Mtap Lote 2 Exámenes Parciales

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PARASITOLOGÍ

Programa de Evaluación de Tecnología


A -1
Médica
28 de octubre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag
ESPECIESRMT,
Y SUSRN, Ph.D, MA, MSMLSc
NOMBRES COMUNES hígado chino
Clonorchis sinensis
platija/plataforma hepática
NEMATODOS Opistorchis felineus Duela deloriental
hígado de gato
Gusano de anguila/gusano
lombriz intestinal
intestinal gigante CÉSTODOS
Enterobius vermicularis Oxiuros/gusano marino
Trichuris trichiura tricocéfalo Diphyllobothrium latum Tenia ancha de
Toxocara cati Áscaris de los gatos pescado/Tenia ancha rusa
toxocara canis Áscaris de perros Tenia del cerdo/Tenia
Ancylostoma brasileño Anquilostoma gato Tenia solium
armada
Ancylostoma canino Perro anquilostoma
Ancylostoma duodenal Anquilostoma del Viejo Taenia saginata Tenia de res/Tenia
Necator americano Anquilostoma del Nuevo desarmada
Strongyloides stercoralis lombriz Hymenolepis nana Tenia enana
Capillaria philippinensis Gusano Pudoc Hymenolepis diminuta Tenia de rata
Lombriz intestinal del Tenia del perro/Tenia de
Trichinella espiralis músculo del cerdo/gusano Dipylidium canino
doble poro
triquina Echinococcus granulosus Tenia hidatídica
Wuchereria bancrofti Filaria de Bancroft
loa loa gusano ocular
brugia malayo Filaria malaya HÁBITAT – ETAPA INFECTIVA – MODO DE
Onchocerca vólvulo Filaria enrevesada TRANSMISIÓN
mansonella ozzardi Filaria de Ozzard NEMATODOS INTESTINALES
mansonella permanente Filaria persistente Hábitat: intestino delgado
Angiostrongylus Etapa infecciosa:
Gusano de pulmón de rata Huevo embrionado Modo lombriz intestinal
cantonensis
Gusano de Guinea/gusano de transmisión:
Dracunculus medinensis Ingestión
serpiente/gusano dragón
Gusano del corazón del Hábitat: intestino grueso
Dirofilaria immitis
perro Etapa infecciosa:
1. Trichuris trichiura
Huevo embrionado Modo
TREMATODOS 2. Enterobius vermicularis
de transmisión:
Schistosoma japonicum platija de sangre oriental Ingestión
esquistosoma mansoni La casualidad de la sangre Hábitat: intestino delgado
esquistosoma haematobio Duela de sangre vesical Etapa infecciosa:
1. Necator americano
Larva filariforme
Paragonimus westermani Trematoda pulmonar 2. Ancylostoma duodenal
Modo de transmisión:
platija intestinal Penetración de la piel
Fasciolopsis buski
gigante/plataforma de busk Hábitat: intestino delgado
Echinostoma ilocanum La casualidad de Garrison Etapa infecciosa:
Fluke de Von Larva filariforme Strongyloides stercoralis
Heterófitos heterofíticos
Siebold/Plataforma enana Modo de transmisión:
Metagonimus yokogawai La casualidad de Yokogawa Penetración de la piel
Fasciola hepática platija del hígado de oveja

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Hábitat: intestino delgado
RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc Mosquitos
Capillaria philippinensis
Etapa infecciosa: brugia malayo Linfáticos superiores (Mansonia
Larva spp.)
Modo de transmisión: Mosca
Ingestión/Consumo de loa loa Tejidos subcutáneos Chrysops,
pescado crudo Mosca del
Moscas
Onchocerca vólvulo Tejidos subcutáneos
Hábitat: intestino delgado negras
(adulto); Etapa infecciosa mansonella ozzardi Cavidades corporales
del músculo (larva): larva
Trichinella espiralis mansonella Mosquitos
enquistada Cavidades corporales
Modo de transmisión: permanente (mosca
Ingestión/Consumo de Dermis de la piel (<1 Culicoides)
Mansonella
carne de cerdo mal cocida mm de la superficie
estreptocerca
de la piel)
NEMATODOS ZOONÓTICOS
Etapa infectiva para el Hábitat: Tejido subcutáneo
hombre: Etapa infecciosa: tercera
ASCARIS NO HUMANOS
huevo embrionado Etapa larvaria
1. toxocara canis
Modo de transmisión: Modo de transmisión:
2. Toxocara cati
Ingestión (accidental) Dracunculus medinensis
Ingestión
Agente causal: Larva Anfitrión intermedio:
migrans visceral.
Etapa infectiva para el Copépodos/pulgas de agua
hombre: dulce
Anquilostomas no humanos
Larva filariforme 1. Ancylostoma canino
Modo de transmisión: 2. Ancylostoma brasileño
Penetración de la piel TREMATODOS
Agente causal: FLORES DE SANGRE
Etapa infectiva para el Hábitat: Venas
hombre: Angiostrongylus mesentéricas superiores
Larva de tercer estadio cantonensis Modo de transmisión:
Modo de transmisión: Penetración cutánea Etapa
Ingestión infectiva: Horquilla cercaria Schistosoma japonicum
de cola
NEMATODOS DE SANGRE Y TEJIDO Muestra para diagnóstico:
(EXTRAINTESTINAL) heces
Etapa de diagnóstico:
GUSANO FILARES Hábitat: Venas
PARÁSITO HÁBITAT VECTOR mesentéricas inferiores
Mosquitos Modo de transmisión:
esquistosoma mansoni
(Aedes, Etapa infecciosa de
Wuchereria Culex, penetración de la piel:
Linfáticos inferiores
bancrofti Anopheles, horquilla cercaria de cola
Mansonia
spp.)

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Muestra para diagnóstico:
RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc Segundo huésped
Heces intermedio: vegetación de
Etapa de diagnóstico: agua dulce.
huevos
Hábitat: Venas vesicales Etapa infecciosa: Fasciola hepática
Modo de transmisión: metacercaria
Penetración cutánea Etapa Modo de transmisión:
infectiva: Horquilla Ingestión
esquistosoma haematobio
Muestra de Cercaria con Segundo Intermedio
cola para diagnóstico: orina Anfitrión: pescado
Etapa de diagnóstico: Etapa infecciosa:
Clonorchis sinensis
huevos metacercaria
platija pulmonar Modo de transmisión:
Segundo Intermedio Ingestión
Anfitrión: Cangrejos Segundo Intermedio
Etapa infecciosa: Anfitrión: pescado
Paragonimus westermani
metacercaria Etapa infecciosa:
Opistorchis felineus
Modo de transmisión: metacercaria
Ingestión Modo de transmisión:
PALAS INTESTINALES Ingestión
Segundo huésped
intermedio: vegetación de CÉSTODOS
agua dulce. PSEUDOPHYLLIDEA
Etapa infecciosa: Fasciolopsis buski Etapa infecciosa: (1) Larva
metacercaria plerocercoide
Modo de transmisión: Modo de transmisión:
Ingestión Ingestión/consumo de
Segundo Intermedio pescados mal cocidos
(Difilobotriasis)
Anfitrión: caracoles
Etapa infecciosa: Etapa infectiva para el
Echinostoma ilocanum Diphyllobothrium latum
metacercaria hombre: (2)
Modo de transmisión: Larva procercoide
Ingestión Modo de transmisión:
Segundo Intermedio Ingestión/Consumo
Anfitrión: pescado accidental de larva
Etapa infecciosa: procercoide (Esparganosis)
Heterófitos heterofíticos
metacercaria
HI: Copépodos
1er

Modo de transmisión:
HI: Peces

CICLOFILIDA
Ingestión
Etapa infectiva para el
Segundo Intermedio
hombre: (1)
Anfitrión: pescado Cisticercus cellulosae (larva)
Etapa infecciosa: Tenia solium
Metagonimus yokogawai Modo de transmisión:
metacercaria Ingestión (Teniasis -
Modo de transmisión: Intestinal)
Ingestión
FLUKOS HEPÁTICOS/HÍGADOS

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RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc
Etapa infectiva para el
• Produce fertilizado
y huevos no

es
hombre: (2) Huevos Ascaris lumbricoides fertilizados
Modo de transmisión:
Ingestión (Cisticercosis -
• Caparazón con
Tejidos) exterior
capa
A ■ 25 ■ ■

IH: Cerdos/Porcinos/Cerdos
Etapa infectiva para el renTuzD unremmuzsd llamado
hombre: abrigo mamilar
Cysticercus bovis (larva)
Modo de transmisión:
Taenia saginata •• Si falta el huevo de
Barril
Ingestión (Teniasis) en forma/en forma
IH: Bovinos/Vacas
Etapa
hombre:
infectiva para el Hymenolepis nana Trichuris trichiura 0• de linterna/en forma
de balón de fútbol
cisticercoide
con
Hymenolepis diminuta
Modo de transmisión:
0• 0 sobresalió
enchufes
polar


Ingestión
Comunmente referido
IH de H. nana y H. diminuta : Dipylidium canino a como
escarabajos/pulgas Huevos planos por un lado
Enterobius vermicularis
, en forma de D con
HI de D. caninum :
cáscara delgada y
Pulgas/piojos
Etapa infectivadepara
perro
hombre: Huevos Modo de
el
Echinococcus granulosus
Ir transparente , con larva en
el interior
transmisión: S2

Ingestión (hidatídica Capillaria philippinensis


Enfermedad/Equinococosis) Con formas típicas y
CÉSTODOS TEJIDOS
atípicas , con forma de

I
ETAPA ENFERMEDAD
ESPECIES maní , cáscara estriada y
INFECCIOSA CAUSADO
Tenia solium Huevos Cisticercosis con clavijas polares planas
Diphyllobothrium
latum
procercoide esparganosis
• Todo huevos son
Espirometra spp. procercoide esparganosis IDÉNTICO

Anquilostomas

Tenia multiceps Huevos cenurosis Ovoide, con delgada

• Hábitat de la tenia adulta: Intestino delgado o El


hombre alberga a la tenia adulta y sirve como huésped
cáscara que contiene
de 2 a 8 células
definitivo. germinales que se
asemejan a BOLAS DE
• Hábitat de Larva: Tejidos
• Similar con
Strongyloides stercoralis anquilostoma pero
MORFOLOGÍA DISTINTA están embrionados
ÓVULOS/HUEVOS DE NEMATODOS PERIODICIDAD Y MORFOLOGÍA DE
MICROFILARIA
ESPECIES MORFOLOGÍA
ESPECIES PERIODICIDAD MICROFILARIA
MICROFILARIA ENVINADA

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RMT, RN, Ph.D, MA,Núcleo
MSMLScque NO se Con expansión alar
extiende hasta la cuticular y bulbo esofágico
Wuchereria periódico
punta de la cola. bien definido.
bancrofti nocturno
Enterobius vermicularis

Subperiódico Dos núcleos


brugia malayo
nocturno terminales € Con cabeza delgada y cola
carnosa que se asemeja a
El núcleo se un látigo.
extiende hasta la Trichuris trichiura
loa loa periódico diurno
punta de la cola.

MICROFILARIA SIN FUNDA

Onchocerca
Núcleo que NO se
extiende hasta la • A. brasileño - 1 par
punta de la cola. de dientes bucales
vólvulo

Núcleo que NO se
mansonella extiende hasta la
ozzardi punta de la cola. • A. duodenal - 2
<-sf----V3, pares de dientes
Núcleo que se bucales
No PERIODICO extiende hasta la
mansonella
punta de la cola. Anquilostomas
permanente
«*>'*.*
Núcleo que se
extiende hasta la
• A. caninum - 3 pares
de dientes bucales
punta de la cola;
Mansonella Dios
curvo (cayado de
estreptocerca
pastor)

• norte americano -
placas de corte
NEMATODOS ADULTOS semilunares


ESPECIES CARACTERÍSTICA
Con 3 labios ovalados/Labio
lombriz intestinal
Trilobado

59-458

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RMT, RN, Ph.D,Útero
MA,con apariencia de
MSMLSc Los huevos de trematodos intestinales, pulmonares y
polo de barbero hepáticos están todos OPERCULADOS.

Angiostrongylus • Con opérculo plano


cantonensis
Paragonimus westermani
• Con abopercular
caparazón

Cavidad bucal más larga; espesamiento


Anquilostomiasis - (engrosamiento de la
premordio genital más
RHABDITIFORME
pequeño
Cavidad bucal más corta;
Heterophyes Heterophyes
(de cáscara gruesa)
• Con angosto
Strongyloides stercoralis - Metagonimus yokogawai opérculo
RHABDITIFORME
premordio genital más
grande (de cáscara delgada) • No abopercular
Enfundado con cola
puntiaguda
• Conmando
ancho
opérculo
Anquilostomiasis -
FILAFORM
Clonorchis sinensis
(ampliamente ovoide) • con abopercular
mando
Opistorchis felineus • con huevos parecidos
(alargadamente ovoide) una BOMBILLA
Sin funda con extremo ELÉCTRICA ANTIGUA
trasero bífido o con es Clonorchis sinensis
Strongyloides stercoralis - muescas
FILARIFORME OTRA
ESPECIES
MORFOLOGÍA
DISTINTA
Con CERCARIA DE COLA
esquistosoma
HORQUILLA
ÓVULOS/HUEVOS DE TREMATODOS El adulto adopta la
Paragonimus westermani
apariencia de un grano de
ESPECIES MORFOLOGÍA
Los huevos de esquistosoma/trematodos sanguíneos NO •
Aparece como si con
Con mando lateral de hombros debido al
CONO CEFÁLICO
Schistosoma japonicum minutos
Fasciola hepática •
Puede parecerse a F.
hepática pero No
del dolor de la cabeza
Con espina lateral distinta cono:
esquistosoma mansoni Echinostoma ilocanum Chupador oral con
G espinas
Disco circumoral con
espinas
Con espina terminal
distinta
esquistosoma haematobio

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RMT, RN, Ph.D, Adulto equipado con ESPESAMIENTOS Y


MA, MSMLSc
Central 3er FILAMENTOS POLARES, el
Lechón/lechón huevo contiene embrión de
genital hexacanto
Heterófitos heterofíticos • puede parecerse • Huevos no
operculados con
heterophyes polar
Hymenolepis diminuta
heterophyes pero no engrosamientos pero
hay un tercer retoño: SIN filamentos
Metagonimus polares
yokogawai
La duela sanguínea más
• huevos con
Schistosoma japonicum CAPA INTRALAMINAL
grande; con tegumento liso dándole apariencia de
• La casualidad Dipylidium canino
HUEVO FRITO

69
esquistosoma mansoni sanguínea más pequeña
Produce paquetes de
• tegumento con huevos.
gruesosanguínea cuyo
Trematoda
esquistosoma haematobio tegumento muestra finas Huevos NUNCA VISTOS en
tuberculaciones. Echinococcus granulosus
LAS HECES HUMANAS

ÓVULOS/HUEVOS DE OTRA MORFOLOGÍA


ESPECIES
CÉSTODOS DISTINTA
rostellum —-yo -gancho
ESPECIES MORFOLOGÍA
• OPERCULADO, con escólex — (6
mAE E E
PESO g \—i, —> — Proglótida

abopercular ventosa----- \ • ft niafureV)}--) C-


cuello------------/ ) “proglótidgV

Diphyllobothrium latum
mando Inmaduro
proglótide
opuesto el
opérculo y puede
V) contener coracidio no
desarrollado
• Scolex (cabeza) – para fijación

• Los HUEVOS pueden • Cuello – región de crecimiento


• Huevos NO • Proglótides – segmentos
o Inmaduro – sexualmente no
OPERCULADOS, con o Maduro: conjuntos completos de macho
estriados radialmente órganos reproductores (testículos,
Taenia solium Taenia
caparazón ovarios,
poros genitales)
saginata 6c que contiene embrión o Grávida/madura – contiene el huevo
de hexacanto útero (la forma del útero varía)
• Los huevos de tenia Difilobotrio
latum
• Con FORMA DE ROSETA
útero en segmentos
pueden
Huevos no operculados con
Hymenolepis nana
POLAR

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Segmentos grávidos con útero
RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc
8 Hymenolepis nana
SACULAR o en forma de saco

“$?
• El gusano adulto se
Hymenolepis
diminuta

considera • El gusano adulto sólo tiene


el MÁS LARGO en cuanto a TRES segmentos
longitud (inmaduro, maduro,
• Gusano adulto con grávido)
ALMENDRA Echinococcus • Considerado como el
ESCÓLEX ESPATULADA EN granulosus MÁS CORTO en cuanto a
FORMA/CUCHARA tamaño
• Dos falsos tontos 12 3 4
BOTHRIA

• Los segmentos grávidos


• Con florero-
pueden
apariencia de segmentos
Contienen útero alargado
con forma/semilla de
con tronco cilíndrico con 8-
calabaza/granos de arroz
12/15 ramas uterinas Dipylidium canino
• Con GENITAL BILATERAL
laterales.
POROS
BdB
2mm 1
• Segmentos maduros – con
3er llamado LÓBULO
ovario

Tenia solium OVÁRICO ACCESORIO


Hymenolepis nana Adulto con ganchos en forma
de Y
PATOLOGÍA

( (S
2A
lombriz intestinal Puede causar obstrucción
onnalarum— • , ~ '

\ (28,2 63353 ■:
20 323323
intestinal-perforación intestinal.

