Cuaderno de Trabajo MF para Modificar Terminado

Centro de Enseñanza Técnica
Industrial
Plantel. Tonalá
Ma. Dolores Calderón Rodríguez
No. Nomina. 3230
Academia. Fármacos
División. Tecnologías Químicas
Microbiología Farmacéutica
Agosto-2024
pág. 1
Cuaderno de trabajo de
Ma. Dolores Calderon Rodríguez
Fármacos
Agosto 2024
pág. 2
Objetivo. Conocer y aplicar las técnicas análisis para el control microbiológico de medicamentos,
materiales de empaque y áreas de producción.
Competencias genéricas.
Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.
Sigue instrucciones y procedimientos de manera reflexiva, comprendiendo cómo cada uno de sus
pasos contribuye al alcance de un objetivo.
Sustenta una postura personal sobre temas de interés y relevancia general, considerando otros
puntos de vista de manera crítica y reflexiva.
Estructura ideas y argumentos de manera clara, coherente y sintética
Aprendizajes esperados.
Valora el alcance y la importancia que tiene la microbiología farmacéutica.
Selecciona y aplica métodos de recolección de muestras para análisis microbiológico.
Elije la forma adecuada del manejo de muestras para análisis microbiológico.
Argumenta y aplica la utilidad que tiene la prueba de limites microbianos; esterilidad en productos
farmacéuticos; eficacia de conservadores y potencia microbiológica de antibióticos.
Describe las características que debe reunir un cuarto limpio en la industria farmacéutica.
Interpreta las normas relativas a cuartos limpios.
Utiliza técnicas de sanitización de cuartos limpios.
Conoce indumentaria apropiada para trabajar en cuartos limpios.
Aplica técnicas de muestreo en cuartos limpios.
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CONTENIDO
Unidad No 1 Recolección y manejo de muestras en el área farmacéutica Pág.
Objetivo.- ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------6
Introducción ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------6
Personal de muestreo------------------------------------------------------------------------------------------------------6
Vestimenta --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------6
Elementos de Muestreo y Recipientes---------------------------------------------------------------------------------6
Transporte y almacenamiento de muestras --------------------------------------------------------------------------7
Practica No, 1 Muestreo de toma de agua ---------------------------------------------------------------------------8
Actividad No. 1 Cuestionario ---------------------------------------------------------------------------------------------10
Unidad No. 2 El recuento microbiológico como parámetro de control microbiano
Objetivo ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------11
Introducción -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------11
Actividad No. 2 Técnicas de recuentos microbianos ---------------------------------------------------------------11
Practica No. 2 Recuentos microbianos --------------------------------------------------------------------------------13
Actividad No. 3 Cuestionario recuentos microbianos --------------------------------------------------------------16
Actividad No. 4 Ejercicios
Ejercicio No. 1-------------------------------------------------------------------------------------------------------17
Ejercicio No. 2 ------------------------------------------------------------------------------------------------------18
Ejercicio No. 3 ------------------------------------------------------------------------------------------------------18
Unidad No. 3 Los métodos generales de análisis para el control microbiano.
Objetivo-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------19
Introducción--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------19
Practica No. 3 Limites Microbianos -------------------------------------------------------------------------------------20
Actividad No 5 Cuestionario Limites microbianos -------------------------------------------------------------------25
Ejercicio No. 4 ------------------------------------------------------------------------------------------------------26
Ejercicio No 5 -------------------------------------------------------------------------------------------------------27
Ejercicio No. 6 ------------------------------------------------------------------------------------------------------28
pág. 4
Practica No. 4 Esterilidad -------------------------------------------------------------------------------------------------29
Actividad No. 7 Cuestionario Esterilidad ------------------------------------------------------------------------------31
Ejercicio 7 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------32
Ejercicio 8 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------33
Ejercicio 9 ------------------------------------------------------------------------------------------------------------33
Practica No. 5 Efectividad de preservativos antimicrobianos ----------------------------------------------------34
Actividad No. 9 Cuestionario Efectividad de preservativos -------------------------------------------------------36
Actividad No, 10 Ejercicios
Ejercicio 10 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------37
Ejercicio 11-----------------------------------------------------------------------------------------------------------38
Ejercicio 12 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------38
Practica No. 6 Actividad Antimicrobiana -------------------------------------------------------------------------------40
Actividad No. 11 Cuestionario Actividad Antimicrobiana ----------------------------------------------------------43
Ejercicio 13 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------44
Ejercicio 14 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------45
Practica No. 7 Valoraciones Microbiológicas -------------------------------------------------------------------------46
Actividad No. 13 Cuestionario Valoraciones microbiológicas ----------------------------------------------------51
Ejercicio 15 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------51
Ejercicio 16 ----------------------------------------------------------------------------------------------------------53
Unidad No. 4 El control microbiológico de cuartos limpios en la industria farmacéutica
Objetivo ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------55
Introducción-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------55
Practica No. 8 Control ambiental ---------------------------------------------------------------------------------------57
Actividad No. 15 Cuestionario Control Ambiental ------------------------------------------------------------------59
Actividad No. 16 Crucigrama --------------------------------------------------------------------------------------------60
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Unidad No. 1 Recolección y manejo de muestras en el área farmacéutica.
Objetivo.- Aplicar las Buenas Prácticas de Laboratorio de Microbiología en los muestreo de
medicamentos, materia primas, materiales de empaque dispositivos médicos etc. destinados al
análisis microbiológico.
Introducción.- La calidad de la muestra tiene una gran repercusión sobre la fiabilidad de la
información que el laboratorio de microbiología pueda proporcionar sobre ella. De una muestra mal
tomada, escasa, incorrectamente transportada o conservada se obtendrán datos que podrían inducir
a errores diagnósticos, interpretaciones inadecuadas, tratamientos y gastos innecesarios.
Personal de muestreo
El muestreo se debe llevar a cabo por personal capacitado de forma continua en esta área. Su
formación incluye:
1.-Procedimientos escritos de toma de muestras y condiciones de almacenamiento hasta su análisis,
2.-Modalidad de trabajo en instalaciones o cabinas de muestreo,
3.-Técnicas y equipos para la toma de muestras,
4.- Planes de toma de muestra,
5.-Riesgos de contaminación y/o contaminación cruzada,
6.-Precauciones a tener en cuenta en base a las características de la materia prima o del producto a
muestrear y al destino de las muestras,
7.-Rotulado, transporte y condiciones de almacenamiento de las muestras,
8.-Limpieza, acondicionado y rotulado de los elementos de muestreo,
9.-Limpieza y rotulado de instalaciones y cabinas de muestreo
Vestimenta
La vestimenta por utilizar debe proteger tanto al operador como al material a muestrear. De acuerdo
con las características del área y/o la muestra se debe utilizar vestimenta adecuada, máscaras,
guantes, barbijos, cofia, cubre calzado, etc.
Elementos de Muestreo y Recipientes

Los elementos de muestreo deben ser de acero inoxidable con pulido sanitario u otro material inerte.
En el caso de la toma de muestra destinada a microbiología, el elemento de muestreo debe ser
estéril.
Los recipientes deben estar estériles para las muestras destinadas a análisis Microbiológico,
apirógenos para aquellas destinadas a ensayos de piretógenos o endotoxinas.
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Es importante que todos los elementos de muestreo posean un método de limpieza validado y un
período de validez definido.
Transporte y almacenamiento de muestras.
De forma general, las muestras recogidas para estudios microbiológicos deben enviarse lo más
rápidamente posible al laboratorio de Microbiología. Se podrán transportar a temperatura ambiente si
no se demora su envío tras su obtención, aunque algunos requieren hielo para ser transportadas. De
igual forma si no se realiza en forma inmediata el análisis la muestra deberá ser refrigerada.
Es indispensable que la muestra se mantenga refrigerada hasta su arribo al laboratorio, ya que tanto
las temperaturas mayores a 6ºC como la luz provocan la multiplicación de los microorganismos e
invalidan la muestra dado que los resultados no reflejarán la realidad. Se recomienda enviar la
muestra lo antes posible pero en caso de demorarse el envío, se puede guardar en un refrigerador a
4°C, pero no es conveniente que pase más de 2 días. En cualquier caso debe evitarse el
congelamiento de la muestra.
e podrán transportar a temperatura ambiente si no se demora su envío tras su obtención, aunque
algunas requerirán hielo para su transporte
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Practica No. 1
Muestreos de toma de agua
Objetivo. Aplicar los métodos para los muestreo de productos, aguas etc. destinados al laboratorio
de microbiología.
Marco teórico.
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Material Equipos
3 frascos de jugo Autoclave
Membranas estériles Placa de calentamiento
Algodón Balanza granataria
Pinzas para membranas Bomba de vacío
1 vaso de precipitado de 100 ml
3 placas de Petri 60 X 15 mm Alcohol al 70%
1 matraz Erlenmeyer de 250 ml Agar método estándar y/ o Agar soya
tripticaseína
1 espátula
1 agitador magnético
1 matraz Kitasato de 1000 ml
Procedimiento
Muestreo de la toma de agua.
1.- Esterilizar 2 frascos de jugo para la recolección de la toma de agua.
2.- Preparar torundas de alcohol al 70% para sanitizar las tuberías
3.- Tomar una torunda y limpiar la tubería por dentro y por fuera.
4.- Abrir la toma de agua y dejar correrla por 1 minuto.
5.- Abrir el frasco estéril y tomar aproximadamente 100 ml de agua, cerrar inmediatamente.
Análisis de la muestra
1.- Preparar el equipo de filtración estéril y colocarlo en el matraz Kitasato
2.- Colocar una membrana en el filtro, tomándola con cuidado con las pinzas para no romperla
3.- Abrir el vaso de filtración y hacer pasar 100 ml del agua muestreada
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4.- Encender la bomba de vacío y filtrar la muestra
5.- Apagar la bomba y tomarla membrana con las pinzas colocándola en una caja de Petri con agar
soya tripticaseína
6.- Incubar a 35°C por 48 h
7.- Terminado el tiempo de incubación, contar las colonias presentes.
Diagrama de flujo( Muestreo de la toma de agua)
Cálculos y resultados.
Toma de agua UFC/ 100 ml
Conclusión._______________________________________________________________________
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Bibliografía._______________________________________________________________________
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ACTIVIDAD NO. 1 CUESTIONARIO Muestreo

