UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA

FACULTAD DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA AMBIENTAL

“AÑO DEL BICENTENARIO, DE LA CONSOLIDACIÓN DE NUESTRA INDEPENDENCIA, Y DE LA

CONMEMORACIÓN DE LAS HEROICAS BATALLAS DE JUNÍN Y AYACUCHO”

BIOTECNOLOGIA
VII CICLO

Parte - I Determinación de Clorofila A y Cianobacterias

Planctónicas Mediante Técnicas de Fluorescencia Utilizando el
Equipo de investigación Algae Torch BBE MOLDAENKE GmbH
de Aguas de la PTARs MEDIA LUNA, Rio Osmore y Litoral de la
ciudad de ILO – PERU - 2024.

DOCENTE: BLGO. HEBERT SOTO

INTEGRANTES:
 SUERO SANDOVAL JHON ALEXANDER
 VARRIOS NAJAR DIEGO
 ROJAS JIMENEZ, VALENTINA JASELL
 MANZANO MAMANI, JESUS STALYN

ILO – MOQUEGUA
2024
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INDICE
1. INTRODUCCION
2. OBJETIVOS
3. MARCO TEORICO
3.1. CLOROFILA A
3.1.1. CAROTENOIDES
3.1.2. ESPECTRO VISIBLE
3.2. CIANOBACTERIAS
3.2.1. FLORACION
3.3. ALGAE TORCH
4. MATERIALES Y METODOLOGIA
4.1. MATERIALES
4.2. METODOLOGIA
5. RESULTADOS
6. CONCLUSIONES
7. BIBLIOGRAFIA
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1. INTRODUCCION. -
La determinación de clorofila A y la identificación de cianobacterias
planctónicas son aspectos fundamentales en el estudio de ecosistemas
acuáticos, ya que estas variables son indicadores clave de la salud y
productividad del medio ambiente. La clorofila A, el pigmento fotosintético
predominante en algas y cianobacterias, es un biomarcador esencial para
evaluar la biomasa fitoplanctónica y el estado trófico de los cuerpos de agua.

La utilización de técnicas de fluorescencia, especialmente a través del equipo

de investigación Algae Torch, ofrece una metodología innovadora y eficiente
para cuantificar estos componentes. Este dispositivo permite una detección
rápida y precisa, facilitando el análisis en tiempo real de la biomasa algal y la
presencia de cianobacterias, lo que es crucial para la gestión y conservación de
los ecosistemas acuáticos.

En esta introducción, se explorarán los principios detrás de las técnicas de

fluorescencia aplicadas a la medición de clorofila A y la relevancia de las
cianobacterias en la dinámica del fitoplancton. Asimismo, se discutirá cómo el
Algae Torch mejora la precisión y la accesibilidad de estos análisis,
promoviendo una comprensión más profunda de las interacciones ecológicas
en los ambientes acuáticos.
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2. OBJETIVOS. –
Objetivo Principal:

 Determinar la concentración de clorofila A y la diversidad de

cianobacterias planctónicas en cuerpos de agua mediante técnicas
de fluorescencia utilizando el equipo de investigación Algae
Torch.

3. MARCO TEORICO. –
3.1. CLOROFILA - A:
Hay cinco tipos principales de clorofila: a, b, c y d, más una molécula
relacionada que se encuentra en procariontes llamada bacterioclorofila.
En las plantas, la clorofila a y clorofila b son los principales pigmentos
fotosintéticos. Las moléculas de clorofila absorben longitudes de onda
azules y rojas, como se demuestra con los picos en los espectros de
absorción.

A nivel estructural, las moléculas de clorofila se componen de una cola

hidrófoba que se inserta en la membrana del tilacoide y una cabeza de
anillo de porfirina (un grupo circular de átomos que rodean a un ion
magnesio) que absorbe la luz

Aunque tanto la clorofila a como la clorofila b absorben luz, la clorofila

a tiene una función única y crucial al convertir la energía de la luz en
energía química. Todas las plantas fotosintéticas, algas y cianobacterias
contienen clorofila a, mientras que solo las plantas y algas verdes
contienen clorofila b, junto con algunos tipos de cianobacterias

Debido a la función central de la clorofila a en la fotosíntesis, todos los

pigmentos utilizados además de la clorofila a se conocen como
pigmentos accesorios, que incluyen otras clorofilas, así como otras clases
de pigmentos, como los carotenoides. El uso de pigmentos accesorios
permite la absorción de una gama más amplia de longitudes de onda y,
por lo tanto, una captura mayor de energía de la luz solar.