) MM
' 21232

Prolapso rectal

Los segmentos grávidos pueden Trichuris trichiura


• o Síntoma de
individuo muy
contener un útero con tronco
infectado
cilíndrico con 15-30 ramas
(Tricuriasis)
uterinas laterales.
Prurito anal
Taenia saginata
214
Enterobius
vermicularis • o Síntoma de
enterobiasis
Capillaria Borborigmos/Estómago
philippinensis
• gorgoteante

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RMT, RN, Ph.D, MA, Síntoma
o MSMLSc de vaso sanguíneo apropiado
capilariasis Paragonimus Puede producir síntomas
El único nematodo que puede westermani • similares a los de la
Trichinella espiralis provocar eosinofilia INTENSA, tuberculosis.
Puede causa Vit. B12
edema periorbitario. • deficiencia anemia
• CULI (Anemia perniciosa)
Picazón/Rocío Diphyllobothrium o El adulto en el
Picazón/picazón en el suelo latum intestino
Anquilostomas
(alimentadores de
• Pendiente a delgado compite
penetración de en la absorción.
sangre) la larva de
filariforme en la Vit. B12
piel
•• Anemia – Deficiencia de
Puede producir MONEDA
OTRAS NOTAS IMPORTANTES
NEMATODOS
LESIONES en los pulmones huevo embrionado Larva completamente
Dirofilaria immitis desarrollada
detectadas mediante RAYOS


X
Elefantiasis de miembros
• Larva de primer estadio

inferiores.
rabditiforme
• Más corto, más robusto,
Wuchereria bancrofti
• Tropical Pulmonar no infeccioso


Eosinofilia
Orina quilúrica/lechosa
••Alimentación
Larva de segunda etapa
o Obstrucción en los
filariforme •Maduro
brugia malayo
• Elefantiasis de

loa loa • Hinchazones
Calabar/fugitivas/temporale
de
Más largo, delgado,
infeccioso
s #1 - Enterobius
Onchocerca vólvulo
• Río ceguera/ceguera
vermicularis
# 2 - Áscaris
Común intestinal
nematodos en todo el mundo
toxocara canis
Toxocara cati • Larva migrans visceral o
lumbricoides
# 3 - Trichuris
Ancylostoma Nematodos clasificados como
caninum • Larva migrans cutánea/ • Trichuris trichiura AFASMIDOS
Ancylostoma
braziliense
“erupción progresiva” • Trichinella espiralis
• Puede desarrollarse debido a
•• capilaria
PENETRACIÓN CERCARIAL un susto Con migración pulmonar en el
Picazón del nadador o Reacción alérgica; ciclo vital y causa
lumbricoides
Forma de
dermatitis • S trongyloides
NEUMONITIS.

Fiebre de Katayama • Hipersensibilidad reacción



estercoralis
Humano
pendiente a

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• LOS GUSANOS ADULTOS
• Humano
RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc
pueden ser
anquilostomas TRES PROFICOS gratis-
• un susto
vivo/ FACULTATIVO
(puede sobrevivir
lumbricoides incluso sin huésped)
• dracunculo HEMBRA VIVIPARA/LARVIPARA
(no capaz de
• Tres vida ciclos:
medinensis Parasitaria (directa), de
produciendo huevos)
• Trichinella espiralis
vida libre (indirecta) y

• áscaris
OVÍPAROS (capaces de
producir huevos sin larva • La biopsia muscular como
lumbricoides completamente desarrollada Trichinella espiralis medios de diagnostico

• enterobio
en su cáscara) (capaces de
OVOVIPAROS
producir huevos con larva
• Bacchman intradérmico
&
Reservorio bentonita
de Capillaria
vermicular completamente desarrollada Aves que se alimentan de
• estrongiloides
lombriz intestinal
en su cascara)
Nematodo intestinal más
peces
philippinensis (nematodo
local)
• examen de Toxocara canis y • No se puede detectar
Hisopo perianal/cinta Toxocara cati
escocesa a través del examen de
• Los huevos Ancylostoma brasileño
Con GATOS/felino como
ANFITRIÓN DEFINITIVO
son
depositado Con PERROS/caninos como
Ancylostoma canino
ANFITRIÓN DEFINITIVO
Enterobius vermicularis
en la región
perianal/piel • Nuevo
• puede llevar
nombre:
Parastrongylus
Trofozoito de
cantonensis
Dientamoeba fragilis en
• Huésped definitivo: ratas

sus huevos
puede causar RETRO Angiostrongylus • Intermedio
INFECCIÓN cantonensis Anfitrión:

Anquilostomas
• puede causar AUTO
Nematodos chupadores de •
caracoles terrestres
CEREBRAL
• Pequeñísimo intestinal ANGIOSTRONGILIASIS


nematodo
Hallazgo
• Meningitis
eosinofílica
LARVA RABDITIFORME •• Dx:
ABDOMINAL
histológico
en heces es diagnóstica
Strongyloides stercoralis • Femenino puede ser

ANGIOSTRONGILIASIS
ITV: Consumo de
PARTENOGÉNICO Parastrongylus
• poder costaricensis
ensalada contaminado
con excreciones de
producir
babosas/caracoles
huevos
infectados
incluso sin

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RMT, RN, Ph.D, secreciones tisulares
MA, MSMLSc • No hermafrodita ;
Cultura Métodos para sexos separados
• Harada Mori Anquilostoma y S.
trematodos • Necesitan dos anfitriones
• cultura copro
estercoralis
sanguíneos • Huésped intermedio:
• Dos desarrollos caracoles
• Anfitrión definitivo:
etapas: Larva y Adulto Hombre
gusanos filarias
•artrópodos
Transmitido por
Trematodos • hermafrodita ;
•hombre:
Etapa infectiva para el
pulmonares, intestinales
y hepáticos
sexos combinados
• Necesitan tres anfitriones.
Etapa diagnóstica para la
microfilarias
detección de filariasis. •• Primer
una seroprueba
intermedio para el
• Periodicidad - es diagnóstico
la migración de la de S. japonicum
larva en
sangre
el •
Suero +
Antígeno
• Filaria – LPO
Debe considerarse en la
HUEVOS LIOFILIZADOS
• Palúdico sangre
extracción de sangre para el
de S.japonicum
la recolección debe
realizarse antes de
diagnóstico de filariasis. PRUEBA DE PRECIPITINA
COPT/CIRCUMOVAL

Incubar durante 24
horas.
los picos de fiebre
(OIO)

(+) resultado -
P .g9-
• Técnica de concentración (3
Técnica de concentración
de Knott
para la detección de
filariasis. ' a00i
•• Reactivo: formalina
Se puede detectar a
F-$-
20um -- 5 5
Paragonimus Cangrejos frescos de montaña
través
westermani como 2º huésped intermedio

Dracunculus
observación de larvas
en ampollas • Heterófitos
heterofíticos
medinensis
abiertas/úlceras
• M. yokogawai
cutáneas después de


Hospedador intermedio:
colocar una gota de clonorchis PESCADO
agua sinensis
• Hábitat: Subcutáneo • Opistorchis
tejido felino
Los segundos huéspedes
TREMATODOS • Fasciolopsis buski intermediarios son
Cercaría Larva con boca, TGI y cola. VEGETACIÓN

Hospedero DEintermedio:
AGUA DULCE
Echinostoma ilocanum
CARACOLES
Cercaria sin cola; al penetrar la Trematodo más
esquistosómula cercaria en la piel humana, Heterófitos heterofíticos mortífero
pierde su cola. CÉSTODOS
Todos los escólex de tenia son globulares excepto: D.
latum
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Todas las especies
RMT,de tenia
RN, tienen
Ph.D, MA,un poro genital
MSMLSc oh Realiza todas las funciones:
(ubicado lateralmente) excepto: D. caninum Reproducción, digestión, excreción, etc.
• Adulto: Puede Citoplasma: con ectoplasma y endoplasma
parecerse Trofozoito - etapa de protozoo en heces líquidas;
Diphyllobothrium latum espirometra etapa móvil
• Huevo: Puede Quiste: etapa de protozoo que probablemente se
recupere en las heces formadas; forma inmóvil
parecerse
• El cestodo más letal
• Tenia especies CILIADO
que puede completar ESPECIES CARACTERÍSTICA
Hymenolepis nana su ciclo en un
huésped (

S Protozoos intestinales
con motilidad
HOMOXENOSO ) direccional de caída
• Poder causa • parásito común de
autoinfección
Duración de la vida de los cerdos; invasor de
Más de 25 años o más adultos de D. latum y tejido
Provoca cenurosis que
puede adquirirse mediante
Balantidio coli • intestinal más grande
protozoos
la ingestión accidental de
heces de perro con huevos;
• Hábitat: Grande
Intestino
Tenia multiceps esto puede provocar una
afección en las heces de
• Trofozoíto: Con
Macronúcleo en
perro con huevos; esto
forma de riñón y
puede provocar una
micronúcleo esférico.
condición llamada GID,
• La de Casoni es una AMEBA
prueba sero ESPECIES CARACTERÍSTICA


para diagnóstico
Hombre es un

S Invasión de tejidos
protozoos intestinales
Echinococcus granulosus callejón sin salida
anfitrión.
• Etapa infecciosa:

• Hidatídico –
Entamoeba histolytica Quiste
cuadrinucleado
potencialmente
peligroso
• Es probable que ingiera
glóbulos rojos
Causa enfermedad Motilidad lenta y no
hidatídica alveolar (forma Entamoeba coli
dirigida.
Echinococcus multicularis mortal de equinococosis; la
más LETAL de todas las
enfermedades helmínticas)
endolimax nana • intestino delgado
protozoos
NO HELMINTOS
• Especies
Con quistedebizco
ameba
PROTOZOOS con gran masa de
Iodamoeba butschlii
glucógeno
Microorganismo eucariota unicelular/unicelular o
Clasificado bajo Reino Protista • quiste de yodo

1
2
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RMT, RN, Ph.D,No MA,hematófago
MSMLSc • Transmitido por tse
no ingiera glóbulos moscas tse/Glossina
rojos hasta su Trypanosoma gambiense spp.
Entamoeba dispar citoplasma Trypanosama rhodesiense • agente causante de
• Actualmente Tripanosomiasis del
morfológicamente se viejo mundo
cierra a E. histolytica
AMEBA FACULTATIVA
acantamoeba Agente causante de la
meningoencefalitis
Balamuthia
amebiana granulomatosa.
Un ameboflagelado, agente
causante de la
Naegleria fowleri
meningoencefalitis
amebiana primaria.

FLAGELADOS
ESPECIES CARACTERÍSTICA
S Flagelado intestinal que
Giardia lamblia exhibe motilidad similar a
una cometa o una
Parásito protozoario que
Chilomastix mesnili adopta la apariencia de un
cayado de pastor.
Leishmania spp.
• Transmitido por flebótomos/flebótomos
• Promastigote - Etapa infecciosa de Leishmania
Visceral
Leishmania donovani Leishmaniasis/Dumdum
Fiebre/Kala-azar
Llaga
Leishmania tropical
oriental/Leishmaniasis
Leishmania braziliensis Leishmaniasis mucocutánea
Enfermedad de
Chaga/Tripanosomiasis
tripanosoma cruzi
Sudamericana o
Tripanosomiasis del Nuevo
EnfermedadMundo
del sueño de
Trypanosoma gambiense
África occidental
Enfermedad del sueño de
Trypanosoma rhodesiense
África Oriental

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RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc ESPOROZOS
ESPECIES CARACTERÍSTICA
S Parásito protozoario con
Toxoplasma gondii gatos/felinos como
huésped definitivo
•Parásito
intraeritrocítico
transmitido por
Babesia microtis picadura de garrapata
•Asume como maltés
apariencia cruzada del
trofozoíto
Etapa infecciosa y etapa
criptosporidio parvum
diagnóstica: Ooquiste
Parásito protozoario que
Cyclospora cayetanensis
muestra
Plasmodium spp.
• Etapa infectiva para el hombre: Esporozoítos
• Etapa infectiva al vector: Gametocitos
o Masculino: Microgametocitos
o Femenino: Macrogametocitos
• Examen de frotis de sangre espesa y fina.
Gránulos de Schuffner,
Plasmodium vivax
trofozoíto ameboide
Puntos de Maurer, formas
de aplicación accole, con
Plasmodium falciparum
gametocitos en forma de
plátano y media luna
Merozoítos en roseta,
Plasmodium malariae
trofozoítos en forma de
banda.

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RMT,
TAREA DE RN, Ph.D,MAHÓN
LECTURA: MA, MSMLScPP. 626- Giardia lamblia o Cryptosporidium en
631 muestras de pacientes inmunocomprometidos
con diarrea o de niños sintomáticos de
MUESTRAS FECAS guarderías.
RECOGIDA ADECUADA DE MUESTRAS
RECOGIDA, MANIPULACIÓN Y TRANSPORTE ➢ El recipiente debe estar limpio, seco, bien
➢ Las muestras de heces deben transportarse al cerrado e impermeable (recipiente de plástico
laboratorio de inmediato o inmediatamente se con tapa). También hay recipientes
les coloca un conservante. recolectores que contienen conservantes.
➢ Los trofozoitos y algunos huevos de helmintos ➢ Las muestras de heces no deben recolectarse
pueden desintegrarse si no se examinan o de orinales o inodoros, ya que pueden
conservan en poco tiempo. contaminarlas con agua u orina, lo que puede
➢ Para una detección óptima de parásitos provocar la destrucción de los trofozoítos o la
intestinales, se recomienda una serie de tres introducción de protozoos de vida libre .
muestras de heces espaciadas por uno o dos ➢ Método alternativo
días, recolectadas en un período de 10 días. o La muestra se puede recolectar en un
o Desventaja: requiere mucho tiempo y trozo limpio de papel encerado o
trabajo. periódico y transferirla al recipiente.
➢ La combinación de tres muestras conservadas o Utilice un recipiente de recolección
en formalina proporciona una tasa de desechable que pueda colocarse
recuperación de parásitos comparable a la del debajo del borde de la taza del
examen individual de heces conservadas en inodoro.
formalina. ➢ La información del recipiente debe incluir el
o Ventaja: Ahorra tiempo nombre del paciente y la fecha y hora en que
o Desventaja: Los organismos están se recolectaron las heces.
presentes en pequeñas cantidades. ➢ Se debe recolectar una muestra de heces antes
Pueden pasar desapercibidos en el de comenzar la terapia antimicrobiana, ya que
examen microscópico de preparados puede reducir la cantidad de organismos
húmedos debido al efecto de dilución presentes en la muestra.
(sensibilidad reducida) ➢ Si el paciente fue sometido a un enema de
➢ El algoritmo que los laboratorios toman en bario, el examen de heces debe retrasarse de
consideración para determinar si se necesita 7 a 10 días. El bario oscurece los organismos
una sola muestra o varias: cuando las muestras se examinan
o Examen de parasitología realizado de microscópicamente incluso después de
forma rutinaria (concentración y frotis procedimientos de concentración.
con tinción permanente) ➢ Si se va a recolectar una muestra purgada, se
o Población de pacientes y criterios usa un purgante salino o fosfosoda porque las
específicos (síntomas de viaje, estado gotas de aceite mineral pueden interferir con
inmunológico, clasificación de pacientes la identificación de parásitos, especialmente
hospitalizados o ambulatorios) ➢ Se deben quistes de protozoos . El segundo o tercer
realizar y examinar frotis con tinción permanente espécimen después de la purga puede
para muestras individuales. contener los trofozoítos que habitan en el
ciego.
➢ Se puede solicitar un inmunoensayo para

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RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc
PRESERVACIÓN ➢ Se utiliza cuando se va a realizar un frotis teñido
➢ La proporción de 3 partes de fijador y 1 parte de permanentemente.
taburete
deben seguirse para una conservación óptima. Fijadores de un solo vial
➢ Se utiliza para preparaciones húmedas y
LABORATORIO portaobjetos teñidos permanentemente que no
PRESERVATIVO MÉTODO DE utilizan formaldehído ni compuestos de
EXAMEN mercurio.
Frotis teñido o Ecofix
permanentemente o Paraseguro
Alcohol de polivinilo o Prot-arreglo
ADN-PCR ➢ Ventajas
o Un sustituto satisfactorio del PVA
Concentración de estándar que contiene cloruro de
formalina-acetato de etilo mercurio.
o Los frotis se secan más rápido
10% formalina Montaje húmedo directo ➢ Desventajas
o La calidad del fondo era mala.
Inmunoensayos o Se observó una morfología menos
definida de los organismos.
Frotis teñidos
Acetato de sodio-ácido permanentemente Formalina
acético-formalina (SAF) ➢ Utilizado en montaje húmedo o procedimiento
Concentración de concentración (sedimentación o flotación)

Concentración Acetato de sodio-ácido acético-formalina (SAF)


Mertiolato-yodo-formalina ➢ Preservación de muestras fecales cuando se
(MIF) Montaje húmedo directo utilizarán procedimientos de concentración y
tinciones permanentes.
Concentración
Mertiolato-yodo-formalina
Montaje húmedo directo ➢ Preservación de trofozoítos, quistes, larvas y
Sistemas de un solo huevos de helmintos para montaje húmedo o
vial Frotis teñidos procedimientos de concentración.
permanentemente ➢ No se utiliza habitualmente para frotis teñidos
permanentemente.
Inmunoensayos EXAMEN MACROSCÓPICO
➢ En el laboratorio se utiliza comúnmente un ➢ El procedimiento de laboratorio inicial realizado
sistema de dos viales que utiliza alcohol
en heces sin conservantes.
polivinílico (PVA), que es un polímero de resina,
en el primer vial y formalina al 10% en el otro ➢ Se encuentran gusanos intactos o proglótides
vial. (segmentos de tenia) en la superficie de las
heces.
fijador de PVA ➢ Las heces formadas deben examinarse después
➢ Consiste en cloruro mercúrico (para fijación) y de 2 a 3 horas de su paso si se mantienen a
PVA (para aumentar la adhesión de las heces al temperatura ambiente.
portaobjetos) ➢ Los exámenes pueden retrasarse 24 horas
después del paso si se coloca en un refrigerador.