1.- Defina el significado de muestreo
2.-¿Por qué es importante rotular los recipientes donde se muestrean las muestras?
3.- ¿Qué requisitos debe cumplir el área de trabajo donde se realizará el análisis microbiológico?
4.- Investiga la técnicas de muestreo de materia primas.
5.- Investiga las técnicas de muestreo de aguas.
6.- ¿Porque es importante realizar el muestreo con la vestimenta adecuada?
7.- ¿ A que temperatura debe de refrigerarse una muestra si no es posible analizarla?
8.- ¿Cuáles factores afectan a los microorganismos vivos de una muestra destinada al laboratorio de
microbiología?
9.- ¿Por qué una muestra para análisis microbiológico no debe congelarse?
10.-¿Por qué es importante realizar controles negativos en el análisis de una muestra?
pág. 10
Unidad No. 2 El recuento microbiológico como parámetro de control microbiano.
Objetivo.- Conocer y aplicar los métodos para realizar un conteo microbiológico de las muestras
analizadas para asegurar su calidad.
Introducción.
Los cultivos puros son útiles por diferentes razones: mantienen los organismos viables, permiten
hacer subcultivos para someterlos a diferentes análisis. Para obtener lo anterior es necesario recurrir
a las técnicas de recuento.
Existen métodos que permiten establecer el número de microorganismos en una muestra dada. Hay
métodos que cuantifican el número de células, y existen otros que cuantifican la masa total de la
población.
Los métodos de recuento microbiano se clasifican en
Métodos directos
1. Recuento en placa
1.1. Vaciado en placa
1.2. Extensión en superficie
2. Número más probable NMP
3. Filtración
4. Instrumentales
Métodos indirectos
➢ Peso seco
➢ Turbidimetría
➢ Nefelométrico de McFarland
ACTIVIDAD No. 2 TÉCNICAS DE RECUENTOS MICROBIANOS
Explica cada una de las técnicas de recuento mencionadas
Recuento en placa.-
Numero mas probable (NMP)
Filtración por membrana.-
pág. 11
Turbidimetría.-
Nefelometría.-
Peso seco.-
pág. 12
PRACTICA No. 2
Recuentos microbianos
Microbiología farmacéutica
Método para el recuento microbiano en placa
Introducción
Los métodos de recuento de microorganismos mediante la enumeración de colonias, han sido
ampliamente utilizados para determinar el contenido microbiano viable en alimentos, medicamentos,
cosméticos etc.. Estos procedimientos asumen que cada célula microbiana viable, formará una colonia
visible al multiplicarse en un medio que contiene agar (medio sólido); sin embargo, una colonia puede
provenir de una célula individual o de un grupo de ellas. Además, solo formaran colonias aquellos
microorganismos que sean capaces de desarrollar en las condiciones en que se realice el recuento.
Algunos microorganismos no desarrollaran debido a deficiencias nutricionales del medio, insuficiente o
excesiva temperatura de incubación, desfavorable tensión de oxígeno o por daño celular, entre otros
factores.
La precisión es definida como la capacidad para obtener resultados similares cuando una serie
de recuentos repetidos es realizada por una misma persona o por varios analistas. La exactitud es la
diferencia entre un recuento obtenido y el recuento real, a menor diferencia mayor exactitud. Ambos
conceptos deben ser considerados al determinar la calidad de una técnica.
Material Equipo
6 placas Petri de 100 x 15 mm 1 vortex

10 pipetas graduadas de 1 o 2 ml 1 balanza granataria
1 pipetas graduadas de 5 ml Placa de calentamiento
2 matraces Erlenmeyer de 500 ml
1 probeta de 100 ml
1 gradilla
10 tubos de ensayo 15x 150 mm con tapón de baquelita Medios de cultivo
2 tubos de ensaye de 20x 150 mm con tapón de baquelita
1 mechero Fisher Agar método estándar
1 espátula
2 vasos de precipitado de 100 ml
1 vaso de precipitados de 250 ml
1 bulbo ( verifiquen que sirva)
2 frascos de jugo limpios
Papel aluminio ( Para envolver pipetas y cajas)
Agua destilada
1 jeringa estéril de 25 ml
1 asa de nicromo
1 solución salina estéril
Microorganismo de prueba
Staphylococcus aureus
Escherichia coli
pág. 13
Preparación de material
1. Esterilización del material
1.1.Esterilizar las cajas Petri y pipetas bacteriológicas a 180°C durante media hora en el horno
2. Preparación de la suspensión de microorganismo
2.1.Adicionar a cada placa con microorganismo resembrado 2 o 3 ml de solución salina estéril
2.2.Con ayuda de un asa de nicromo barrer el medio de cultivo para facilitar su recolección y con una
jeringa estéril succionar el líquido obtenido de cada placa y vaciarlo en un tubo de ensayo estéril y
con tapón de baquelita.
3. Preparación de material
3.1.Preparar 8 tubos de ensayo con 9 ml de solución salina cada no
3.2.Identificar cada tubo desde 10-1 10-2 10-3 10-4 y así sucesivamente hasta el último tubo 10-8 .
4. Procedimiento
4.1.De la suspensión de microorganismo pipetear alícuota de 1 mL y transferirla a un tubo con 9 mL de
solución salina estéril, y así hasta obtener el número necesario de diluciones. La concentración
disminuirá 10 veces en cada dilución sucesiva. Luego de transferir 1 ml de la dilución 1:10 a un tubo
con 9 mL de solución salina estéril, agitar en la forma recomendada. Transferir con otra pipeta estéril
l mL a otro tubo de dilución y agitar, proseguir de igual forma hasta la dilución deseada. Utilizar solo
material estéril.
5. Inoculación de la muestra mediante la técnica de vaciado en placa:

5.1.Colocar 1 mL de las diluciones seleccionadas para la siembra, en el fondo de las cajas de petri
estériles previamente marcadas con la información necesaria para su identificación, destapándolas
solo lo suficiente para introducir la pipeta con una inclinación de 45°. Se deja escurrir y al concluir
aplicar la punta tres veces en zonas de la caja libres de líquido para completar la transferencia.
Nunca soplar. Si se obstruye la pipeta, cámbiela.
5.2.Adicionar aproximadamente 15 a 20 mL de medio fundido y mantenido en baño maría a 45 °C.
Inmediatamente incorporar el inoculo al medio mediante rotación de la caja y movimientos rectos,
mezclar mediante 6 movimientos de derecha a izquierda, 6 en el sentido de las manecillas del reloj,
6 en sentido contrario y 6 de atrás a adelante, sobre una superficie lisa y horizontal hasta lograr una
completa incorporación del inóculo en el medio; cuidar que el medio no moje la cubierta de las cajas.
evitar el derrame del líquido o su contacto con la tapa. Dejar solidificar.
5.3.Preparar una o varias cajas conteniendo medio de cultivo y diluyente sin inocular, con el fin de
confirmar su esterilidad. ( Control positivo)
5.4.Una vez solidificado el agar, invertir las placas e incubarlas. A 35 ± 2ºC 48 ± 2 h
pág. 14
Diagrama de flujo ( Anexe fotografías o realice dibujos)
Reporte
1.- Descripción macroscópicamente de las colonias obtenidas.
2.- Reportar Unidades Formadoras de Colonias UFC/ml de bacterias en cada placa
Resultados
VACIADO EN PLACA
Tubo Tubo Tubo Tubo
Microorganismo dilución dilución Dilución Dilución
Microorganismo No, 1 ____________________________________
Microorganismo No.2 _____________________________________
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Conclusión. No se permiten conclusiones tales como “aprendí mucho” “ todo estuvo bien”, “ me gusto”
etc tiene que ser un reflejo de lo aprendido desde la investigación previa hasta la ejecución de la
práctica.-
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Bibliografía
ACTIVIDAD No. 3 CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son las causas que pueden hacer variar el número de microorganismos en un recuento
microbiano?
2. ¿Qué desventajas tiene la técnica de recuento de microorganismos por extensión en superficie,

