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J Vet Res 64, 523­529, 2020

DOI:10.2478/jvetres­2020­0067

Eficacia de formulaciones naturales en

patología de mastitis bovina: solución
alternativa al tratamiento antibiótico

Claudia Pa 1 , Daniel Severus Dezmirean1 ,

ca1 , Liviu Alexandru Mărghita
Ioana Adriana Matei2, Victori a Bonta3 , Ioan Pa ca4 , Flore Chirilă2 ,
Adrian Cîmpean4 , Nicodim Iosif Fi 2

1Departamento de Apicultura y Sericultura, Facultad de Ciencia Animal y Biotecnologías,

2Departamento de Microbiología, 4Departamento de Producción Animal y Seguridad Alimentaria,
Facultad de Medicina Veterinaria,
3Instituto de Ciencias de la Vida “Rey Miguel I de Rumania”,
Universidad de Ciencias Agrícolas y Medicina Veterinaria, Cluj­Napoca, 400372, Rumania
[email protected]

Recibido: 19 de marzo de 2020 Aceptado: 5 de octubre de 2020

Abstracto

Introducción: La mastitis bovina es una enfermedad inflamatoria de la ubre que causa importantes pérdidas económicas en la industria ganadera y de
productos lácteos. Hoy en día, los tratamientos antibióticos convencionales para el ganado están siendo sustituidos poco a poco por tratamientos alternativos.
En este contexto, el objetivo principal de este estudio fue evaluar la eficacia de productos naturales en el tratamiento alternativo de la mastitis bovina. Material
y Métodos: Se probaron in vivo dos formulaciones naturales con efecto antimicrobiano in vitro previamente sugerido en vacas mastíticas. Los animales con
un diagnóstico positivo de mastitis (n = 20) se dividieron en tres grupos de tratamiento: a dos grupos (n = 8) se les administraron formulaciones de propóleo,
extractos alcohólicos de lúpulo Brewers Gold y Perle, liquen de ciruela, malva común, caléndula, ajenjo. ajenjo, yemas de álamo negro, melisa y aceites
esenciales de orégano, lavanda y romero denominados R4 y R7 (diferentes sólo en que este último es más concentrado) y un grupo (n = 4) una mezcla de
antibióticos convencional. La eficacia in vivo de los tratamientos se evaluó mediante recuentos de células somáticas y en placa estándar, considerándose el
tratamiento eficaz cuando ambos parámetros estaban por debajo del límite máximo. Resultados: R7 fue eficaz en la mayoría de los casos, siendo
terapéuticamente bactericida en seis de ocho vacas, mientras que R4 dio buenos resultados en tres de ocho vacas y los antibióticos convencionales curaron
a una de cada cuatro. Conclusión: Estos resultados sugieren el posible potencial terapéutico de estos productos naturales en la mastitis bovina.

Palabras clave: vacas, mastitis, tratamientos alternativos, pruebas in vivo , productos naturales.

Introducción tratamiento (medicamentos y honorarios veterinarios), leche

descargada, coste laboral, muertes y casos repetidos de mastitis,
La mastitis bovina es una enfermedad infecciosa importante y las repercusiones indirectas, que son la disminución de la
que causa las mayores pérdidas económicas en la industria producción de leche, cambios en la calidad de la leche (cambios
ganadera y láctea. Se informaron impactos financieros negativos de composición, peor calidad higiénica de la leche y gastos
de la mastitis en las granjas lecheras en muchas partes del públicos). consideraciones de salud), costos de sacrificio y
mundo, incluidos EE. UU., Europa, Australia y Sudáfrica (23). Es reemplazo, secado prematuro, el aspecto de bienestar animal de
difícil estimar las pérdidas asociadas con la mastitis clínica, y aún la mastitis y problemas de salud asociados (23).
más difícil cuantificar las asociadas con la forma subclínica. En Aunque la mastitis es una enfermedad compleja que
los países europeos, las pérdidas por mastitis por vaca y año se involucra muchos factores, y técnicamente el término podría
estiman entre 100 y 300 dólares equivalentes (9). La considerable usarse para describir cualquier lesión en la ubre que pueda
carga económica incluye los costos directos, es decir, el costo de resultar en inflamación, generalmente se acepta como una
referencia a la reacción inflamatoria con agentes causales
microorgánicos que han crecido demasiado abundantemente o entró en

