LABORATORIO

Células como modelos experimentales:

 E.coli: procariota (bacteria) modelo para el estudio de biología molecular replicación

ADN, código genético, expresión génica, síntesis de proteínas. Simplicidad génica y
nutricional y facilidad de propagación (se reproduce cada 20 minutos).
 Saccharomyces cerevisae: eucariota (levadura unicelular) simple como modelo de
organización, estructura y regulación celular. Su división es cada 24 horas.
 Caenorhabditis elegans: organismo multicelular (nematodo) con genoma más simple
de los animales. Estudios de desarrollo y diferenciación animal.
 Drosophila melanogaster: (mosca de la fruta) tiene un corto ciclo de reproducción (2
semanas). Modelo de biología de desarrollo y genética en organismos multicelulares
complejos.

28
 Arabidopsis thaliana: pequeña planta con flor; estudio de desarrollo y biología
molecular vegetal. Cultivo sencillo en el laboratorio y técnicas concretas para
manipulación genética.
 Pez cebra: estudio de desarrollo de vertebrados. Fácil mantenimiento y rápida
reproducción (3-4 meses). Embriones transparentes que se desarrollan fuera de la
madre.
 Ratón: reciente finalización de la secuenciación del genoma; mamífero más
manejable para los análisis genéticos. Defectos en mutaciones similares a humanos.

Cultivo de células en el laboratorio:

se produce el crecimiento y
manipulación bajo condiciones de
laboratorio controladas fuera de
organismos intactos. Se utilizan
células madre embrionarias. Existen
cultivo primario, secundario, líneas
celulares inmortales. Los virus son
modelos simples para el estudio
celular.

Microscopía:

29
Conceptos previos: las lentes son objetos translúcidos une
refractan (doblan) la luz y pueden aumentar el tamaño de
un objeto creando una imagen virtual. Las lentes del ojo
actúan como lentes convexas.

Nuestros ojos reciben y procesan

la luz (imagen) reflejada desde los objetos. El aumento total se
calcula teniendo en cuenta el aumento de cada lente.

Microscopía óptica: en microscopía, colocamos el objeto entre la

fuente de la luz y nuestros ojos y observamos la luz transmitida a
través del objeto. La resolución es de 0.2 μm, capacidad de un microscopio para distinguir
objetos separados por pequeñas distancias.

Las partes del microscopio son las lentes oculares, cabezal, brazo, macrométrico,
micrométrico, foco de luz, condensador, platina, objetivos, revólver y objetivo de inmersión
(aceite). Los objetivos son de aumento, factor de corrección, distancia focal y abertura
numérica.

Microscopio de campo claro brillante/luminoso o campo oscuro: la luz pasa a través de las
células (vivas y teñidas). Se distinguen las distintas partes dependiendo del contraste tras la
absorción de luz por componentes celulares (incremento por tinción). En la mayoría de los
casos requiere un tratamiento previo (fijadores: alcohol, ácido acético, formaldehido)
irreversible.

Se deben usar colorantes que absorban solo ciertas longitudes de onda. Las longitudes de
onda que no se absorben se transmiten al ojo y, como resultado, el objeto teñido aparece
de un color, indicando su localización. Los objetos que absorben la luz pueden verse
(cloroplastos).

Microscopio de contraste de fases y microscopio de contraste por inferencia diferencial:

con sistemas ópticos que convierten las variaciones de densidad/grosor (índice de
refracción) en diferencias de contraste/intensidad (brillo/oscuridad). Componentes
intracelulares de células vivas en lámina delgada.

30
Microscopía fluorescente: los fluorocromos son moléculas que absorben la radiación UV y
liberan parte de la energía en forma de longitud de onda más larga (luz visible), provocando
destellos contra un fondo oscuro.

Se pueden usar para comprobar la difusión y movimiento a través de membranas celulares,

sondas para determinar la cantidad de soluto/ion, estudios de hibridación AND-ARN, unión
a proteínas e inmunoglobulinas, etc. Usan filtros para captar la luz emitida. Tiene
especificidad, elevado contraste y versatilidad.

 Especificidad: se pueden añadir fluoróforos a estructuras subcelulares específicas.

 Elevado contraste: solo obtienen imagen de la estructura que une los fluorocromos
(usando filtros específicos).
 Versatilidad: células vivas o muertas de animales, vegetales, procariotas y
combinaciones.

Microscopía confocal: reduce el problema de los objetos que están en un mismo plano se
ven borrosos en la imagen enfocada. La abertura puntiforme y el plano iluminado son
confocales. Los rayos de luz (con enfoque fino) emitidos por el plano delgado iluminado de
la muestra pueden pasar por la apertura mientras que el paso de cualquier otro rayo de luz

31
que pudiera emanar de un plano superior o inferior al plano determinado se impide para
que no participe en la formación de la imagen. Los puntos fuera del foco del espécimen se
tornan invisibles.