sobre la de vaciado en placa?
3. ¿A qué se denomina cuenta de bacterias mesofílicas aerobias?
4. Con tus palabras ¿ Crees que un recuento microbiano puede variar si lo realiza una o dos personas
y por qué?
5. ¿Cuál es el método de recuento microbiano más utilizado en la industria?
6. ¿Cuál es la desventaja de hacer uso del recuento indirecto por peso seco?
7. ¿Para que el conteo de microrganismos en placa sea confiable debe estar entre cuales valores?
pág. 16
8. ¿ Como es el crecimiento de los microorganismos?
9. A que temperatura debe de vaciarse el medio de cultivo en el recuento de vaciado en placa?
10.- ¿Cómo sabes cuando la temperatura de tu medio de cultivo es la adecuada para poder vaciarlo en
la placa con microorganismos?
ACTIVIDAD No. 4 EJERCICIOS
Ejercicio No. 1
Para realizar la prueba de actividad antimicrobiana se ocupan 1x10 8 UFC/ml de un cultivo de
Escherichia coli, incubado durante 24 horas. Se realizan 10 diluciones de la suspensión inicial tomando
1 ml de cada una pasándola sucesivamente en cada tubo. Obteniendo en la dilución 10 la cantidad de
95 UFC/ ml ¿Cuál dilución tomarías para realizar el análisis?
Dilución UFC/ml Coloca una X en la dilución

elegida
Dilución -1
Dilución -2
Dilución -3
Dilución -4
Dilución -5
Dilución -6
Dilución -7
Dilución -8
Dilución -9
Dilución -10
pág. 17
Ejercicio No. 2
Calcule el número de UFC/mL de una muestra si al hacer diluciones y sembrar en placa 500 µl de cada
una se obtienen los siguientes resultados.
Dilución Caja 1 Caja 2 Promedio

Dilución -6 1210 UFC 1003 UFC
Cálculos.
Muestra _________________________
Ejercicio No. 3
Calcule el número de UFC/mL de un cultivo de Pseudomona aeruginosa, incubado durante 24 horas
en medio TSB si al hacer diluciones y sembrar en placa 200 µl de cada una de las diluciones en dos
placas por dilución, se obtienen los siguientes resultados.
Dilución Placa 1 UFC Placa 2 UFC Promedio UFC

-7 1986 2011
-8 291 256
-9 18 9
-10 1 0
Cálculos
Muestra.__________________
pág. 18
Unidad No. 3 Los métodos generales de análisis para el control microbiano.
Objetivo.- Conocer y aplicar los MGA para las pruebas microbiológicas de medicamentos
Introducción.- Los Métodos Generales de Análisis (MGA) establecen la metodología analítica para
identificar y valorar sustancias, así como pruebas limite y análisis oficiales, sobre los cuales se basan las
monografías contenidas en la FEUM.
MGA 0571. Limites microbiano.- Estas pruebas tienen como objetivo evaluar la calidad microbiológica
de productos farmacéuticos (materias primas, productos intermedios y terminados), Mediante la cuenta
de organismos mesófilos aerobios, hongos filamentosos y levaduras, así como la investigación de
microorganismos específicos.
MGA 0381. Esterilidad.- Esta prueba aplica a todos los productos biológicos, medicamentos,
dispositivos médicos, y productos que se denominan como estériles tiene como finalidad investigar la
presencia de microorganismos contaminantes
MGA 0305. Efectividad de preservativos antimicrobianos.- Los preservativos son sustancias que se
adicionan principalmente a preparados farmacéuticos no estériles multidosis, para inhibir el
crecimiento de los microorganismos que pueden introducirse durante el proceso de fabricación 0 uso del
preparado
MGA 0100. Valoración microbiológica de antibióticos.- La potencia o actividad de los

antibióticos se calcula comparando el grado de inhibición de microorganismos sensibles y
específicos producida por concentraciones conocidas del antibiótico analizado y una
sustancia de referencia.
En los antibióticos puede haber ligeros cambios químicos que se traducen en perdida de
actividad antimicrobiana que no pueden demostrarse por métodos químicos, por esta razón,
en caso de duda respecto a la actividad de un antibiótico, los métodos de valoración
microbiológica prevalecen sobre los métodos químicos.
pág. 19
PRACTICA No. 3
DETERMINACION DE LIMITES MICROBIANOS
OBJETIVO
El estudiante podrá aplicar las técnicas microbiológicas, y realizará el control microbiológico de materias
primas y productos farmacéuticos no estériles, utilizando metodologías oficiales
PROCEDIMIENTO O DESARROLLO
Preparación de las muestras para el recuento de microorganismos mesófilos aerobios y hongos
y levaduras.
1.-Disolver 10g de la muestra en 90 mL (dilución 1:10) de solución de uso (buffer de fosfatos PH 7.2)
2.-Tomar 1.0 mL de la dilución de la muestra obtenida en el punto anterior y colocarlo en un par de
cajas petri estériles, para cada medio de cultivo utilizado
3.-Añadir a cada par de cajas de 15 a 20 mL del medio Agar soya tripticaseína para los
microorganismos mesofilos aerobios y agar Dextrosa Sabouraud para los hongos y levaduras.
4.-Con movimientos rotatorios suaves, mezclar la alícuota de la muestra con el medio de cultivo, evitar
derramar el líquido.
5.-Permitir que el medio de cultivo solidifique, tapar e incubar las cajas petri en posición invertida entre
30°C y 35°C durante 72h.
6.-Después del periodo de incubación a las 72h, promediar las UFC de la caja 1 y de la caja 2 y
determinar el número de UFC por mililitro, gramo o por unidad de muestra.
7.-Para el caso de hongos y lev. Después de incubación de 7 días determinar el número de UFC en la
caja 1 y caja 2.
8.-Calcular el promedio de UFC de las cajas y determinar el número de UFC por mililitro, gramos o por
unidad de muestra.
Determinación de microorganismos específicos (Patógenos)
El diluyente para la determinación de microorganismos específicos (patógenos); es Caldo soya
tripticaseína (Caldo Casoy).
1.-Preparar una dilución 1:10 de la muestra a analizar, que será 10g o 10mL de muestra en 90mL de
caldo soya tripticaseína, el tiempo de incubación será de 18h a 24h a una temperatura de 30°C a
35°C.
2.-Al terminar del tiempo de incubación del caldo soya tripticaseína y no se observa presencia de
turbidez en este se considera se considera Negativo y se determina que no hay contaminación
microbiológica.
3.-En el caso de que al finalizar el tiempo de incubación del caldo soya tripticaseína se observa
presencia de turbidez se considera Positivo y se determina que hay presencia de microorganismos por
lo que es necesario determinar si es microorganismo específico o patógeno.
Investigación de microorganismos Patógenos
1.-Para la determinación de presencia de microorganismos específicos (Patógenos) se debe de utilizar
diferentes medios enriquecidos y selectivos para cada uno de los microorganismos a investigar:
2.-Para los casos de investigación de Escherichia coli: del caldo soya tripticaseína contaminado se
agitara para mezclar y transferir 0.1mL a 10mL de caldo Mac Conkey se incubara de 42°C a 44°C
durante 24h a 48 h. subcultivar a una caja con agar Mac Conkey e incubar de 30°C a 35°C durante
18h a 72h respectivamente.
pág. 20
3.-Para el caso de identificación de Salmonella spp: transferir 0.1mL del caldo soya tripticaseína
contaminado a 10mL de caldo Rappaport Vassiliadis e incubar de 30°C a 35°C de 18h a 24h.
después subcultivar en placas de Agar xilosa lisina desoxicolato e incubar de 30°C a 35°C durante
18h a 48h.
4.-Para el caso de identificación de Pseudomonas aeruginosa en medio selectivo, se resembrara en
placa de Agar cetrimida e incubara de 30°C a 35°C durante 18h a 72h.
5.-Para el caso de identificación de Staphylococcus aureus en medio selectivo, se resiembra en
placa de Agar sal manitol e incubar de 30°C a 35°C durante 18h a 72 h.
Determinación de Bacterias Gram Negativas bilis tolerantes
1.-Para el caso de identificación de Bacterias Gram Negativas Bilis Tolerantes. Para la preparación y
pre incubación de la muestra: se preparara una dilución 1:10 en caldo soya tripticaseína mezclar e
incubar de 20°C a 25°C por un periodo de 2h a 5 h. después del periodo de incubación inocular con
1mL de la solución anterior, 9mL caldo Mossel para enriquecimiento e incubar de 30°C a 35°C
durante 24h a 48 h; al finalizar el periodo de incubación resembrar en placas de Agar glucosa rojo
violeta bilis e incubar de 30°C a 35°C durante 18h a 24h.
2.-El producto cumple con la prueba de Determinación de Microorganismos Específicos si no hay
crecimiento en los medios de cultivo o si las pruebas de identificación son negativas
MATERIAL EQUIPOS
10 cajas Petri de 90 x 15 mm de vidrio o desechables Balanza granataria
2 pipetas graduadas de 10 mL estériles. 2 mecheros Fisher
2 pipetas volumétricas de 1 o 2 ml Placa de calentamiento
6 frascos para esterilizar (pueden ser de Jugo) Agitador magnético
1 Bulbo que sirva
1 espátula Medios de cultivo y reactivos
3 matraces Erlenmeyer 500ml NaOH
Papel aluminio Fosfato monobásico de K
1 probeta de 100 ml Agua
2 vasos de precipitados Agar Soya Tripticaseína
2 matraz volumétrico de 100 ml con tapón Agar Dextrosa Sabouraud
1 matraz volumétrico de 1 L con tapón( para todo el grupo) Medios de cultivo para patógenos
(VER APARTADO “SI LA MUESTRA
ESTA TURBIA” )
SOLUCIONES Y MEDIOS DE CULTIVO