© 2020 C. Pa ca et al. Este es un artículo de acceso abierto distribuido bajo la licencia Creative Commons Atribución­
NoComercial­SinDerivadas (http://creativecommons.org/licenses/by­nc­nd/3.0/)
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el canal del cuarto de la ubre y el tejido mamario causando una Los problemas son las posibles implicaciones para la salud humana
infección intramamaria (IMI) (16). A pesar de que la definición de IMI a través de un mayor riesgo de que surjan cepas de bacterias
no está clara, la salud de la glándula mamaria a menudo se define resistentes a los antibióticos que luego puedan ingresar a la cadena
en función de su bacteriología (la presencia o ausencia de un IMI) o alimentaria y el mayor riesgo de residuos de antibióticos en la leche (29).
en función del recuento de células somáticas (CCE) compuesto o de En relación con estos riesgos, existe una presión continua para
un cuarto de nivel (27). Los IMI generalmente se detectan mediante reducir el uso de antibióticos en el tratamiento de animales
cultivo de leche. Esto permite el seguimiento de la salud de la ubre productores de alimentos y un aumento dramático en la producción
y la identificación de los agentes etiológicos de la enfermedad y de leche orgánica, lo que ha llevado a investigaciones para encontrar
garantiza una terapia antimicrobiana específica y dirigida (6). agentes antimicrobianos alternativos.
Aunque existen varios estudios centrados en los efectos
Los patógenos que causan la mastitis pueden tener diferentes antimicrobianos de productos vegetales (10, 22, 30) o productos
orígenes, clasificándose según la fuente en contagiosos, ambientales apícolas (1, 8, 26) sobre patógenos aislados de la leche de vacas
u oportunistas (16). mastíticas, existen pocos datos sobre in vivo.
Los microorganismos contagiosos generalmente se encuentran en pruebas. En el contexto del aumento de la resistencia a múltiples
la superficie de la ubre o de los pezones de las vacas infectadas y medicamentos y la demanda de productos orgánicos, los altos costos
son la principal fuente de infección. Staphylococcus aureus es la del tratamiento de la mastitis y del desarrollo de nuevos medicamentos
especie aislada con mayor frecuencia, seguida de Streptococcus sintéticos eficientes, el bajo costo de fabricación de los productos
agalactiae y los patógenos menos comunes como Corynebacterium vegetales y la aparente falta de resistencia antimicrobiana a estos
bovis y Mycoplasma bovis (16). Los patógenos ambientales se fitoquímicos, el objetivo de este estudio fue probar in vivo dos
encuentran en el entorno inmediato de la vaca, en el aserrín y la productos de origen vegetal y que contienen propóleos con
cama, el estiércol y el suelo. Las bacterias en esta clasificación propiedades previamente probadas in vitro.
incluyen cepas de estreptococos como Streptococcus Dygalactiae, eficacia (21).
S. uberis, S. bovis, Enterococcus faecium y E. faecalis, y coliformes
como Escherichia coli, Klebsiella pneumonia y Enterobacter
aerogenes (16). Causan mastitis si el sistema inmunológico del Material y métodos
huésped está comprometido o si no se practican adecuadamente el
saneamiento y la higiene (24). Animales y muestras. El estudio se llevó a cabo en una granja
lechera ubicada en el condado de Cluj (46°44′54″N 23°50′0″E),
llanura de Transilvania, Rumania, en un rebaño de 220 vacas de raza