Microscopía de fluorescencia
confocal de barrido láser. (A)
Diseño óptico de un microscopio
confocal de barrido láser. La
fluorescencia (verde) emitida, en
el camino de vuelta, debe pasar a
través de un agujero de alfiler
que es confocal con el plano
focal de la muestra. El orifico
confocal excluye la luz de los
planos focales desenfocados de
la muestra. Las señales de fluorescencia del tubo fotomultiplicador se envían a un
ordenador que reconstruye la imagen confocal. (B) Una imagen de tubulina fluorescente en
un huevo de erizo de mar fecundado, vista con microscopía de fluorescencia convencional.
(C) El mismo huevo fecundado visto por microscopía confocal en un plano focal que pasa
por el ecuador del huevo. Se ve claramente el aparato del huso mitótico mientras el huevo
se divide en dos células hijas.

Microscopía electrónica:

 Microscopio electrónico de barrido (SEM; los electrones rebotan en la superficie de

la muestra) y de transmisión (TEM; la imagen se crea por transmisión de electrones a
través de la muestra).
 Las muestras se procesan (se fijan, impregnan y cortan) y se cubren con metales, en
la mayoría de los casos, para conseguir un mayor contraste.

32
Microscopía fuerza atómica: instrumento mecano-óptico capaz de detectar fuerzas del
orden de los nanonewtons. Al rastrear una muestra, es capaz de registrar continuamente su
topografía mediante una sonda o punta afilada de forma piramidal o cónica.

Se utiliza ampliamente para la obtención de imágenes superficiales de alta resolución; así

como para obtener información de las propiedades mecánicas de un material.

Contaje de células:

Hemocitómero o cámara de Neubauer:

Otros contadores de células (automáticos):

33
  Imagen directa.
 Resistencia eléctrica (Electrical Sensing Zone (ESZ) method).
 Citometría de flujo: recuento y clasificación de células según sus características
morfológicas (biomarcadores).

Identificación de tipos celulares:

Citometría de flujo: permite recuento y clasificación de células según sus características

morfológicas (biomarcadores).

 Fluorescence activated cell sorting (FACS): separación de una población de células

vivas en subpoblaciones en base a un marcaje fluorescente.

Centrifugación diferencial: muy útil para aislar orgánulos subcelulares y estudiar sus
componentes. Se basa en la diferencia de densidad respecto al medio en el que se
encuentran suspendidos (sedimentación).

Homogeneización en medio isotónico (suele contener

sacarosa) y centrifugación secuencial del
homogeneizado aumentando la fuerza centrífuga y el
tiempo en cada ciclo. Una vez retirados los
ribosomas, el sobrenadante contiene la fase soluble
de la célula. Partículas demasiado pequeñas para
retirarse por sedimentación. Purificación adicional
por gradiente de densidad. Mantenimiento de
viabilidad y funcionalidad.

Aislamiento, purificación y fraccionamiento de

proteínas:

Cromatografía: fraccionamiento de mezcla

de componentes disueltos a su paso a
través de una matriz porosa. La

34
cromatografía líquida tiene fase móvil o fase inmóvil. Cuanto mayor sea la afinidad de una
proteína por el material de la matriz, su paso por la columna más lento. El solvente es
recogido en fracciones en tubos diferentes y analizado.

Electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato de sodio (SDS-PAGE): depende de

la capacidad de las moléculas cargadas para migrar en un campo eléctrico. La matriz
gelatinosa (gel) se compone de polímeros de acrilamida entrecruzados (tamiz molecular). La
muestra se prepara en una solución de sacarosa o glicerol para aumentar para la densidad.
Las proteínas cargadas migran al electrodo opuesto a través del gel (sumergido en un
tampón).

Western blotting: tras la

transferencia, la membrana de
nitrocelulosa se incuba con un
anticuerpo (primario) dirigido
contra la proteína de interés.
Antes de esta incubación, la
superficie del papel de
nitrocelulosa se “bloquea” incubándola con una proteína no reactiva, como la caseína, para
evitar la unión inespecífica del anticuerpo 1º a la nitrocelulosa; este bloqueo de la caseína
deja las proteínas de la muestra aún disponibles para la unión del anticuerpo. (3) Después
de lavar el anticuerpo 1º no unido, se añade un anticuerpo 21 ligado a la enzima, que se une
al anticuerpo 1º y (4) puede generar un producto coloreado para la detección.

Electroforesis bidimensional: fraccionamiento de mezclas complejas de proteínas con el uso

de dos propiedades diferentes de las moléculas (punto isoeléctrico y masa molecular). No
permite separar proteínas con masa molecular elevada, muy hidrófobas o poco frecuentes
en la célula.