Solución amortiguadora de fosfatos pH 7.2: En un matraz volumétrico de 1000 mL, disolver 34.0 g
de fosfato monobásico de potasio en agua y ajustar el pH a 7.2 + 0.1, con una solución de Hidróxido
de sodio 1.0 N (aproximadamente 175 mL) llevar a volumen; mezclar y esterilizar. Almacenar en
refrigeración por un periodo máximo de 3 meses.
Solución de uso (Solución diluida): Diluir 1.25 mL de la solución concentrada (obtenida en el punto
anterior) en 1000 mL de agua purificada. Envasar en volúmenes de 90 mL y esterilizar.
Agar soya tripticaseína (agar casoy). Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar.
pág. 21
Agar dextrosa saboraud. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar.
Caldo soya tripticaseína (caldo casoy). Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y
esterilizar.
Preparar solo si la muestra para patógenos presenta turbidez
Caldo MacConkey. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar.
Agar MacConkey. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar.
Caldo Rappaport Vassiliadis de enriquecimiento para Salmonella. Preparar siguiendo las instrucciones
del fabricante y esterilizar.
Agar xilosa lisina desoxicolato. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante.
Agar sal manitol. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar
Agar cetrimida. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar de acuerdo a lo
establecido en los parámetros de trabajo para la autoclave del área de microbiología.
Caldo-Mossel de enriquecimiento de enterobacterias. Preparar siguiendo las instrucciones del
fabricante.
Agar glucosa rojo violeta bilis. Preparar siguiendo las instrucciones del fabricante y esterilizar
DIAGRAMA DE FLUJO.
pág. 22
RESULTADOS
Microorganismos mesófilos aerobios
Contar el número de colonias en las placas.
Calcular el número de microorganismos viables por ml y/o g de muestra, expresado como
Unidades Formadoras de colonias por mL o g (UFC/mL) (UFC/g)
Muestra No. 1 __________________________________________
Especificación. -__________________________________________
Anotar los resultados:

Placa 1: __________ Placa 2: __________ Promedio: __________
Dictamen: _____________________
Muestra No. 2___________________________________________
Especificación. -__________________________________________
Dictamen: _____________________
Microorganismos Hongos y levaduras

Contar el número de colonias en las placas
Calcular el número de microorganismos viables por ml y/o g de muestra, expresado como
Unidades Formadoras de colonias por mL (UFC/mL)
Muestra No. 1___________________________________________
Especificación: __________________________________________
Anotar resultados
Dictamen: _____________________
Muestra No. 2____________________________________________
Especificación. _________________________________________
pág. 23
Dictamen: _____________________
Microorganismos Patógenos
Muestra No. 1___________________________________________
Especificación.-__________________________________________
Microorganismos patógenos ________________________________
Muestra No. 2 ___________________________________________
Especificación.- __________________________________________
Microorganismos patógenos ________________________________
CONCLUSION.____________________________________________________________________
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BIBLIOGRAFIA.____________________________________________________________________
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pág. 24
ACTIVIDAD No. 5 CUESTIONARIO
1.- ¿Menciona las formas farmacéuticas a la cual se le realiza la prueba de Limites microbianos?
2.- ¿Cuáles son los microorganismos objetables?
3.-¿ Cuándo se realiza un análisis de un producto oral ¿Cuáles microorganismos patógenos investigas?
4.- Si en una muestra analizada se determina la presencia de Staphylococcus aureus. Explica ¿Que
medios de cultivo utilizaste y que características morfológicas presenta el microorganismo?
5.- De igual manera que la pregunta anterior, si se determinara la presencia de cada uno de los
siguientes microorganismos ¿Qué medios de cultivo se hacen uso y que características presenta el
medio y el microorganismo?
Escherichia coli
Salmonella
Pseudomonas aeruginosa
Clostridium sporogenes
6.- Cuándo en una muestra analizada se obtiene como resultado un microorganismo patógeno diferente
a los microorganismos citados en la FEUM ¿La muestra se aprueba o se rechaza? Y ¿Por qué?
7.- ¿ Cuál es el propósito del control negativo en los análisis microbiológicos?
8.- ¿Cuál es la finalidad del control positivo en los análisis microbiológicos?
pág. 25
9.- ¿Cuáles métodos de recuentos microbianos son los mas utilizados para realizar la prueba de Limites
Microbianos?
10.-Si en una muestra analizada para patógenos hay presencia de turbidez en el caldo soya. Explica
el procedimiento que realizas para identificar los microorganismos presentes en él.
ACTIVIDAD NO. 6 EJERCICIOS
Ejercicio No. 4
Se tiene una materia prima de Estearato de Mg cuya especificación es la siguiente:
Cuenta total de BMA No más de 1000 UFC/g
Hongos y levaduras No mas de 500 UFC / g
Libre de Salmonella sp y E. coli
Explica ¿Cómo realizarías el análisis de Limites Microbianos para cada determinación? Mencionando
los medios de cultivo, diluyente, diluciones utilizadas, temperaturas y tiempos de incubación, morfología
de los microorganismos presentes y todo lo que conlleva realizar el análisis.
pág. 26
Ejercicio N. 5
Se tiene una materia prima Almidón de maíz cuya especificación es la siguiente:

Bacterias mesófilas aerobias.- No excede 1000UFC/g
Hongos y levaduras.- No excede 100 UFC/g
Libre de E. coli
Su especificación es elevada por lo que para poder cuantificar los microorganismos es necesario
realizar diluciones. El resultado fue el siguiente:
BMA en la dilución -3 = Placa No. 1.- 11 UFC/ g , Placa No. 2.- 8UFC/g
Hongos y levaduras en la dilución -2 = Placa No.1 1 Hongo/g , Placa No. 2 0 Hongos/g
Ausencia de E. coli
Realiza los cálculos y dictamina si la materia prima satisface prueba o no.
pág. 27
Ejercicio No. 6
Se tiene una suspensión oral de Albendazol cuya especificación es la siguiente:
Bacterias mesófilas aerobias.- No excede 100UFC/ml
Hongos y levaduras.- No excede 10 UFC/ml
Libre de patógenos
Sus resultados fueron los siguientes:
BMA = 6UFC/ml
Hongos y levaduras = Menos de 10UFC /ml
Presencia de Staphylococcus epidermidis
Realiza los cálculos y explica cómo se llegó a estos resultados y como se identificó el microorganismo.
pág. 28
PRACTICA No. 3
PRUEBA DE ESTERILIDAD
OBJETIVO
El estudiante podrá aplicar las técnicas microbiológicas, y realizará la prueba de esterilidad por método
de filtración por membrana y método directo.
MARCO TEORICO.
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Material Reactivos Equipos

