I.

INTRODUCCIÓN

1
 II. OBJETIVOS
2.1 General

2.2 Específicos

2
 III. CONTENIDO
3.1 Clasificación

Los productos químicos presentes en los laboratorios se pueden clasificar aplicando

diferentes criterios.
Los reactivos se pueden clasificar teniendo en cuenta muchos criterios. Podemos destacar:
 según el criterio de riesgo para la salud.
 Según su estado de agregación:
1. sólidos,
2. líquidos
3. disoluciones preparadas.
 Según su naturaleza química.
Distinguimos dos grandes grupos:
 ORGÁNICOS
 INORGÁNICOS
Clasificación del agua de acurdo a su dureza.
El agua dura o calcárea es aquella que contiene un alto nivel de sales de magnesio y calcio.
La dureza del agua se expresa normalmente como cantidad equivalente de carbonato de
calcio (aunque propiamente esta sal no se encuentre en el agua) y se calcula a partir de la
suma de las concentraciones de calcio y magnesio (en miligramos por litro o en partes por
millón).
1. Grado químicamente puro (QP).
2. Grado reactivo analítico (PA, DC, RA).
3. Grado HPLC (high purity liquid chromatogha-phy).
4. Además de estos, existen grados de menor pureza (mercantil, industrial y
técnico), que generalmente no usaremos en el laboratorio.
Clasificación del agua de acuerdo a su calidad fisicoquímica
Teniendo en cuenta diversos parámetros fisicoquímicos, se distinguen cuatro tipos de agua:
I, II, III y IV, siendo la tipo I la más pura y la tipo IV, la menos pura.
 Tipo I o ultra pura: Se usa para cultivos celulares, absorción atómica y HPLC
(cromatografía líquida de alta eficacia, high performance liquid chromatography).
 Tipo II o de grado analítico: Se usa en la mayoría de los analizadores automáticos y para
preparar la mayoría de los medios de cultivo y reactivos.
 Tipos III y IV o de grado laboratorio: Para el aclarado final del material de vidrio, pruebas
cualitativas y preparación de algunos reactivos y medios de cultivo.
Tipos de productos químicos
Según su función:

3
 Disolventes
 Reactivos.
 Colorantes.
 Indicadores.
 Patrones primarios.
 Medios de cultivo.

Disolventes: Son productos líquidos que se usan para elaborar disoluciones. El más utilizado
es el agua.
Reactivos: Son sustancias de naturaleza y concentración conocidas que se utilizan para
producir reacciones químicas. Los objetivos de estas reacciones pueden ser diversos:
determinar la presencia o la concentración de una sustancia, identificar un microorganismo,
inactivar una sustancia tóxica, etc.
Colorantes: Son sustancias que tiñen tejidos, células, partes de células, bacterias u otras
estructuras orgánicas para facilitar su visualización. El mecanismo de acción de algunos
colorantes se basa en reacciones químicas, mientras que muchos otros sencillamente se
concentran en zonas concretas.
Indicadores: Son productos que se adicionan al medio y que cambian de color en el punto
final de la reacción. Por ejemplo, las tiras indicadoras de pH o las tiras para verificar un
proceso de esterilización contienen indicadores.
Patrones primarios: Son sustancias que se utilizan como referencia al hacer una valoración
o una estandarización.
Medios de cultivo: El estudio microbiológico requiere la siembra de la muestra, debidamente
preparada, para que los microorganismos presentes se reproduzcan y puedan ser
identificados. La mayoría de los medios de cultivo se comercializan con todos sus
componentes y van acompañados de las instrucciones para prepararlos.

3.2 Concepto

Un reactivo es toda sustancia que interactúa con otra en una reacción química y que da
lugar a otras sustancias de propiedades distintas, denominadas productos de reacción.
Estas reacciones proporcionan muchas opciones en el laboratorio: Se puede provocar una
reacción porque el producto resultante es más fácil de cuantificar que el/de origen, o porque
la reacción provocará un cambio de color que permitirá determinar si un analito está
presente, o porque reducirá la peligrosidad de un producto y facilitará la gestión de los
residuos resultantes, etc.
Reactivos orgánicos: Son habituales los disolventes orgánicos en muchos laboratorios.
Otros productos, como los destinados a síntesis orgánicas, solo los encontramos en algunos
laboratorios.