3.1.1. CAROTENOIDES:

Los carotenoides son otro grupo clave de pigmentos que

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absorben la luz violeta y verde azulada. Los brillantes

carotenoides encontrados en frutos —como el rojo del tomate
(licopeno), el amarillo de las semillas de maíz (zeaxantina) o el
naranja de una cáscara de esta fruta (β-caroteno)— se utilizan
como avisos para atraer animales, que pueden ayudar a
dispersar las semillas de plantas.

En la fotosíntesis, los carotenoides ayudan a capturar la luz,

pero también tienen una función importante al deshacerse del
exceso de energía luminosa. Cuando una hoja está expuesta a
pleno sol, recibe una cantidad enorme de energía; si dicha
energía no se maneja adecuadamente, puede dañar la
maquinaria fotosintética. Los carotenoides de los cloroplastos
ayudan a absorber el exceso de energía y a disiparla como
calor.

3.1.2. ESPECTRO VISIBLE:

El espectro visible es la única parte del espectro

electromagnético que puede ver el ojo humano. Incluye la
radiación electromagnética cuya longitud de onda está
aproximadamente entre 400 nm y 700 nm. La luz visible del
sol parece blanca, pero en realidad se compone de varias
longitudes de onda (colores) de luz. Puedes ver estos diferentes
colores cuando la luz blanca atraviesa un prisma: dado que las
distintas longitudes de onda de la luz están inclinadas en
diferentes ángulos a medida que atraviesan el prisma, se
dispersan y forman lo que vemos como un arcoíris. La luz roja
tiene la longitud de onda más larga y la menor cantidad de
energía, mientras que la luz violeta tiene la longitud de onda
más corta y la mayor cantidad de energía.

Aunque la luz y otras formas de radiación electromagnética

actúan como ondas en muchas condiciones, también pueden
actuar como partículas en otras. Cada partícula de radiación
electromagnética, llamada fotón, tiene una cantidad fija de
energía. Los tipos de radiación con longitud de onda corta
tienen fotones de alta energía, mientras que aquellos con
longitud de onda larga tienen fotones de baja energía.
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3.2. CIANOBACTERIAS:

Las Cianobacterias son organismos microscópicos, bacterias Gram-

negativas que contienen clorofila, lo que les permite realizar fotosíntesis.
Por ello históricamente se las ha identificado como algas verde-azules.
Están presentes en aguas dulces, saladas, salobres y zonas de mezcla de
estuarios. Muchas especies de cianobacterias producen toxinas, las
cuales son contenidas en la célula o exudadas al medio, por lo que pueden
aparecer disueltas en el agua, constituyéndose en un problema de
significancia para la salud humana y ambiental.

3.2.1. FLORACION CIANOBACTERIAL:

Las cianobacterias son organismos que están presentes dispersos en

el agua ambiente, en concentraciones diversas que varían de acuerdo
a los factores limitantes de su crecimiento. Se conoce como bloom o
floración al crecimiento rápido de la densidad de la población
cianobacterial en el agua, alcanzando niveles tales que se puede
observar a simple vista, y afecta en mayor medida a ríos, embalses y
lagos, constituyéndose en un peligro potencial para la salud, en
particular cuando su uso está destinado para recreación, como fuente
para riego o para agua potable.

Se da por la presencia aumentada de nutrientes como nitrógeno y

fósforo en los cuerpos de agua (lagos, embalses, ríos, lagunas),
temperaturas altas, días sin viento ni oleaje, y suficiente luz solar,
como factores más importantes. Este proceso, llamado eutrofización,
es natural; actualmente está acelerado por factores antropogénicos y
climáticos.

3.3. ALGAE TORCH:

El AlgaeTorch bbe es un instrumento de campo, ligero y portátil. para la

cuantificación simultánea del contenido de clorofila-a de las
cianobacterias y del contenido total de clorofila de las microalgas en el
agua. La medición de clorofila-a permite eliminar la agotadora
preparación de muestras en el laboratorio. Una medición completa
necesita menos de 15 segundos. No necesita preparación de muestras.