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➢ Una porción
RMT, deRN, Ph.D,formadas
las heces MA, MSMLSc
debe EXAMINACIÓN MICROSCÓPICA
colocarse en formalina para el procedimiento de Preparación del montaje húmedo
concentración y otra porción en PVA para frotis ➢ La preparación húmeda directa de heces sin
teñidos permanentemente. conservantes se utiliza para detectar la
➢ Las muestras no deben colocarse en una presencia de trofozoitos protozoarios móviles en
incubadora a 37° C para evitar la desintegración heces líquidas frescas o en material de
de cualquier organismo y evitar el crecimiento sigmoidoscopia.
de bacterias. ➢ Las muestras purgadas deben examinarse
inmediatamente (dentro de los 30 minutos)
Consistencia
después del paso para garantizar la motilidad de
➢ Esto puede ayudar a determinar el tipo de los organismos.
conservante que se utilizará.
➢ También se debe colocar una porción en un
➢ También puede indicar las formas de parásitos fijador como PVA, de modo que se puedan
que se espera que estén presentes y dictar la realizar frotis teñidos permanentemente para
inmediatez del examen. una identificación definitiva.
➢ Lo más probable es que los quistes se ➢ La preparación de solución salina en muestras
encuentren en las heces formadas y, a veces, en de heces no fijadas es importante para la
las heces blandas. detección de huevos o larvas de helmintos,
➢ Los trofozoítos suelen encontrarse en las heces protozoos móviles y quistes de protozoos.
líquidas.
➢ El yodo puede ayudar a resaltar los detalles
nucleares y las masas de glucógeno, pero puede
matar los trofozoítos.
➢ Si la muestra se trata con formalina al 10%, se
debe omitir la preparación de solución salina.
➢ Para el examen microscópico, comience con un
objetivo de baja potencia y luego avance hacia
un objetivo de alta potencia para identificar
estructuras sospechosas.
➢ La inmersión en aceite no debe usarse en un
montaje húmedo a menos que la muestra haya
sido sellada con esmalte transparente o vaspar.
Color
Procedimiento de prueba
➢ Las heces normales suelen tener un aspecto
marrón. ➢ El procedimiento de preparación húmeda utiliza
➢ Las heces negras pueden indicar sangrado en el un portaobjetos de vidrio sobre el cual se ha
tracto gastrointestinal superior colocado en un extremo una gota de solución
➢ La presencia de sangre fresca en la muestra salina fisiológica (0,85%) y una gota de yodo
puede indicar sangrado en la porción inferior del (Dobell y O'Connor, D'Antoni, o dilución 1:5 de
tracto intestinal. solución de Lugol). en el otro extremo.
➢ Se agrega una pequeña cantidad (2 mg) de heces
➢ Cualquier porción que contenga sangre o moco a cada gota y se mezcla bien.
teñido de sangre debe seleccionarse para ➢ La muestra debe cubrirse con un cubreobjetos .
preparación húmeda y colocarse en un ➢ La preparación debe ser fina y no debe rebosar
recipiente conservante. más allá de los bordes del cubreobjetos. Los bordes
se pueden sellar con un esmalte de uñas

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transparenteRMT,
o vaspar
RN,(mezcla 1:1 de
Ph.D, MA, vaselina y
MSMLSc ➢ El método del sulfato de zinc es el procedimiento
parafina) para evitar un secado rápido. habitual de flotación.
➢ Las muestras preservadas con PVA no son ➢ Ventaja del método del sulfato de zinc
aceptables para preparaciones húmedas porque
o Produce menos desechos fecales
se vuelven turbias cuando se exponen al aire.
➢ Desventaja del método del sulfato de zinc
Técnicas de concentración o Provoca que los huevos operculados se
➢ Diseñado para concentrar los parásitos en una abran o colapsen.
pequeño volumen de líquido y eliminar los residuos oh Distorsiona los quistes de protozoos.
➢ Se pueden utilizar heces frescas o conservadas oh Huevos infértiles de Ascaris lumbricoides
en formalina. y
➢ El sedimento puede examinarse sin teñir o Schistosoma spp. Es posible que se
teñido con yodo. pierdan los huevos.
➢ Con este método se pueden detectar quistes, ➢ Debido a su alta densidad, los huevos se
larvas y huevos de helmintos, pero los hundirán hasta el fondo del tubo.
trofozoítos no sobreviven a este procedimiento. ➢ La mayoría de los organismos tienden a
➢ Existen dos tipos de técnicas de Concentración: asentarse después de 30 minutos. Por este
o Método de sedimentación motivo, el examen debe realizarse lo antes
o Método de flotación posible una vez finalizado el procedimiento.
➢ Ambos métodos se basan en la diferencia de ➢ Método de flotación especial:
gravedad específica entre los parásitos y la o Método de flotación de azúcar en vaina
solución concentradora. para Cryptosporidium spp.
o Reemplazado por microscopía de
Método de sedimentación anticuerpos fluorescentes o tinción
➢ Los organismos se concentran en el fondo del acidorresistente modificada
tubo de centrífuga.
➢ Puede detectar quistes, larvas y huevos. Frotis teñidos permanentemente
➢ El método de sedimentación con formalina- ➢ Se utiliza para detectar e identificar trofozoítos y
acetato de etilo (FES) es el método de quistes de protozoos.
sedimentación estándar. ➢ Características necesarias para la identificación
➢ Se pueden concentrar las muestras fijadas con de protozoos
formalina al 10%, SAF o Ecofix. o Detalle nuclear
➢ Los sedimentos se utilizan para preparar o Tamaño
preparaciones húmedas y portaobjetos teñidos o Estructuras internas
permanentemente. ➢ Las tinciones permanentes que se usan
➢ Los kits disponibles comercialmente se comúnmente incluyen hematoxilina y
comercializan por sí solos. contenía tricrómico (modificación de Wheatley de la
concentración fecal sin el uso de acetato de tinción de Gomori)
etilo. ➢ El tinte de elección en la mayoría de los
o Ventaja: eliminación más sencilla y laboratorios es el tinte tricrómico porque:
preparación más limpia gracias al oh Menos dependiente de la técnica.
método de filtración oh Menos tiempo
o Desventaja: más caro ➢ Se puede realizar una tinción tricrómica en heces
frescas fijadas con fijador Schaudinn o en una
Método de flotación muestra conservada en PVA.
➢ Los organismos están suspendidos en la parte ➢ Las muestras conservadas en SAF se tiñen con
superior de un fluido de alta densidad.

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RMT,férrica
hematoxilina RN, Ph.D,
ya queMA, MSMLSc
no se tiñe bien con
una tinción tricrómica. *a menudo distorsionado o
➢ Una mala fijación de la materia fecal da como destruido durante la tinción
resultado una mala tinción o organismos que no
tiñen. Escombros de fondo Verde
➢ Hay modificaciones en la tinción tricrómica para
permitir la detección de “microsporidios”
Levaduras
Procedimiento para el frotis teñido con tricrómico
➢ Utilice aplicadores para untar una fina ➢ Cromatina periférica nuclear : ADN y proteínas
película de heces en un portaobjetos de en el borde del núcleo.
vidrio. ➢ Kariosoma – Masa de cromatina en el núcleo.
➢ No se debe dejar secar el frotis y se debe ➢ Barras cromatoidales : inclusión citoplasmática
colocar inmediatamente en fijador de cromatina que se tiñe de oscuro
Schaudinn.
➢ Para muestras conservadas en PVA, se En un frotis teñido con hematoxilina férrica
colocan varias gotas de muestra sobre una ESTRUCTURAS COLOR
toalla de papel para drenar el exceso de parásitos Gris negro
líquido. Se recoge el material de la toalla de
papel y se unta sobre el portaobjetos. Materiales nucleares Negro
➢ La muestra se deja secar al aire antes de Material de antecedentes Azul grisáceo claro
teñirla.
➢ Todos los frotis teñidos permanentemente
En un frotis de Tricromo bien teñido deben examinarse escaneando las partes
ESTRUCTURAS COLOR gruesas y delgadas del frotis usando un
aumento de menor potencia (objetivo x10 o
Quistes y trofozoítos Azul verde x40).
➢ Luego, las áreas delgadas se examinan bajo
*excepto Entamoeba coli *Púrpura inmersión en aceite (objetivo x100) para la
identificación de organismos.
➢ Debería tomar aproximadamente de 10 a 15
Cromatina periférica minutos examinar adecuadamente las áreas
nuclear seleccionadas.
➢ Los organismos que se tiñen ligeramente y
cariosoma pueden ser difíciles de identificar son los
siguientes:
Rojo oscuro-violeta oh Entamoeba hartmanni
oh Dientamoeba fragilis
barras cromatoidales
o Endolimax nana
Las células rojas de la o Chilomastix mesnili
sangre o Giardia lamblia

Huevos y larvas Rojo Tinte ácido resistente modificado


➢ La combinación de hematoxilina de hierro y
carbol fucsina se utiliza para la tinción

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RMT,
simultánea RN, Ph.D,Cryptosporidium
de Isospora, MA, MSMLSc y ➢ Procedimiento de Enterotest
protozoos. o El paciente ingiere una cápsula de gelatina
que contiene un hilo con peso.
Tinción acidorresistente modificada por Kinyoun o Un extremo de la cuerda se pega con cinta
➢ Se utiliza para detectar ooquistes de adhesiva al costado de la boca del
Cryptosporidium, Cystoisospora belli paciente; el extremo ponderado se lleva
(anteriormente Isospora belli ) y Cyclospora hasta la parte superior del intestino
cayetanensis. delgado.
➢ Los ooquistes aparecerán como organismos o Después de 4 horas, se levanta el hilo, se
teñidos de magenta sobre un fondo azul. recoge una porción del moco adherido al
hilo y se examina en una preparación
OTRAS MUESTRAS EXAMINADAS PARA INTESTINALES Y
húmeda en busca de trofozoítos móviles.
PARÁSITOS UROGENITALES
o La muestra restante del hilo se coloca
en un fijador para obtener un frotis
PREPARACIÓN DE CINTA DE CELOFÁN PARA oxiuros
teñido permanentemente.
➢ La muestra fecal no es óptima debido al ciclo de o Organismos que se pueden recuperar:
vida del oxiuro Enterobius vermicularis. La ▪ Huevos de Fasciola hepatica y
hembra del oxiuro migra desde el ano durante la Clonorchis sinensis
noche para poner huevos en la zona perianal.
▪ Ooquistes de Crypstosporidium
➢ La preparación de cinta de celofán se utiliza y Cystoisospora belli.
habitualmente para la detección de sospechas
de infecciones por oxiuros.
MUESTRAS DE SIGMOIDOSCOPIA
Procedimiento
➢ Limpie el área perianal de la persona con un ➢ Los raspados o aspirados de sigmoidoscopia se
utilizan para diagnosticar amebiasis o
depresor de lengua cubierto con cinta de criptosporidiosis.
celofán (con el lado adhesivo hacia afuera).
➢ Examine inmediatamente en busca de trofozoítos
➢ La recogida deberá realizarse a primera hora de móviles y una porción de la muestra se coloca en
la mañana, antes de que la persona vaya al baño fijador de PVA para obtener frotis teñidos
o se haya bañado. permanentemente.
➢ Después de la recolección, el lado adhesivo de la ➢ Se prepara un frotis para teñir con tinción
cinta se coloca en un portaobjetos de acidorresistente modificada o mediante
microscopio y se escanea con aumentos de alta procedimiento fluorescente si se sospecha
y baja potencia . criptosporidiosis.
➢ Existen en el mercado paletas con superficie
pegajosa para la prueba.
MUESTRAS DE ORINA, VAGINALES Y URETRALES
➢ Se pueden detectar organismos en el sedimento de
ASPIRADOS DUODENALES orina: o Huevos de Schistosoma haematobium y E.
➢ Se puede enviar material obtenido de aspirados vermicularis
duodenales o de Enterotest en casos de o Trofozoítos de Trichomonas vaginalis (también
sospecha de giardiasis o estrongiloidiasis se pueden observar en preparados húmedos
cuando los síntomas clínicos sean sugestivos de de secreción vaginal o uretral)
infección pero negativos en el examen de heces
de rutina. ➢ Se utilizan métodos de cultivo en sobre para T.
vaginalis como InPouchTV . Se agrega la muestra al
medio, se incuba y se observa el crecimiento dentro

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de los 3 días.RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc organismo puede perderse.
➢ Tinción de Giemsa :
oh Citoplasma: azulado
ESPUTO oh Cromatina: rojo a rojo púrpura
➢ Organismos vistos en montaje húmedo directo de o (+) Punteado palúdico: Puntos rosados y
Esputo: rojos
o Larva filariforme de Strongyloides o Ventaja: da el mejor detalle morfológico
stercoralis (hiperinfección) o Desventaja: procedimiento que requiere
o Huevos de Paragonimus westermani mucho tiempo
➢ Organismo visto en el frotis con tinción permanente ➢ Tinción de Wright:
o Entamoeba histolytica (el paciente es o Ventaja: período de tinción más corto
sospecha de absceso pulmonar)
o Desventaja: la intensidad del color para la
EXAMEN DE MUESTRAS DE SANGRE Y diferenciación de parásitos no es tan
PARÁSITOS DE LOS TEJIDOS buena como con Giemsa Stain.

Frotis de sangre Procedimiento de identificación


➢ La tinción con tinción de Giemsa y Wright es el ➢ Las películas gruesas y finas son útiles para los
método más común para detectar malaria, parásitos sanguíneos y se pueden preparar en el
Babesia, Trypanosoma y algunas especies de mismo portaobjetos o en portaobjetos
microfilarias. separados.
➢ El tripanosoma y las microfilarias se pueden ➢ Usar dos portaobjetos es más eficiente debido al
detectar en una preparación húmeda de una diferente tratamiento de las películas.
muestra de sangre fresca con aumentos de baja ➢ El tinte Giemsa se puede utilizar en películas
y alta potencia, y la identificación se basa en las gruesas y finas.
características del frotis teñido. o Los extendidos finos se fijan con metanol
➢ Trypanosoma spp . o microfilarias se pueden antes de teñirlos con tinte de Giemsa.
observar usando el método de concentración o Se suelta una muestra espesa durante el
usando filtros de membrana, pero rara vez se procedimiento de tinción para lisar los
usan en el laboratorio. glóbulos rojos.
➢ La biopsia de tejido se utiliza para detectar ➢ La tinción Wright no se puede utilizar para
Trichinella espiralis, Leishmania spp. y películas gruesas porque contiene metanol, que
Toxoplasma gondii. fijará los glóbulos rojos. Lise los glóbulos rojos
primero con agua destilada.
➢ Los métodos serológicos pueden ser útiles para
detectar la infección actual si el individuo Película gruesa
proviene de un área no endémica.
➢ Una película gruesa es mejor para la detección
Recolección y preparación de parásitos (alta sensibilidad) debido al mayor
volumen de sangre y al hecho de que los
➢ La muestra ideal para el frotis de malaria es la organismos se concentran en un área
sangre por punción digital porque proporciona relativamente pequeña.
las mejores características de tinción. ➢ Procedimiento de película gruesa:
➢ La sangre en EDTA proporciona una tinción o Poner varias gotas de sangre en el
adecuada si se procesa dentro de 1 hora. portaobjetos y extenderlo.
➢ Si se tarda más de 1 hora en preparar el o Espesor óptimo cuando el papel de
portaobjetos, el organismo puede periódico apenas se ve a través de la
distorsionarse. Y al exceder las 4 horas, el gota de sangre antes de que se seque.

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RMT, RN,gruesa
o Demasiado Ph.D,=MA, MSMLSc
la película se
desprende del portaobjetos
o Deje secar durante al menos 6 horas antes
de teñir.
o No debe fijarse con metanol porque la
fijación evita la lisis de los glóbulos
rojos.
o La tinción de Giemsa libera hemoglobina
mediante la lisis de los glóbulos rojos no
fijados.
o El frotis teñido a x100 detecta
microfilarias
o El frotis grueso a x1000 detecta
organismos palúdicos.
➢ Los glóbulos blancos, las plaquetas y los parásitos
sólo son visibles.

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➢ Es difícil identificar
RMT, RN,organismos
Ph.D, MA, yMSMLSc
también FLUIDO CEREBROESPINAL
comparar el tamaño de los eritrocitos ➢ Ocasionalmente se pueden observar en
infectados y no infectados. muestras de LCR organismos que causan
➢ La identificación de especies debe realizarse a meningitis amebiana o enfermedad del sueño.
partir de una película delgada porque se ➢ El tripomastigote es visible debido al
pueden observar las características del parásito movimiento del flagelo y la membrana
y los eritrocitos. ondulante.
➢ Requiere habilidades que puedan distinguir la
motilidad amebiana en un campo de
Película delgada neutrófilos.
➢ Se prepara una película delgada igual que con el ➢ Se cultiva el LCR cuando se sospecha
recuento celular diferencial. meningoencefalitis amebiana causada por
Naegleria fowleri .
➢ Se fija en metanol durante 1 minuto y se seca al o Se siembra agar no nutritivo con una capa
aire antes de teñir con tinte de Giemsa.
➢ Escaneado a x100 para detectar organismos de E. coli y se inocula el sedimento del
grandes como microfilarias LCR.
o Sellado e incubado a 35 o C.
➢ Al menos 100 campos de inmersión en aceite o Se examina diariamente en busca de
(x1000) para examinar la presencia de
organismos como Trypanosoma o de rastros finos de crecimiento bacteriano
organismos intracelulares como Plasmodium o que indiquen que las amebas se han
Babesia. estado alimentando de las bacterias.
➢ Para un paciente sintomático, se deben
examinar varios frotis de sangre de muestras
DIAGNÓSTICO INMUNOLÓGICO
recolectadas en intervalos aproximados de 6
horas durante 36 a 48 horas antes de realizar ➢ Los parásitos que invaden el tejido ( E.
un diagnóstico final negativo. histolytica, T. cruzi o T. gondii) son los
➢ La parasitemia (porcentaje de eritrocitos principales organismos que estimulan la
parasitados) se puede calcular a partir del frotis producción de anticuerpos.
de sangre fina. ➢ Las pruebas serológicas son útiles para la
identificación si no se pueden utilizar métodos
invasivos.
MUESTRAS DE BIOPSIA ➢ Las pruebas de anticuerpos sirven únicamente
➢ Se utiliza para diagnosticar Leishmania spp. como marcadores epidemiológicos,
infecciones porque son intracelulares. especialmente en zonas endémicas.
➢ El amastigote se puede detectar en tejidos ➢ Detección de IgM
como la piel, el hígado, el bazo y la médula o Ventaja: Útil para identificar infección
ósea. Depende de las especies presentes. durante la fase aguda o Desventaja:
➢ Las muestras de las lesiones cutáneas deben Disminuye a niveles no detectables como si
tomarse por debajo de los bordes de la úlcera la infección comenzara a resolverse.
porque la superficie no produce células ➢ Detección de IgG
infectadas. o No distingue entre infección
relativamente reciente o pasada
porque puede persistir durante años.

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RMT,
➢ La detección deRN, Ph.D, MA,
anticuerpos MSMLSc
es útil en algunos
casos: o un paciente que vive en una zona no
endémica por un parásito ha viajado recientemente
a una zona endémica y ahora muestra síntomas,
pero el organismo no ha sido detectado en una
muestra clínica.
o Una prueba positiva de anticuerpos
ayudaría a confirmar el diagnóstico.