(1) Las proteínas de la muestra se separan primero por

sus puntos isoeléctrico en un gel de tubo de diámetro
estrecho con un gradiente de pH fijo, mediante una
técnica denominada enfoque isoeléctrico (IEF). Esta es la
separación con la “primera dimensión”. (2) El gel de IEF
se empapa entonces en SDS y se colocar encima de un
gel de poliacrilamida SDS para la separación de
“segunda inmersión” de SDS-PAGE (3), que resuelve las
proteínas en función en función de su tamaño.

35
 TEMA 3: MECANISMOS DE TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANAS
Transporte pasivo a través de membranas celulares:

Difusión simple:

Selectividad de la membrana plasmática: únicamente los gases, las

moléculas hidrofóbicas (ej. hormonas esteroideas) y moléculas
pequeñas polares, pero sin carga (ej. agua, etanol) son capaces de
difundir libremente a través de la membrana plasmática.

¿Qué característica de la molécula determina la velocidad de

transporte por difusión simple?:

 Polaridad de sustancia: medida mediante el coeficiente de partición, que es la

proporción entre su solubilidad en un solvente no polar, como el octanol o aceite
vegetal, y la solubilidad en agua. Cuanto mayor sea la solubilidad en lípidos, más
rápida será la penetración a través de la membrana.

36
  Tamaño de la sustancia: las moléculas más pequeñas sin carga penetran con gran
rapidez.

Difusión facilitada: hidratos de carbono, aminoácidos, nucleósidos, iones, etc. A favor de

gradiente de concentración y/o electroquímico. Movimiento energéticamente favorable. No
interviene ninguna fuente de energía externa.

El paso de la mayoría de
moléculas está mediado por
proteínas transportadoras
transmembrana que evitan
la interacción de dichas
moléculas con las cadenas
hidrofóbicas de los ácidos
grasos de fosfolípidos.

 Canales proteínicos (iónicos): forman poros abiertos a través de los cuales las
moléculas de tamaño y carga adecuados (ej. Determinados iones) pueden cruzar la
membrana. No siempre permanecen abiertos (señales extracelulares). Están en las
membranas de todas las células, realizan un transporte extremadamente rápido y
son altamente selectivos debido a la estrechez del poro.
 Proteínas transportadoras: unen selectivamente las pequeñas moléculas (ej.
Glucosa) que serán transportadas experimentando un cambio conformacional para
liberar la molécula al otro lado de la membrana.

Proteínas canal: un grupo de proteínas canal son las porinas, que permiten libre tránsito de
iones y moléculas polares pequeñas a través de membranas externas de bacterias,
mitocondrias y cloroplastos.

Las proteínas canal también permiten el paso de moléculas entre células conectadas
(uniones gap). Algunas células animales y vegetales tienen acuaporinas, para el transporte
rápido de agua. Son impermeables a los iones cargados, por lo que no alteran el gradiente
electroquímico de la membrana.

37
Canales iónicos: presentes en las membranas de todas las células. Propiedades de los
canales iónicos:

1) Transporte extremadamente rápido (1000x proteínas transportadoras).

2) Altamente selectivos: estrechez del poro.
3) Apertura transitoria en respuesta en respuesta a estímulos específicos: regulados
por ligando, voltaje, etc.

Especialmente estudiados en células nerviosas y musculares (transmisión señales eléctricas)

por Alan Hodgkin y Andrew Huxley (1952) usando células nerviosas gigantes de calamar.

SELECTIVIDAD IÓNICA DE LOS CANALES IÓNICAS: los canales de Na+ son 10 veces más
permeables al Na+ que al K+. Los canales de K+ son más de 1000 veces más permeables a K+
que al Na+.

38
Potencial de membrana y canales iónicos: sinapsis química. Los neurotransmisores se
liberan en la hendidura sináptica e interactúan con receptores acoplados a proteínas G o
con receptores de canales iónicos en la célula postsináptica. Sólo se generará un potencial
de acción en la célula postsináptica si los neuropéptidos (rojo) producen una despolarización
suficiente.

Transporte activo a través de membranas celulares:

Transporte activo dirigido por la hidrólisis de ATP: transporte en dirección energéticamente

desfavorable, en contra de gradiente de concentración y/o electroquímico. Energía
proporcionada por una reacción acoplada (hidrólisis de ATP).

Bombas iónicas como

ATPasa Na+/K+:
cambios
conformacionales (que
inducen cambios de
afinidad) en la bomba,
dirigidos por el ATP.
Por cada ATP: 3 sitios
de unión al Na+ hacia

39
exterior y 2 sitios de unión al K+ hacia el interior. Consumo de casi el 25% del ATP en células
mamífero; electrogénica. Impulso nervioso, equilibrio osmótico y volumen celular.