6 frascos jugo por equipo Caldo Soya Tripticaseína Bomba de vació
Material para preparar medios de cultivo Medio Liquido Tioglicolato Placa de calentamiento
Equipo de filtración Peptona de carne
Pinzas
1 vaso de precipitado de 100 ml
Membranas estériles
PROCEDIMIENTO O DESARROLLO.
Método por filtración por membrana
1.- En el manifold o equipo de filtración colocar una membrana estéril con ayuda de unas pinzas
estériles.
2.- Colocar el vaso, embonando bien el vaso para evitar derrames.
3.-Manejar la muestra de acuerdo con su presentación
4.- Con ayuda de una jeringa succionar el líquido de cada ampolleta de acuerdo con la cantidad
marcada en las tablas.
5.- Si la muestra es polvo de igual modo ver las tablas y tomar la cantidad indicada en ellas.
6.-Colocar la muestra en solución I (80 ml de peptona de carne)
7.- O se puede adicionar directamente al equipo de filtración.
8.- No olvidar que antes de adicionar la muestra a la membrana se debe de humedecer con una
pequeña cantidad de solución I (peptona de carne)
pág. 29
9.- Adicionar la muestra.
10.- Encender la bomba de vacío para succionarla
11.- Apagar la bomba y realizar un enjuague con 80 ml de solución I (peptona de carne al 0.1%)
12.-Volver a encender la bomba hasta que el líquido haya desaparecido.
13.-Quitar el vaso del manifold y con ayuda de unas jeringas cortar la membrana en dos partes iguales.
14.- Colocar una mitad en el caldo soya y la otra mitad en el medio líquido tioglicolato.
15.- Cerrar inmediatamente los frascos
16.- Incubar el Caldo soya por 14 días a una temperatura de 20ºC a 25ºC
17.- Incubar el Medio líquido tioglicolato por 14 días a una temperatura de 30ºC a 35ºC
18.- Revisar cada frasco sin agitarlo (al séptimo día)
19.- Interpretar resultados
Método directo
1.- Con ayuda de una jeringa succionar el líquido de cada ampolleta de acuerdo con la cantidad
marcada en las tablas.
2.- Si la muestra es polvo de igual modo ver las tablas y tomar la cantidad indicada en ellas.
3.- Si es material de empaque ( tapones, ajugas, catéter etc) adicionar las piezas directamente a los
medios de cultivo respectivamente.
4.- Adicionar a cada frasco con medio de cultivo la cantidad no mayor al 10% del volumen utilizado de
cada medio de cultivo.
5.- Seguir los pasos 15 hasta el 19 dl método por filtración de membrana.
Diagrama de flujo de la prueba de esterilidad de cada método.
pág. 30
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Método Filtración por membrana
Muestra No. 1 ____________________________________
Caldo soya tripticaseína (Satisface prueba) ________________________________
Medio liquido tioglicolato (Satisface prueba). ______________________________
Método Directo
Muestra No. 1 ________________________________
Caldo soya tripticaseína (Satisface prueba). __________________________________
Medio liquido tioglicolato (Satisface prueba) __________________________________
CONCLUSION.-
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BIBLIOGRAFIA.-
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ACTIVIDAD No. 7 CUESTIONARIO Esterilidad
1.- ¿Menciona las formas farmacéuticas a la cual se le realiza la prueba de Esterilidad?
2.- ¿Cuáles son los microorganismos utilizados para la prueba de promoción de crecimiento de los
medios utilizados en la prueba de esterilidad?
3.- Si te diera positiva una prueba de esterilidad que procedimiento seguirías?
4.- Con tus palabras explica porque es importante que un fármaco cumpla con la prueba de esterilidad.
5.- ¿Cuáles son las temperaturas y los tiempos de incubación de cada uno de los medios utilizados en
la prueba?
6.-¿Si por el origen de la muestra los medios de cultivo se enturbian desde inicio del análisis . Explica
el procedimiento que se sigue para aprobar o no la muestra.
7.-¿Cuáles son las causas por las que la prueba de esterilidad se puede invalidar?
8.- Un análisis de prueba de esterilidad ¿Puede repetirse en caso de dar positiva?
9.-Cuando se trabaja un ungüento oleoso ¿ Cual es diluyente utilizado para el análisis?
10.- ¿Cuántos lavados de la muestra se pueden realizar en el método de filtración por membrana según
la FEUM?
pág. 32
ACTIVIDAD No. 8 Ejercicios
Ejercicio 7
Se ha realizado la prueba de esterilidad de una materia prima estéril, transcurrido días de incubación
el control negativo de CST presenta turbidez pero la muestras no ¿ Que procede con el análisis?
Explica el procedimiento que se realizaría en este caso.
Ejercicio 8
Se realiza la prueba de esterilidad de una muestra de Midazolam solucion inyectable 5 ml cuyo cantidad
del lote es de 250,000 ampolletas las cuales se llenan en 3 días con doble turno de trabajo. Completa
las siguientes preguntas.
¿De acuerdo con la cantidad del lote cuantas muestras se toman para realizar la prueba de esterilidad?
¿Qué volumen de la muestra debes tomar para realizar el análisis?
¿Cuál método se utilizará para hacer el análisis?
Ejercicio 9
Los resultados obtenidos de la prueba de esterilidad de una muestra de Hidrocortisona polvo para
solucion inyectable contaminada fue la presencia de Staphylococcus capitis ¿De dónde puede ser el
origen de esta contaminación? Y explica como pudiste identificar el microorganismo.
pág. 33
PRACTICA No. 5
Efectividad de preservativos antimicrobianos
OBJETIVO
El estudiante aplique y conozca el MGA 0305 Efectividad de preservativos antimicrobianos
MARCO TEORICO.
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MATERIAL Reactivos
8 placas de Petri 15 x90 mm Twen 80
1 asa de nicromo Lecitina de soya
3 frascos de jugo Peptona de carne
1 matraz Erlenmeyer de 500 ml Agar soya tripticaseína
1 agitador magnético Agar Dextrosa Sabouraud
1 espátula Agua
5 tubos 20x150 mm
10 tubos de 15x150 mm
10 pipetas volumétricas de 1 o 2 ml
1 pipeta graduada de 10 ml
1 gradilla
1 perilla
Papel aluminio
1 probeta de 1 L
PROCEDIMIENTO
1.- Preparación de la suspensión
a) Resembrar el microorganismo de prueba en Agar Soya Tripticaseína e incubar a la temperatura de
30 a 35°C de 18 a 24 h
pág. 34
b) Cumplido el tiempo de incubación, adicionar 3 ml de solución salina a cada una de las placas con
microorganismos de prueba y con ayuda de un asa de nicromo resuspénderlo.
c) Con ayuda de una jeringa tomar el volumen de cada una de las placas y colocarlo en un tubo estéril.
2.- Preparación del inoculo
a) Preparar 8 a 10 tubos de ensaye con 9 ml de solución salina peptonada y esterilizar.
b) De la suspensión obtenida realizar un recuento microbiano por el método de vaciado en placa
c) Incubar las placas a la temperatura de 30 a 35° C por 24 h.
d) Cumplido el tiempo de incubación contar las colonias en las placas que tengan de 30 a 300 UFC/ml
e) Elegir el tubo en el cual contenga 1x108 UFC/ml
3.- Preparación de la muestra
a) En 2 tubos estériles adicionar 10 ml de la muestra analizar
b) Inocular cada envase conteniendo el producto con 0.1ml de la suspensión ajustada
c) Mezclar para homogenizar y realizar un recuento por vaciado en placa para contar la cantidad de
los microorganismos adicionados (Tiempo 0)
d) Guardar los tubos con las muestras a temperatura a 22.5 ± 2.5 º C. y protegidos de la luz
4.- Preparación del control positivo
a) En 2 tubos con 10 ml de solución salina peptonada estéril.
b) Inocular cada envase con 0.1ml de la suspensión ajustada
c) Mezclar para homogenizar y realizar un recuento por vaciado en placa para contar la cantidad de
los microorganismos adicionados (Tiempo 0)
d) Guardar los tubos con las muestras incubar los envases inoculados a 22.5 ± 2.5 º C. y protegidos
de la luz
De acuerdo a la categoría del producto

Tomar muestra de cada envase a los intervalos (tiempos).
Diagrama de flujo
pág. 35
Resultados
E. coli
Tubo elegido de la preparación del inoculo ___________ , Cantidad ________________UFC/ml
S. aureus
Tubo elegido de la preparación del inoculo ___________ , Cantidad ________________UFC/ml
Especificación de acuerdo con la categoría del producto.

______________________________________________________________________________
Muestra
E. coli
Microorganismos (tiempo 0) __________________ UFC/ ml
S. aureus
Muestra
E. coli
Microorganismos (tiempo 14 días) __________________ UFC/ ml
S. aureus
Control +
E. coli
S. aureus
Control +
E. coli
S. aureus
Dictamen. __________________________
Conclusiones.-
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Bibliografía.-
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ACTIVIDAD No .9 Cuestionario Efectividad de preservativos Antimicrobianos
1.- ¿Menciona las formas farmacéuticas a la cual se le realiza la prueba de Efectividad de

preservativos?
2.- ¿Cuáles son los microorganismos utilizados para realizar la prueba de Efectividad de preservativos?
3.- ¿Cuál es el diluyente utilizado cuando se trabaja con hongos y levaduras?
4.-¿Qué entiendes cuando tu especificación te dice lo siguiente: Explícalo con tus palabras
5.- ¿Cuál es la finalidad de realizar la prueba de efectividad de preservativos?
pág. 37
Ejercicio 10
En un análisis de efectividad de preservativos de una muestra de Ambroxol solucion oral se prepara

una suspensión de microorganismo inicial aprox 100,000,000 UFC / ml de cada uno, obteniendo los
siguientes resultados en el tiempo cero, ¿Cuál sería la reducción de cada microorganismo en el tiempo
de 28 días para bacterias y hongos para ser aprobado?
Microorganismo Tiempo 0 Tiempo 14 días Tiempo 28 días

Bacterias Hongos Bacterias Hongos Bacterias Hongos
Staphylococcus 981,000 X
aureus UFC/ml
Escherichia coli 1,020,000 X
UFC/ml
Pseudomona 910,000 X
aeruginosa UFC/ ml
Cándida albicans X 1,100,000
UFC/ml
Aspergillus X 850,000
brasilensis UFC/ml
Ejercicio 11
En el recuento inicial de cada microorganismo obtenemos los siguientes datos ( en la tabla) y de

acuerdo con lo especificado en la cantidad de microorganismo adicionado a la muestra No más del 1%
que cantidad de microorganismos en realidad se le adiciona a la muestra y el control positivo para su
análisis.
Microorganismo Cantidad de Cantidad de

microorganismo microorganismo
adicionado
Staphylococcus 112,000,000 UFC/ml
aureus
Escherichia coli 89,000,000 UFC/ml
Pseudomona
aeruginosa 101,000,000 UFC/ml
Cándida albicans 96,000,000 UFC/ ml
Aspergillus brasilensis
99,000,000 UFC/ ml
pág. 38
Ejercicio 12
Los resultados obtenidos en un análisis de preservativos antimicrobianos para un producto de

categoría 1 es el siguiente para cada microorganismo. Observa y reporta si el producto es aprobado o
no para cada bacteria de acuerdo con la tabla de especificaciones.
Microorganis Tiempo 0 Tiempo 7 días Tiempo 14 días Tiempo 28 días

mo Bacteri Hongos Bacteri Hongo Bacteri Hongos Bacteri Hongo
as as s as as s
Staphylococcu 854,000 X 650,000 x 85,000 X 251000 X
s aureus UFC/ml UFC/ ml UFC/ml UFC/ml
Escherichia 1,120,0 X 101,000 x 105;000 X 116 X
coli 00 UFC/ml UFC/ml UFC/ml
UFC/ml
Pseudomona 890,000 X 92,000 x 658 X 3 UFC/ X
aeruginosa UFC/ ml UFC/ml UFC7ml ml
Cándida X 1,010,0 X 86,000 X 56UFC/ X 0 UFC/
albicans 00 UFC/ ml ml
UFC/ml ml
Aspergillus X 950,000 X 870,00 X 920,000 X 938,00
brasilensis UFC/ml 0 UFC/ UFC/ml 0 UFC/
ml ml
Resultados
Staphylococcus aureus.- ____________________________
Escherichia coli.- __________________________________
Pseudomona aeruginosa.- ___________________________
Cándida albicans.- _________________________________
Aspergillus brasilensis.- _____________________________
pág. 39
PRACTICA No. 6
Actividad Antimicrobiana
Microbiología farmacéutica
Objetivo
Comprobar la eficacia de los germicidas o sanitizantes utilizados en las industrias.
Marco teórico.
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Material para el recuento inicial