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➢ Desventaja RMT,
de laRN, Ph.D,deMA,
prueba MSMLScgran
anticuerpos: monoclonales para detectar organismos Giardia y
número de reacciones cruzadas que limita su Cryptosporidium .
utilidad diagnóstica. ➢ No todos los kits pueden detectar E. histolytica
➢ Muchas pruebas serológicas utilizadas por pero pueden diferenciar E. histolytica y E.
laboratorios de referencia como los CDC no están dispar.
disponibles comercialmente. ➢ Los kits de detección de antígenos han sustituido
a los exámenes microscópicos en los
➢ Parámetros que un laboratorio debe considerar al laboratorios de algunos hospitales.
seleccionar el método a utilizar:
o Costo ➢ Las pruebas de malaria aprobadas en EE. UU. se
oh Rendimiento diagnóstico basan en el principio de captura de antígeno
oh Poblacion de pacientes inmunocromatográfico que utiliza sangre
completa para detectar proteínas de la malaria.
o Incidencia relativa del parásito en la zona.
o Número de muestras a procesar ➢ La
➢ La sangre del paciente se hace reaccionar con un
anticuerpo monoclonal marcado con tinte o
hemaglutinación y la fijación del complemento son partículas de oro.
métodos clásicos utilizados para detectar anticuerpos
contra organismos parásitos. ➢ Algunas pruebas no son específicas de especie y
detectan una proteína como la lactato
➢ Las pruebas más nuevas utilizan técnicas de deshidrogenasa o aldolasa del parásito que es
inmunoensayo enzimático o fluorescente (EIA). común a todas las especies de Plasmodium
➢ Las pruebas de inmunoensayo para detectar humanas.
anticuerpos contra T. gondii o E. histolytica ➢ Otras pruebas detectan proteínas específicas de
(infecciones extraintestinales) están disponibles
cada especie, como la proteína rica en histidina
para los laboratorios clínicos.
que está asociada con P. falciparum.
➢ Algunas pruebas detectan ambos tipos para
INMUNOENSAYOS ENZIMÁTICOS proporcionar una imagen más completa del
agente infeccioso.
➢ Problemas con el desarrollo de métodos de EIA para
la detección de anticuerpos contra parásitos
intestinales:
TÉCNICAS DE ANTICUERPOS FLUORESCENTES
o Dificultad para obtener el antígeno del Anticuerpo fluorescente directo
parásito apropiado para la detección.
oh Reactividad cruzada de anticuerpos.
➢ Técnicas de anticuerpos fluorescentes directos
(DFA) que utilizan anticuerpos monoclonales
oh Pobre sensibilidad y especificidad de las
desarrolladas para detectar ooquistes de
pruebas. Cryptosporidium en las heces.
➢ El uso principal de la EIA ha sido la detección de o Las heces se esparcen en un portaobjetos.
antígenos de parásitos.
o Se añade el reactivo que contiene el
➢ A diferencia de las pruebas de anticuerpos, también anticuerpo.
proporcionan información sobre la infección actual.
o La muestra se examina con un
➢ Número de EIA disponibles para detectar la microscopio fluorescente para
presencia de Giardia lamblia, Cryptosporidium spp.,
E. histolytica y Entamoeba dispar. determinar las características de la
estructura de color verde manzana.
➢ Algunos son capaces de detectar más de un parásito
utilizando anticuerpos específicos del organismo ➢ Ventaja: demuestran una mayor sensibilidad,
inmovilizados en una membrana. especialmente cuando sólo están presentes
ooquistes raros.
➢ Kits de EIA rápida utilizados con heces frescas o ➢ Desventaja: más caro que el procedimiento
conservadas y kits que utilizan anticuerpos
acidorresistente modificado

2
5
PARASITOLOGÍ
Programa de Evaluación de Tecnología
A -1
Médica
28 de octubre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag
➢ Los anticuerpos
RMT, RN, Ph.D, MA, MSMLSc
monoclonales eliminan los
resultados falsos positivos y falsos negativos, lo
que resulta útil para examinar grandes
cantidades de muestras.
Capa leucocitaria cuantitativa
➢ El procedimiento cuantitativo Buffy Coat utiliza
naranja de acridina (tinte fluorescente) para
teñir material nuclear y detectar organismos
palúdicos en la sangre.

2
6
PARASITOLOGÍ
Programa de Evaluación de Tecnología
A -1
Médica
28 de octubre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag
o El RMT, RN,
tubo de Ph.D, MA, MSMLSc
microhematocrito está
recubierto con tinte fluorescente.
o Después de la centrifugación, se pueden
ver parásitos en un área pequeña en
la parte superior de la columna de
glóbulos rojos.
➢ Ventaja: Más sensible que el frotis grueso para
demostrar parásitos
➢ Es posible que los instrumentos necesarios no
estén disponibles.

MÉTODOS MOLECULARES
➢ Los métodos moleculares para la identificación
de parásitos todavía están limitados a los
laboratorios de referencia.
➢ Los métodos pueden incluir ensayos de
reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
clásicos y en tiempo real.
➢ Existen métodos moleculares de detección
para especificar una serie de organismos,
incluidos los parásitos de la malaria.

2
7
INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
Programa de Evaluación de
Tecnología Médica - 1
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MT(ASCPi),
ANTÍGENO, MSMT
ANTICUERPO e INMUNE 1. INMUNOGENECIDAD: capacidad inherente de
RESPUESTA una sustancia para inducir una respuesta inmune
que resulta en la formación de linfocitos o
ANTÍGENOS anticuerpos inmunes.
Definición: Cualquier estructura molecular que, cuando L Si un antígeno es inmunogénico, es capaz
se introduce, es capaz de producir anticuerpos. de inducir la producción de anticuerpos o
una respuesta inmune.
L Puede provocar que el sistema inmunológico
FACTORES QUE AFECTAN
produzca anticuerpos.
L Puede ser microorganismo, patógeno, sustancias
INMUNOGENECIDAD
extrañas, etc. A. EXTRAÑO: el inmunógeno debe reconocerse
PARTES DEL ANTÍGENO como extraño o no propio para inducir una
respuesta inmune.
L El sistema inmunológico es capaz de
• Porción del transportista: responsable de discriminar lo propio de lo no propio y
esta característica única permitiría que el
el
sistema inmunológico se active cuando
peso molecular del antígeno; el
hay agentes extraños (invasores)
El peso molecular de un antígeno se puede presentes en el cuerpo.
expresar en daltons.
L El inmunógeno debe ser reconocido como
• Epítopo o Determinante: determina la
especificidad del antígeno; responsable de la
extraño o no propio o simplemente como
un invasor para que se produzca una
producción de anticuerpos específicos y puede respuesta inmune.
basarse en la naturaleza del antígeno
TIPOS DE ANTÍGENOS

Anticuerpo A

Autoantígeno: autoantígeno; derivado del


cuerpo de la persona
L Un sistema inmunológico sano no debe
ser estimulado por un autoantígeno
porque se considera propio o parte del
sistema corporal.
L No debería provocar una respuesta
inmune porque podría provocar un
trastorno autoinmune.
• Aloantígeno : derivado de otros individuos de la
misma especie.
L Toda la célula microbiana es la porción ( Ejemplo: células sanguíneas de donantes )
portadora del antígeno. Las estructuras
específicas de la membrana de la célula
son los epítopos. Los epítopos de la
• Heteroantígeno: derivado de otras especies;
pueden derivarse de animales o de fuentes no
superficie determinarían el anticuerpo humanas; más extraño para los humanos
específico que interactuaría con el bacilo.
DOS PROPIEDADES DE LOS ANTÍGENOS

1
INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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• MT(ASCPi),
Antígeno MSMT : un tipo de
heterófilo
heteroantígeno que se produce a partir de Ejemplo:
Respuesta inmune

plantas o animales no relacionados y que


puede inducir una respuesta inmune común o L albúmina (30, 000 a 60, 000 daltons);
similar. considerado como un buen antígeno
TIPOS DE INJERTO L hemocianina (100.000 a millones de
daltons); Excelente antígeno porque es de
Injerto: también se conoce como trasplante de tejido. tipo altamente complejo.
• Autoinjerto: obtenido del propio cuerpo del
paciente C. COMPLEJIDAD QUÍMICA
Ejemplo: Pacientes que sufrieron
quemaduras de segundo o tercer grado. • Proteínas: el mejor y más fuerte antígeno;
• Isoinjerto/Syngraft : obtenido de individuos
idénticos (gemelos idénticos)
Altamente estable debido a los enlaces
peptídicos presentes que hacen que circule
por más tiempo en el cuerpo.
L
• En la circulación, si el antígeno
Aloinjerto: obtenido de no idénticos pudiera durar más tiempo en la
individuos de la misma especie; Injerto más circulación, eso lo convertiría en un
antígeno altamente inmunogénico.
común trasplantado Ejemplo: Riñón
Cuanto más tiempo permanezca en la
Sangre: tejido comúnmente
circulación, mayor será la exposición
transfundido
• Heteroinjerto/ Xenoinjerto: obtenido de
otras especies
del antígeno en el sistema
inmunológico, lo que aumentará las
posibilidades de que se produzca una
Ejemplo: Otros mamíferos o animales de respuesta inmunitaria.
laboratorio (corazón de cerdo)
• Polisacáridos: ex. endotoxina,
B. TAMAÑO cápsula neumocócica
• Cuanto más grande es la molécula, más
inmunogénica. •
• El número de epítopos aumenta
Glicoproteínas: como ABO, antígenos Rh
proporcionalmente con el tamaño de la
molécula. • Polipéptido: ej. Insulina
• Peso molecular mínimo para que un
antígeno/sustancia induzca una respuesta
• Ácido nucleico, lípidos y aminoácidos:
menos inmunogénicos
inmune: al menos 10.000 daltons de peso
molecular o superior
• Si tiene menos de 10.000 daltons , el
antígeno se considera hapteno (antingeno
2. ANTIGENICIDAD/ESPECIFICIDAD: la
capacidad de reaccionar específicamente con
incompleto), por lo que es incapaz de inducir el anticuerpo o célula que provocó su
una respuesta inmune debido a su pequeño
tamaño. producción.
Tamaño aumentado – Epítopo aumentado –
L La especificidad se basa en el
epítopo presente en la superficie del
Mejorar antígeno.

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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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MT(ASCPi), MSMT
DEFINICIÓN DE TÉRMINOS L Ejemplos:
✓ CFA (Adyuvantes completos de
Freunds): compuesto de
• Hapteno: un antígeno incompleto; no Emulsión de agua en aceite de
cultivo de Mycobacterium
inmunogénico por sí mismo; Si se combina butyricum o Bordetella pertussis
con una proteína transportadora, el hapteno ✓ LPS (lipopolisacárido)
puede provocar una respuesta inmune ya que
aumentará el peso molecular y se estabilizará
✓ Adyuvantes de aluminio: más
utilizados
la estructura del hapteno. clínicamente/comúnmente

• Inmunógeno: definido como cualquier sustancia


que puede inducir una respuesta inmune;
CLASIFICACIÓN DEL ANTÍGENO SEGÚN
LA REACCIÓN DE ANTICUERPOS
antígeno
L Todos los inmunógenos son antigénicos, 1. Antígeno homólogo : antígeno que induce un
pero no todos los antígenos son anticuerpo y reacciona específicamente con él.
inmunogénicos.
• Alérgeno : clase especial de inmunógeno que
induce hipersensibilidad reacciones
2. Antígeno heterogéneo : reacción cruzada; El
antígeno reacciona con el anticuerpo. No
específicamente reacción de hipersensibilidad indujo para su producción.
tipo 1; causar reacción en algunas personas pero
no en todas AFINIDAD versus AVIDEZ

• Adyuvantes: sustancias añadidas a un


Afinidad: la fuerza de atracción entre un epítopo y
el sitio de combinación del antígeno (porción Fab)
inmunógeno para mejorar la respuesta inmune del anticuerpo.
L Acciones: Avidez: la suma de la interacción/la fuerza de la
✓ Prolonga el tiempo de retención interacción entre antígenos complejos y anticuerpos
del inmunógeno en el cuerpo:
permanece más tiempo en Similitudes: Ambos miden la fuerza de
circulación, aumenta las atracción/interacción
posibilidades de ser reconocido
Diferencias: la afinidad implica una interacción
por las células inmunes (WBC),
activando el sistema simple (un solo epítopo + porción Fab), mientras que
inmunológico. la avidez implica que múltiples epítopos interactúan
con los anticuerpos.
✓ Aumenta el tamaño efectivo del
inmunógeno; la sustancia más
grande, el más
inmunogénico y se reconoce ANTICUERPOS
fácilmente Definición: sustancias, específicamente
✓ Estimula el afluencia de glicoproteínas, producidas por los linfocitos B o las
macrófago y/o células plasmáticas (linfocitos B maduros o
linfocitos – aumentó diferenciados) en respuesta a una estimulación
producción de antigénica. También conocidas como
leucocitos inmunocompetentes
oProteína portadora común :
Albúmina.
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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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inmunoglobulinas.
MT(ASCPi), MSMT ESTRUCTURA DE LA INMUNOGLOBULINA
Anteriormente conocidas como gammaglobulinas,
ya que se descubrió que estaban concentradas en la
región gamma de la electroforesis de proteínas
séricas.

TERMINOLOGÍAS:
Isotipo: es lo mismo que las clases de anticuerpos .
Las clases de anticuerpos dependen de su cadena
pesada presente y la cadena pesada de los
anticuerpos se usa básicamente para nombrar los
anticuerpos.
5 CADENAS PESADAS : 1. Cuatro (4) cadenas polipeptídicas
✓ Gamma (IgG) L Compuesto por 2 cadenas ligeras idénticas
✓ Mu (IgM) y 2 cadenas pesadas idénticas (no se
permiten cadenas diferentes)
✓ Alfa (IgA) L Cadenas ligeras :
✓ Delta (IgD) o Kappa : sintetizado con
✓ Épsilon (IgE) regulación del gen ubicado en el
Alotipo: determinado por la diferencia en la estructura cromosoma 2
del anticuerpo en la región constante , específicamente o Lambda : la formación de este está
la secuencia de aminoácidos. regulada por el gen situado en el
Idiotipo: determinado según la diferencia en la región cromosoma 22
variable del anticuerpo. L Cadenas pesadas : Cadenas pesadas :
síntesis de Mu, alfa, delta, épsilon
regulada por el cromosoma 14

2. Tanto las cadenas ligeras como las pesadas se


mantienen unidas mediante ENLACES
DISULFUROS COVALENTES
3. Las cadenas pesadas están interconectadas por
ENLACES DISULFUROS.

4. Ig tiene 2 regiones terminales:


Carboxiterminal : con secuencia de
aminoácidos constante (región constante)
L AKA. Región Fc (Fragmento
cristalizable/Fragmento cristalino)
Aminoterminal : con anticuerpos variables

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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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especificidad (región MSMT
MT(ASCPi), variable)
L AKA. Fab - Fragmento para unión a
antígeno o antígeno Vinculante
Fragmento: donde interactúa el epítopo
del antígeno.
L porción hipervariable de la región Fab :
lugar específico donde
El epítopo del antígeno interactúa con el
anticuerpo.
Con el uso de enzimas, estas se utilizan para
desintegrar y estudiar las partes del anticuerpo.
5. El tratamiento del anticuerpo monomérico con
la enzima papaína (escinde enlaces covalentes)
producirá 3 fragmentos :
Un fragmento Fc : fragmento cristalino;
involucrarse en la función biológica de Ig
L Las funciones biológicas del fragmento Fc
están involucradas en:
✓ Fijación del complemento
✓ Transferencia placentaria de
anticuerpos
✓ Sitio de unión para células
Dos fragmentos Fab (monovalentes): capaces
de unirse al antígeno incluso sin el Fc, pero no
pueden aglutinarse ni precipitar ; separados 2
fragmentos fabulosos

6. El tratamiento con pepsina da como resultado la


digestión del fragmento Fc → destruido →
dejando 2 fragmentos Fab . Los dos
fragmentos Fab tienen dos sitios de
combinación de antígenos ( bivalentes ).

5
INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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7. por lo tanto, es capaz
MT(ASCPi), de unirse a antígenos,
MSMT Región de bisagra: se encuentra entre CH1 y CH2
precipitarse y aglutinarse .
L La región bisagra es la región flexible del
anticuerpo. La flexibilidad de la región
bisagra se atribuye a la presencia de
abundante aminoácido prolina.
Cadena J (Joining Chain): estructura glicoproteica
que se utiliza para unir o conectar 2 o más
monómeros de anticuerpos
L Ejemplo: IgM, IgA secretora

DOMINIOS DE INMUNOGLOBULINA DOMINIOS DE


Región Variable: responsable de la especificidad INMUNOGLOBULINAS
del anticuerpo.
L La región variable es el sitio de unión al
antígeno.
L HIPERVARIABLE PARTE/
REGIÓN: porción específica de la región
variable donde tiene lugar la unión al
antígeno.
CH2 (Cadena Pesada Constante 2) : se une a las
proteínas del complemento, específicamente a la
C1q.
L La parte del anticuerpo que inicia la
activación de la vía del complemento,
específicamente las vías clásicas.
CH3 (Cadena Pesada Constante 3): responsable
de las reacciones citotrópicas que involucran
macrófagos, monocitos, mastocitos, células
asesinas citotóxicas y células B.
CL (Constant Light Chain): responsable del tipo de cadena ligera del anticuerpo.
L El tipo de cadena ligera puede ser Kappa o Lambda. Kappa está presente predominantemente en
Ab, el 65% de la cadena ligera es Kappa y el 35% es Lambda.