4
Reactivos inorgánicos: La mayoría de los reactivos comunes pertenecen a este grupo. La
clasificación química detallada se corresponderá a la de todas las sustancias químicas:
ácidos, bases, sales, etc.
Dentro de estos reactivos inorgánicos se puede distinguir entre reactivos para análisis
clásicos, preparados para análisis instrumentales y disolventes.
La pureza: En la práctica debemos tener en cuenta que en el “mundo real” no hay
sustancias puras. Podemos encontrar preparados comerciales con grados de pureza muy
elevados, pero no existe la garantía de pureza absoluta, ya que siempre hay algún nivel de
impureza.
Por ejemplo, si un envase de cloruro sódico especifica que tiene una pureza del 99,6%
significa que 100 g de este producto están formados por 99,6 g de NaCI y 0,4 g de
impurezas.
La cantidad de impurezas presentes en los reactivos químicos determinan una clasificación
de los reactivos. Las categorías de interés en los laboratorios de análisis son, en orden de
pureza:
 Grado químicamente puro (QP): Es el grado que se aplica a los productos de
una pureza inferior a los de grado reactivo.
 Grado reactivo analítico (PA, DC, RA): Tienen un porcentaje muy bajo de
impurezas, lo cual hace a estos reactivos adecuados para utilizar en técnicas
analíticas de diagnóstico. Dentro de este grupo, los más utilizados son los que
cumplen con las normas de la ACS (American Chemical Society), que indican en
su etiqueta PA-ACS.
 Grado HPLC (high purity liquid chromatogha-phy): Los productos que se
encuentran clasificados como HPLC son los de mayor pureza, y son aptos para
su uso en cromatografía líquida de alta resolución.
 Además de estos, existen grados de menor pureza (mercantil, industrial y
técnico), que generalmente no usaremos en el laboratorio.
La información sobre la composición química y la pureza de cada reactivo constan en su
etiqueta, y es una información esencial ya que cada técnica analítica tiene establecido el
nivel de pureza que deben tener los reactivos utilizados en ella.
Las impurezas que acompañan a un reactivo son sustancias que no reaccionarán en la
reacción que estamos estudiando. Para diferenciar la parte de reactivo que sí reaccionará
(parte pura) de la que no (parte impura), se define la pureza del reactivo, que se expresa en
porcentaje y se refleja en la etiqueta del producto.
Los kits de reactivos:
 La automatización de las pruebas diagnósticas ha conducido a que las empresas
suministren kits de reactivos específicos para los equipos que comercializan.
También existen kits para determinadas técnicas.
 Un kit de reactivos es un conjunto de dos o más reactivos que se emplean para
determinar una sustancia y que se comercializan conjuntamente.

5
Agua

El agua también se clasifica según su calidad microbiológica, es decir, según la cantidad de

microorganismos presentes.

Muchos de los procesos que se realizan en el laboratorio requieren el uso de agua como
disolvente. Además, también se utiliza como reactivo, en operaciones de limpieza, o como
elemento necesario en distintos procesos (esterilización con autoclave, destilaciones, etc.).

Que para que el agua mantenga su nivel de calidad es necesario aplicar los procedimientos
de almacenamiento y manejo que corresponda. Por ejemplo, el agua purificada en contacto
con la atmósfera absorbe una pequeña cantidad de CO2 , lo cual hace que su conductividad
aumente un poco.