El objetivo de determinar la clorofila es realizar una medición cualitativa

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y cuantitativa del fitoplancton. El contenido de clorofila de las algas

puede ayudar a determinar la cantidad de algas en el agua. Al mismo
tiempo, se evalúa el fitoplancton, que puede considerarse potencialmente
dañino. Esto incluye los tipos más frecuentes de verde azuladas
(cianobacteria). El AlgaeTorch diferencia de forma automática el
contenido de clorofila de las algas verde azuladas (cianobacteria) y el
contenido de clorofila del resto de microalgas presentes.
Se puede utilizar el AlgaeTorch en cualquier lugar en el que se requiera
una valoración de la calidad del agua en relación con las algas. El
principio de medición es sencillo y se controla automáticamente a través
de una pantalla integrada de cristal líquido, desde el inicio de la
medición hasta la proyección de los resultados. El AlgaeTorch se puede
emplear para la valoración de proliferaciones de algas en una fase
temprana, para la medición de la calidad de aguas de baño y para la
evaluación del estado ecológico conforme a la Directiva Marco del Agua
de la UE y la calidad de los sistemas de refrigeración del agua.

4. MATERIALES Y METODOLOGIA. –
4.1. MATERIALES:
 8 litros de agua superficial de la PTAR media luna (E-5)
 10 litros de agua de la bocatoma de suministro de petróleo (E-13)
 Guantes
 Mascarilla
 Rotuladores
 Cámara para evidencias
 Alcohol
 Algae Torch
 Valdes
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4.2. METODOLOGIA:
PASO 1:

Como se nos indicó en la hoja de instrucciones, se tuvo que ir a

buscar las muestras de agua en ambos puntos (E-5) y (E-13)
respectivamente, primero nos localizamos cerca de la
municipalidad, a la altura de la bocatoma de suministro de
petróleo y extrajimos en envases la cantidad de 10 L de agua
necesaria para la práctica.
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PASO 2:

En segunda instancia nos dirigimos a la PTAR media luna para

extraer 8L de una de las lagunas con agua residual, en este caso
se sacó del punto (E-5) especificado por el docente en las
instrucciones.
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PASO 3:

Con las muestras necesarias y ya en laboratorio, se procedió a

realizar las mediciones de clorofila –a y cianobacterias, para esto
se usó el dispositivo algae Torch, tras una breve demostración del
docente a cargo para la manipulación del equipo.
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PASO 4:

Tras realizar las mediciones correspondientes, se procedió a hacer

circular la totalidad de las muestras de agua por un filtro y así
obtener una muestra de agua concentrada con micro algas y demás
compuestos que se analizaran posteriormente vía microscopio,
estas muestras se rotularon y almacenaron, se obtuvo 2 muestras
por grupo.
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5. RESULTADOS. –
Tras concluir con las mediciones del dispositivo algae Torch obtuvimos
mediciones de cianobacterias y de clorofila A, los cuales mostramos en
el siguiente cuadro.

RESULTADOS DE MEDICIONES
RIO PTAR
1° cyano 5.6 0 1° cyano 0.1 0
1°total 19.7 520.6 1°total 5.9 0
2°cyano 3.4 0 2°cyano 0.6 0
GRUPO 1 GRUPO6
2°total 31.2 463 2°total 7.3 4.9
3°cyano 12.6 0 3°cyano 3.8 0
3°total 38.1 303 3°total 18.8 6.6
1° cyano 0.3 13 1° cyano 3.2 0
1°total 6.2 33.6 1°total 7.9 17.9
2°cyano 0 11.7 2°cyano 1 2.4
GRUPO2 GRUPO7
2°total 4.3 36.6 2°total 4.1 17.4
3°cyano 0 12.1 3°cyano 17.8 0.2
3°total 4.2 35.1 3°total 19 18.8
1° cyano 7.5 93.4 1° cyano 1.8 8.9
1°total 46.9 278.3 1°total 12.6 26.3
2°cyano 0.5 91.3 2°cyano 0 0.1
GRUPO 3 GRUPO 8
2°total 19 276.4 2°total 10.7 12
3°cyano 14.6 86 3°cyano 0.1 2
3°total 45.2 258.2 3°total 54.9 16.7
1° cyano 0 0 1° cyano 0 0
1°total 1.5 49.1 1°total 1.8 2.8
2°cyano 0 0 2°cyano 0 0
GRUPO 4 GRUPO 9
2°total 1.5 49.5 2°total 1.3 2.9
3°cyano 0 0 3°cyano 0 0
3°total 1.5 50.3 3°total 1.6 2.7
1° cyano 5.5 90.7 1° cyano 2.5 0
1°total 12.2 571.5 1°total 5.2 2.1
2°cyano 7.1 90.4 2°cyano 1.3 0
GRUPO 5 GRUPO 10
2°total 14.6 570.5 2°total 0.3 2.2
3°cyano 6 95.3 3°cyano 0.1 1.3
3°total 13.1 566.2 3°total 2.4 2.6
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Con los datos obtenidos separamos en 2 cuadros los resultados de

cianobacterias y de clorofila A, así mismo presentamos gráficas para
poder observar mejor las cantidades. Cabe recalcar que los datos
presentamos en estos cuadros son promedios obtenidos de los resultados
principales de todos los grupos que obtuvieron muestras según
planteamiento de la práctica.