6
INMUNOLOGÍA Y
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MT(ASCPi), MSMT
CLASES DE INMUNOGLOBULINAS
IgG
• Ig predominante en suero humano sano
IgM
• Anticuerpo
Anticuerpo L con la vida media o vida pentamericano; más
en circulación más larga grande
Anticuerpo L predominante en la
respuesta secundaria o anamnésica
• Respuesta primaria
IgG1 66% 2
IgG2 23% 4
• Proporciona inmunidad al recién nacido.
IgG3
IgG4
7%
4%
15
2
L único anticuerpo que puede atravesar anticuerpo; Ab predominante durante la
etapa aguda de la enfermedad
activamente la placenta porque es el
anticuerpo más pequeño; puede • El primero en aparecer en la filogenia y el
último en salir en la senescencia.

proporcionar inmunidad neonatal
L IgG1 e IgG3: subclases de IgG que Primer anticuerpo que se expresa en la
pueden cruzar activamente la superficie de las células B; ya que mu es la
primera cadena pesada que se sintetiza

placenta
Aparecen por primera vez después de un
• Fijación del complemento (Vía Clásica)

estímulo antigénico primario.
Considerado como un anticuerpo que
L IgG3, IgG1, IgG2 (de mayor a menor reacciona en frío a temperatura de referencia
(4°C)
potencia)

• Opsonización • Funciones de la IgM:


L Fijación del complemento (clásica;
• Neutralización de toxinas y virus.
L
más potente y eficaz)

• Participa en la reacción de aglutinación y


precipitación.
Reacción de aglutinación (puede

IgA
L IgG se considera el mejor anticuerpo
precipitante. Existen como
L Anticuerpos que reaccionan en monómero (sangre)
caliente; Reacciona óptimamente a y dímero
37°C. Todos son clínicamente iniciar Lattice
(secreción). Formación)—
significativos porque reaccionan de mejor
manera óptima a la temperatura anticuerpo aglutinante porque la IgM
corporal. es el Ab más grande
L opsonización
4 SUBCLASES DE IgG L Neutralización de la toxina
Porcentaje del total de No. de cuerpos Responsable de la inmunidad de las
IgG en circulación. disulfuro
mucosas.

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L Transferido por la madre a través del
MT(ASCPi), MSMT
calostro (junto con IgG)
2 subclases: IgA1, IgA2
Con componente secretor
El componente secretor es responsable
de mantener la estructura de IgA en
la secreción evitando la degradación
enzimática de la estructura del
anticuerpo.

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INMUNOLOGÍA Y
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IgD MT(ASCPi), MSMT

La función aún se desconoce, pero se cree


que desempeña un papel en la
inmunorregulación.
Se encuentra en la superficie de los linfocitos
B.

• Se postula como un anticuerpo antiidiotípico

IgE
Ig menos abundante en el suero
Anticuerpo termolábil, Otro nombre Otras notas
originalmente conocido como ✓ Poder cruz el
anticuerpo reagínico. Se une placenta excepto
fuertemente a los mastocitos IgG Ig sérica IgG2
(tejidos). y basófilo ✓ Ig mayor en 2°
receptor (circulación intravascular) respuesta inmune
Media algunos tipos de reacciones de ✓ Ig predominante en
hipersensibilidad (la histamina liberada se la secreción
debe a la unión de la IgE con el alérgeno
IgA Ig secretora
✓ Con cadena J
adjunto) ✓ Existe como
Aumenta durante las infecciones (es decir, monómero en suero
infección helmíntica) y dímero en
secreción.
✓ Ig predominante en
IgM Ig pentamérica 1° Inmune
CLASES DE INMUNOGLOBULINAS respuesta
Activar Sí
IgG IgA NoIgE No
IgM IgD ✓ Tiene cadena J
Comp (específica
150T Sí
160-400T 900T 180 190
✓ Implicado en la
lemen te mente vía Sólo vía (especí tonela tonela activación de las
Peso células B.
clásica), alternativa ficame das das
molecul
excepto (Siempre nte el IgD --- ✓ Susceptible a
ar degradación de
(Dalton) IgG4 que IgA esté Camin
enzimas
Media 21-23 días 5-6endías 5 odias 2-3 ✓ Calor & Ácido
agrega s Clásico 2-3
vida días
para que ) días ✓ Asociado
Lábil con
provoque Hipersensibilidad
Subclase 4 2 o , más 2 - -
induzca la eficient inmediata
s
Dominio 4 activación)
4 e5 4 5
IgE Ig reactiva ✓ Se une basófilos
y mastocitos
s
✓ Elevado durante
infecciones
parasitarias
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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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MT(ASCPi), MSMT
RESPUESTA RESPUESTA INMUNITARIA
INMUNE
Definición: Reacción del sistema inmunológico,
específicamente las células inmunes , cuando el cuerpo • PRIMARIA
Ocurre en cuatro fases después de la exposición
a un antígeno.
está expuesto a un agente extraño.
Afectado por los siguientes factores:
Fase de retraso L : el anticuerpo
aún no es detectable; es la fase en la que
1. Estado de salud general las células inmunes procesan el antígeno.
L Si la persona está sana, se deduce que la Si el antígeno se encuentra por primera
respuesta inmune también es vez, más largo será el proceso antigénico.
inmediata/fuerte. Si una persona está Por lo tanto, el resultado es una fase de
enferma, la respuesta inmune está un LAG más larga. Si el antígeno ya está
poco retrasada o débil. expuesto la segunda vez (Re exposición
2. Edad al mismo agente), el proceso antigénico
en la fase LAG es más corto debido al
L El sistema inmunológico de los recién
reconocimiento por parte de las células
nacidos aún no se ha desarrollado de memoria. En la Respuesta Primaria ,
completamente y todavía está en proceso hay una Fase LAG más larga.
de desarrollo, por lo que tienen una
respuesta inmune más débil. Las células
del sistema inmunológico de los bebés L Fase logarítmica/exponencial Fase :
son ingenuas. Los geriátricos también anticuerpo título aumenta
tienen un sistema inmunológico débil, logarítmicamente; se observa el título
por lo que tienen una respuesta inmune máximo del anticuerpo;
débil o retrasada.
3. Dosis/Vía de administración del antígeno
L Cuanto mayor sea la dosis del L Meseta/Estacionario: el título de
antígeno/cuanto mayor sea el antígeno anticuerpos se estabiliza; Allá es
un
expuesto al sistema inmunológico, más
fuerte o más rápida será la respuesta equilibrio/equilibrio entre
inmune síntesis o producción de anticuerpos
versus catabolismo de anticuerpos.
L Cuando una persona es vacunada con un
antígeno particular, se considera que la
dosis de antígeno garantiza la
provocación de una respuesta inmune. La L Disminución: el catabolismo de
forma común de administrar una vacuna anticuerpos está aumentando (el
es intramuscular/subcutánea. catabolismo de anticuerpos excede la
L La mejor vía de administración del producción de anticuerpos); por lo tanto,
el título de anticuerpos está
antígeno es la intravenosa (IV) ; poco
común disminuyendo
4. Control genético de la respuesta inmune.
L Complejo Mayor de Histocompatibilidad
(MHC) está controlado genéticamente,
• IgM es el primer anticuerpo que aparece en la
respuesta inmune primaria
una forma de activar y provocar una
respuesta inmune.

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0
INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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MT(ASCPi), MSMT COMPARACIÓN DE PRIMARIA Y
RI SECUNDARIO

IR 1° 2°
Fase de latencia Más extenso Corta
Fase de meseta Corta Más extenso
Fase de declive menos gradual Más gradual
AB presente IgM IgG, IgM
Título AB Más bajo Más alto
RESPUESTA INMUNITARIA SECUNDARIA

• alias ANAMNÉSTICO/ MEMORIA


RESPUESTA
• Provocado por una segunda o cualquier exposición
posterior al mismo antígeno
• Presenta las mismas cuatro fases que la respuesta
primaria.
La fase L LAG es más corta porque ya hay una
reexposición o memoria, por lo que hay una
respuesta de anticuerpos más rápida.
• El título de anticuerpos de la respuesta inmune secundaria es mayor que el de la respuesta primaria
• La IgG es el anticuerpo predominante en la respuesta inmune secundaria.

• Activo Artificial - Inmunidad adaptativa de vacunas con antígenos atenuados

• No respondedores – una persona que no es


capaz de producir anticuerpos adecuados contra un agente particular

1
1
INMUNOLOGÍA Y
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Programa de Evaluación de
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MT(ASCPi), MSMT
CITOMETRÍA DE FLUJO Fluidica

• Para que los parámetros celulares se midan


• Utilizado por primera vez con fines de
con precisión, las células deben pasar a
través de un láser una a la vez en una sola
fila. Para hacerlo, el citómetro extrae las
investigación en la década de 1960.
• En la década de 1980, se utilizó debido a una
caída ↓ en las células T auxiliares
células suspendidas y las inyecta dentro de
una corriente portadora de solución salina
isotónica (líquido de envoltura) para formar
circulantes. un flujo laminar.
• Se utiliza en la identificación de la infección
por VIH y en la inmunofenotipificación de
• La corriente de muestra está controlada por
la corriente portadora, lo que la enfoca
células para identificar la expresión del hidronámicamente para que las células se
antígeno de superficie. midan con precisión.
Citometría de flujo celular Fuente de luz láser
• Las células individuales en suspensión
líquida se analizan a través de su:
• Consta de uno o más láseres pequeños
refrigerados por aire.


o Características intrínsecas de dispersión
de la luz. La longitud de onda emitida por la luz
o Propiedades extrínsecas (como la monocromática indica qué fluorocromos se
presencia de proteínas de superficie pueden utilizar; sin embargo, no se pueden
específicas) utilizar todos los fluorocromos. El

• Analiza utilizando anticuerpos o sondas


marcados con fluorescencia.
fluorocromo que se utilizará en un ensayo
depende de la fuente de luz utilizada para la
excitación.
oh Fluorocromo : absorbe la luz a través

• Ventajas : un espectro de longitudes de onda;


o El uso de varios fluorocromos emite luz de menor energía en un
diferentes permite a los citómetros espectro de longitudes de onda más
medir múltiples propiedades celulares largas; Tienen un patrón espectral
o Se pueden analizar miles de células, lo distintivo de absorción y emisión.
que permite una detección precisa de
células raras.
• Los citómetros de flujo clínicos contienen al

• Los componentes principales de un citómetro


de flujo son los ff:
menos un láser (argón), mientras que los
citómetros de flujo más nuevos tienen un
segundo láser (helio-neón).
o Fluidica
o Fuente de luz láser
• A medida que las células pasan a través del
láser, la luz se dispersa en muchas
oh Ópticas y fotodetectores direcciones donde la cantidad y el tipo de
o Computadora para análisis y gestión de dispersión de luz pueden dictar la
datos. información sobre las propiedades físicas de
la célula.
INSTRUMENTACIÓN • Parámetros intrínsecos : utilizados para
caracterizar diferentes tipos de células.

1
2
INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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o Dispersión
MT(ASCPi),deMSMT
luz en ángulo hacia relativa establecida en 1 a 256
canales

adelante/FSC (dispersión de luz a
menos de 90 grados): indica el El número de fotodetectores limita la cantidad de
fluorocromo a medir

o
tamaño
Dispersión de luz en ángulo recto • La especificidad del fotodetector para una
determinada banda de longitud de onda se logra
ortogonal/SSC (dispersión de luz a mediante la disposición de una serie de filtros
90 grados): indica granularidad o ópticos.
complejidad intracelular

ADQUISICIÓN Y ANÁLISIS DE DATOS
Parámetros extrínsecos : requiere la adición
de una sonda fluorescente para la detección. Representaciones Gráficas (Niveles de
Fluorocromos comúnmente utilizados en Representación):
citometría de flujo clínica 1. Histograma de un solo parámetro
Excitación Fluorocromo o
Longitud de tinte
Emisión
Longitud de • Traza un parámetro elegido (generalmente
fluorescencia) en el eje x versus el número de
ondanm (láser
488 onda
580 eventos en el eje y, por lo que solo se analiza un
de argón) Isotiocianato de parámetro usando este tipo de gráfico.
fluoresceína (FITC)
580 • Luego, el operador puede configurar un
marcador para diferenciar entre células que
Ficoeritrina (PE)
Yoduro de 620 tienen niveles bajos de fluorescencia (negativas)
de células que tienen niveles altos de
peridinina (PI) fluorescencia (positivas) para un anticuerpo
670 marcado con fluorocromo en particular.
Peridinina clorofila
(PerCP) El marcador define % + celdas

633 nm (láser Aloficocianina 670


He-Ne) (APC)
Cy-5 670

ÓPTICA Intensidad fluorescente

• La dispersión de la luz y la fluorescencia


generada debido a la interacción de las células 2. Histograma bivariante ( o también conocido
con el láser se detectan mediante detectores y como gráfico de puntos de parámetro dual)
tubos fotomultiplicadores.
o La luz fluorescente llega al tubo
fotomultiplicador y crea corriente
• Donde cada punto representa una celda o evento
individual
eléctrica → pulso de voltaje → señal
digital
• Se trazan dos parámetros, uno en cada eje, uno
frente al otro. Utilizando diagramas de puntos de
▪ La señal digital es proporcional a la parámetros duales, el operador puede dibujar una
intensidad de la luz detectada. "puerta" alrededor de una población de interés y
analizar varios parámetros ( extrínsecos e
▪ La intensidad se mide en una escala intrínsecos ) de las celdas contenidas dentro de

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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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Tecnología Médica - 1
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la región cerrada. Esto permite al operador
MT(ASCPi),
detectar desechos MSMTsubpoblaciones de
y aislar
células de interés.

• El recuento absoluto de un tipo de célula


particular (por ejemplo, linfocitos T CD4) se
obtiene multiplicando el recuento absoluto de
células de la población de interés (p. ej.,
linfocitos) derivado de un analizador de
• Al analizar una población de células
hematología por el porcentaje de la población de
interés en la muestra. (Linfocitos CD3 y CD4).


utilizando un diagrama de puntos de dos
parámetros, el operador elige qué parámetros El análisis fenotípico detallado puede
analizar en los ejes x e y. Luego divide el
diagrama de puntos en cuatro cuadrantes , determinar el linaje y la clonalidad, así como el
separando los positivos de los negativos en grado de diferenciación y activación de una
cada eje. población celular. Esto es útil para el diagnóstico
diferencial o la aclaración de trastornos
CUADRANTE 1 linfoproliferativos estrechamente relacionados.
Está formado por células
que son positivas. para
fluorescencia en el eje y y ANÁLISIS DE MUESTRA
negativo para
fluorescencia en el eje x. Muestras comúnmente utilizadas para análisis:
CUADRANTE 2 Está formado por células
que son positivas. para
fluorescencia en los ejes
• Sangre pura

xey L debe recolectarse en ácido


CUADRANTE 3 Está formado por células etilendiaminotetraacético (EDTA) , el
anticoagulante de elección para las
que son negativas. para
muestras procesadas dentro de las 30
fluorescencia en los ejes horas posteriores a la recolección.
xey
La heparina L también se puede
CUADRANTE 4 utilizar para sangre total y médula ósea y
Está formado por células
que son positivas. para puede proporcionar una estabilidad
mejorada en muestras de más de 24 horas.
fluorescencia en el eje x y
negativo para L Se deben rechazar las muestras
fluorescencia en el eje y hemolizadas o coaguladas . La sangre
periférica, la médula ósea y otras
muestras con una gran cantidad de
glóbulos rojos requieren la eliminación de
eritrocitos para permitir un análisis eficaz

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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
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de los glóbulos blancos.
MT(ASCPi), MSMT citometría de flujo se ha convertido en un
componente importante de la evaluación inicial y el
• Médula ósea seguimiento posterapéutico posterior en el
tratamiento de la leucemia y el linfoma.

• Aspiraciones de fluidos
Uno de los componentes más importantes del
análisis de citometría de flujo es la estratificación
Las muestras de tejido : es mejor recolectarlas de las neoplasias hematopoyéticas según su linaje
y transportarlas en un medio de cultivo de tejidos (es decir, células B, células T o mieloides) y el
(RPMI 1640) a temperatura ambiente o a 4ºC , si el grado de diferenciación.
análisis se retrasará. CD45 es un marcador panleucocitario presente
L Luego, la muestra se desagrega para en todos los glóbulos blancos pero con niveles
formar una suspensión de células variables de expresión; esto da como resultado
individuales, ya sea mediante niveles variables de fluorescencia. Esta variación en
disociación mecánica o mediante la expresión se basa en la madurez de la célula. Los
digestión enzimática . blastos expresan niveles más bajos de CD45 (baja
L mecánica desagregación , o fluorescencia), pero muestran un aumento de la
" broma ," es preferido y es expresión de CD45 a medida que la célula madura,
Esto se logra mediante el uso de un por lo que los glóbulos blancos maduros tienen una
bisturí y fórceps, una aguja y una jeringa fluorescencia mucho más brillante en comparación
o una pantalla de malla de alambre. con sus etapas progenitoras anteriores. Este nivel
Luego se añaden anticuerpos L a la variable de expresión de CD45 es útil para
preparación celular resultante y se diferenciar diversas poblaciones de glóbulos
procesan para su análisis. Los blancos.
anticuerpos utilizados suelen ser
monoclonales, cada uno con una etiqueta La enumeración de células T CD4 de sangre
fluorescente diferente. periférica en pacientes infectados por el VIH sigue
siendo la prueba de mayor volumen realizada en el
laboratorio de citometría de flujo, porque se utiliza
APLICACIONES CLÍNICAS para clasificar las etapas de la enfermedad del VIH y
determinar las opciones de tratamiento.
Aplicaciones rutinarias de la citometría de flujo en el Las infecciones por VIH tipo 1 causan
laboratorio: una disminución rápida y profunda en el
• Inmunofenotipado de linfocitos de sangre
periférica.
número de células T CD4 y una
expansión de los niveles de células T
• Enumeración de células madre CD34 en
sangre periférica y médula ósea para su uso
CD8 durante el curso inicial (12 a 18
meses) de la enfermedad.
en trasplantes de células madre. L Algunas personas continúan perdiendo
• Caracterización inmunofenotípica
leucemias agudas, linfomas no Hodgkin y
de
rápidamente células T CD4 y progresan
hacia el SIDA, mientras que otras
otros trastornos linfoproliferativos. mantienen recuentos de células T CD4
relativamente estables y permanecen
libres de SIDA durante años.
La inmunofenotipificación mediante

