Limnología

Fitoplancton

El fitoplancton puede ser caracterizadas por medio de varios métodos, los cuales son:

Los métodos indirectos:

Los métodos directos:
que involucran analizar las poblaciones
que se basan en analizar la muestra por por medio de análisis espectrales
medio de un microscopio, lo que fluorescentes a diferentes longitudes de
implicaría una forma directa de analizar onda de luz, que pueden determinar
algo en la muestra aspectos muy propios para cada grupo de
organismos planctónicos involucrando los
diferentes pigmentos que los constituyen

TIPOS DE MUESTRAS EN LA
DETERMINACIÓN

Método cuantitativo Método cualitativo

Este método debe garantizar la captura de “todos”

los organismos planctónicos representativo en Permite determinar qué tipo de
cuanto a la cantidad y composición del plancton. células predominan y, junto con los
Este análisis permite
análisis hidrobiológicos se puede
obtener diversos índices como: productividad
sucesión diversidad y asociación fitoplantónicas. conocer el estado de envejecimiento
Botellas del cuerpo de agua. Redes
PLANIFICACIÓN DE LOS TRABAJOS CON EL ELEMENTO DE CALIDAD FITOPLACTON

Recopilación de datos Muestreo de Lagos y Embalses

existentes
Recuentos (cél/mL); Biovolumen (mm3/L)
Consultas de bases de datos Datos fisicoquímicos e hidromorfológicos
Citas bibliográficas Inventario de especies Clorofila “a

Base de datos
Lagos Embalses

Identificación de Cálculo/elaboración Rangos de

asociaciones de especies de índices específicos abundancia

Ejemplo:
BIOVOLUMEN
1. La abundancia de las algas expresada como biovolumen (mm3 /L) permite una mejor
comparación con la concentración de clorofila “a” (la cual se usa habitualmente como
indicador de la biomasa del fitoplancton).
2. Una estrategia de recuento puede ser la de calcular sólo los biovolúmenes de las especies
que más contribuyen al biovolumen total. Pero actualmente lo más riguroso es utilizar
técnicas de análisis de imagen utilizando como base recuentos digitalizados.

Para la determinación del biovolumen se utiliza el método de Rott (1981), que consiste en medir
como mínimo 20 individuos de cada especie, asimilando su morfología a una forma geométrica
conocida; posteriormente se calculó el volumen de cada especie, según la fórmula para la figura
geométrica escogida y, finalmente, se multiplico el volumen por el número de células/mL obtenido

EJEMPLO
Para la estimación de la biomasa del fitoplancton se realizó un conteo utilizando un microscopio
invertido a partir del método de sedimentación propuesto por Lund et al, 1958, el cual consiste en
tomar alícuotas en ml de volumen variable, según el grado de turbidez del agua, y posteriormente se
concentran en cámaras tipo Utermohl, 1 hora por cada ml de volumen sedimentado. (Utermohl,
1958).
El conteo se realizó hasta alcanzar 400 células del morfotipo más abundante para asegurar un límite
de confiabilidad de 0,95 (Wetzel y Likens 2000). Para la identificación taxonómica de las especies
se utilizaron claves especializadas: Bicudo & Bicudo 1970, Komarek & Anagnostidis (2005),
Komarek & Fott (1983), Parra et al., (1982ª, 1982b, 1982c, 1983), Cox. 1996. Thienemann (1955).
Para obtener la densidad de cada morfotipo se aplica la siguiente ecuación.

Para la estimación del volumen de la Comunidad del fitoplancton se siguió la metodología sugerida
por Hillebrand et al., 1999 y Sun & Low 2003. Las muestras de fitoplancton se observaron en el
microscopio óptico, tomando las medidas de las dimensiones lineales (Ancho y largo) y medidas
adicionales necesarias para obtener el volumen y el área superficial. Se tomó la medida de 30
células de los morfotipos más abundantes, así como el mayor número de células de los morfotipos
menos abundantes.
EQUIPO DE MUESTREO PARA FITOPLANCTON
Los muestreadores más usados operan con un cierre mecánico llamado mensajero que tiene como
función cerrar herméticamente los lados del cilindro después de la colecta. 1.- Niskin; 2.- Kenmerer
y 3.- Van Dorn

TECNICAS DE CONSERVACIÓN

Las muestras de fitoplancton se deben someter lo antes posible a uno de los siguientes métodos de
conservación.

Muestras Vivas Muestras Muertas

Mantener las muestras vivas a Los conservantes más utilizados

oscuras y en nevera entre 4 y 10°C. son una solución de Lugol (0,5
Enfriarlas paulatinamente. Si la mL por 100 mL de muestra) y
muestra contiene una elevada formaldehido (2-4%), o Alcohol
densidad de organismos y/o materia (70%). Todas las muestras
orgánica es conveniente diluir con fijadas se conservan protegidas
agua. El tiempo máximo de de la luz y en lugar
conservación es de 12 hrs fresco(<15°C)

Cámaras de recuento

• Cámara Sedgewick Rafter: Confeccionada en vidrio con dimensiones de 50x20x1mm.