Los patógenos oportunistas provocan formas leves de mastitis e local (Băl ata Românească), que eran cinco años y al segundo o
incluyen estafilococos coagulasa negativos (CoNS). tercer parto. A todas las vacas se les realizó una prueba de mastitis
Estos estafilococos pueden aislarse de la leche, son comensales y utilizando la prueba de mastitis de California (CMT) correlacionada
normalmente implican una respuesta inmune menor en el ganado y con signos clínicos y subclínicos. Los signos clínicos incluyeron falta
sólo causan infecciones leves. Incluyen S. epidermidis, S. de apetito, reducción de la cantidad de leche y leche con suero y
saprophyticus, S. simulans, coágulos de fibrina. Además, el recuento de células somáticas (SCC)
S. chromogenes, S. hyicus, S. warneri, S. sciuri y S. xylosus (16, 18). y el recuento de células bacterianas (BCC)/recuento en placa
estándar (SPC) confirmaron el diagnóstico. Se obtuvieron resultados
El tratamiento de la mastitis generalmente implica la positivos para mastitis en 20 vacas.
administración intramamaria de antibióticos para eliminar una cuarta
parte de los organismos causantes. La respuesta clínica debe ser Recogida y análisis de muestras de leche. Las muestras se
perceptible en un plazo de 5 a 7 días; de lo contrario, el caso suele recolectaron siguiendo las recomendaciones del Consejo Nacional
considerarse un fracaso terapéutico (2). Los productos antimicrobianos de Mastitis de EE. UU. (19). Las ubres de los sujetos se lavaron con
intramamarios comerciales disponibles en Europa contienen abundante agua limpia y se limpiaron con toallas de papel, y la
antibióticos únicos como cefalexina benzatínica, cefalonio, cefapirina superficie de los pezones se desinfectó con hisopos que contenían
benzatínica, cefazolina, cloxacilina benzatínica o rifaximina, o una etanol al 80%. Después de desechar el primer chorro de leche, se
mezcla de dos o tres antibióticos. recogieron aproximadamente 40 ml de cuarto de leche en tubos
esterilizados de 50 ml y se almacenaron a 4°C hasta que se realizó
Los productos que combinan múltiples antibióticos contienen oxacilina el análisis de higiene en el laboratorio de referencia de la Fundación
benzatínica y oxacilina sódica, sulfato de framicetina y estearato de para el Control de la Calidad de la Leche, Cluj­Napoca, en el siguiente
eritromicina, sulfato de neomicina y espiramicina, penicilina G hora después de la recolección.
procaína y novobiocina sódica, cloxacilina benzatínica y sulfato de
neomicina, penicilina G procaína y sulfato de neomicina, cloxacilina Recuento de células somáticas. El SCC se determinó mediante
benzatínica y sulfato de colistina, o penicilina. G procaína, nafcilina y el método fluorooptoelectrónico en un medidor de mastitis y calidad
sulfato de dihidroestreptomicina (2, 11). Sin embargo, el uso de la leche/contador de células somáticas Fossomatic 90 (Foss,
extensivo de antibióticos en el tratamiento y control de la mastitis no Dinamarca), de acuerdo con la norma HRN ISO 13366­
siempre es eficaz y desarrolla resistencia y la consiguiente falta de Norma 2:2006 (13). Un resultado de 100.000 células/ml se consideró
respuesta a la terapia con antibióticos (7). Otros importantes un CCS bajo, ya que generalmente se considera que refleja una
glándula mamaria sana (25). Un SCC alto fue >200.000 células/ml,
ya que este es un umbral racional para
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C. Pa ca et al./J Vet Res/64 (2020) 523­529 525