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SEROLOGÍA
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L Durante la fase crónica
MT(ASCPi), MSMT de la enfermedad ANTICUERPOS MONOCLONICOS
por VIH-1, la disminución de las células • Importante en la inmunotipificación mediante
T CD4 puede ser lenta durante muchos citometría de flujo o Se utilizan anticuerpos
años debido al mantenimiento de los monoclonales y policlonales marcados con
mecanismos homeostáticos. Sin fluorescencia.
embargo, a medida que estos • Es preferible utilizar anticuerpos policlonales
mecanismos homeostáticos comienzan a específicos para diversos antígenos de
fallar, se produce una mayor disminución superficie.
de las células T CD4 y CD8, lo que • Producido mediante técnica de hibridoma y
eventualmente conduce al desarrollo del ADN recombinante.
SIDA.
MARCADORES DE SUPERFICIE EN
CÉLULAS T CD4+ CÉLULAS T Y B
➢ utilizado para estadificar la progresión de la ANTÍGEN TIPO DE
FUNCIÓN
enfermedad del VIH ON CÉLULA
➢ pronóstico para el desarrollo del SIDA CD2 Timocitos, Implicado en la
➢ utilizado para monitorear la respuesta a la células T, células activación de las
terapia antirretroviral CD3 NK
Timocitos, células T. con el
Asociado
CATEGORÍAS DE VIH-1 ACCDG A CDC células T. receptor de antígeno
de células T; papel
Células T CD4+ en la transducción
Porcentaje de de señales TCR
(células CD4/mm
células CD4 con
)
linfocitos (%)
3

CD4 Células T Correceptor para


Nivel 1 >500 >28% auxiliares, MHC clase II;
Etapa 2 200-500 14-28% monocitos, receptor para el VIH
Etapa 3 <200 <14% CD5 macrófagos.
Células T Modulación positiva
(SIDA) maduras, o negativa de la
timocitos, señalización de los
EJEMPLOS ADICIONALES DE FLUJO subconjunto de receptores de
USO DE CITOMETRÍA células B (B1) células T y B.
CD8 Correceptor para
Subconjuntos de
• Determinación del contenido de ADN. timocitos, células
MHC clase I
• Estado de ploidía de las células tumorales. T citotóxicas
• Leucemia/linfoma/enfermedad residual
mínima seguimiento del paciente después del CD10 Precursores de proteasa; marcador
tratamiento
• Detección de células hemoglobina F positivas
(en casos de hemorragia feto-materna)
células B y T, para pre-B CALLA
células
• Tipificación y compatibilidad cruzada del
antígeno leucocitario humano (HLA) para estromales de la
trasplante de órganos sólidos médula ósea

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CD11b Células mieloides
MT(ASCPi), MSMT Subunidad α M de CD44 La mayoría de los Molécula de
y NK la integrina CR3, se leucocitos adhesión que media
une al componente la localización en
del complemento órganos linfoides
CD13 Células iC3b,
metaloproteasa de periféricos
mielomonocíticas zinc
CD14 Células Receptor de CD45 Todas las células Tirosina fosfatasa,
monocíticas lipopolisachari de hematopoyéticas. aumenta la
CD15 Neutrófilos, señalización.
eosinófilos, Trisacárido terminal
monocitos. expresado en
glicolípidos. CD45R Diferentes formas Esencial en la
CD16 Macrófagos, en todas las activación
Receptor FC de baja
células NK, células estimulada por
afinidad, media la
neutrófilos. hematopoyéticas. antígenos de células
fagocitosis y ADCC
TyB
CD19 Células B, células Parte del
dendríticas correceptor de CD 56 Células NK, No conocida
foliculares. células B, molécula subconjuntos de
de transducción de células T
señales que regula CD 94 Células NK, Subunidad de
el desarrollo y la subconjuntos de Complejo NKG2-A
activación de las células T implicado en la
CD21 células B del
Células B, células Receptor inhibición de la
dendríticas componente del citotoxicidad de las
foliculares, complemento C3d; NK = Asesino natural; células NK
subconjunto de parte de la célula B TCR = complejo receptor CD3-αβ;
correceptor de MHC = clase mayor de histocompatibilidad;
timocitos VIH = virus de inmunodeficiencia humana;
inmaduros con CALLA = antígeno de leucemia linfoblástica aguda
CD 19 común;
CD23 Células B, Regulación de la F = Fragmento cristalizable;
C

monocitos, síntesis de IgE; ADCC = citotoxicidad celular dependiente de


células desencadena la anticuerpos;
dendríticas liberación de Il-1, IgE = inmunoglobulina E;
foliculares. Il-6 y GM-CSF de GM-CSF = colonia de granulocitos-macrófagos
los monocitos factor estimulante.
CD25 Células T Receptor de IL-2
activadas, células AUTOMATIZACIÓN DE INMUNOENSAYOS
B, monocitos. • A principios de la década de 1990 se dispuso
por primera vez de instrumentos de
inmunoensayo fiables.

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o
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Utiliza soporte sólido
MT(ASCPi),
libres y unidos.
MSMT para separar analitos Analítico •• Sensibilidad
Precisión
oa automatizar heterogéneo
inmunoensayos incluso para péptidos de
• Precisión/estandarización de
pruebas


bajo nivel (p. ej., hormonas peptídicas) •• Linealidad
Razones para la automatización de las técnicas
de inmunoensayo:
a. método más exacto y preciso
• Interferencias
Efectos de arrastre
Económico
b. mayor sensibilidad
• Costo de la compra
c. reducir o eliminar las numerosas tareas
manuales necesarias para realizar • Opciones de arrendamiento
procedimientos analíticos
d. disminuye la probabilidad de error • Costos de mantenimiento

••
e. reducir el muestreo erróneo Instrumento
Costos de reactivos
f. reducir el tiempo de respuesta y el costo Requisitos de
por prueba
mantenimiento

g. capacidad de proporcionar más servicios
con menos personal Compatibilidad de
h. ahorro en controles, duplicados, automatización
diluciones y repeticiones
i. Mayor vida útil de los reactivos y menor
Fabricante •• Requisitos de espacio
Planes de productos futuros
eliminación debido a la obsolescencia.
j. mejor identificación de muestras = con
el uso de códigos de barras en la entrega •• Reputación


de muestras con códigos de barras Operacional
••Menú de prueba
Rendimiento

••
Hay una gran variedad de inmunoensayos Capacidad de reactivo
automatizados disponibles; La elección del Estabilidad del reactivo
mejor instrumento depende de las necesidades
del laboratorio.
o Prioridad principal en la selección de •
Capacidad inmediata
Capacidad de prueba de
instrumentos : calidad analítica de los
ensayos; Analizador que tiene las ••
reflejos
Tamaño del kit de reactivos
propiedades que pueden satisfacer las
demandas del laboratorio.
••
Requisitos de formación
Complejidad operativa
Requisitos de residuos
• Requisitos de
almacenamiento de
reactivos

FACTORES A CONSIDERAR EN
SELECCIÓN DE UN AUTOMATIZADO Planes de tiempo de
INSTRUMENTO DE INMUNOENSAYO
PRINCIPALES TIPOS DE INMUNOENSAYO
CATEGORÍA FACTOR ANALIZADORES
1. Analizadores de lotes
➢ Puede examinar múltiples muestras y
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proporcionar acceso a las muestras de
MT(ASCPi), MSMT
prueba para la formación de mezclas de
reacción posteriores. • Las tareas a considerar durante el
➢ permitir solo un tipo de análisis a la vez La etapa analítica incluye introducir la
(puede considerarse un inconveniente → muestra, agregar reactivo, mezclar reactivo y
no permitir el procesamiento de muestras muestra, incubar, detectar, calcular e informar
urgentes ) lecturas o resultados.
o STAT SAMPLES se carga
aleatoriamente; requiere múltiples
análisis.
• Se puede realizar un muestreo automático
mediante bombas peristálticas (tecnología más
o Los analizadores por lotes no están antigua) y pipetas de desplazamiento positivo
diseñados para análisis múltiples de de líquido (tecnología más nueva).
una sola muestra.
o Sistema modular: • Los problemas a considerar con la tecnología
de sonda son la inclusión de detectores de
coágulos que rechazarán automáticamente una
muestra si se detecta un coágulo y la capacidad
configuración de la sonda de muestra para detectar la
disponible en analizadores por lotes cantidad de líquido de la muestra, utilizando
un sensor de nivel de líquido.

de próxima generación que fueron
diseñados para medir múltiples Otro problema asociado con las sondas de
analitos de múltiples muestras. pipeta reutilizables es el arrastre o la
2. Analizadores de acceso aleatorio contaminación de una muestra con material de
muestras anteriores.
➢ Puede analizar múltiples muestras de
prueba.
➢ Pruebas múltiples en cualquier muestra de
prueba
• El uso de reactivos en analizadores de
inmunoensayo automatizados requiere la
consideración de los siguientes factores:
manipulación, preparación, almacenamiento y
dispensación.

• Una vez añadidos los reactivos a las muestras, la


siguiente preocupación es mezclarlas
correctamente para obtener resultados fiables.
Los analizadores utilizan diferentes métodos y
cualquiera que sea el método utilizado; Es
imperativo que no haya salpicaduras entre los
pocillos de muestra para evitar resultados
erróneos.

• Luego, la incubación programada se lleva a cabo


a temperatura ambiente, o los analizadores deben
tener incubadoras incorporadas para la
incubación a temperatura controlada. Los
bloques metálicos calentados se utilizan
• La automatización ocurre en las tres etapas de
ampliamente para incubar pocillos o cubetas de
reactivos.
las pruebas de laboratorio:
etapas analítica y postanalítica.
el preanalítico,
• La espectroscopia de absorción colorimétrica ha

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FECHA
sido el principal | Mark
medio deRodrigo D. Mendros
medición, debido a RMT,
la con confianza.
capacidad MT(ASCPi),
compuestos.
de medir unaMSMT
amplia variedad de
• La instrumentación puede aumentar el tiempo de
• Otros métodos de detección incluyen la
fluorescencia y la quimioluminiscencia, los
respuesta de las pruebas, eliminar la posibilidad
de errores manuales y permitir una mayor
cuales requieren detectores de fluorescencia. sensibilidad para determinar la presencia de
analitos de bajo nivel.
VALIDACIÓN
DEFINICIÓN DE TÉRMINOS
• Independientemente de la instrumentación
considerada, siempre se debe realizar una
• La precisión se refiere a la capacidad de la
prueba para medir lo que dice medir.
validación adecuada de nueva instrumentación o
metodología. • La precisión se refiere a la capacidad de
• La validación del nuevo instrumento o método
reproducir consistentemente el mismo resultado
en pruebas repetidas en el análisis.
debe completarse antes de que se puedan
informar los resultados del paciente utilizando
ese instrumento.
• La sensibilidad analítica se define como la
cantidad más baja mensurable de un analito.

• Según lo designado por CLIA, las verificaciones • La especificidad analítica es la capacidad del
ensayo para generar un resultado negativo
requeridas que se determinarán para un nuevo cuando el analito no está presente.
método son exactitud, precisión, sensibilidad
analítica, especificidad analítica para incluir
sustancias que interfieren, rango reportable e
• El rango reportable se define como el rango de
valores que generarán un resultado positivo para
intervalos de referencia. las muestras analizadas mediante el
• Listas de otros sitios web gubernamentales con
procedimiento de prueba.
información sobre
métodos/instrumentos.
la validación de
• El intervalo de referencia es el rango de valores
encontrados en individuos sanos que no tienen la
Tabla 12-5. Sitios web gubernamentales relacionados con CLIA
condición detectada por el ensayo. Esto se utiliza
para definir el valor esperado de una prueba
Centros para enfermedades www.phppo.cdc.gov/ciia/default.aspx negativa.
Control y Prevención

Comida y droga www.fda.gov/cdrh/CUA/index/html RESUMEN


Administración

El colegio americano
Laboratorio de Patólogos
www.cap.org/apps/docs/
acreditación_laboratorio/listas de verificación/
• La citometría de flujo es una herramienta
poderosa para identificar y enumerar varias
Programa de acreditación quimica_y_toxicologia_ poblaciones de células.


Lista de verificación de inspección para abril2OO6.pdf
Química

Laboratorio Clínico www.clsi.org


Un citómetro de flujo mide múltiples
Protocolo de evaluación del Instituto de Estándares propiedades de las células suspendidas en un
medio fluido en movimiento. A medida que cada
• Los analizadores por lotes pueden funcionar
mejor si solo se realiza un tipo de prueba a gran
célula o partícula pasa en fila india a través de
una fuente de luz láser, produce un patrón de luz
característico que se mide mediante múltiples
escala.
• Los analizadores de acceso aleatorio permiten
una mayor flexibilidad e incluyen un
detectores de luz dispersa (hacia adelante y 90
grados) y emisiones fluorescentes (si la célula
está teñida con un fluorocromo).


procesamiento rápido de muestras estadísticas.
En cualquier caso, cualquier instrumento nuevo
• La dispersión directa es una medida del tamaño
de la celda, mientras que la dispersión lateral
requiere una validación exhaustiva antes de que determina la complejidad interna o granularidad
los resultados de los pacientes puedan informarse de una celda.

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INMUNOLOGÍA Y
SEROLOGÍA
Programa de Evaluación de
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FECHA | Mark Rodrigo D. Mendros RMT,
• MT(ASCPi), MSMT
Determinar la población de linfocitos de un
individuo es esencial para diagnosticar
afecciones como linfomas, enfermedades de
inmunodeficiencia, infecciones inexplicables o
enfermedades inmunitarias adquiridas como el
SIDA.

• Los linfocitos son identificado usando


monoclonal anticuerpos dirigidos contra
antígenos de superficie específicos.
• La citometría de flujo es el método más utilizado
para la inmunofenotipificación de poblaciones de
linfocitos.
• Los sistemas automatizados pueden generar
análisis más exactos, precisos y sensibles de
muchos analitos en comparación con los
inmunoensayos manuales.
• La automatización se incorpora en todas las
etapas de las pruebas de laboratorio: preanalítica,
analítica y posanalítica.
• La validación debe incluir al menos una
determinación de la exactitud, precisión, rango
reportable, rango de referencia, sensibilidad
analítica y especificidad analítica.

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INMUNOLOGÍA Y
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Programa de Evaluación de
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FECHA | Mark Rodrigo D. Mendros RMT,
• MT(ASCPi),
Los analizadores MSMT
automatizados son costosos, pero pueden reducir el tiempo de respuesta y el tiempo de
intervención del personal técnico y pueden proporcionar resultados sensibles y precisos.

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BACTERI
Programa de Evaluación de Tecnología Médica-
OLOGÍA
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11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
RN, Ph.D, MA, MSMLSc
GRAMOS [+] BACILOS

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BACTERI
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OLOGÍA
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11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
RN, Ph.D, MA, MSMLSc
Bacillus cereus Bacillus Anthracis
Se considera como agente de infecciones entéricas • Lo más significante; un agente de bioterrorismo
(infecciones que afectan al tracto gastrointestinal) el
Bacillus cereus (de los tres bacilos mencionados, es el
• Causa ántrax
- Clasificado en la Categoría A
único agente de infección entérica).
Comúnmente conocido como “ bacilo del arroz frito ”,
- Los agentes de bioterrorismo pueden clasificarse
en tres categorías
ya que este organismo está implicado en casos de
intoxicación alimentaria asociada al consumo de arroz L Categoría A : fácil transmisión y alta tasa de
frito. mortalidad
B. cereus , B. anthracis y B. subtilis son formadores de l Categoría B
l Categoría C
esporas.
• No es un agente de infecciones entéricas.
FACTORES VIRULENTOS: • NO MÓTILES y GAMMA HEMOLÍTICOS
✓ Exotoxina/enterotoxina Toxina similar al cólera
Puede causar intoxicación alimentaria
• Microscópicamente, forma la llamada “ apariencia
de caña de pescar de bambú desarticulada ”.
▪ Tipo de diarrea
▪ Tipo emético
• [+] Prueba de lecitinasa
- Inoculación en agar yema de huevo
Produce dos tipos de toxinas: motivo por el cual Cuando se inocula en medios en placa (BAP):
provoca intoxicaciones alimentarias.
- Las colonias producirán “ proyecciones
En comparación con B. anthracis , B. cereus se considera arremolinadas ” que le darán una apariencia de
MÓTIL y BETA HEMOLÍTICA en BAP. CABEZA DE MEDUSA, CABEZA DE LEÓN
o apariencia de “ vidrio tallado ”.
La mejor muestra para la prueba: alimento - Las colonias son tan TENAZAS que le dan una
sospechoso consistencia de “ clara de huevo batida ”
[+] Hidrólisis de gelatina En medios en tubos (semisólidos) (medios de gelatina):
[+] Crecimiento en PEA (agar alcohol - Forma el llamado “ abeto invertido ” o “ patrón
feniletílico) de pino invertido ”.
agar yema de huevo
- Se utiliza para detectar lecitinasa y lipasa, El medio selectivo es PLET.
inoculación. (polimixina lisozima EDTA acetato de talo):
- (+) zona opaca alrededor de las colonias - Muestra un “patrón similar a una cuerda” debido
- Inocular → Incubar → Nota para zonas opacas a su susceptibilidad a la penicilina.
- Para obtener un patrón de “collar de perlas”:
L Inocular en MHA (agar Mueller Hinton)
L Colocamos un disco de antibiótico de
penicilina y luego colocamos un
cubreobjetos encima del disco.
L Incubar toda la preparación.
[+] Resultado en prueba de L Pasadas las 24 horas, retiramos el
Lecitinasa cubreobjetos que cubre el disco de penicilina
Nota: PEA (agar alcohol feniletílico) se puede utilizar y lo invertimos en el portaobjetos.
como medio de aislamiento para cocos grampositivos ( L Aparecerán bacilos dispuestos en cadenas
S. aureus o estreptococos). (patrón de collar de perlas)

Nota: MHA (agar Mueller Hinton) se utiliza para pruebas

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OLOGÍA
11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
RN, Ph.D, MA, MSMLSc CAUSAS TRES TIPOS DE ÁNTRAX:

EXTERNO INTERNO
Cutánea A. Pulmonar A. intestinal a.
Más común pero Inhalación de Menos común
menos grave. esporas al pero más grave
manipular lana.
“Apariencia de caña de pescar de bambú
desarticulada”
Contacto con Ingestión de
esporas esporas
infectadas.

