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UNIVERSIDAD CIENTÍFICA DEL SUR

Carrera/s: Medicina humana

PRACTICA DE LABORATORIO

Curso: Bioquímica

Docente: Manuel Ezequiel Bayona Costa

INFORME N°2

Práctica: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

Integrantes:

Jaque Huayta Eduardo Valery - 100%

Bautista Pacasi Valentina Francesca - 100%

Valverde Aira Vanessa - 100%

Escalante Perez Lucero Tatiana - 100%

Sección: 2AI2

Horario de practica: 8:40 PM - 10:20 PM

LIMA, PERÚ

2024 - II
1. Marco teórico

La concentración sérica de proteínas totales y fraccionadas, nos nombra de manera


implícita acerca de las dietas hiperproteicas y el metabolismo proteico, esto puede llegar a
influir en los niveles de proteínas totales y sus fracciones (como la albúmina y las
globulinas) generando un monitoreo para su posible diagnóstico de enfermedades
desarrollada en el organismo.

Las dietas hiperproteicas pueden aumentar la síntesis y concentración de proteínas en


suero, ya que el exceso de proteínas consumidas puede elevar los niveles de fracciones
proteicas como la albúmina, los cuales juegan un papel clave en el transporte de nutrientes
y en el mantenimiento de la presión oncótica plasmática. Además, permite detectar
enfermedades hepáticas, renales e inflamatorias del sistema inmunológico. (Cordero, M.R;
Montero, U.C; Maurillo, N.).

La albúmina, una proteína esencial que constituye más de la mitad de las proteínas séricas,
desempeña un papel fundamental en el mantenimiento del volumen plasmático y en la
regulación del equilibrio osmótico en el cuerpo. La mediciones de las fracciones específicas
de proteínas como la albúmina y las globulinas, pueden ayudar a proporcionar información
sobre el estado de salud del paciente. Por ejemplo, las disminuciones en los niveles de
albúmina pueden indicar hipoalbuminemia, insuficiencia hepática, mayor permeabilidad de
los capilares o malnutrición. Mientras que los niveles de globulinas permiten tener una mejor
visualización acerca de sus derivados en enfermedades como trastornos inmunológicos o
infecciones. (Aparicio, V.A ; Nebot, E; Heredia, J.M; & Aranda, P.).

2. Objetivos

2.1 Determinar la concentración en suero de las proteínas plasmáticas totales de


albúmina y globulinas.

2.2 Interpretar los resultados obtenidos en la determinación de proteínas, albúminas


y globulinas.
3. Materiales y método

MATERIALES EN LA MESA DE LOS ESTUDIANTES

● 01 gradilla
● 06 tubos de ensayo 13 x 100 mm
● 01 piseta de agua destilada
● 02 pipetas de 5 mL
● 01 propipetas

MATERIALES EN LA MESA CENTRAL DEL PROFESOR

● 01 suero comercial
● Estuche comercial para determinar proteínas totales y albúmina (01 estándar
de
proteínas totales; 01 reactivo BCF; 01 reactivo EDTA/Cu+2)
● Espectrofotómetro
● Baño maría 37°C
● 04 micropipeta 100-1000 µL y/o de 5-50µL
● Puntas descartables para micropipetas
● Cubetas para espectrofotometría
● Vórtex

Determinacion de proteinas plasmaticas total por el Método de Biuret

La determinación de las proteínas totales se realiza utilizando ionescúpricos que en


medio alcalino reacciona con las proteínas formando compuestos de coordinación
de color violeta, cuyo pico de máxima absorción es de 540 nm y su intensidad es
proporcionala la concentración de proteínas.

Determinación de la concentración de albúmina

La albúmina reacciona con el Bromo Cresolftaleína a pH 3.8 formando un


compuesto coloreado que absorbe a 625 nm.
4. Procedimiento experimental

4.1 PROCEDIMIENTO 1

DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS SÉRICAS TOTALES

A un tubo de ensayo denominado “Estándar” le agregamos 1 mL del reactivo (


Biuret) y 0.02 ml del Estándar de proteína, dejamos reposar a temperatura ambiente
por 5 minutos y posteriormente vertemos un poco de la solución a una cubeta y lo
llevamos al espectrofotómetro a 540 nm, a la parte en otro tubo de ensayo
denominado “Muestra” también agregaremos 1mL del reactivo de Biuret con 0.02 ml
de la muestra, que en este caso será suero de un paciente (Valtrol), de igual manera
lo dejamos reposar a temperatura ambiente por 5 minutos y luego depositamos la
muestra en una cubeta y la llevamos al espectrofotómetro a 540 nm, posteriormente
esperamos los resultados que usaremos para determinar las proteínas séricas
totales del paciente.