la presencia de infección (5). El número de bacterias aerobias Las muestras se procesaron después de la identificación de
mesófilas se evaluó indirectamente con base en el número de la flora bacteriana y luego se analizaron para determinar la
colonias generadas por las células del microorganismo presente en sensibilidad a los productos naturales de abejas y plantas como lo
la muestra de leche. describen Markey et al. (17).
Recuento de placas estándar. El número total de bacterias Pruebas experimentales. Se incorporaron diferentes extractos
(BCC) se determinó mediante el método de citometría de flujo en un de plantas, extracto de propóleo y aceites esenciales a una masa
analizador de bacterias de la leche BactoScan FC (Foss), según la de gel suave natural (goma xantana). Según un estudio previo (21),
norma ISO 21187:2004 (14). se elaboraron ocho formulaciones (R1­R8), que incluyen extracto
El analizador BactoScan se calibró basándose en el número de acuoso de propóleo, extractos alcohólicos de lúpulo Brewers Gold y
colonias, que se determinó mediante el método de referencia Perle, liquen de ciruela, malva común, caléndula, ajenjo, brotes de
(contando las colonias de bacterias en una placa como recuento de álamo negro, melisa. y aceite esencial de orégano, lavanda y
placa estándar – SPC), de acuerdo con la norma HRN ISO romero. Estos se probaron in vitro por separado y se compararon
4833:2003 (15). Para este recuento se inocularon dos placas Petri con siete antibióticos utilizados en el tratamiento de la mastitis
estériles inundándolas con 1 mL de leche. (oxitetraciclina, ceftriaxona, gentamicina, penicilina, florfenicol,
También se inoculó una placa de Petri con cada una de al menos enrofloxacina y amoxicilina), también como se describe en el estudio
tres diluciones decimales (10­1­10­3). Las placas preparadas se anterior (21). En esa investigación, tras el análisis estadístico
incubaron a 37°C durante 48 h. Después de la incubación, se realizado con el software Epi Info 7 (https://www.cdc.gov/epiinfo), se
colocaron placas que tenían un número de colonias que oscilaba entre 25 yobservó
250. que los dos productos R4 y R7 ejercían efectos significativos
Se eligió para el recuento y se calculó el número de unidades en cepas aisladas de leche de vacas con mastitis, y estos fueron
formadoras de colonias (UFC) considerando la dilución de la placa elegidos en el presente experimento para pruebas in vivo . Estos
individual. Los resultados se expresaron en UFC/mL de leche. Un
número total de bacterias >100.000 células/ml se consideró un
indicio de mastitis.
Análisis microbiológico de la leche. Para los animales positivos, se administraron por vía intramamaria, en un volumen de 10 mL.
el análisis del patógeno (identificación de género o especie) se Cada producto en gel contiene extracto acuoso de propóleo,
realizó en el Laboratorio de Microbiología de la Universidad de extractos alcohólicos de lúpulo Brewers Gold y Perle, liquen de
Ciencias Agrícolas y Medicina Veterinaria de Cluj­Napoca, mediante ciruela, malva común, caléndula, ajenjo, brotes de álamo negro,
cultivo en medio específico (Muller­Hinton, sangre y agar melisa y aceite esencial de orégano, lavanda y romero en diferentes
MacConkey). La incubación de la placa se realizó a 37°C durante concentraciones.
24 h en condiciones aeróbicas (12). Después de la incubación, se
realizó el análisis morfológico de las colonias y células bacterianas Las vacas diagnosticadas con mastitis clínica y subclínica (n
mediante tinción de Gram. Para cada colonia, se realizaron pruebas = 20) fueron separadas de las sanas en otra parte del refugio y
preliminares para seleccionar el tipo de microgalería de índice de divididas en tres grupos.
perfil analítico (API). Dos de los grupos (n = 8 en cada uno) fueron tratados con los dos