Puede desarrollar Ingestión de


También
“ escara negra ” carne infectada
conocida como:
en la piel. mal cocida
“Enfermedad del
trapero”

“Colonias de cabezas de medusa” "Enfermedad del


Observado cuando se inocula B. anthracis en BAP clasificador de
lana"

Bacillus subtilis
• Bacillus subtilis es un contaminante común
de laboratorio
• También conocido como bacilo del heno.
• Bacillus cereus y Bacillus subtilis son
hemolíticos MÓTILES y BETA en BAP

“Patrón invertido de abeto/pino”

FACTORES VIRULENTOS:
✓ Cápsula de D-glutamato
L previene la fagocitosis
L no es un polisacárido por naturaleza, sino D-glutamato.
✓ Capacidad de producir una exotoxina con 3 componentes.
1. factor letal
2. factor de edema
3. Antígeno protector

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BACTERI
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1
OLOGÍA
11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
RN, Ph.D, MA, MSMLSc
clostridio


clostridio botulínico Heces
• También conocido como “ bacilo bueno enlatado ”

Herida
• También conocido como “ bacilo de Von Ermengen Alimento
Clostridium perfringens

• Un agente de infección gastrointestinal. • También se considera un agente de infección
• En laboratorio no se suele cultivar entérica.
• No se cultiva en BAP pero suele producir hemólisis
BETA .
• Bajo el género Clostridium, C. perfringens se
considera histotóxico.
• Las esporas se encuentran en el nivel subterminal.
• [+] Lipasa Otros nombres: Clostridium welchii, bacilo de Frankel,
• [ – ] Lecitinasa móvil bacilo de la gangrena gaseosa.

FACTORES VIRULENTOS: Características importantes:


✓ Toxina botulínica • Microscópicamente forma la “Morfología del
L Una neurotoxina potente en humanos Furgón”
L Bloquea la liberación de acetilcolina provocando • Cuando se inocula sobre BAP produce (+) Target
o Doble hemólisis
parálisis fláccida o parálisis de muñeca de
trapo (los músculos no responden). L Target o Doble hemólisis es cuando
una colonia está rodeada por una
PUEDE CAUSAR: Beta interna y una Alfa externa.
• Botulismo L Por lo general, los organismos solo
- Un tipo mortal de intoxicación alimentaria. tienen 1 patrón de hemólisis. Pero,
- Botulismo infantil en el caso de Clostridium
L Puede desarrollarse como resultado de la perfringens , presenta doble
ingestión de esporas durante la lactancia. hemólisis.
L El niño afectado manifestará hipotonía (fuerza
muscular reducida) L La beta hemólisis se debe a la beta
Síntoma L : síndrome del bebé flácido
• SID / Síndrome de muerte súbita del lactante /
hemolisina y la tetatoxina producidas
por Clostridium perfringens.
Muerte en la cuna Mientras que la alfa hemólisis se
debe a la toxina alfa y la lecitinasa
La confirmación de laboratorio se realiza


demostrando la presencia de toxina en: • Provoca una fermentación tormentosa de la leche


Suero cuando se inocula en un medio lácteo de
tornasol.

Heces
Alimento L Por producción excesiva de gas
También se puede realizar cultivando C. botulinum
de:
• Es la Lecitinasa (+) y la prueba de Nagler (+)

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BACTERI
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OLOGÍA
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11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
LRN, Ph.D,
Ambos MA, MSMLSc
realizados en agar yema de organismo S. agalactiae.
huevo. • Causas Gangrena gaseosa y mionecrosis
• Para identificar Clostridium perfringens en el
laboratorio es necesario realizar 2 pruebas. La siguiente imagen muestra la llamada hemólisis doble
L Prueba CAMP Inversa y para o hemólisis objetivo, rodeada por beta interna y alfa
demostrar el Objetivo o Doble externa.
Hemólisis L La imagen de la derecha es el resultado positivo
de la prueba Reverse CAMP. Tome nota del
• La prueba CAMP inversa se lleva a cabo
inoculando BAP, que es el medio requerido.
desarrollo de la beta hemólisis con forma de
punta de flecha que se considera como (+).
Aparte de BAP, necesitará un organismo L El estreptococo del grupo B es el S. agalactiae. L
conocido como Streptococcus agalactiae . El beta hemolítico del grupo A es el S. pyogenes y el
L S. agalactiae cuando se inocula en hemolítico del grupo B es S. agalactiae
BAP, produce beta hemólisis.
L Inoculamos primero el organismo
conocido que es S. agalactiae en
BAP. Luego inoculamos a
continuación el organismo
desconocido que se sospecha que es
C. perfringens perpendicular a S.
agalactiae . Debería haber un punto
donde ambos organismos se
encuentren.
L El resultado positivo (+) de la prueba MEDIO DE LECHE DE TORNADO
CAMP inversa es el mismo que el Usos:
resultado de la prueba CAMP, que
es "Hemólisis mejorada como se
• Se utiliza principalmente para diferenciar
miembros dentro del género Clostridium.
muestra en la zona de punta de
flecha de hemólisis beta".
• Diferenciar las enterobacterias de otros bacilos
gramnegativos basándose en la capacidad de las
L El resultado negativo (-) tanto para la enterobacterias para producir tornasol.
prueba CAMP como para la prueba
CAMP inversa es "Sin hemólisis
• Cultivar y mantener cultivos de bacterias del
ácido láctico.
mejorada"
o La prueba CAMP es para S. Componentes del medio de leche tornasol
agalactiae y para realizar la •Leche desnatada y un indicador de pH.
prueba CAMP, el organismo L La leche desnatada aporta nutrientes para
conocido que se utilizará es el crecimiento, contiene lactosa para la
S. aureus . Mientras que la fermentación y detección de producción
prueba CAMP inversa es de ácido. La leche desnatada también
para la detección de C. aportará proteínas en forma de caseína.
perfringens utilizando el

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BACTERI
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1
OLOGÍA
11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
L El indicador
RN, Ph.D,deMA,pH MSMLSc
se llama Azolitmin.
En un pH ácido (4,5), el indicador
aparecerá de color rosa, pero en un pH
alcalino (8,3) se volverá azul. Entre estos
extremos (pH neutro) es de color violeta.

4 reacciones básicas en medio Litmus Milk


1. Fermentación de la lactosa
2. Reducción de tornasol
3. coagulación de caseína
4. hidrólisis de caseína

L Estas reacciones producen una variedad


de resultados y combinaciones, cada una
de las cuales puede diferenciar bacterias
L Tenga en cuenta que es posible combinar
resultados. Por ejemplo, en un resultado
de color rosa, hay fisuras en el coágulo.

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BACTERI
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OLOGÍA
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RESULTAD INTERPRETACIÓN
RN, Ph.D, MA, MSMLScSÍMBOLO Top con banda reacción alcalina k
OS
Rosa Reacción ácida A azul medio o
Rosado y sólido azul
(blanco en la Ningún cambio Ninguno de los reactivos CAROLINA
parte inferior); coágulo ácido C.A. anteriores DEL NORTE
coágulo no Posibles resultados en medio de leche tornasol
movible
Fisuras en Gas GRAMO
coágulo
Fermentación S
Coágulo roto tormentosa
Reducción de tornasol R
Color blanco
(parte inferior
del medio)
Semisólido y no Cuajada C
*Una cuajada se diferencia de un coágulo ácido en
rosado; Líquido
que no se disolverá en condiciones alcalinas.
claro a gris en
la parte
Clarificación Digestión de peptona; PORD

En un medio de leche de tornasol, hay 4
reacciones posibles, que pueden producir una
del medio; peptonización variedad de resultados combinados, que
pérdida de pueden usarse para identificar el organismo.
“cuerpo”
1. La fermentación de la lactosa acidifica el medio y hace que el tornasol se torne rosado.
L Lo que cambió es solo el pH (producción de ácido)
2. La acumulación de ácido puede hacer que la caseína precipite y forme un coágulo ácido. Los coágulos ácidos
solidifican el medio y pueden aparecer de color rosa o blanco con una banda rosa en la parte superior.
L Este resultado es un ejemplo de combinación porque el pH es ácido y al mismo tiempo hay formación
de coágulos.
3. Las fisuras o grietas en el coágulo son evidencia de la producción de gas.
L En el fondo del tubo, no es de un color blanco sólido, se considera una fisura o grieta que es un signo de
producción de gas.

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OLOGÍA
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Clostridium difficile de granero

• Flora normal del colon. • BAP : emitirá fluorescencia en CHARTREUSE


• Causa colitis pseudomembranosa o diarrea
asociada a antibióticos.
L Produce fluorescencia amarilla.

Características importantes:

• móvil
• Lecitinasa y Lipasa (-)
• Los factores de virulencia son la toxina A
(enterotoxina) y la toxina B (citotoxina).
• Aunque C. difficile es cultivable, rara vez
realizamos cultivos en el laboratorio.
L El cultivo de C. difficile es posible pero en
el laboratorio, para detectar el
diagnóstico o detección de C. difficile se
realiza mediante la detección de
citotoxinas.
Para detectar la citotoxina producida por
C. difficile lo hacemos mediante
Inmunoensayo Enzimático (EIA).
L La muestra que generalmente se presenta
son heces. Las heces recién evacuadas,
líquidas o no formadas se utilizan para
cultivo y análisis de toxinas. Se utilizan
heces formadas o un hisopo rectal para
detectar el estado de "portador".

Medios utilizados para C. difficile

• CCFA - Agar cicloserina cefoxitina fructosa


L Es un medio selectivo para C. difficile. Él
Contiene rojo neutro como indicador.
L En CCFA, C. difficile desarrolla colonias
con olor a establo de caballos o a patio

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OLOGÍA
1
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Clostridium tetani • C. tetani rara vez se cultiva y a menudo se
diagnostica basándose en los síntomas clínicos y
No es un agente de infección entérica pero está la observación de esporas hinchadas ubicadas
clasificado en el género Clostridium. en las terminales .

Otros nombres: bacilo de cabeza de tachuela, bacilo del


tétanos, baqueta, piruleta, bacilo de raqueta de tenis.
L Baqueta, piruleta, raqueta de tenis porque
C. tetani tiene esporas terminales
hinchadas
• C. tetani junto con C. botulinum se consideran
Clostridium neurotóxico
L C. botulinum provoca parálisis fláccida,
mientras que C. tetani provoca parálisis
espástica “poco movimiento”
L En la parálisis flácida , los músculos no
responden en absoluto en comparación
con la parálisis espástica , hay poco
movimiento.
• C. tetani causa tétanos debido a su capacidad
para producir tetanospasmina, una exotoxina
que bloqueará la liberación de
neurotransmisores.
L La tetanospasmina es el factor de
virulencia.
L tetanospasmina es una exotoxina
responsable de bloquear la liberación de
neurotransmisores que conducen a una
parálisis espástica que provocará un
bloqueo de la mandíbula.
La mandíbula bloqueada hace que el
paciente muestre el síntoma único del
tétanos, que es el risus sardonicus,
también conocido como sonrisa
sardónica.
• El tétanos tiene una tríada de síntomas:
1. Mandíbula bloqueada o trismo
2. Sonrisa sardónica o risus sardonicus
3. Espasmo de todos los músculos u
opistótonos.

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OLOGÍA
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Estafilococo aureus
bacitracina
Forma parte de la flora normal pero causa enfermedades, Vogues -Prueba de Positivo (+) Color rosa a rojo
tanto mediadas como no mediadas por toxinas. También se Proskauer
considera un agente de infección entérica. Prueba PIR Negativo (-)
• Hemólisis en BAP Beta hemolítico

Cocos grampositivos (+)
Dispuestos en racimos parecidos a uvas cuando se Prueba de bacitracina Resistente a 0,4 unidades de
observan.
bajo el microscopio utilizando tinción de Gram.

catalasa.
La detección inicial se realiza mediante prueba de

• La prueba de coagulasa es la prueba definitiva

PRUEBAS PARA LA DETECCIÓN DE S.


AUREUS
Prueba Reacción de S. aureus
Prueba de catalasa Positivo (+): Burbujeo vigoroso o
efervescencia.
Prueba de coagulasa Slide Coagulase, Positivo (+):
Formación de
coágulos/aglutinación

Tubo Coagulasa, Positivo (+):


manitol Formación
Positivo (+):deHalo amarillo
Prueba de alrededor de las colonias.
Prueba de ADNasa Precipitación de HCl, Positiva
(+): Aclaramiento del agar
alrededor de las colonias

Método de tinte, Positivo (+):


Azul de toluidina: Zona
rosada alrededor de las
colonias
Verde de metilo: zona
clara alrededor de las
colonias.

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OLOGÍA
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11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
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Prueba de catalasa
• Prueba bioquímica para diferenciar estafilococos y
micrococos de estreptococos.
L estafilococos y micrococos dan positivo en la
prueba de catalasa (+)
Los estreptococos L dan negativo en la prueba
de catalasa (-)
• Se puede realizar en portaobjetos o en tubo.
• Reactivo utilizado: peróxido de hidrógeno al 3%
• Resultado positivo:
efervescencia.
burbujeo vigoroso o

• En la prueba de catalasa, las colonias/organismos que


crecen en BAP NO se utilizan porque conducirán a
resultados falsos. reacción positiva

Prueba de coagulasa
• La prueba definitiva/prioritaria para S. aureus
• Resultado positivo (+): formación de
coágulos/aglomeración
• Sedespués
realiza si se sospecha la presencia de S. aureus
de la prueba de catalasa.
• Laaureus
prueba de coagulasa se realiza para diferenciar el S.
patógeno de otros estafilococos.
• Reactivo utilizado: Plasma de conejo
L Recogido usando EDTA
L En la preparación del plasma nunca se utiliza
citrato porque puede dar lugar a una falsa
reacción positiva

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OLOGÍA
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OTRAS PRUEBAS PARA IDENTIFICAR S.


AUREUS

Prueba de coagulasa en portaobjetos • Si después de la incubación se forma un coágulo,


• Propósito: detecta el factor de
aglomeración/coagulasa unida
entonces es positivo, si no se forma un coágulo,
entonces es negativo.
• Procedimiento: Prueba de fermentación de manitol
L Coloque un asa llena del organismo a • S. aureus da positivo en la prueba de
fermentación de manitol
analizar en el portaobjetos.
L Añadir plasma de conejo y NSS. • Propósito: detecta la producción de ácido de
L Mezcle y luego observe si se forma un forma aeróbica o anaeróbica.
coágulo. L Fermentador: organismo que puede
producir ácido con o sin aire.
• Si es positivo (+), se informa como positivo para • Medios utilizados: Agar Manitol Sal (MSA)
S. aureus L Tiene rojo fenol como indicador de pH.
• Si es negativo (-), se debe realizar coagulasa en • Contiene 7,5% de sal
tubo. • Procedimiento:
L Inocular el organismo en MSA.
Prueba de coagulasa en tubo L Incubar durante 18-24 horas
• Finalidad: Detectar coagulasa libre. L Después de la incubación, observe si hay
• Similar a la coagulasa en portaobjetos, pero se
realiza en un tubo y requiere incubación durante
un halo amarillo alrededor de las
colonias.


4 horas a 35-37 ° C.
Procedimiento:
• Positivo (+): halo amarillo alrededor de las
colonias
L Coloque un asa llena del organismo a • Negativo (-): Permaneció en rojo
analizar en el tubo, luego agregue plasma
de conejo y NSS.
• Una prueba de fermentación de manitol positiva
significaría:
L Incubar durante 4 horas a 35-37 ° C 1. El organismo pudo fermentar (producir
L Después de la incubación, verifique la ácido) manitol.
formación de coágulos. 2. El organismo pudo tolerar una
L Si no se forma ningún coágulo, incube concentración de sal del 7,5%.
más durante 16 horas a temperatura
ambiente (25 °C) AGAR MANITOL SAL
• Tiempo total de incubación: 20 horas

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OLOGÍA
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PRUEBA DE MSA NEGATIVA PRUEBA DE MSA POSITIVA

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Prueba de ADNasa (prueba de termonucleasa)

• S. aureus da positivo en la prueba de ADNasa


Hemólisis en BAP

• Tiene dos métodos: • S. aureus es beta-hemolítico


Prueba de precipitación de HCl Prueba de
L Luego, agregue 0,1 HCl normal.
• Procedimiento: • S. aureus es resistente a 0,4 unidades de
L Inocular el organismo en agar ADNasa. bacitracina, un antibiótico también conocido como
Taxo A
L incubar
• Resultado positivo: limpieza del agar alrededor de las colonias.

Método de tinte
• Agar ADNasa utilizado con azul de toluidina o verde de metilo
• Resultado positivo (+):
L Azul toluidina: Zona rosada alrededor de las colonias.
L Verde de metilo: Zona clara alrededor de las colonias.
Prueba de ADNasa : se utiliza para determinar la capacidad de un
organismo para hidrolizar el ADN y utilizarlo como fuente de
carbono y energía para el crecimiento.

