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    Base de Agar para Listeria Oxford ISO Cat.

    1133
    Medio selectivo para la detección de Listeria monocytogenes.

    Información práctica
    Aplicaciones Categorias
    Recuento selectivo Listeria
    Detección Listeria

    Industria: Clínica / Alimentación

    Regulaciones: ISO 11290

    Principios y usos
    La Base de Agar para Listeria Oxford es un medio selectivo para Listeria según la fórmula de Oxford y se recomienda para la detección de Listeria
    monocytogenes a partir de muestras clínicas y productos alimenticios. Se utiliza para sembrar la muestra directamente o para la confirmación después
    de inocular la muestra en la Base de Caldo de Enriquecimiento para Listeria (Cat.1120).

    Todas las especies de Listeria hidrolizan la esculina a esculetina, que reacciona con los iones hierro produciendo colonias negras y un ennegrecimiento
    del medio. Otra ventaja de este medio es que las peptonas y el almidón de maíz proporcionan una base nutritiva rica para el crecimiento, y la adición de
    citrato de amonio férrico mejora el desarrollo de L. monocytogenes. El cloruro de litio es un agente inhibidor, que junto con los otros antibióticos del
    suplemento, inhiben el crecimiento de bacterias Gram negativas y una gran parte de las Gram positivas. La cicloheximida inhibe las levaduras.

    Fórmula en g/L
    Agar bacteriológico 10 Citrato de amonio férrico 0,5
    Fécula de maíz 1 Peptona 23
    Cloruro sódico 5 Cloruro de litio 15

    Preparación
    Suspender 27,8 gramos del medio en 500 ml de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un
    minuto hasta su completa disolución. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Enfriar a 45-50 ºC y agregar asépticamente un vial de
    Suplemento Selectivo Listeria Oxford (Cat. 6003), previamente reconstituido en 5 ml de agua destilada estéril / etanol. Homogeneizar suavemente y
    dispensar en placas de Petri.

    Instrucciones de uso
    Para diagnóstico clínico, el tipo de muestra es líquido amniótico.
    - Inocular en superficie. Estrías paralelas con el asa o hisopo.
    - Incubar en condiciones aeróbicas a 37 ºC durante 48 horas.
    - Lectura e interpretación de los resultados.

    Para la detección y enumeración de Listeria monocytogenes y Listeria spp. según la ISO 11290:
    - Pesar 25 g (o 25 ml) de la muestra y agregar 225 ml de Caldo 1/2 Fraser (Cat. 1183). Homogeneizar e incubar a 30 ºC durante 25±1 horas.
    - Inocular 0,1 ml de cultivo del Caldo 1/2 Fraser incubado (independientemente de su color) en 10 ml de Caldo Fraser (Cat. 1182). Incubar a 37 ºC
    durante 24±2 horas en condiciones aeróbicas.
    - Del cultivo de enriquecimiento primario se inocula la superficie de Agar Listeria según Ottaviani y Agosti y el otro medio selectivo a elección del
    laboratorio (Oxford), para obtener colonias bien separadas.
    - A partir del cultivo de enriquecimiento secundario, repetir el procedimiento, inocular la superficie del Agar Listeria de acuerdo con Ottaviani y Agosti
    (Cat. 1345) y el Agar Oxford. Incubar durante un total de 48±2 h.
    - Seleccionar las colonias presuntivas y llevar a cabo las pruebas de confirmación para L. monocytogenes o Listeria spp.

    Aunque las colonias típicas de L.monocytogenes son casi siempre visibles después de 24 horas de incubación, la incubación debe prolongarse 24
    horas más para detectar cepas de crecimiento más lento.

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    Control de calidad
    Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
    Sin restos Polvo fino Beige Ámbar 7,0±0,2

    Test microbiológico
    Según la ISO 11133:
    Condiciones de incubación: (37 ºC / 48 h).
    Condiciones de inoculación: Productividad cualitativa (10^3-10^4 CFU) / Selectividad ( 10^4-10^6 CFU) / Especificidad (10^3-10^4 CFU).

    Microrganismos Especificación Reacción característica


    Listeria monocytogenes 4b ATCC 13932 Buen crecimiento (2) >50% Colonias gris verdosas con halo negro
    Listeria monocytogenes ATCC 19112 Buen crecimiento (2) >50% Colonias gris-verdosas con halo negro
    Escherichia coli ATCC 25922 Inhibición total (0)
    Enterococcus faecalis ATCC 29212 Inhibición total (0)

    Almacenamiento
    Temp. Min.:2 ºC
    Temp. Max.:25 ºC

    Bibliografía
    ISO NORMATIVE 11290-1 Microbiology of food and animal feeding stuffs -- Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria
    monocytogenes -- Part 1: Detection method.
    Curtis, G.D.W. Mitchell, R.G., King, A.F., Griffin E.J.A selective medium for the isolation of Listeria monocytogenes. Letters in Appl.Microbiol.8.95-98

    Inspired by knowledge Página 2 de 2 - Nº revisión 2 - Fecha 21/05/2019 www.condalab.com

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