Informe N°7 - EVALUACIÓN DEL METABOLISMO BAJO CONDICIONES DE AYUNO Y POSTPRANDRIAL EN 24 HORAS

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CARRERA(S): Enfermería

PRÁCTICA DE LABORATORIO

CURSO: Bioquímica

PROFESOR(A): Quevedo Torres, Sergio Renan

INFORME DE PRÁCTICA

PRÁCTICA N°: 7

TÍTULO: EVALUACIÓN DEL METABOLISMO BAJO CONDICIONES DE AYUNO


Y POSTPRANDRIAL EN 24 HORAS

INTEGRANTES:
Castro García, Catherine Isabel [email protected]

Hernández Vera Paulo Ademir [email protected]

HORARIO DE PRÁCTICA

FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 23 de mayo de 2024

FECHA DE ENTREGA DEL INFORME: 30 de mayo de 2024

LIMA, PERÚ

2024
ÍNDICE
1. OBJETIVOS ....................................................................................... 3
2. INTRODUCCIÓN ................................................................................ 4
3. MATERIALES Y MÉTODOS.............................................................. 5
4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL................................................ 6
5. RESULTADOS ................................................................................... 7
6. DISCUSIÓN ........................................................................................ 9
7. CONCLUSIÓN .................................................................................. 11
8. RECOMENDACIONES .................................................................... 12
9. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ............................................... 13
1. OBJETIVOS

• Evaluar el metabolismo en condición de ayunas y en condición de alimentación


normal en un tiempo de 24 horas.
2. INTRODUCCIÓN

El metabolismo humano está completamente diseñado para poder adaptarse en


estados fisiológicos, como el ayuno y después de la alimentación. Durante un periodo
de 24 horas, la concentración de glucosa de una persona se ve afectada
significativamente, ya que en el organismo se activa varias rutas metabólicas clave
como la glucogenólisis, gluconeogénesis y glucogénesis. Estas rutas son esenciales
para mantener las concentraciones de glucosa en los valores normales dentro del
organismo, asegurando el funcionamiento de los demás órganos.

La Glucogenólisis, es el proceso que ocurre en ayunos breves, por el cual el


glucógeno almacenado en el hígado y los músculos se usan para descomponerse
en glucosa para ser liberada en la sangre. En el caso de los músculos no puede
aportar glucosa al torrente circulatorio, ya que no posee dicha enzima y la glucosa
fosforilada queda atrapada en el interior de las células musculares [1].

La Gluconeogénesis, es el proceso que ocurre en ayunos prolongados donde se


produce glucosa a partir de precursores no glucídicos, como aminoácidos, glicerol y
lactato. Esta vía se activa principalmente en el hígado durante el ayuno y se coordina
con las vías catabólicas de oxidación y catabolismo proteico [2].

La Glucogénesis, es el proceso que ocurre cuando hay un aumento de niveles de


glucosa por la alimentación, en el cual se sintetiza glucógeno a partir de glucosa que
se almacenaran en el hígado y los músculos para su uso posterior cuando los niveles
de glucosa en sangre hayan disminuido como en el caso del ayuno donde se activa
la ruta metabólica glucogenólisis que es el reverso [3].

En esta práctica, se evaluará el metabolismo en condiciones de ayuno y postprandial


(después de la ingesta de alimentos) a lo largo de 24 horas con la ayuda del método
de glucosa oxidasa para determinar las distintas concentraciones de glucosa y
entender como el cuerpo humano regula y ajusta su metabolismo para adaptarse en
diferentes estados.
3. MATERIALES Y MÉTODOS