No hay que confundir absorción y adsorción:

Absorción: la sustancia absorbida penetra en la que la absorbe.
Adsorción: la sustancia adsorbida es atraída y retenida en la superficie de la que la
adsorbe, pero no penetra en ella.
Las propiedades del agua

La molécula de agua está compuesta por dos áto-mos de hidrógeno y uno de oxígeno,
dispuestos de tal manera que forman un ángulo de 105° con el oxígeno en el vértice.
En la molécula, los electrones se disponen cerca de este vértice, de forma que la molécula
queda con las cargas negativas en ese vértice y las positivas en el otro extremo, es decir,
es una molécula polar (con dos polos, uno con carga positiva y otro con carga negativa).
A causa de esta polaridad, entre las distintas moléculas de agua se forman unas uniones
mediante puentes de hidrógeno. Estas uniones son débiles y se rompen y se vuelven a
formar con frecuencia en el agua líquida.
Estas características químicas hacen que el agua sea un excelente disolvente.
De hecho, del agua se dice que es el disolvente universal, ya que puede disolver sustancias
polares o con carga iónica (alcoholes, aminoácidos, proteínas, sustancias salinas, etc.).
La calidad del agua
 Existen distintos niveles de calidad del agua, con base en parámetros de dureza,
fisicoquímicos y microbiológicos, y para cada uso se debe seleccionar el tipo de
agua adecuado. Ejemplos:

6
  Al preparar un medio de cultivo usando como disolvente un agua sin garantías de
esterilidad, en el cultivo que realicemos lo más probable es que obtengamos un
crecimiento de microorganismos procedentes del agua
 Al aplicar una técnica potenciométrica a una disolución realizada con agua que
contiene iones, la lectura resultante no será la correcta.
 Al igual que comentábamos en referencia a la pureza de los reactivos, también la
calidad del agua es un parámetro establecido para cada técnica analítica y
procedimiento que se realice en el laboratorio.

Procesos para purificar el agua.

 Filtración
 Osmosis inversa
 Destilación

 Desionización

La filtración:
es un paso previo antes de aplicar cualquier otro medio de purificación. El procedimiento
más común es usar un filtro de partículas que impide el paso de sólidos y a continuación
filtros de carbón activado que adsorben gran parte de las sustancias orgánicas disueltas en
el agua. El carbón activado está tratado para incrementar su capacidad de adsorber, lo cual
se consigue haciéndolo más poroso.

La ósmosis inversa:
consiste en aplicar presión sobre una disolución concentrada separada mediante una
membrana semipermeable de otra solución menos concentrada.
Al aplicar la presión se consigue que pase agua pura y se separe del agua con mayor
concentración de sustancias. Se puede decir que ocurre lo contrario que en una ósmosis,
ya que mientras en la ósmosis el equilibrio se consigue por el paso de agua desde la
disolución diluida a la concentrada, en la ósmosis inversa se consigue por el paso del agua
desde la disolución concentrada a la diluida.
Las membranas tienen un tamaño de poro muy pequeño, de alrededor de 0,0005 μm de
diámetro, y evita el paso de sales, materias inorgánicas, sustancias orgánicas, pirógenos,
virus y bacterias. Resulta un procedimiento relativamente barato y es eficaz para muchos
usos del laboratorio, lo que lo convierte en el método de elección para la purificación de
agua a gran escala.
El equipo de ósmosis inversa puede tener varias configuraciones, dependiendo de la calidad
del agua de alimentación, pero todos poseen una o varias membranas semipermeables a
través de las cuales se hace circular el agua. Como las membranas se van colmatando, se
deben limpiar de forma periódica para asegurar que el sistema continúe funcionando con el
máximo rendimiento.

Destilación:

7
Permite separar sustancias en función de sus puntos de ebullición. El proceso básico para
purificar agua mediante destilación consiste en calentar al agua de origen; una vez que se
alcanza el punto de ebullición del agua, esta comienza a evaporarse y estos vapores se
recogen y se enfrían para que vuelva a estado líquido.
El producto resultante es agua destilada, y en el recipiente origen quedan las impurezas
En ocasiones se aplica una segunda destilación al agua destilada; en este caso se obtiene
agua bidestilada. Mediante este proceso se eliminan muchos de los contaminantes del agua,
ya que la mayor parte de las impurezas son sales, que quedarán en el tanque de ebullición;
no elimina, sin embargo, los contaminantes volátiles.
El gran inconveniente de la destilación es que gasta mucha energía, lo que hace que sea
un procedimiento demasiado caro cuando se necesitan grandes volúmenes de agua.