4.2 PROCEDIMIENTO 2

DETERMINAR LA CONCENTRACIÓN SÉRICA DE ALBÚMINA

En este caso a un tubo de ensayo que llamaremos “Estándar” le agregaremos 1ml


de reactivo de albúmina con 0.01ml del estándar de albúmina, agitamos
y observaremos los cambios, dejamos reposar por 3 minutos y posteriormente lo
vertemos en una cubeta y lo llevamos al espectrofotómetro a 620 nm, esperamos
los resultados; de igual manera en otro tubo de ensayo llamado “Muestra” vertemos
1 ml de albúmina con 0.01ml del suero de un paciente, agitamos el tubo de ensayo y
observaremos los cambios; dejamos reposar la solución por 3 minutos a
temperatura ambiente y posteriormente lo traspasamos a una cubeta y lo llevamos
al espectrofotómetro a 620 nm y esperamos los resultados que serán usados para
calcular la concentración sérica de albúminas en el paciente.
5. Análisis de resultados

5.1. Proteínas plasmáticas

Calculamos la absorbancia de las proteínas plasmáticas con los siguientes datos.


Abs de la muestra: 1089 mg/dL
Abs del estándar: 1,002 mg/dL

(ALB) = 5.6 x 1,089 = 6.0 g/dL

5.2. Albúmina

Calculamos la absorbancia de la albúmina con los siguientes datos.


Abs de la muestra: 1,427 mg/gL
Abs del estándar: 1,092 mg/dL

(ALB) = 1,427/1,092 x 3,1g/dL = 4,05 g/dL

6. Conclusiones

- Se han identificado las técnicas y fórmulas necesarias para determinar las


concentraciones de las proteínas plasmáticas totales, específicamente
albúmina y globulinas, en el suero. Cada tipo de proteína reacciona de
manera diferente, produciendo resultados de absorción de color distintos: las
proteínas generales muestran un color morado, mientras que la albúmina se
presenta con un color verdoso.

- Los resultados se han interpretado considerando la importancia de las


concentraciones estándar para evaluar los niveles de proteínas y albúmina
(ya sean elevados o bajos).

7. Recomendaciones

En estos casos es fundamental obtener una muestra de sangre venosa adecuada;


las muestras deben ser tomadas con diferentes pipetas, ya que se podría
contaminar la muestra con algún reactivo y puede dar un resultado erróneo.
Los resultados de las pruebas de proteínas plasmáticas deben interpretarse en el
contexto del cuadro clínico del paciente y de otros resultados de laboratorio.
8. Bibliografía

1. Aparicio, V.A; Nebot, E.; Heredia, J.M; & Aranda, P. Efectos metabólicos,
renales y óseos de las dietas hiperproteicas. Papel regulador del ejercicio.
Revista andaluza de medicina del deporte [Internet]. 2010 [citado 7 Set
2024];3(4):153-158.
Disponible en:
https://www.elsevier.es/es-revista-revista-andaluza-medicina-del-deporte-284-pdf-X1
888754610876894

2. Martínez Augustin O., Martínez de Victoria E.. Proteínas y péptidos en


nutrición enteral. Nutr. Hosp. [Internet]. 2006 Mayo [citado 2024 Sep 08] ;
21( Suppl 2 ): 01-14.
Disponible en:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212-16112006000500002&l
ng=es.

3. Myron A., Merlini G., Sheldon J., Ichihara K. Indicaciones clínicas para los
ensayos de proteínas plasmáticas: transtiretina (prealbúmina) en inflamación
y desnutrición. Acta bioquímica. clin. Latinoamérica. [Internet]. 2008 Jun
[citado 2024 Sep 08]; 42(2): 279-288.
Disponible en:
https://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0325-29572008000200
014&lng=es.

4. Gazzaneo M, Tineo E, Chapín Y, Vizcaíno R, Gerardino O,, Rodríguez Y.


ALBÚMINA SÉRICA COMO INDICADOR NEGATIVO DE ESTRÉS
METABÓLICO EN PACIENTES PEDIÁTRICOS CON SEPSIS. ESTADO
ANZOÁTEGUI. Archivos Venezolanos de Puericultura y Pediatría [Internet].
2005; 68(1):7-14.
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