geles biológicos naturales seleccionados R4 y R7 elegidos en
función de su actividad antimicrobiana in vitro publicada en un
Las galerías de identificación de gérmenes API de microMérieux trabajo anterior (21). Los dos grupos experimentales fueron tratados
(bioMérieux Inc., EE. UU.) son un sistema de clasificación bacteriana todos los días (mañana y tarde) durante cinco días con gel
basado en una serie de experimentos. administrado por vía intramamaria, utilizándose gel R4 en el grupo
Constan de 20, 32 o 50 pruebas, cada una contenida en pequeños 1 y gel R7 en el grupo 2. El tercer grupo (n = 4) fue tratado por vía
tubos de reacción que incluyen un sustrato nutritivo. intramamaria con un gel comercial convencional. Producto antibiótico
Este sistema fue desarrollado para la identificación rápida de (AC) que contenga amoxicilina y ácido clavulánico, siguiendo las
especies clínicamente relevantes. La interpretación de los resultados recomendaciones e indicaciones del fabricante.
considera cuál de los tubos dio una reacción positiva, y estos datos
luego se compilan en un número que se verifica con una base de La eficacia del tratamiento fue evaluada por SCC y SPC. Se
datos que contiene todos los microorganismos conocidos. recolectaron cinco muestras de leche de cada animal antes del
tratamiento a las 0 h; durante el tratamiento a las 24 h, 48 h y 72 h
Para confirmar las identidades de las bacterias patógenas a y después del último día de tratamiento a las 120 h.
nivel de especie, Staphylococcus API 20 STAPH, Streptococcus API
20 STREP y Bacillus Al final del tratamiento, la eficacia de los dos productos
Se utilizaron API 50 CH para los géneros correspondientes (Cuadro naturales apícolas y vegetales (R4 y R7) se confirmó una vez más
1). in vitro sobre una selección de cepas bacterianas predominantes
Las cepas bacterianas también se identificaron mediante el identificadas en las mismas muestras de leche (S. intermedius, S.
sistema de identificación automática VITEK 2 (bioMérieux) (Tabla 1). epidermidis, S. hominis, S. aureus, Bacillus spp. y Streptococcus
El sistema construye el perfil bioquímico de una cepa interpretando agalactiae).
entre 70 y 80 pruebas impregnadas en tarjetas. La identificación Análisis estadístico. El análisis estadístico se realizó con el
suele tardar entre 3 y 4 h, siendo mucho más precisa y trabajando software Epi Info 7. Se calcularon la media y la desviación estándar
con una gran base de datos según los estándares utilizados (ISO y las diferencias entre las medias se analizaron mediante el ANOVA.
17025:2017).
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test (prueba paramétrica de desigualdad de medias), Se identificaron cepas. En orden descendente de prevalencia,
considerándose estadísticamente significativo un valor de P < 0,05. las cepas fueron S. epidermidis (en 11 vacas), S. aureus (3), S.
schleiferi (2) y S. hominis (1). Otros cocos Gram positivos
identificados pertenecían a los géneros Micrococcus (3),
Resultados Streptococcus (1) y Aerococcus (1). Se identificaron bacilos
grampositivos sólo en tres muestras, siendo dos Bacillus spp. y
Veinte de 220 vacas de la granja participante fueron una Corynebacterium spp. Se registró coinfección en cinco
diagnosticadas con mastitis clínica y subclínica leve según casos: dos con S. schleiferi y Micrococcus spp.; uno con S.
CMT, SCC, SPC y signos clínicos. En todos los casos sólo se epidermidis y S. hominis; otro con S. aureus y Aerococcus spp.;
detectaron bacterias Gram positivas. En 15 de 20 vacas se y el último con Staphylococcus spp., Micrococcus spp. y
identificó una especie bacteriana, en cuatro vacas se descubrió Corynebacterium spp.
coinfección con dos especies y en una vaca se encontró
coinfección con tres especies. En 17 vacas, diferentes
estafilococos.