Desionización:
La desionización, también llamada desmineralización, se logra al pasar el agua a través de
unas resinas de intercambio iónico, que emiten iones al agua y atraen a determinadas
moléculas presentes en ella; el producto que se obtiene es agua desionizada. Los equipos
de intercambio iónico tienen dos tipos de resinas:
 Resinas de intercambio de cationes.
 Resinas de intercambio de aniones.
Resinas de intercambio de cationes: Retiran iones positivos del agua (como Na+, Ca2+,
etc.) y le aportan protones (H+).
Resinas de intercambio de aniones: Retiran iones negativos (como C1-, HC03-, CO32-)
y aportan grupos hidroxilos (OH-).
Los iones liberados por las resinas (H+ y OH-), se combinan entre sí y forman agua.
Este método es fácil de instalar y proporciona mayor volumen de agua pura que la
destilación, pero las resinas se deben regenerar periódicamente para que funcionen
correctamente, y este es un procedimiento caro.
Además, la desionización sola no elimina la materia orgánica.

El agua ultra pura:

no se puede obtener a partir de un solo proceso, se requiere la combinación de más de uno
de ellos para lograr la calidad deseada tanto en lo fisicoquímico como en lo microbiológico.
Una forma de lograrla es filtrando el agua de la red de suministro con filtros de sedimentos
y de carbón activado, para eliminar las partículas de mayor tamaño y el cloro residual. El
agua resultante se pasa a una unidad de ósmosis inversa, donde se eliminan las sales
disueltas con una eficiencia de entre el 95 y eI 98%. Finalmente, se pasa por un equipo de
intercambio iónico. El agua que se obtiene no necesariamente cumple con los estándares
de calidad y es conveniente hacer varios pasos a través de las resinas. Cuando el agua
tratada circula, se intercala una lámpara UV de 254 nm para su desinfección y una segunda
lámpara UV de 185 nm para efectuar la destrucción de la materia orgánica al nivel de trazas,
que siempre se genera cuando el agua está en contacto con la resina mixta y demás
componentes del equipo. Hay que tener en cuenta además que el agua almacenada pierde
sus cualidades, por lo que el reciclado continuo es muy conveniente.
Procesos específicos de los distintos laboratorios
Cada tipo de laboratorio utiliza productos químicos específicos para su actividad. A
continuación veremos de forma resumida cuáles cuales son los más habituales en los
laboratorios de Análisis Clínicos y en los de Anatomía Patológica. En todos ellos