I. MATERIALES EN LA MESA DE LOS ESTUDIANTES

• 01 gradilla

• 05 tubos de ensayo 13x100mm

• 01 piseta con agua destilada

• Propipetas

• Pipeta graduada de 5 mL

• Solución de glucosa de 60 mg/dL

• Solución de glucosa de 90 mg/dL

II. MATERIALES EN LA MESA CENTRAL DEL PROFESOR

• 01 estuche comercial de glucosa oxidasa

• Espectrofotómetro

• Baño de maría

• Cubetas

• Micropipetas de 10-50 µL; 100 – 1000 µL

• Puntas de micropipetas

• Vórtex

MÉTODO DE LA GLUCOSA OXIDASA

La glucosa reacciona con el reactivo enzimático que contiene una mezcla de las
enzimas Glucosa Oxidasa (GOD) y Peroxidasa (POD). En la primera etapa la
Glucosa es oxidada a Ac. Glucónico por la acción de la enzima GOD, liberándose
como producto H2O2, el cual en una reacción mediada por la enzima POD, reacciona
con el Ac. p-Hidroxibenzoico y 4-Aminoantipirina produciéndose un compuesto
coloreado con un máximo de absorción a 505 nm., en cantidad proporcional a la
cantidad de Glucosa presente en la muestra.
4. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Determinación de la concentración de glucosa en suero en condición de ayuno


y alimentación en 24 horas

1. Enumerar 4 tubos de ensayo (Blanco, estándar, M.P 1 y M.P 2).


2. Adicionar los volúmenes que se describen en la tabla que se muestra a
continuación:

3. Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C.


4. Leer las absorbancias ajustando a cero el espectrofotómetro (505 nm) con el
blanco de reactivo.
5. Anotar las absorbancias obtenidas del espectrofotómetro.
6. Calcular el factor de calibración y la concentración de glucosa en el suero.
5. RESULTADOS

Determinación de la concentración de glucosa en el suero en condición de


ayuno y alimentación en 24 horas.

Tubos Absorbancias Imagen

Blanco 0

Estándar 0,167

M.
0,153
Problema I

M.
-0,032
Problema II

Tabla 1: Absorbancias del espectrofotómetro


FACTOR DE CALIBRACIÓN

MUESTRA PROBLEMA 1 MUESTRA PROBLEMA 2

ST Glucosa 100 mg/dl ST Glucosa 100 mg/dl

(100/0,167 𝑥 0,153) = 91,6 mg/dl (100/0,167 𝑥 -0,032) = -19,16 mg/dl


6. DISCUSIÓN
Este estudio determino los niveles de glucosa en la sangre de una persona en
condición de alimentación en 24h y una persona en condición de ayuno, usando el
método de la glucosa oxidasa para obtener las concentraciones por el factor de
calibración a través de las absorbancias obtenidas del espectrofotómetro. Además,
se comparará los niveles de glucosa en ambos pacientes. A continuación, se
analizan los datos obtenidos.

Concentraciones de glucosa en pacientes en condición de alimentación 24h

Se observo que la glucosa del paciente 1 presento un valor de 91,6 mg/dl, lo cual
indica que esta dentro de los valores normales de glucosa en sangre (60 – 110
mg/dl). Esto sugiere que la persona se encuentra en un estado de alimentación
adecuada, ya que mantiene su glucosa dentro de sus parámetros. En el caso de que
estos valores fueran bajos, podría causar hipoglucemia (síntomas como la
ansiedad, irritabilidad, dolor de cabeza, sudoración, perdida de conocimiento, latidos
cardiacos irregulares, etc.), la cual puede ser causada por una ingesta insuficiente
de carbohidratos o un problema hepático [4]. Por otro lado, la Hiperglucemia
(síntomas como sed intensa, visión borrosa, fatiga, aumento de apetito, pérdida de
peso inexplicable, piel seca, etc.), es causada por una mala administración de dosis
correcta de insulina, dieta desequilibrada de carbohidratos, enfermedades o
infecciones [5].

Esto demuestra que el paciente se encuentra alimentado adecuadamente y no tiene


ningún problema o enfermedad como la hipoglucemia e hiperglucemia.

Concentraciones de glucosa en pacientes en condición ayuno

Se determino que la glucosa del paciente 2 debería de presentar una glucosa dentro
de los valores normales, lo cual indicaría que esta en una condición normal. En el
caso de presentar niveles bajos, podría ser un indicio de hipoglucemia o un problema
hepático en el caso de las rutas metabólicas como la glucogenólisis y
gluconeogénesis, ya que no están produciendo suficiente glucosa para mantener el
organismo en un estado adecuado.