Retículo de 1mm que subdivide 1ml en 1000µ
• Cámara de recuento Neubauer: Cámara para Conteo de Neubauer Bright Line Retículos de
0,0025mm2 Profundidad de 0,100mm

MUESTREO DE FITOPLANCTON Equipos de laboratorio

Cámaras de sedimentación Utermöhl para fitoplancton

el tiempo de sedimentación recomendado es de 3 horas por centímetro de la columna de
sedimentación para las muestras fijadas con Lugol
El objetivo final de estos procesos de concentración/dilución es conseguir que el número final de
algas por campo óptico sea el óptimo para permitir la correcta identificación de las especies y
facilitar el recuento
Microscopio invertido
Debe estar equipado con: Condensador de apertura numérica (NA) 0,5 cómo mínimo y objetivos
con NA de 0,9 o más. Es recomendable utilizar objetivo de inmersión de 100x con AN 1,3. Los
oculares x10 o x 12,5 equipados con un micrométrico calibrado y con una retícula de recuento. Para
exámenes de detalle para identificación es aconsejable emplear un microscopio de contraste de fase
o con contraste de interferencia de Nomarski
Luz traspasa la muestra, lo que permite estudiar muestras en medio líquido vivas o muertas

PROCESO DE RECUENTO

Cuantitativo realizar un inventario de los taxones y un recuento de los individuos presentes de cada
taxón. La estrategia para el recuento depende de los objetivos a conseguir y especialmente del nivel
taxonómico. Se recomienda realizar una visualización previa de las muestras, antes de iniciar el
recuento, con la finalidad de confeccionar una lista de los taxones presentes en la muestra y tener
una visión general de la densidad de algas

Recuento de un número de Recuento de toda la cubeta

campos ópticos del microscopio de sedimentación
seleccionados al azar

Número de algas por campo debe ser óptimo para permitir la correcta identificación y facilitar el
recuento: Densidad, tamaño y partículas extra. Evaluar con diferentes densidades y diluir o
concentrar

Recuento e identificación de fitoplancton por el método Utermöhl

Recuento en cámara

1.- Se recuenta en tres transectas

2.- Se recuenta en triplicado para un valor optimo
y se promedian los tres recuentos, en imagen solo
se muestra uno, es decir un total de 9 transectas.
3.- El campo ocular debe ir moviéndose desde un
extremo a otro al pasar la transecta.f
4.- Si en el campo ocular aparece la mitad de una
célula, se suman dos mitades y se cuenta como
una.
5.- Al presentar los resultados se deben graficar
con la desviación estándar.
6.- Si la desviación es muy alta, es señal que la
cámara quedo mal cargada, es decir celular no se
encuentran dispersas homogéneamente, y se debe
descartar la lectura, cargar nuevamente la cámara

Fotografía al microscopio óptico de una Alexandrium catenella, un dinoflagelado

muestra de fitoplancton "grande". La marino que puede provocar mareas
muestra fue recogida mediante una manga tóxicas. Tinción con calcofluor para
de nilón 20 µm de malla. Obsérvese la poner de relieve las placas celulósicas
diversidad de formas y tamaños. que recubren al organismo.
Características del dinoflagelado Ceratium sp

1.- La presencia de blooms de 4.- Teniendo grandes

Ceratium sp. han sido En las diatomeas del ventajas para obtener
atribuidos a la presencia de género Rhizosolenia y recursos limitados del
quistes resistentes en la los dinoflagelados del ambiente, ya que realizan la
superficie de los sedimentos. género Ceratium, formas migración en la capa de agua
bi – o polimórficas de forma rápida y efectiva
2.- Las características pueden aparecer
morfológicas de Ceratium sp. estacionalmente por 5.- Esta especie presentan
como su baja relación AS/V, cambios de temperatura, adaptaciones que indican
por la presencia de y/o diferencias en las que la abundancia y los
protuberancias y gran longitud, concentraciones de cambios temporales de la
alta capacidad de migración, sílice población se deben al
regulación de nutrientes reclutamiento de una gran
limitantes y capacidad de cantidad de propágulos
explotar ambientes perennes en el sedimento
alternativos, como fagotrofia y que funcionan como “banco
mixotrofia , favorecen su de semillas” esta especie
dominancia. presenta adaptaciones en los
demás estados de
3.- Cuando existen reservas de
crecimiento que le permite,
fósforo que se encuentran en el
geminar y desarrollarse
fondo de los sedimentos
nuevamente en la columna
favorecen la migración vertical
de agua
de Ceratium sp

Especie N° 2 dinoflagelado
Especie N°3 Fragilaria sp.
Bacillariophyceae

En el caso de que se trate de

especies que crecen en cadena, se
debe contar cada célula como
individuo, la flecha muestra 42
células

La forma correcta de cargar es hacer un asterisco con la pipeta mientras se deja caer la
muestra, esto permite que las células no se concentren en las orillas