La bomba de Ca+2 mantiene bajas concentraciones en el interior celular; señalización

celular (contracción muscular). Las bombas iónicas H+ en bacterias, levaduras, células
vegetales, estómago, lisosomas, endosomas con diferentes funciones.

Los transportadores ABC (ATP-binding cassettes; dominios de unión a ATP muy conservados)
en procariotas (importan nutrientes y exportan compuestos tóxicos) y eucariotas (exportan
compuestos tóxicos).

En células cancerosas, los transportadores MDR son responsables de la resistencia múltiple

a fármacos de la resistencia múltiple a fármacos al expulsar compuestos tóxicos. Regulador
transmembrana de la conductancia de la Fibrosis Quística (CFTR): transporte defectuoso de
Cl-.

40
Transporte activo por gradientes iónicos: transporte de moléculas en contra de gradiente
electroquímico acoplando el transporte de una segunda molécula en dirección
energéticamente favorable (co-transporte).

Transporte activo/pasivo de glucosa por las células epiteliales: el transporte activo dirigido
por el gradiente de Na+ es responsable de la entrada de glucosa desde la luz intestinal. En el
dominio apical, el transportador une y transporta de forma coordinada 1 molécula de
glucosa y 2 iones de Na+ en la célula (simporte). La glucosa de la dieta se absorbe y
concentra dentro de las células epiteliales intestinales.

41
Endocitosis:

Transporte de macromoléculas y partículas grandes: descubierto por Christian de Duve

(1963). El material se rodea por una porción de membrana que se invagina formando una
vesícula con el material ingerido gracias a la remodelación de actina.

 Fagocitosis: las células engullen bacterias, desechos celulares o células intactas. La

unión a receptores de membrana estimula la extensión del seudópodo y formación
de fagosoma. Utilidad: alimentación, defensa y eliminación de células
viejas/dañadas.
 Macropinocitosis: captación de líquidos extracelulares. Formación de lamelipodios.

Endocitosis mediada por clatrina: captación selectiva de macromoléculas específicas y no

específica de líquidos extracelulares. Unión a receptores de la superficie celular inducen la
unión a proteínas citosólicas y a la clatrina. La dinamina hidroliza GTP y conduce a cambio
conformacional que estimula la fisión de la membrana. Vesículas recubiertas de clatrina en

42
el interior celular. Modelo clave. Transporte de colesterol por las LDL (lipoproteína de baja
intensidad).

Transporte a lisosomas y reciclaje de receptores:

Ejemplo práctico. Impulso nervioso y potencial de membrana:

43
Conceptos generales:

El potencial de membrana está presente en todas las células (entre –15mV y –100mV). Para
células no excitables la diferencia de voltaje se denomina potencial de membrana. En

44
células nerviosas o musculares se denomina potencial de reposo. Está sometido a cambios
drásticos.

Potencial de membrana: relación entre concentración iónica y potencial de membrana viene

dada por Ecuación de Nerst:

Existe un potencial de equilibrio para cada ion por separado. El potencial de membrana
viene determinado por el flujo de todos los iones que atraviesan la membrana plasmática.

El potencial de acción se transmite mediante apertura y cierre regulado de los canales de

Na+ y K+ que, junto con las bombas de transporte activo, permiten restaurar el potencial de
membrana en reposo.

En la sinapsis química, la llegada de los potenciales de acción a los botones terminales de las
neuronas estimula la liberación de neurotransmisores como la acetilcolina, GABA, dopamina
que transportan señales entre las células en una sinapsis (paracrina).

Potencial de acción (sinapsis química y eléctrica): canales de Na+ y K+ activadas por voltaje
en membranas de células excitables (neuronas, células musculares y sensoriales).

45
Si el estímulo hace que la membrana se despolarice solo unos cuantos mV (de –70mV a –
60mV) la membrana regresa rápidamente a su potencial de reposo al cesar el estímulo.

Si el estímulo despolariza la membrana más allá del umbral (cerca de los –50mV) el cambio
de voltaje abre los canales de sodio y el sodio entra a favor de gradiente electroquímico. El
potasio se transporta en sentido contrario.

46
Sinapsis química: es importante que el neurotransmisor sólo tenga una vida media corta
después de su liberación. Dicho neurotransmisor desaparece por hidrólisis enzimática y/o
recaptación en terminaciones presinápticas.

47
Potencial de membrana e impulso nervioso: secuencia de fenómenos durante la transmisión
sináptica con acetilcolina. Tras la llegada del impulso nervioso, los canales de calcio
dependientes de voltaje se abren, permiten la entrada de calcio y liberación de acetilcolina,
que se une a receptores postsinápticos. Si la unión del neurotransmisor causa
despolarización, se genera un impulso nervioso (5a); si la unión del neurotransmisor causa
hiperpolarización (5b) la célula postsináptica se inhibe y se dificulta la generación de un
impulso nervioso por otro estímulo excitatorio.

48
49