Tabla 1. Patógenos identificados en leche normal y mastítica

gramo
Microorganismo identificado Tipo de equipo Perfil de código
+/­
Estafilococo epidermidis + Estafilococo API 6773151
Estafilococo aureus + Estafilococo API ATCC 6538P
Staphylococcus schleiferi + Estafilococo API 6732553
Estafilococo hominis + Estafilococo API 6732112
Aerococcus viridans + Identificación VITEK 0625703821500211
Aerococcus viridans + Identificación VITEK 0625707930700413
Staphylococcus aureus + Identificación VITEK 0209610546712053
Bacillus cereus + API 50 CHB 7212
Corynebacterium spp. + Identificación VITEK 4407611554521210
Micrococcus spp. + Identificación VITEK 0625703050500211
Streptococcus agalactiae + Identificación VITEK 0205610554226611

Tabla 2. Primera recolección de secreción mamaria (tiempo 0) de vacas en pruebas experimentales in vivo

Producto Especies bacterianas predominantes aisladas de

Paciente UFC/mL CCS/mL
probado una muestra de leche.

1. S. epidermidis 902.000 169.800

2. S. epidermidis S. 385.000 1.000.000

schleiferi,
3. 89.000 114.300
Micrococcus spp.
S. schleiferi,
4. 49.000 190.800
Micrococcus spp.
5. S. epidermidis 172.000 3.600
tratado

6.
Grupo

S. epidermidis 312.000 51.900

con
R4
1

7. S. epidermidis 171.600 195.800

8. S. epidermidis 364.000 240.000

9. S. epidermidis 66.000 102,100

10. S. epidermidis S. 334.000 80.300

epidermidis,
11. 125.000 39.000
hominis

12. S. epidermidis 41.000 54.000

13. Bacilospp . 48.000 105.900

14. 10 000
tratado

S. epidermidis 37.000
Grupo
con
R7
2

15. S. aureus 177.000 129.000

dieciséis.
Streptococcus spp. 247.900 1.000.000

17. Bacilospp . 223.000 10.000

S. aureus,
18. 525.000 1.004.600
antibióticos

Aerococcus spp.
tratado

19. S. aureus 218.000 12.000

control
Grupo
con
de

Corynebacterium spp. Estafilococos spp.

20. 220.000 88.900
Micrococcus spp.

UFC – unidades formadoras de colonias; SCC – recuento de células somáticas

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C. Pa ca et al./J Vet Res/64 (2020) 523­529 527

La recolección de secreciones mamarias se realizó antes del De las vacas tratadas con R7, sólo una presentó un recuento
tratamiento (colección 1) (Tabla 2), durante el tratamiento: a las 24 bacteriano elevado y Streptococcus spp. fue aislado de la leche de
h (colección 2), 48 h (colección 3) y 72 h (colección 4), y después esta vaca. Se registró un recuento bajo de bacterias en una vaca
del último día de tratamiento. a las 120 h (recolección 5). En todas en la tercera medición, en otra en la cuarta y en cinco vacas en la
las vacas tratadas, se observó una disminución del número de última medición, una vez finalizado el tratamiento. Se registró un
bacterias y células somáticas entre la primera medición (antes del RCS alto en dos vacas: la vaca con un alto recuento de bacterias y
tratamiento) y la última medición (después del final del tratamiento). otra.
De manera similar, entre los animales tratados con AC, uno
De manera similar, el número medio de bacterias (UFC/mL) en la presentó un recuento bacteriano alto en la quinta medición y el
quinta medición fue estadísticamente significativamente menor que mismo animal y otras dos vacas presentaron un RCS alto. En las
la media de la primera medición tanto en el grupo tratado con R4 muestras de leche de vaca con un recuento bacteriano elevado
como en el grupo tratado con el producto comercial (P = 0,00841 y persistente, S. aureus y Aerococcus spp. fueron detectados.
P = 0,00301 , respectivamente). En las vacas tratadas con R7,
también se observó una diferencia significativa (P = 0,00872) para Si un tratamiento puede considerarse eficaz cuando tanto el
la cuarta medición (la última realizada durante el tratamiento) (Fig. SCC como el SPC están por debajo del límite máximo, R7 fue eficaz
1). en seis de ocho vacas, R4 en tres de ocho vacas y CA en una de
cada cuatro vacas. Sin embargo, el recuento de SCC puede tardar
más en caer por debajo del límite máximo, ya que los tratamientos
están dirigidos principalmente a eliminar las células bacterianas y la
inflamación también puede disminuir con el tratamiento solo como
efecto secundario.
Las cepas bacterianas predominantes seleccionadas aisladas de
leche de mastitis presentaron diferentes valores de área de inhibición
cuando se probaron in vitro (Fig. 2). Incluso con esta observación,
el producto R7 sigue siendo el más eficaz, los antibióticos
convencionales son menos eficaces y el R4 el menos eficaz.

Discusión

Figura 1. Número de unidades formadoras de colonias (UFC) en la leche de vacas El tratamiento de la mastitis clínica y subclínica generalmente
con mastitis tratadas con dos formulaciones diferentes de origen vegetal natural y
antibióticos convencionales
implica la administración de antibióticos para eliminar una cuarta
parte de los organismos causantes. Las consideraciones económicas
exigen que se obtenga la mejor curación posible con el menor
tiempo de espera del animal, para que la leche pueda volver a
comercializarse (11).
La terapia con antibióticos no puede desvincularse de los costos
para los productores de leche. Por este motivo, se están
desarrollando tratamientos alternativos para que el producto final
(leche) esté libre de contaminantes peligrosos de la clase de
antibióticos que de otro modo serían necesarios.
La identificación de diferentes cepas de estafilococos en
muestras de leche de mastitis concuerda con la de otros estudios
de investigación (28). En nuestro estudio anterior (21), se probaron
in vitro ocho productos biológicos naturales contra patógenos
aislados de la leche de mastitis. Entre ellos, tres presentaron áreas

