Tarea Academica de Uroanalisis

DEFINA BREVEMENTE A LOS AGARES QUE SE
EMPLEAN EN LA DIFERENCIACION BIOQUIMICA EN

UROANALISIS.
AGAR MAC CONKEy

USO
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios
facultativos a partir de muestras clínicas, aguas y alimentos. Todas las especies
Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.
Fundamento
En el medio de cultivo las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo
de bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares
y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la
flora Gram positiva.
Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un
viraje del color del indicador de pH (rojo neutro). Los microorganismos no fermentados de
lactosa producen colonias incoloras.
Procedimiento
Siembra
En superficie: inocular directamente la muestra por estría.
En profundidad: inocular una alícuota de la muestra directa o de su dilución. Verter un
volumen del medio de cultivo fundido y enfriado a 40 – 45°C homogenizar con
movimientos de vaivén y rotación. Dejar solidificar.
C.L.D.E. MEDIO (Cysteine lactose electrolyte
deficient)
USO
Medio indicado para el procesamiento de urocultivos. Es utilizado para el aislamiento,
recuento e identificación presuntiva de microorganismos, pues permite el desarrollo de la
mayoría de los patógenos urinarios y previene el desarrollo invasor de Proteus spp.
FUNDAMENTO
Es un medio deficiente de electrolitos.
En el medio de cultivo, la peptona, el extracto de carne y la tripteína aportan los
nutrientes necesarios para el adecuado desarrollo bacteriano. La Lactosa es el hidrato de
carbono fermentable, la L- cistina es el agente reductor, el azul de bromotimol es el
indicador de pH.
La diferenciación de los microorganismos se basa en la utilización que estos puedan hacer
a la lactosa, las cepas que la fermentan, acidifican el medio que vira del verde amarillo,
mientras que los que no lo hacen, dan colonias incoloras que viran al medio de color azul.
La restricción de electrolitos en el medio impide el desarrollo invasor de Proteus, por tal
motivo, es un medio ideal para el recuento de colonias
PROCEDMIENTO
SIEMBRA
Inocular una alícuota de orina en la superficie del medio. Para poder realizar recuento de
colonias
E.M.B. AGAR (con Eosina y Azul de Metileno)
USO
Este medio es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos
Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales
Permiten el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
FUNDAMENTO
El medio de cultivo combina las fórmulas de Holt – Harris y Teague con la de Levine, para
obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacteriaceae y otras
especies de bacilos Gram negativos.
Es nutritivo por la presencia de peptona que favorece el desarrollo microbiano. La
diferencia entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/ o sacarosa, y aquellos que son
incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores de eosina y azul de metileno; ejercen
un efecto inhibitorio sobre una gran variedad de bacterias Gram positivas.
Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. Presentan un brillo metálico. Las cepas
que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada. mientras las
que no la hacen son incoloras.
También pueden crecer especies de Candida y se observan como colonias rosadas y
puntiformes.
PROCEDIMIENTO
Siembra
En superficie, por estriado directo a partir de la muestra.
En profundidad, para favorecer el desarrollo de Clamidosporas.
AGAR TSI (TRIPLE SUGAR IRON)
USO
Medio universalmente empleado para diferenciación de enterobacterias, en
base a la fermentación de los hidratos de carbono, glucosa, lactosa y
sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.
Fundamento
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los
nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano.
La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El
tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción para la
producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de
iones de Fe3+, los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen
sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el
cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.
Por fermentación de azucares, se producen ácidos, que se detectan por
medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio
acido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrogeno que reacciona
con una sal de hierro proporcionando el típico sulfuro de hierro de color
negro.
PROCEDIMIENTO
SIEMBRA
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, con aguja de
inoculación inocular el medio de cultivo, picando el fondo y extendiendo
sobre la superficie del mismo.
CHRISTENSEN MEDIO (urea AGAR BASE)
Uso
Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad
ureásica.
Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan, úrea tales como Proteus
spp. Otras enterobacterias y estafilococos.
FUNDAMENTO
En el medio de cultivo la tripteína y la glucosa, aportan los nutrientes para el
desarrollo de microorganismos. El cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico, y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Las bacterias hidrolizan la úrea por medio de la enzima ureasa liberan
amoniaco y dióxido de carbono. Estos alcalinizan el medio de cultivo
haciendo virar el indicador rojo de fenol del color amarillo al rojo.
Este en el caso de Klebsiella spp, Enterobacter spp, y Citrobacter spp.
PROCEDIMIENTO
SIEMBRA
A partir de un cultivo puro del microorganismo en estudio, estriar la
superficie del medio en el pico de flauta.
Se recomienda no punzar la capa profunda para controlar el color.
MEDIOS DE CULTIVOS CROMOGENICOS
USO
Diferenciación rápida de bacterias urinarias.
FUNDAMENTO
Contienen sustratos cromogénicos que producen colores específicos cuando
son metabolizados por ciertas bacterias, facilitando la identificación

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