10 tubos 15x150mm con tapón de baquelita
4 placas de Petri 90 x 15 mm
1 probeta de 1 L
Material para la practica
2 frascos de jugo
Material para preparar los medios, solución neutralizante, y solución amortiguadora( lean como se
prepara y pidan los matraces adecuados a la cantidad que van a preparar)
Mechero Fisher
1 probeta de 1 L
Perrilla de succión
Gradillas donde los tubos entren
Reactivos
Agua destilada
Lecitina en polvo ( si no hay entonces liquida)
Tween 80
Fosfato monobásico de potasio
Hidróxido de sodio
Agar método estándar
Procedimiento
Preparación de la suspensión de microorganismo
pág. 40
1.- Preparar el medio de cultivo para resembrar el microorganismo.
2.- Resembrar ya sea en botella de Roux o en placas de Petri (4 o 5 para logras obtener la
concentración deseada de mo) por estría el microorganismo de prueba
3.- Incubar a 30- 35°C por 18 a 24 h
4.- Pasando el tiempo de incubación, sacar las placas o la botella de roux y adicionar a cada una de 3
a 5 ml de solución salina para para recuperar el mo.
5.- Con ayuda de una jeringa estéril recopilar la solución de cada placa y adicionarla en un tubo esteril.
Determinación de la cuenta viable inicial

A un tubo de ensaye de 15x150 que contenga 9 mL de la solución amortiguadora de fosfatos diluida
estéril, transferir 1 mL de la suspensión de los microorganismos de prueba y efectuar las diluciones
decimales necesarios para obtener placas que contengan cada una entre 25 y 250 colonias.
Elegir el tubo que contenga aproximadamente de 75 a 125 x106 del microorganismo de prueba.
Inoculación de la muestra
1.- Para cada uno de los microorganismos de prueba, medir exactamente y por duplicado 9.9 mL del
producto o su dilución, y colocarlos en tubos de ensaye con tapón de rosca estériles.
2.- Agitar los tubos, suspender la agitación, justamente antes de la inoculación, para que en el
momento de esta, aún exista movimiento residual del líquido y así facilitar la incorporación del
inóculo.
3.- Inocular en forma individual cada tubo con cada uno de los microorganismos de prueba en el centro
de la superficie del líquido, evitando tocar con la pipeta, el cuello o las paredes del matraz.
4.- Agitar el tubo con la muestra inoculada y exactamente 30 s después de la inoculación, transferir 1
mL de esta, a un tubo de ensayo conteniendo 9 mL de la solución neutralizante diluida mezclar y
transferir por duplicado alícuotas de 1,0 mL a cajas de petri estériles agregar a cada placa de 15 mL a
18 mL del medio agar para métodos estándar con neutralizante, homogeneizar, permitir que
solidifique, invertir las placas e incubar durante 48 h 35°C a 37°C. Después del período de incubación,
contar el número de UFC en las placas.
Control positivo
Trabajar igual que la muestra pero sin adicionarla, hacer uso de solución amortiguadora diluida.
PREPARACION DE SOLUCIONES
1.-Solución amortiguadora de fosfatos 0,25 M
En un matraz volumétrico de 1 000 mL, disolver 34 g de fosfato monobásico de potasio en 500 ml de
agua, ajustar el pH entre 7,1 y 7,3 con la solución de hidróxido de sodio, aforar con agua, mezclar y
distribuir en porciones de 100 mL.
Esterilizar en autoclave (121°C) durante 15 min, dejar enfriar y conservar en refrigeración.
2.- Solución amortiguadora de fosfatos diluida

Colocar 1,25 mL de la solución amortiguadora de fosfatos 0,25 M en un matraz volumétrico de 1 L y
llevar a volumen con agua, mezclar y distribuir en porciones de 9 mL en tubos esterilizar en autoclave
a 121° C durante 15 min.
pág. 41
3.- Solución neutralizante concentrada
Mezclar 40 g de azolecitina, con 280 mL de polisorbato 80 mL y 1,25 mL de la solución
amortiguadora
de fosfatos, diluir con agua hasta obtener un volumen final de un 1 L; ajustar el pH a 7,2 con la
solución volumétrica de hidróxido de sodio o la solución volumétrica de ácido clorhídrico. Esterilizar
en autoclave A 121°C durante 20 min.
4.-Solución neutralizante diluida

Mezclar 100 mL de la solución neutralizante concentrada con 25 mL de la solución amortiguadora de
fosfatos 0,25 M, adicionar 1 675 mL de agua, mezclar. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 20
min.
DIAGRAMA DE FLUJO
CALCULOS
Microorganismos.
S. aureus . _____________________ UFC/ml
E. coli _______________________UFC/ ml
pág. 42
RESULTADOS ( Satisface prueba)
CONCLUSION.-
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BIBLIOGRAFIA.(APA).-
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ACTIVIDAD No. 11 Cuestionario
1.- Define el significado de germicida
2.- ¿ Qué factores pueden influir en la efectividad de los germicidas?
3.- La “NMX-BB-040-SCFI-1999. Métodos generales de análisis - determinación de la actividad

antimicrobiana en productos germicidas” especifica el uso únicamente de 2 bacterias ¿ pueden utilizar
mas de esas 2 bacterias y por qué?
4.- ¿ Como funciona un germicida?
pág. 43
5.- ¿Por qué los microorganismos pueden generar resistencia a los germicidas utilizados?
6.- ¿ Que se debe de tomar en cuenta para elegir un germicida?
7.- En un análisis de Actividad antimicrobiana ¿Cuál es la función de hacer uso de una solucion
Neutralizante?
8.- ¿Qué tiempo de contacto y velocidad de acción debe tener un desinfectante para cumplir su
función?
9.- ¿ Cuál es la especificación para aprobar o rechazar un germicida?
10.- ¿Para qué es utilizado el recuento inicial de microorganismos y para que el secundario en el
análisis?
ACTIVIDAD No. 12 Ejercicios
Ejercicio 13
El análisis de el germicida 201N da los siguientes resultados:
Microorganismo Conteo de Microorganismos ( Microorganismos

control +) sobrevivientes
Staphylococcus aureus 1,150,000 UFC/ml 150 UFC/ml
Escherichia coli 795,000 UFC/ ml 6 UFC/ml
Realiza los cálculos y ve se el producto está aprobado o no.
pág. 44
Ejercicio 14
Se tiene los resultados de la efectividad de un germicida para cada uno de los microorganismos
utilizados en la prueba.
Staphylococcus aureus 99.996% de efectividad

Escherichia coli 99.999 % de efectividad
Especifica ¿Si el producto es apto para su uso o se rechaza y por qué?

Respuesta.-
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_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
pág. 45
PRACTICA No. 7
Valoración Microbiológica de Antibióticos
OBJETIVO.- El alumno comprenderá la diferencia entre una Valoración química y Valoración
Microbiológica de antibióticos.
MARCO TEORICO.-
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PROCEDIMIENTO
Preparación del inoculo
Resembrar el microorganismo de prueba en Agar Soya Tripticaseína en tubos, cajas o botella de
Roux por estría, incubar de 18 a 24 h a una temperatura de 35°C. Transcurrido el tiempo de
incubación, adicionar 3 ml de solución salina estéril y con ayuda de un asa de nicromo barrer el
microorganismo; con una jeringa de 25 ml succionar y juntar la suspensión obtenida de cada tubo o
caja en otro tubo estéril. Diluir la suspensión de microorganismo con solución salina.
Preparación de capa base y capa siembra
Capa base.- Preparar y esterilizar el medio de cultivo Antibiótico No. 1 (21 ml por placa) de acuerdo
con las indicaciones del proveedor.
Capa siembra.- Preparar y esterilizar el medio de cultivo Antibiótico No 1 (4 ml por placa) de acuerdo
con las indicaciones del proveedor.
Después de vaciar la capa base a cada una de las placas y dejar solidificar, adicionar la capa siembra
ya inoculada con el microorganismo de prueba (1 ml por cada 100 ml de medio de cultivo).
¡Precaución, vaciar rápidamente la capa siembra evitando así la coagulación del medio!
Preparación de la solución amortiguadora.
Seguir la tabla marcada en la FEUM.
Preparación de solución madre y diluciones de prueba.
pág. 46
De acuerdo con la potencia del estándar preparar una solución madre de 1000 UI de penicilina.
1000 UI X 1 ml / 10 ml = 100 UI/ml
100 UI x 1ml /10 ml= 10 UI/ml
10 UI X 10 ml / 100ml = 1 UI/ml
10 UI X 6.4 ml /100ml = 0.64 UI/ ml Solución amortiguadora de fosfatos pH 6.0 al 1%
10 UI X 8.0 ml /100ml = 0.8 UI/ ml
10 UI X 12.5 ml/ 100 ml = 1.25 UI/ml
10 UI X 15.6 ml/ 100 ml = 1.56 UI/ml
Preparación de la muestra
Preparar la muestra a la misma concentración del estándar medio (solución C) 1 UI/ml y diluir con
solución amortiguadora de fosfatos 1% pH 6
Equipos Material Reactivos
Balanza granataria. 18 cajas de Petri de vidrio 20 x Difosfato de potasio sal
Mechero 100 mm. Monofosfato de potasio sal
Placa de calentamiento Cilindros de acero inoxidable Solución salina estéril (frasco de
Agitador magnético Material volumétrico de diferente 250 ml PISA)
Estufa o incubadora a 35° C capacidad: Antibiótico No 1
Colocador de cilindros 7 volumétricos de 100 ml Ácido fosfórico 18 N Para
4 volumétricos de 10 ml ajustar pH
1 volumétrico de 1000 ml Hidróxido de potasio
Pipetas volumétricas de diferente
capacidad:
2, 4, 5, 10,1ml
1 micropipeta de 100 a 1000 µl
Mechero Fisher
Asa de nicromo
Espátula
3 jeringas de 25 ml
Papel aluminio
Nota: El material volumétrico dependerá de las diluciones realizadas de la muestra y/o