Fig. 2. Recuento de células somáticas (RCS) en muestras de cuartos de leche de

de inhibición comparables a las observadas con florfenicol y
vacas tratadas con dos formulaciones diferentes a base de plantas naturales y enrofloxacino y mayores que las de penicilina, gentamicina y
antibióticos convencionales.
amoxicilina (21). Debido al pequeño número de casos de mastitis
disponibles en la granja analizada, en este estudio sólo se incluyeron
Entre las vacas tratadas con R4, en dos casos se registró un dos de los productos naturales para el tratamiento de la mastitis.
recuento bacteriano bajo (SPC <100000 UFC/mL) a las 48 h durante Tres productos con eficacia in vitro del estudio anterior, incluidos
el tratamiento, y en otros tres casos al final del tratamiento, mientras los dos probados en el presente estudio, tenían los mismos
que en tres se observó un recuento bacteriano alto. casos. En todos ingredientes naturales pero los contenían en diferentes
estos casos, se aisló S. epidermidis de la leche antes del tratamiento. concentraciones. Los ingredientes activos incluían extracto acuoso
Además, un alto de propóleo, extractos alcohólicos de lúpulo Brewers Gold y Perle,
Se observó SCC (SCC <200.000 células/mL) en tres vacas, entre liquen de ciruela, común
las cuales dos tenían un recuento bajo de bacterias (Fig. 2).
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malva, caléndula, ajenjo ajenjo, yemas de álamo negro, melisa y También se registró el efecto de Rosmarinus officinalis y Moringa
aceite esencial de orégano, lavanda y romero. La diferencia entre oleifera en microorganismos gramnegativos aislados de la leche (4,
las formulaciones R4 y R7 probadas en el presente estudio fue una 20). Con base en estas observaciones, al aumentar las
mayor concentración de todos los ingredientes activos en esta última. concentraciones de los ingredientes en los geles evaluados, se
podría obtener una mejor eficacia sobre las bacterias Gram­
Aunque no se informó ninguna diferencia estadísticamente negativas.
significativa entre las medias de SSC y BCC entre los tres grupos En comparación con la terapia convencional, los productos
(R4, R7 y CA), cinco días después del final del tratamiento, una alta naturales utilizados en este estudio (que contienen diferentes
proporción de vacas tratadas con R7 tenían ambos parámetros por extractos de plantas y propóleo) sugieren una buena eficacia en el
debajo del límite. (seis de ocho), casi la mitad de las vacas tratadas tratamiento de la mastitis causada por bacterias Gram­positivas.
con R4 (tres de ocho) lo tenían, y para las vacas que recibieron AC, Los extractos de plantas medicinales parecen ser una opción segura,
la proporción fue de una cuarta parte (una de cada cuatro). Si se eficiente y de bajo costo para tratar este tipo de enfermedades,
considera solo el número total de bacterias, en el caso de R7 siete minimizando las pérdidas económicas y, lo que es igualmente
de ocho vacas tuvieron buen BCC en su leche, tres de cuatro lo importante, previniendo el desarrollo de resistencia a los
tuvieron en el caso de CA y cinco de ocho en R4. Estas diferencias medicamentos tanto en animales como en humanos que consumen productos animale
entre BCC y SCC en el caso de CA, comparadas con la diferencia Es necesario realizar más investigaciones para identificar todos los
casi inexistente en los casos de R4 y R7, pueden sugerir que los compuestos activos de los extractos, evaluar su eficacia y establecer
geles también tienen un papel en la reducción de la inflamación. diferentes índices de seguridad (principalmente la concentración
Este posible efecto se sugirió previamente para varios aceites potencialmente tóxica), al igual que los ensayos clínicos.
esenciales (Nepeta cataria, Rosmarinus officinalis y Origanum
vulgare) que contienen varios compuestos bioactivos con potente Declaración de conflicto de intereses: Los autores declaran que no
efecto antiinflamatorio, incluidos carvacrol, limoneno, citronelal y existe ningún conflicto de intereses con respecto a la publicación de
cinamaldehído (22). este artículo.