PROMEDIOS DE CIANOBACTERIAS
GRUPOS RIO PTAR
GRUPO 1 7.2 0
GRUPO 2 0.1 12.27
GRUPO 3 7.53 90.23
GRUPO 4 0 0
GRUPO 5 6.2 92.13
GRUPO 6 1.5 0
GRUPO 7 7.3 0.87
GRUPO 8 0.63 3.67
GRUPO 9 0 0
GRUPO 10 1.3 0.43

 Como se observa en la gráfica para cianobacterias los puntos con

registro más alto pertenecen a los grupos 3 y 5 respectivamente
en cuanto a datos obtenidos de muestras de PTAR.
 En cuanto a los registros más bajos para PTAR se encontró que la
lectura más baja es igual a 0 cantidad de cianobacterias, aquí están
los grupos 1, 4, 6 y 9.
 En cuanto a muestras de mar y rio, los registros más altos
pertenecen a los grupos 1, 3 y 7 respectivamente, todos ellos
superando los 7 μg/L.
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 Los registros más bajos nuevamente son de 0, aquí están los

grupos 4 y 9 respectivamente.
 Cabe recalcar que los grupos 4 y 9 presentan 0 presencia de
cianobacterias para sus muestras, el grupo 4 obtuvo muestras de
PTAR y de la playa boca del rio, así mismo el grupo 9 obtuvo
muestras del malecón costero cercano a muelle fiscal y de la playa
puerto inglés.

PROMEDIOS DE CLOROFILA A
GRUPOS RIO PTAR
GRUPO 1 29.67 428.87
GRUPO 2 4.9 35.1
GRUPO 3 37.03 270.97
GRUPO 4 1.5 49.63
GRUPO 5 13.3 569.4
GRUPO 6 10.67 3.83
GRUPO 7 10.3 18.03
GRUPO 8 26.06 18.3
GRUPO 9 1.56 2.8
GRUPO 10 2.63 2.3

 Para el caso de clorofila A los registros con mayor cantidad

pertenecen a los grupos 1, 3 y 5, siendo este último el que presento
mayor cantidad de clorofila A con 569.4 μg/L en cuanto a
muestras de PTAR.
 Los valores más bajos pertenecen a los grupos 6, 9 y 10, siendo el
grupo 10 el que obtuvo menor registro con 2.3 μg/L. Debemos
recalcar que ambas muestras del grupo 10 pertenecen a muestras
de mar.
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 En cuanto a muestras de mar y rio, los mayores registros de

clorofila A los obtuvieron los grupos 1, 3 y 8 siendo el grupo 3 el
que registro mayor presencia de clorofila A con 37.03 μg/L. cabe
recalcar que el grupo 8 obtuvo su muestra de mar y rio cerca de
la PTAR media Luna.
 Los registros más bajos para muestras de rio y mar lo obtuvieron
los grupos 4, 9 y 10 respectivamente siendo el de menor registro
el grupo 4 con 1.5 μg/L. Debemos recalcar que el grupo 4 obtuvo
su muestra de la playa Montecarlo.

6. CONCLUSIONES. –
Como conclusiones podemos decir que:

 La técnica de fluorescencia demostró ser efectiva y sensible para

la detección y cuantificación de clorofila A, permitiendo
identificar concentraciones bajas y altas en las diferentes muestras
de agua.
 El uso del dispositivo Algae Torch facilita la identificación
específica de cianobacterias planctónicas, lo que es crucial para
evaluar la calidad del agua y el estado de los ecosistemas
acuáticos.
 Los resultados mostraron variaciones significativas en la
concentración de clorofila y cianobacterias de las muestras que se
usaron, lo que indica la importancia de realizar muestreos
regulares para entender las dinámicas de estos organismos.

7. BIBLIOGRAFIA. –
 Schopf, J. W. (1993). «Microfossils of the Early Archean Apex
chert: new evidence of the antiquity of life», en Science
260:640-646.
 Laboratorio de Plantas Vasculares, Facultad de Ciencias,
UNAM. «CIANOBACTERIAS (CYANOBACTERIA)».
UNAM. Consultado el 21 de septiembre de 2015.
 Jimeno, A. & Ballesteros, M. 2009. Biología 2. Grupo Promotor
Santillana. ISBN 974-84-7918-349-3