estándar)
Preparación de las placas
1.-Ya teniendo las placas listas con su capa base y capa siembra colocar seis cilindros de acero
inoxidable a intervalos regulares de 60° en un radio de 2.8 cm.
2..-Para la curva dosis respuesta, utilizar un total de 12 placas, tres para cada concentración, excepto
para la media o punto de referencia de la curva (c), la cual se incluye en todas las placas.
pág. 47
3.- Llenar tres cilindros de un conjunto de tres placas con la concentración de referencia y alternar
tres cilindros con la concentración más baja y así sucesivamente para cada concentración.
4.-De esta manera se obtienen 36 zonas de inhibición para la concentración de referencia (c) y nueve
para las cuatro concentraciones restantes de la curva (a, b, d, e).
5.- Para cada muestra utilizar tres placas, llenar tres cilindros de cada placa con la concentración
media de referencia (c) y en forma alterna llenar los otros tres con la muestra preparada a la
concentración media o de referencia.
6.-Realizar por duplicado la muestra.
7.-Incubar las placas de 16 a 18 h.
8.-Terminado el tiempo de incubación medir los halos y registrarlos en la siguiente tabla
Std a Std c Std b 0.8 Std c Std d Std c Std e Std c

0.64 UI/ml UI/ml UI/ml 1.25 UI/ml 1.56 UI/ml
UI/ml UI/ml UI/ml
X= X= X= X= X= X= X= X=
Estándar C
X=
pág. 48
Mta 1 Std c Mta 2 Std c
UI/ml UI/ml
CALCULOS (Valores corregidos de la muestra y estándar)
pág. 49
DIAGRAMA DE FLUJO
RESULTADOS
CONCLUSIONES.-
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
pág. 50
ACTIVIDAD 13.- CUESTIONARIO Valoraciones microbiológicas
1.- ¿Explica en que se basa las valoraciones químicas y las valoraciones microbiológicas?
2.- ¿Cuándo es recomendable las valoraciones microbiológicas sobre las químicas?
3.- ¿Qué diferencia existe entre las valoraciones microbiológicas de antibióticos y las valoraciones
microbiológicas de vitaminas?
4.-¿ A que transmitancia se debe de ajustar el microorganismo en una valoración microbiológica

cilindro- placa para poder ser utilizado ?
ACTIVIDAD No. 14 EJERCICIOS

Ejercicio 15
Se realizará una valoración microbiológica del antibiótico Amikacina sulfato cuya potencia del
estándar primario es de 701 µg /mg y la potencia teórica de la muestra es de 729 µg/ mg. Realiza el
análisis de esta materia prima, buscando medios de cultivo base y siembra, buffer utilizado,
concentraciones de la curva y muestra, diluciones y llena la tabla con datos que de tu elección y
finalmente con el uso de la regresión lineal saca la potencia real de la MP.
pág. 51
Std a Std c Std b Std c Std d Std c Std e Std c
X= X= X= X= X= X= X= X=

UI/ml UI/ml
pág. 52
Ejercicio 16
Se realizará una valoración microbiológica del antibiótico Gentamicina sulfato cuya potencia del
estándar primario es de 590 µg /mg y la potencia teórica de la muestra es de 595 µg/ mg. Realiza el
análisis de esta materia prima, buscando medios de cultivo base y siembra, buffer utilizado,
concentraciones de la curva y muestra, diluciones y llena la tabla con datos que de tu elección y
finalmente con el uso de la regresión lineal saca la potencia real de la MP.
pág. 53
Std a Std c Std b Std c Std d Std c Std e Std c
X= X= X= X= X= X= X= X=

UI/ml UI/ml
pág. 54
Unidad No. 4 El control microbiológico de cuartos limpios en la industria farmacéutica
Objetivo.- Conocer y aplicar los métodos y técnicas existentes en las diferentes empresas para el
control ambiental de los cuartos de trabajo, monitoreo de superficies y personal.
Introducción
¿A qué llámanos cuarto limpio?

Los cuartos limpios son áreas delimitadas por paredes, techo, piso y accesos controlados.
Esto se obtiene controlando el aire suministrado que es filtrado para este fin, y por la ligera
presión positiva, previniendo que partículas del exterior entren al cuarto.
Un cuarto limpio también se debe tener control sobre las partículas contenidas en el aire,
control del flujo del aire, ruido y vibración, así como aspectos de ingeniería industrial tienen
que ser considerados.
La filtración de aire con filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air) o filtros
ULPA (Ultra Low Penetration Air) se colocan en el techo con retorno en el piso, o ranura en la
parte baja de las paredes proporcionando un continuo flujo de aire limpio.
Factores importantes en el control de partículas son los parámetros de la humedad y la

Temperatura los cuales deben estar bajo control en un cuarto limpio.
Un cuarto limpio debe de ser una construcción sellada, en la cual se deben de utilizar solo
materiales que no contaminen y deben de usarse sistemas y elementos que eviten la
contaminación accidental del exterior o de los operadores. Los aceros inoxidables son
recomendados para ser utilizados en las superficies de trabajo. Se debe de evitar en lo
posible de superficies en donde se pueda colectar el polvo.
Es recomendable colocar a la entrada del cuarto un tapete con superficie adhesiva lo que
evita que entren las partículas de la suela de los zapatos de trabajo del personal que ingrese
al cuarto limpio.
Otra recomendación es que el acceso al cuarto limpio cuente con una antecámara y varias
puertas, (sistema de esclusas) las cuales nunca se deben abrir al mismo tiempo, este
procedimiento asegura que el cuarto limpio nunca sea expuesto directamente a áreas sucias.
Es importante que el cuarto limpio tenga una presión positiva con respecto a la antecámara
y al resto de la fábrica, esto es con el fin de que partículas de la antecámara y de la fábrica
misma no puedan entrar cuando las puertas del cuarto limpio son abiertas.
Las áreas de fabricación deberán clasificarse con base en el apéndice A Normativo de esta
Norma.
El diseño y construcción de las áreas de fabricación, laboratorio y otros cuartos que estén
involucrados en la fabricación (incluyendo las áreas destinadas para el manejo de animales)
pág. 55
deben ser de materiales que permitan su limpieza, mantenerlos libres de polvo, insectos,
plagas y facilitar su mantenimiento, a fin de minimizar riesgo de contaminación.
Todas las instalaciones y edificios deben ser sujetos a instrucciones escritas para su limpieza
y cuando aplique su sanitización.
Las áreas de producción deben tener acabado sanitario; todos los servicios como son:
lámparas y tuberías, puntos de ventilación y extracción, alimentación de energía, deben ser
diseñadas e instaladas para evitar acumulación de polvos y facilitar su limpieza.
El diseño de las áreas de fabricación debe contemplar cuartos para el acceso de personal,
cambio de ropa de acuerdo a la clasificación del Apéndice A Normativo de esta Norma.
Para procesos asépticos, las instalaciones deben considerar además lo siguiente:

1.- En las áreas asépticas, los techos falsos deben ser sellados para prevenir contaminación
proveniente del espacio encima de ellos.
2.-Se debe contar con sistemas que eviten que dos puertas consecutivas sean abiertas
simultáneamente, por lo que se debe contar con un sistema de interlock y un sistema de
alarma visual y/o auditivo.
3.- Se debe demostrar que el patrón de flujo de aire no representa un riesgo de
contaminación.
4.- Se debe contar con un Sistema de alarma para indicar cualquier falla en el Sistema de
aire. Indicadores de presión diferencial deben ser apropiados entre áreas donde la diferencial
es importante, y la diferencial de presiones debe ser registrada.
5 Los vestidores para ingreso a áreas de procesamiento aséptico deben diseñarse como
esclusas de aire y proporcionar separación física de las diferentes etapas de cambio. La
etapa final de los vestidores, en condiciones estáticas, debe cumplir con la misma
clasificación del área a la que conduce. Se debe tener vestidores separados para entrada y
salida del personal.
pág. 56
Practica No 8
Control Ambiental y superficies
Objetivo.- Conocer y practicar los métodos utilizados para el control ambiental y muestreo de
superficies.
Procedimiento.
Preparar el medio de cultivo de acuerdo a las indicaciones del fabricante

En los tubos de ensaye adicionar 2 ml de solución salina y esterilizar
Preparar lo hisopos y esterilizarlos( o comprarlos ya estériles)
Control microbiológico del aire sedimentación en placas de agar.