Errores técnicos

Durante el proceso de determinación de la glucosa del paciente 2, se observaron


valores negativos en la absorbancia del espectrofotómetro, lo que afectó el resultado
del factor de calibración y la obtención de la concentración de glucosa. Esto se debe
a varios factores como la caducidad, el almacenamiento inadecuado, la
contaminación, errores de preparación (diferentes concentraciones), interferencias
en la reacción, etc. Esto pueden provocar la degradación o la alteración de las
enzimas del reactivo durante el proceso de determinación de la glucosa, dándonos
valores bajos, altos o valores negativos en la absorbancia por el espectrofotómetro.
7. CONCLUSIÓN

Se concluye que, a partir de los valores obtenidos, se observaron dos perfiles de


pacientes distintitos. En el primer caso, el nivel de glucosa registrado fue de 91,6
mg/dl, lo que indica que se encuentra dentro de los rangos normales (60 – 110
mg/dl). Sin embargo, en el segundo caso, se detectó un valor fuera de los
parámetros esperados, sugiriendo la posibilidad de un error con el reactivo utilizado.
Es esencial destacar la importancia de revisar el reactivo antes de realizar el
experimento o proceder con los pasos del procedimiento experimental,
asegurándose de su vigencia, almacenamiento, errores en la preparación, para
evitar posibles errores como lo observado del caso 2.
8. RECOMENDACIONES

• Antes de comenzar cualquier experimento, es crucial leer y comprender todas


las instrucciones detalladamente
• Usar adecuadamente el equipo de protección personal: bata, guantes, cofia y
mascarilla.
• No comer, beber o fumar en el laboratorio, y lavarse las manos después de
manipular cualquier sustancia química.
• Usar correctamente los guantes al manipular las sustancias químicas para así
evitar futuros accidentes.
• Mantener ordenado la mesa con los instrumentos del laboratorio para evitar
accidentes que nos perjudiquen a nosotros mismos o a cualquier compañero.
• Comunicar cualquier incidente, derrame o problema de seguridad al personal del
laboratorio o al docente.
• Manipular todos los materiales cuidadosamente.
• Al terminar de usar las sustancias de los frascos, se debe cerrar al instante para
evitar que se derramen.
• Seguir estrictamente el tiempo indicado y las condiciones de mezcla
especificadas por el docente
9. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

[1] Albero R, Sanz A, J. Playán. Metabolismo en el ayuno. Endocrinología y nutrición


[Internet]. 2004 Jan 1 [cited 2024 May 28];51(4):139–48. Available from:
https://www.elsevier.es/es-revista-endocrinologia-nutricion-12-articulo-metabolismo-
el-ayuno-S1575092204745994

[2] Gluconeogénesis y glucogenólisis [Internet]. LibreTexts español. 2022 [cited 2024


May 28]. Available from:
https://espanol.libretexts.org/Salud/Ciencias_B%C3%A1sicas/Biolog%C3%ADa_cel
ular%2C_gen%C3%A9tica_y_bioqu%C3%ADmica_para_estudiantes_precl%C3%A
Dnicos/05%3A_Combustible_para_M%C3%A1s_Tardes/5.01%3A_Gluconeog%C3
%A9nesis_y_glucogen%C3%B3lisis

[3] Glucogénesis [Internet]. Quimica.es. 2024 [cited 2024 May 28]. Available from:
https://www.quimica.es/enciclopedia/Glucog%C3%A9nesis.html

[4] Brutsaert EF. Hipoglucemia [Internet]. Manual MSD versión para público general.
Manuales MSD; 2023 [cited 2024 May 14]. Available from:
https://www.msdmanuals.com/es-pe/hogar/trastornos-hormonales-y-
metab%C3%B3licos/diabetes-mellitus-y-otros-trastornos-del-metabolismo-de-la-
glucosa-sangu%C3%ADnea/hipoglucemia
[5] Holland K. Hiperglucemia (nivel alto de azúcar en la sangre): Síntomas, causas y
más [Internet]. Healthline. Healthline Media; 2022 [cited 2024 May 14]. Available
from: https://www.healthline.com/health/es/hiperglucemia#sintomas

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