8
encontraremos reactivos comunes a cualquier laboratorio, como el agua, o ciertos ácidos y
bases, y además algunos productos específicos.
Además de reactivos comunes, estos laboratorios utilizan mayoritariamente kits de
reactivos, adecuados a los equipos de análisis automatizados de que dispongan.
Hematología:
En este caso encontramos reactivos comunes y kits de reactivos para los analizadores
comerciales, pero también distintos colorantes para poder teñir las células de la sangre y la
médula ósea. Los colorantes vienen ya preparados y listos para usar. Los que se usan más
habitualmente en Hematología son los derivados de la mezcla de colorantes ácidos y
básicos (eosina y azul de metileno), como:
 La solución de May-Grünwald, que contiene eosina (como colorante aniónico) y azul
de metileno (como colorante catiónico) disueltos en metanol.
 La solución de Giemsa, que contiene eosina, azul de metileno y productos de la
oxidación del azul de metileno (azur A, azur B, violeta de metilo y azul de metilo).
Inmunología:
Los reactivos típicos del laboratorio de Inmunología son los anticuerpos que al ponerlos en
contacto con sus antígenos dan lugar a la unión antígeno-anticuerpo que se visualizará
mediante otros reactivos enzimáticos o fluorescentes.
Biología molecular:
En los laboratorios de Biología Molecular se usan kits específicos para extracción de ADN
o ARN y una mezcla de reactivos para llevar a cabo la reacción en cadena de la polimerasa
(PCR), que nos permitirá obtener múltiples copias de un fragmento de ADN. Para este
procedimiento, que estudiaremos en el módulo de Biología Molecular, se necesitan
productos como: Los cuatro desoxirribonucleótidos-trifosfato (dNTP), que serán los
sustratos para polimerizar nuevo ADN. Cebadores o iniciadores (primers), que delimitan la
zona de ADN que se va a amplificar y son los que permiten que la polimerasa inicie la
reacción.
 lones divalentes, que actúan como cofactores de la polimerasa. Se suele usar
magnesio (Mg2+), agregado comúnmente como cloruro de magnesio (MgCI2).
 lones monovalentes, como el potasio. Una solución tampón o buffer, que mantiene
el pH adecuado para el funcionamiento de la ADN polimerasa.
 ADN polimerasa o mezcla de distintas polimerasas con temperatura óptima alrededor
de 70°C (la más común es la polimerasa Taq).
 ADN molde, que contiene la región de ADN que se va a amplificar.
Citogenética:
 Un medio hipotónico (0,075M KCI) para provocar un choque osmótico y un aumento
de volumen de la célula, con lo cual se consigue una buena separación cromosómica.
 Productos para la fijación de las células.
 Colorantes para la tinción de los cromosomas, que los hace identificables.
Microbiología:
 Los medios de cultivo. Permiten el crecimiento de colonias de microorganismos para
su posterior identificación. Algunos de ellos contienen factores que favorecen o
inhiben a determinados géneros o especies. Los medios de cultivo ya vienen
preparados comercialmente.
 Los reactivos para la identificación de microorganismos. Cada género, incluso cada
especie, tiene diferentes reacciones cuando se les enfrentan diferentes reactivos y

9
 las pruebas de reacción ante reactivos forman parte de los protocolos de
identificación.
Tinción de Ziehl Neelsen: es una técnica de tinción diferencial usada para la identificación
de ciertos microorganismos patógenos, las micobacterias, también denominada ácido
alcohol resistente (BAAR). Utiliza un primer colorante (fucsina), un decolorante (alcohol
Clorhídrico) y un segundo colorante o colorante de contraste (azul de metileno).
Tinción de esporas mediante la técnica de Wirtz –Conklin, que utiliza dos colorantes, verde
malaquita y safranina.
3.3 Riesgo

Riesgo químico: es aquel que se deriva del uso o la presencia de sustancias químicas
peligrosas.
Las sustancias químicas penetran en el organismo principalmente por inhalación, absorción
de la piel o ingestión.

Los contaminantes químicos presentes en los procesos industriales son muy numerosos:
en la pintura industrial, en la fabricación de abonos y plaguicidas, limpieza de instalaciones,
combustión de hornos, calderas y motores, fabricación de plásticos, desengrasados de
superficies metálicas, etc.

Efectos:
 Corrosión. - Producen destrucción parcial o total de los tejidos con los que contacta
(piel, ojos y sistema digestivo son las partes más afectadas).
 Irritación. - Los irritantes causan inflamación de los tejidos con los que contacta.
 Reacciones alérgicas. - Pueden ser dermatológicas o respiratorias, provocando
cuadros de picores, rinitis, dermatitis de contacto, etc.
 Neumoconióticos. - Producen alteración crónica pulmonar por la inhalación
prolongada de partículas.
 Asfixia. - Los asfixiantes ejercen su efecto al impedir la transferencia de oxígeno a
los tejidos.
 Anestésicos y Narcóticos. - Actúan como depresores del sistema nervioso central
provocando mareos, náuseas, etc., normalmente reversibles (disolventes
industriales).
 Cáncer. - Los cancerígenos humanos conocidos son sustancias que actúan
interfiriendo las funciones reproductoras o sexuales de la persona.
 Tóxicos sistémicos. - Son los agentes que causan lesiones en determinados órganos
o sistemas específicos del organismo como cerebro, hígado, riñón, pulmón etc.
 Es peligrosa para la salud.
 Puede provocar incendios y explosiones.
 Es peligrosa para el medio ambiente.
Riesgo tóxico: Cuando una sustancia química es peligrosa para la salud de las personas
hablamos de riesgo tóxico. Este riesgo se puede llegar a materializar si la exposición al
agente químico no está controlada. El riesgo tóxico de un producto químico depende de dos
factores: la toxicidad y de la dosis absorbida, donde influyen una serie de factores:

10
composición, propiedades, concentración, duración de la exposición, vía de entrada al
organismo y carga de trabajo.
 Toxicidad: capacidad de una sustancia de producir daño.
 Dosis: cantidad de producto absorbido por el organismo.
Por lo general, una sustancia muy tóxica producirá daños a muy baja dosis, mientras otras
necesitan dosis mayores o una acumulación de pequeñas dosis.

3.4 Tipos de reacción químicas

Así mismo, los tipos de reacciones químicas las cuales pueden ser:
Síntesis/ Combinación: Dos o más reactivos reaccionan para dar lugar a un producto.
Descomposición: Una sustancia se descompone en dos o más productos mediante la
aplicación de alguna forma de energía.
Simple sustitución/ Desplazamiento: Un elemento desplaza en un compuesto a otro
elemento, para que esto suceda el elemento que va a desplazar debe de ser más reactivo.
Doble sustitución/Doble desplazamiento: Este tipo de reacciones químicas se lleva a cabo
en solución acuosa en donde hay iones presentes y ocurre un intercambio entre ellos.
También existen otras reacciones como son:
Neutralización: generalmente exotérmicas, lo que significa que desprenden energía en
forma de calor. Se les suele llamar de neutralización porque al reaccionar un ácido con una
base, estos neutralizan sus propiedades mutuamente.
Oxidación: Se denomina comúnmente oxidación a las reacciones químicas en las que el
oxígeno se combina con otras sustancias, formando moléculas llamadas óxidos. Esto es
particularmente frecuente en el mundo de los metales, aunque para nada exclusivo de ellos.
En química se llama oxidación al fenómeno químico en el que
un átomo, molécula o ión pierde uno o varios electrones, aumentando así su carga positiva.
 Oxidación lenta. Se produce por causa del oxígeno contenido en el aire o en el agua,
esa que hace que los metales pierdan su brillo y sufran corrosión al estar expuestos
demasiado tiempo al ambiente.
 Oxidación rápida. Ocurre en reacciones químicas violentas como la combustión,
generalmente exotérmicas (liberan energía en forma de calor), y se produce
fundamentalmente en elementos orgánicos (con contenido de carbono e hidrógeno).

Redox: son aquellas en las que se transfieren electrones de una sustancia a otra. Una celda
electroquímica es un dispositivo experimental para generar electricidad mediante una
reacción redox (celda galvánica o voltáica).

11
 Combustión. Las combustiones son reacciones químicas redox que liberan una
importante cantidad de energía en forma de calor y luz. Estas reacciones son
oxidaciones rápidas que desprenden mucha energía.
 Oxidación de metales. Son reacciones más lentas que las combustiones. Son
descritas comúnmente como la degradación de ciertos materiales, especialmente
metálicos, por acción del oxígeno sobre ellos.
 Desproporción. También conocidas como reacciones de dismutación, presentan un
único reactivo que se reduce y se oxida al mismo tiempo. Un caso típico de esto es
la descomposición del agua oxigenada (H2O2).
 Desplazamiento simple. También llamadas “reacciones de sustitución simple”,
ocurren cuando dos elementos intercambian sus lugares respectivos dentro de un
mismo compuesto.

12