Declaración de Divulgación Financiera: El estudio recibió el apoyo

financiero del (1) Proyecto Programa de Alianzas en Áreas Prioritarias
Se obtuvieron buenos resultados de BCC en siete de ocho ­ PN II, desarrollado con el apoyo del MEN­UEFISCDI, proyecto no.
vacas tratadas con R7. En estas siete vacas, las bacterias S. 148/2014;
epidermidis, S. hominis, S. aureus y Bacillus spp. fueron detectados (2) Programa 2: Competitividad de la economía rumana a través de
en la leche antes del tratamiento. la investigación, el desarrollo y la innovación: PN­III­P2­2.1­
Según indica BCC, luego del tratamiento hubo una disminución de CI­2018­1472 no. 252 CI del 09/03/2018. Título del proyecto:
la carga bacteriana, lo que sugiere su efecto sobre estas especies. Producto biológicamente activo para el control de la nosemosis en
La única vaca tratada con R7 en la que se registró un BCC alto abejas; y (3) Subprograma 1.2 ­ Desempeño Institucional ­
también después del tratamiento tenía Streptococcus spp. identificado
en su leche, lo que sugiere un efecto moderado sobre esta especie. Proyectos de Financiamiento de Excelencia en CDI, Contrato no.
De manera similar, las pruebas in vitro 37PFE/11.06.2018. Título del proyecto: “Incrementar el desempeño
de R7 mostró una buena actividad inhibidora sobre estafilococos (S. institucional a través de la consolidación y desarrollo de líneas de
chromogenes, S. hyicus, S. intermedius y S. xylosus), investigación dentro de la USAMVCN”.
Lactococcus lactis, Kytococcus sedentarius, Bacillus cereus y sobre
las bacterias Gram negativas Vibrio fluvialis y Yersinia ruckeri (21).
Sin embargo, sólo se registró una actividad moderada frente a Declaración de derechos de los animales: No se requiere ninguna.

bacterias Gram negativas como Escherichia coli, Serratia liquefaciens,

Enterobacter intermedius (Kluyvera intermedia), o Aeromonas Referencias

hydrophila y A. caviae (21). La eficacia de R7 sobre bacterias Gram
negativas no fue evaluada in vivo, ya que éstas no fueron aisladas 1. Bačić G., Mačešić N., Radin L., Aladrović J., Matanović K., Mašek T., Brozić D.,
Benić M., Radić B., Bačić I., Šuran J.: formulación de propóleo intramamario
de las muestras de leche.
para Prevención y tratamiento de mastitis en rumiantes lecheros
de vacas positivas a mastitis. Sin embargo, otros estudios han
(RC.2.2.08­0003). J Anim Res 2016, 6, 47–49.
demostrado una buena actividad contra las bacterias Gram negativas
en preparados que contienen algunos de los ingredientes principales 2. Bhosale RR, Osmani RA, Ghodake PP, Shaikh SM, Chavan SR: Mastitis: una
de nuestros geles. Por ejemplo, los compuestos activos presentes crisis intensiva en la ciencia veterinaria. Int J Pharma Res Health Sci 2014, 2,
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en extractos de líquenes (en acetona, metanol, etanol, agua, éter
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editado por DC Blood & VP Studdert, WB Saunders, Filadelfia, 1999, 1380–
para los microorganismos gramnegativos. 1381.
patógenos como Aeromonas, Enterobacter, Helicobacter, 4. Cheng WN, Jeong CH, Seo HS, Han SG: El extracto de moringa atenúa las
Klebsiella, Pseudomonas y Proteus spp. (30). respuestas inflamatorias y aumenta la expresión genética de la caseína en
las células epiteliales mamarias bovinas. Animales (Basilea) 2019, 9, 391,
Del mismo modo, el extracto etanólico de propóleo se puede utilizar
doi: 10.3390/ani9070391.
contra bacterias Gram negativas como K. pneumoniae,
5. Dohoo IR, Meek AH: Recuento de células somáticas en leche bovina. Can Vet J
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