1.- Preparar 4 placas Petri con agar soya Tripticaseína
2.- Sanitizar tu área de trabajo con el sanitizante de tu elección.
3.- Exponer las placas, una en cada esquina de la meseta, derecha e izquierda.
4.- Colocar las otras placas en algún lugar de tu elección
5.- Abrir las placas y exponer por 30 minutos.
6.- Terminado el tiempo cerrar las placas y proceder a incubar a la temperatura de 30 a 35º C por 48
h.
7.- Terminado el tiempo de incubación contar las colonias presentes en cada placa
8.- Reportar en UFC/cm2
Control microbiológico del aire por impacto

1.- Sanitizar el equipo con alcohol al 70 por entre las ranuras procurando llegar hasta lo interior del
mismo.
2.- Colocar una placa en el equipo.
3.- Encender el equipo por el tiempo indicado por el docente ( Se deberá de muestrear 1 m3 de aire
por lo que se muestrea aproximadamente 5 minutos)
4.- Terminado el tiempo e muestreo retirar la placa del equipo tomándola por los lados y colocar su
tapa.
6.- Rotular la placas con la información del lugar donde se muestro.
Muestreo de superficies
Método de Hisopo
1.- Delimitar un área aproximada de 5cm x 5cm sobre la superficie a muestrear.
2.-Tomar el hisopo estéril y humedecer el hisopo en diluyente y presionar ligeramente en la pared del
tubo para quitar el exceso de solución.
3.- Con el hisopo inclinado en un ángulo de 30°, frotar 4 veces la superficie delimitada cada una en
dirección opuesta a la anterior.
4.-En una placa Petri resembrar con el hisopo con el que se muestreo la superficie en forma de estría
y/o realizar vaciado en placa.
5.-Incubar a 35 ± 2°C 24/48 ± 2 h.
Muestreo de manos
pág. 57
1.- Colocar 2 placas de Petri con agar soya sobre la mesa.
2.- Con ayuda de un compañero, abrir las placas
3.- Colocar en cada placa derecha e izquierda las huellas de los 5 dedos procurando no presionar el
medio de cultivo para que no se rompa.
4.- Contar aproximadamente 5 segundos y retirarlas.
5.- Tapar las placas e incubar de 35 ± 2°C 24/48 ± 2 h.
Material ( Por equipo)
12 placas Petri
1 matraz Erlenmeyer de 500 ml
1 probeta de 100 ml
1 vidrio de reloj
1 espátula
1 mechero Fisher
Hisopos o palillos y algodón para prepararlo
2 tubos de 13x100 mm con tapón de baquelita
Solución salina
Agar Soya Tripticaseína ( Método estándar etc)
Equipos
Placa de calentamiento
Incubadora
Muestreador de aire
Diagrama de flujo para cada procedimiento.
Resultado
TABLA DE RESULTADOS
Método ambiental
No. De meseta __________________
Posición de la placa UFC/ cm3
SUPERFICIE
Superficie
muestreada UFC/cm2
pág. 58
MUESTREO DE MANOS
Nombre. UFC/ huella

Mano
Derecha
Izquierda
CONCLUSION.-
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
Bibliografía.-
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
_________________________________________________________________________________
ACTIVIDAD 15 CUESTIONARIO Control Ambiental
1.-¿Qué indica el crecimiento microbiano en una placa con agar soya expuesto al ambiente?
2.- ¿Cómo participamos en la contaminación del ambiente en el laboratorio?
3.- Investiga las especificaciones para el control ambiental de cada uno de los cuartos en un laboratorio.
4.- ¿En la industria farmacéutica ¿Qué es un área blanca? Y ¿ Un área gris?
pág. 59
5.- ¿Cuáles son las técnicas utilizadas para la sanitización de los cuartos en un laboratorio
farmacéutico?
6.- ¿Qué características debe cumplir el personal que ingresa a áreas asépticas?
7.- ¿Cuáles son las técnicas para el muestreo microbiológico de superficies?
8.- ¿Cuáles son los métodos utilizados para el control ambiental de un área aséptica?
9.- Explica brevemente cual es el procedimiento de vestido del personal para ingresar a un área
aséptica
10.- Explica el procedimiento para preparar un uniforme para ingresar a un área aséptica.
Actividad No. 16 Crucigrama
1.- Completa el siguiente crucigrama

Horizontales
1.- Área delimitada por paredes, techo, piso y accesos controlados.
2.- Área diseñada para mantener dentro de límites el número de partículas viables y no viables
3.- Presión que debe de tener un cuarto limpio.
4.- Proceso que se lleva a cabo en el área ISO- Clase 5.
5.- Frecuencia de monitoreo ambiental en al área ISO-Clase 7 para partículas viables.
6.- Proceso donde se aplican productos químicos para reducir el número de mo existentes.
Verticales
7.- Proceso de remover la suciedad.
8.- Sanitizantes más comunes.
9.- Técnica utilizada para la limpieza y sanitización de áreas asépticas.
10.- Los movimientos del personal dentro de un área aséptica son:
11.-El uniforme para las clases 5/6 deben ser:
12.- Se basa en medir espectrofotométricamente el crecimiento del microorganismo de prueba en un medio de
cultivo líquido.
pág. 60
4,7
9 6
12
1 10
11
2 8
pág. 61

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Centro de Enseñanza Técnica

Ma. Dolores Calderon Rodríguez

Elementos de Muestreo y Recipientes

Toma de agua UFC/ 100 ml

ACTIVIDAD NO. 1 CUESTIONARIO Muestreo

4.- Investiga la técnicas de muestreo de materia primas.

5.- Investiga las técnicas de muestreo de aguas.

6.- ¿Porque es importante realizar el muestreo con la vestimenta adecuada?

7.- ¿ A que temperatura debe de refrigerarse una muestra si no es posible analizarla?

10.-¿Por qué es importante realizar controles negativos en el análisis de una muestra?

ACTIVIDAD No. 2 TÉCNICAS DE RECUENTOS MICROBIANOS

Explica cada una de las técnicas de recuento mencionadas

Numero mas probable (NMP)

Filtración por membrana.-

Método para el recuento microbiano en placa

6 placas Petri de 100 x 15 mm 1 vortex

5. Inoculación de la muestra mediante la técnica de vaciado en placa:

1.- Descripción macroscópicamente de las colonias obtenidas.

2.- Reportar Unidades Formadoras de Colonias UFC/ml de bacterias en cada placa

Microorganismo No, 1 ____________________________________

Microorganismo No.2 _____________________________________

ACTIVIDAD No. 3 CUESTIONARIO

2. ¿Qué desventajas tiene la técnica de recuento de microorganismos por extensión en superficie,

3. ¿A qué se denomina cuenta de bacterias mesofílicas aerobias?

5. ¿Cuál es el método de recuento microbiano más utilizado en la industria?

9. A que temperatura debe de vaciarse el medio de cultivo en el recuento de vaciado en placa?

ACTIVIDAD No. 4 EJERCICIOS

Dilución UFC/ml Coloca una X en la dilución

Dilución Caja 1 Caja 2 Promedio

Dilución Placa 1 UFC Placa 2 UFC Promedio UFC

MGA 0100. Valoración microbiológica de antibióticos.- La potencia o actividad de los

SOLUCIONES Y MEDIOS DE CULTIVO

Muestra No. 1 __________________________________________

Anotar los resultados:

Muestra No. 2___________________________________________

Anotar los resultados:

Placa 1: __________ Placa 2: __________ Promedio: __________

Microorganismos Hongos y levaduras

Muestra No. 1___________________________________________

Muestra No. 2____________________________________________

Anotar los resultados:

Placa 1: __________ Placa 2: __________ Promedio: __________

Muestra No. 1___________________________________________

Microorganismos patógenos ________________________________

Muestra No. 2 ___________________________________________

Microorganismos patógenos ________________________________

2.- ¿Cuáles son los microorganismos objetables?

7.- ¿ Cuál es el propósito del control negativo en los análisis microbiológicos?

8.- ¿Cuál es la finalidad del control positivo en los análisis microbiológicos?

ACTIVIDAD NO. 6 EJERCICIOS

Se tiene una materia prima Almidón de maíz cuya especificación es la siguiente:

Realiza los cálculos y dictamina si la materia prima satisface prueba o no.

Sus resultados fueron los siguientes:

Material Reactivos Equipos

Diagrama de flujo de la prueba de esterilidad de cada método.

Medio liquido tioglicolato (Satisface prueba). ______________________________

Muestra No. 1 ________________________________

Caldo soya tripticaseína (Satisface prueba). __________________________________

Medio liquido tioglicolato (Satisface prueba) __________________________________

Placa 1: Placa 2: Promedio: __

Placa 1: Placa 2: Promedio: __