Practica de Laboratorio en Base A Banco de Sangre

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Practica de laboratorio en base a Banco de Sangre – Inmunohematologia

Temas:
 Sistema ABO - Tipo Rh
 Determinación de antígeno D o factor Rh
 Determinación variante D débil

Materiales:
 EPP (guantes, gorro quirúrgico, mascarilla, bata).
 8 Tubos ensayo de vidrio
 4 Goteros
 Reactivo anti –A, anti –B, anti
 Reactivo Anti – D, albumina bovina,
 500 ml Solución salina
 Jeringas de 10 cc
 Material para flebotomía (camisa, vacuntairner, algodón, alcohol)
 2 tubos con EDTA tapón morado
 Marcadores punta fina para rotular
 Hojas blancas
 Porta objetos
Tipificación del sistema ABO

Objetivo: Al término de la práctica el alumno determinara los cuatro grupos sanguíneos en


sangre del sistema ABO.

Generalidades: En la membrana del glóbulo rojo existen complejos químicos que


representan los llamados grupos o factores sanguíneos Fué Landsteiner quién realizó en
1900 el importante descubrimiento de que los eritrocitos del hombre pertenecen a varios
sistemas Antigénicos diferentes, este autor descubrió el sistema A B O.
La clasificación del grupo sanguíneo está, determinada por la presencia o ausencia de los
aglutinógenos en el eritrocito y las aglutininas en el suero. Para la identificación del grupo
sanguíneo ABO se deben hacer dos investigaciones consecutivas: la primera se llama
tipado globular y es la determinación de los aglutinógenos eritrocíticos con antisueros o
aglutininas conocidas, la segunda se llama tipado sérico o contratipado y es la
identificación de las aglutininas utilizando glóbulos rojos con antisueros conocidos, los
sueros patrones deben ser de alto titulo, estos sueros pueden ser preparados en el
laboratorio o en su defecto, se consiguen en las casas comerciales de productos biológicos.
La investigación de los aglutinógenos eritrociticos se deben realizarse por el método de
tubo de ensayo.

Se utilizan tres reactivos llamados: suero anti A (de sangre b), de color azul y que contiene
aglutininas alfa, suero anti B (de sangre a), de color amarillo y que contiene aglutininas
beta, existe además otro suero, el anti AB que contiene las dos aglutininas, alfa y beta.
Fundamento: Los antígenos de los hematíes son estructuras químicas que proporcionan
propiedades específicas a su superficie y que solo pueden detectarse con anticuerpos que
corresponden a esos antígenos la mayoría de estas reacciones antígeno-anticuerpo implican
la aglutinación o hemólisis de los hematíes.

Material y equipo:
 1 gradilla
 16 tubos 10 x 75
 4 tubos 13 x 100
 4 pipetas Pasteur con bulbo
 Centrifuga clínica
 Sueros hemoclasificadores Anti-A, Anti B. Anti-AB
 Albúmina bovina al 22% o 33%
 Solución fisiológica
 Sangre problema

Tipificación en tubo.

Técnica:
1. Se prepara una suspensión de glóbulos rojos al 5%, previamente lavado en solución
fisiológica.
2. En una gradilla colocar 4 tubos de ensaye de 10 x 75, marcados con las letras A, B, AB
y Control.
3. En cada tubo poner una gota de suspensión de glóbulos rojos al 5%.
4. En el tubo marcado con A poner una gota de suero anti A, en el tubo marcado con B,
poner una gota de suero anti B, en el tubo AB una gota de suero anti AB
5. Se debe hacer un control agregando a 1 tubo con una gota de albúmina bovina al 22 %
6. Mezclar perfectamente los tubos y dejar reposar por dos minutos.
7. Mezclar nuevamente y se procede a centrifugar a 2,500 r p m durante un minuto
8. Se sacan los tubos cuidadosamente de la centrifuga evitando que se mezclen los
glóbulos rojos que quedan depositados en el fondo de los tubos y para efectuar la
lectura se sacuden cuidadosamente el botón del fondo, uno por uno buscando si existe
aglutinación macroscópica.
9. Si la aglutinación tuvo lugar, puede comprobarse en el seno del líquido claro los
hematies que nadan y se flotan formando pequeños agrupamientos, si el resultado es
negativo los glóbulos rojos se distribuyen uniformemente por el líquido.
10. El resultado se reporta de acuerdo a la intensidad del grupo y al color del líquido
sobre nadante, de una o varias cruces, hasta cuatro.

Conclusión
 Elaborar un informe de laboratorio.

Docente: Lic. Jasberth Cruz Izaguirre


Bionalista clínico

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