Prueba de Vogues-

Proskauer
S. aureus es positivo para la prueba VP
• Vogues-Proskauer es una prueba bioquímica que forma parte de la prueba IMVIC
• IMVIC se utiliza para bacilos entéricos gramnegativos
• Resultado positivo (+): color rosa a rojo

Prueba PIR
• S. aureus es PYR negativo (-)
• Para la identificación de S. pyogenes que es positivo (+) para PYR
• S. pyogenes : cocos grampositivos y catalasa negativos

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OLOGÍA
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RN, Ph.D,VIRULENTOS
FACTORES MA, MSMLSc
coagulasa → Mayor virulencia factor,
considerado como
MARCADOR de
VIRULENCIA
→célulasEnzima que hace que las
bacterianas se aglutinen
Beta
Lactamasa
→ También conocido como
en el plasma.
penicilinasa
→deResponsable de la resistencia
hialuronidasa → También conocido como Factor
S. aureus a la penicilina y a

Duran Raynal
→ Factor de dispersión
ADNasa

→ TambiénMejora la capacidad del
conocida como
termonucleasa
→ Cuando liberado,
disminuye
Beta
hemolisina
→esfingomielinasa
También conocido como
C o lisina fría y
caliente
Enterotoxinas A → Provoca beta hemólisis
yB → Provoca intoxicación
TSST-1 → Síndrome de shock tóxico
Toxina 1 → Causas del síndrome
exfoliación →shockCausas
de tóxico
piel descamación/
exfoliación en SÍNDROME DE
PIEL ESCALDADA/
RITTER'S
PVL/ Pantón
Leucocidina de
San Valentín
→ Destrucción de glóbulos
blancos
Proteína A
→ Previene la fagocitosis
Prueba de cefalosporinasa
➢ Prueba de producción de Beta Lactamasa
➢ Utiliza disco de cefinasa
impregnado
→ tiene sustrato
nitrocefina
➢ (+) resultado: De rosa a rojo
➢ (-) resultado: Amarillo

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OLOGÍA
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BACILOS GRAM NEGATIVOS
A. Vibrio cholerae
➢ patógeno entérico
➢ Anaerobio facultativo (puede vivir con o sin aire)
➢ Fermentador: puede producir ácido con o sin aire.
➢ Varillas móviles, curvas o en forma de coma.
➢ No halófilo junto con Vibrio mimicus
➢ Se encuentra en agua salobre o marina y la
transmisión a los humanos se produce por la
ingestión de agua contaminada, productos
frescos, carne, productos lácteos y mariscos.
➢ Especie importante ya que causa la enfermedad
CÓLERA (cólera asiático o cólera epidémico)
que se caracteriza por la producción de heces
acuosas de arroz.
➢ Factor de virulencia: colerágeno/toxina del cólera
➢ Motilidad: Motilidad de estrella fugaz.
➢ Prueba de cuerdas (+): uso de desoxicolato de
sodio
L En un portaobjetos, coloque un asa llena
de organismo, luego agregue
desoxicolato de sodio y luego mezcle.
L Después de mezclar, use el asa/aguja para
levantar las colonias.
L (+): estructura similar a un hilo
L También puede identificar Klebsiella
pneumoniae (de la familia
Enterobacteriaceae; encapsulada)

Prueba bioquímica
oxidasa +
Glucosa +
Lactosa -
sacarosa +

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género Vibrio
OLOGÍA
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11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
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• Oxidasa (+), excepto V. metschnikovii
L Prueba de detección del género Vibrio
• Halófilo, excepto V. cholerae y V. mimicus
L Requiere aumentar la concentración de
sal, normalmente entre un 8 y un 10 %
de sal
• Glucosa (+) Vibrio cholerae en agar TC8S Vibrioparaha^molyticus en TCBS Agai

• Lactosa (-), excepto V. vulnificus B. Especies de Campylobacter


• basófilo ➢ Oxidasa (+)
➢ Dos especies importantes: C. jejuni y C. coli
Diagnóstico :
• Muestra para diagnóstico: Heces o hisopo rectal. ➢ Aparece como bacilos en forma de S que se
asemejan a alas de gaviota bajo el microscopio.
• Medios de transporte: medios de Cary Blair ➢ Motilidad y muestra motilidad rápida.
• Medios de enriquecimiento: agua de peptona ➢ Requiere un nivel bajo de oxígeno del 5%
alcalina
• Medios selectivos-diferenciales: TCBS – (microaerofílico) y un aumento de CO 2 del 5-
Tiosulfato 10% (capnofílico)
Citrato Sal biliar Sacarosa ➢ Temperatura óptima para el crecimiento: 42-43
grados C
L Selectivo: ningún grampositivo crecerá
debido a la presencia del inhibidor. ➢ La mayoría de las especies son asacarolíticas (no
fermentan azúcar)
l Diferencial – diferenciar si
sacarosa (+) o sacarosa (-) ➢ Los pacientes de Guillain Barre + dan positivo en
l Este medio contiene sacarosa como anticuerpos contra Campylobacter
Carbohidrato fermentable, azul de ➢ Causas: síndrome sistémico febril,
bromotimol y azul de timol como gastroenteritis y enfermedad periodontal (dse que
indicadores. afecta la cavidad bucal)
L Fermentador sin sacarosa: Verde Aeromonas spp.
Fermentador de sacarosa L : Amarillo

8% NaCl TCBS oxidasa


Amarillo –
sacarosa (+)
Verde –
sacarosa (-)
V. parahaemolyticus halófilo Verde +
V. vulnificus halófilo Verde +
alginolyticus halófilo Amarillo +
mimicus No Verde +
V. fluvialis halófilo Amarillo +
V. furnissii halófilo Amarillo +
V. metschnikovii halófilo Amarillo -

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BACTERI
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OLOGÍA
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Prueba de oxidasa (1)Ph.D,
RN, Aeromonas
MA, MSMLSc hydrophila: Vibrio spp.
[+] organismo amante del agua Aeromonas spp.
asociado con la enfermedad del Prueba de
tracto gastrointestinal oxidasa
+ +
Motilidad
(2) Aeromonas
generalmente
caviae
aislada en

el (generalmente
+ +
laboratorio móvil)

Requerimiento de
+ -
• Prueba de oxidasa [+];
Fermentativo NaCl 8% -10
(puede producir ácido con o (halófilo
Fermentos
sin aire) bacilos gramnegativos
Manitol + +
• Puede producir colonias en
Crecimiento en
Medios que se utilizan para
TCBS + +
aislar a los miembros. de el
(Una forma de
familia
separar) - +
enterobacterias
Hemólisis,
• puede crecer en Mac
DNasa, Hidrólisis
Conkey, EMB, SSA y CIN
de esculina
(crecimiento en este
O129
medios de comunicación
Susceptibilidad S R
indistinguibles de los de
Yersinia enterocolitica
lisina ornitina
++- +-+
especies)
arginina
Gelatina
Factores de virulencia de Campylobacter y
Licuefacción + +
Aeromonas
enterotoxina • Altera/cambia el metabolismo

prueba D
Prueba de difusión de doble disco
Actividad de las células
epiteliales intestinales que
provocan la salida de electrolitos
• Propósito: detectar resistencia inducible a
clindamicina entre cepas de S.aureus
y líquido a la luz. :para confirmar el resultado del antibiótico
• Cuando se libera enterotoxina, clindamicina si es resistente o susceptible
[+] resultado : Debilitamiento de la zona de
puede provocar diarrea profusa
y acuosa clindamicina para producir un patrón D
• Heces de pacientes con
[-] resultado: reportar clindamicina como sensible
mientras que si [+] reportar clindamicina como
enterotóxico. resistente
enfermedad diarreica → acuosa y
citotoxina
• Altera la estructura del
Por ejemplo, al realizar una prueba de susceptibilidad
inoculada con MHA
células epiteliales intestinales 4 antibióticos:
• Cuando es destruido/dañado, puede C – Clindamicina
E – Eritromicina
*La enterotoxina y latambién provocar
citotoxina no son los únicos P – Penicilina
factores de virulencia para cualquier agente de la SXT
enfermedad del TGI porque la mayoría de los agentes
de infecciones entéricas pueden producir otros
factores.

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BACTERI
Programa de Evaluación de Tecnología Médica-
1
OLOGÍA
11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT,
RN, Ph.D, MA, MSMLSc

Después de hacer la prueba y medir la zona de inhibición, • Considerada como una especie importante.
resulta que la Clindamicina (Clase Linconamida) es
Susceptible mientras que la Eritromicina (Clase
• Aunque es parte de la flora normal, puede
causar enfermedades mediadas y no mediadas por
Macrólido) es Resistente toxinas.
• Independientemente de la clase, el modo de • Produce beta lactamasa/penicilinasa – es
resistente a la penicilina
acción de la clindamicina y la eritromicina para
matar bacterias es mediante la inhibición de la -En el tratamiento de S. aureus, nunca usamos
síntesis de proteínas. penicilina.
• Dado que tienen el mismo modo de acción, se
espera que el resultado del organismo tanto con
la clindamicina como con la eritromicina sea de
alguna manera el MISMO.
(ver texto en la parte inferior de la foto)

Al realizar la prueba D:
• Inocular nuevamente usando MHA pero en lugar de
usar 4 antibióticos, use solo los antibióticos
Clindamicina y Eritromicina.
Requerido para realizar la prueba D:


MHA
15 ug de eritromicina y 2 ug de clindamicina que son
Se colocan a 15 mm de distancia y luego se incuban.
• Medir la zona de inhibición.
*antes de colocar el anticuerpo en MHA, inocular
primero el S. aureus
[+] resultado : Debilitamiento de la zona de clindamicina
para producir un patrón D
*si el organismo es susceptible pero no tiene forma de D
es negativo, el resultado de susceptible debe estar en la
LETRA D

Estafilococo aureus

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"e BACTERIOLOGÍA
Programa de Evaluación de Tecnología Médica KO -1
SSS“EDIC 11 de noviembre de 2021 | Mamá. Cristina SJ Liwanag RMT, RN,
Ph.D, MA, MSMLSc

Para detectar/tratar SARM/ORSA Pruebas para detectar MRSA


infecciones por S. aureus
utilizamos fármacos S. aureus resistente a la meticilina y oxacilina
resistentes a la S. aureus resistente
penicilinasa .
-Los estafilococos que muestran resistencia a
estos medicamentos se denominan
Ex: •
MRSA/ORSA.
Cepa de resistente a S. aureus a 1. Uso de CHROM AGAR (caro) MRSA –
oxacilina Meticilina, Nafcilina y Oxacilina Color de colonia rosa o malva No MRSA –
Cloxacilina Meticilina
-puede matar S. aureus
• Resistencia de Estafilococo a Inhibición del crecimiento o colonias
penicilinasa medicamentos resistentes se incoloras o azules
debe a
PBP2a (proteína fijadora de penicilina 2) 2. PRUEBA DE DIFUSIÓN EN DISCO DE
(que se encuentra en la pared celular) CEFOXITINA: induce la expresión de PBP2a
codificada por el gen mec A
3. ESTÁNDAR DE ORO para la detección de
Características del SARM: MRSA -PCR para detectar el gen mec A


RESISTENTE a la penicilina


RESISTENTE A LA Oxacilina
Prueba de cefoxitina POSITIVA

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ANÁLISIS DE ORINA Y
Programa de Evaluación de Tecnología
OTROS
Médica FLUIDOS
18 de noviembre de 2021 | Mark Rodrigo D. Mendros
CORPORALES
RMT, MT(ASCPi), MSMT
EXAMEN MICROSCÓPICO DE MUESTRA DE ORINA Sangre Hematíes/modelos de hematíes
Proteína Cilindros/células
✓ Uno de los procedimientos de rutina que realizamos Nitrito Bacterias/leucocitos
cuando realizamos análisis de orina de rutina. Esterasa de leucocitos Leucocitos/modelos de
✓ Antes de realizar el examen microscópico de la Glucosa Levadura
orina, debemos realizar un examen físico y químico
de la orina. Centrifugamos y decantamos la orina.
Los sedimentos serán examinados en el examen PREPARACIÓN DE ESPÉCIMEN
microscópico. o Las muestras deben examinarse mientras
✓ Propósito : detectar e identificar materiales estén frescas o adecuadamente
insolubles presentes en la orina. conservadas .
✓ Los sedimentos de orina son aportados por los ff: o o Los elementos formados ( principalmente
Sangre - la orina es el ultrafiltrado del plasma. Los glóbulos rojos, glóbulos blancos y
materiales insolubles en la sangre/plasma se observan cilindros hialinos ) se desintegran
en la orina o Riñón. rápidamente, especialmente en orina
o Tracto genitourinario inferior alcalina diluida.
o Contaminación externa o La refrigeración (1-6 grados Celsius)
✓ Los sedimentos de orina incluyen: puede provocar la precipitación de
o RBC, WBC, células epiteliales, cilindros uratos y fosfatos amorfos que pueden
o Bacterias, levaduras, parásitos. afectar la claridad de la orina. Otros
o Moco, espermatozoides cristales no patológicos que pueden
o Cristales y artefactos = tipos desorganizados oscurecer otros elementos en el
✓ El examen del sedimento urinario debe incluir tanto sedimento de orina.
la identificación como la cuantificación de los o Calentar la muestra a 37 °C antes de
elementos presentes .
centrifugar puede disolver algunos
✓ El menos estandarizado y el que más tiempo cristales.
consumiendo parte del análisis de rutina
o Se prefiere la muestra de captura limpia a
Confirmar la causa patológica o
mitad de camino porque minimiza la
no patológica de la turbidez.
contaminación externa del sedimento.
CRIBADO MACROSCÓPICO Y CORRELACIÓN CON Hematuria (turbia) versus
SEDIMENTOS MICROSCÓPICOS Claridad hemoglobinuria/mioglobinuria
(rojo claro)
✓ Las anomalías en las partes física y química del
análisis de orina juegan un papel primordial en VOLUMEN DE MUESTRA
la decisión de realizar un análisis microscópico, o Se centrifuga una cantidad estándar de
de ahí el uso del término examen orina, generalmente entre 10 y 15 ml,
macroscópico , también conocido como
en un tubo cónico.
tamizado químico .
o Con frecuencia se utiliza un volumen de
CORRELACIONES DE DETECCIÓN MACROSCÓPICA 12 ml porque las tiras reactivas
Prueba de pantalla Significado multiparamétricas se sumergen
Color Sangre fácilmente en este volumen y los
tubos de centrífuga con tapa a
menudo se calibran para este

1
ANÁLISIS DE ORINA Y
Programa de Evaluación de Tecnología
OTROS
Médica FLUIDOS
18 de noviembre de 2021 | Mark Rodrigo D. Mendros
CORPORALES
RMT, MT(ASCPi), MSMT
volumen.
o Si no es posible obtener una muestra de
recomienda el escaneo a baja
potencia del perímetro del
12 ml, como ocurre con los pacientes cubreobjetos.
pediátricos, se debe anotar el o Cuando se encuentran elementos como
volumen de la muestra utilizada en el moldes que requieren identificación,
formulario de informe. la configuración cambia a alta
o La producción de orina es proporcional a potencia .
la ingesta de líquidos y la función renal o Cuando el sedimento se examina sin
de un individuo. teñir, muchos de sus componentes
tienen un índice de refracción similar
al de la orina. Por lo tanto, es esencial
CENTRIFUGACIÓN
que los sedimentos se examinen con
o La centrifugación durante 5 minutos a luz reducida cuando se utiliza
400 RCF produce una cantidad óptima microscopía de campo brillante.
de sedimento con la menor posibilidad
de dañar los elementos. INFORME DEL EXAMEN MICROSCÓPICO
o Los moldes se informan como el número
VOLUMEN DE SEDIMENTO EXAMINADO promedio por campo de baja potencia
(lpf) después del examen de 10
o Cuando se utiliza el método campos.
convencional con portaobjetos de o RBC y WBC , como número promedio
vidrio, el volumen recomendado es de por 10 campos de alta potencia (hpfs) .
20 uL (0,02 ml) cubiertos por un
cubreobjetos de vidrio de 22 mm.
▪ En pacientes con sangrado en la
orina o sospecha de ITU = Si
o Permitir que la muestra fluya fuera del
se ven muchas células en el
cubreobjetos puede provocar la portaobjetos, infórmelas como
pérdida de elementos más pesados, “demasiadas numerosas para
como los modelos . contarlas”.
▪ Pacientes con ITU leve = los
EXAMEN DEL SEDIMENTO glóbulos blancos se ven en
grupos. Debería informarse
o Observación de un mínimo de 10 como "Las células de pus se
campos tanto en campo de baja ven en grupos o agregados".
potencia (lpf = 10x) como en campo oh Células epiteliales, cristales y otros.
de alta potencia (hpf = 40x) Los elementos se informan con
o Primero se examina el portaobjetos a frecuencia en términos
baja potencia para detectar cilindros y semicuantitativos como : raro, pocos,
determinar la composición general del moderado y muchos, o como 1+, 2+,
sedimento. 3+ y 4+, siguiendo el formato de
o En el método de deslizamiento laboratorio en cuanto al uso de lpf o
convencional, los modelos tienden a hpf .
ubicarse cerca de los bordes del
CORRELACIONES DE ORINÁLISIS DE RUTINA
cubreobjetos; por lo tanto, se

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CORPORALES
Elementos RMT, MT(ASCPi), MSMT
microscópicos
Físico Químico Excepciones
Turbiedad Número
glóbulos rojos +Sangre
Color rojo Hemólisis
+Proteína
Lisis
WBC Turbiedad +Nitrito
numérica
+Leucocitos
Células
Turbiedad Número
epiteliales
moldes +Proteína Número
pH
Número y
bacterias Turbiedad +Nitrito
tipo
+Leucocitos
Color de Número y
Cristales pH
turbidez tipo
TÉCNICAS DE EXAMEN DE SEDIMENTOS

MANCHA DE SEDIMENTO
✓ La tinción aumenta la visibilidad general de los
elementos sedimentarios que se examinan
utilizando

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CORPORALES RMT, MT(ASCPi),
microscopía ✓
de campo brillante
índice de refracción. (Ej. es de yeso hialino)
MSMT cambiando su Clínico. Firma:
o Daño de la membrana glomerular
✓ La tinción también imparte características de (glomerulonefritis)
identificación de estructuras celulares, como o Lesión vascular dentro del tracto
los núcleos, el citoplasma y las inclusiones. genitourinario.
✓ La tinción más utilizada en el análisis de orina o Cálculos renales
es la tinción de Sternheimer-Malbin (consta
de violeta cristal y safranina O). 2. Glóbulos blancos (leucocitos/células de pus)
✓ Aparecen como: esferas granulares, de
Tabla 6-3 aproximadamente 12 micrones de diámetro,
generalmente neutrófilos.
Mancha Acción Función ✓ Generalmente hay <5 leucocitos/hpf en la
Sternheimer-Malbin Delinea la estructura y los colores contrastantes del
Identifica leucocitos, células epiteliales y cilindros. orina normal.
núcleo y el citoplasma.
Azul de toluidina Mejora los detalles nucleares. Diferencia los glóbulos blancos y las células
✓ Generalmente se distingue de los glóbulos
epiteliales tubulares renales (RTE) rojos por la adición de ácido acético glacial al
Distingue los glóbulos rojos de los glóbulos 10 % que disuelve los glóbulos rojos y hace
Ácido acético al 2% Lisa los glóbulos rojos y mejora los núcleos de
los glóbulos blancos
blancos, levaduras, gotas de aceite y cristales.
que los núcleos de los glóbulos blancos
Tinciones lipídicas : Tiñe los triglicéridos y las grasas neutras de
Identificar gotas de grasa libre y células y cilindros
parezcan más distintos.
✓ Piuria : aumento de leucocitos en la orina
que contienen lípidos.
Oil Red 0 y Sudan III color rojo anaranjado. Identifica cilindros bacterianos.
tinción de Gram No mancha el colesterol
Diferencia bacterias grampositivas y Identifica eosinófilos urinarios.
✓ Células brillantes: leucocitos de color azul
Tinción de Hansel gramnegativas. pálido que producen una “apariencia brillante”
La combinación de metileno y la eosina Y
Identifica gránulos de color amarillo-marrón de en su citoplasma; Se observa en orina diluida o
Mancha de azul de
tiñen los gránulos eosinófilos.
hemo. siderina en células y cilindros hipotónica.
✓ Clínico. Firma:
Tiñe estructuras que contienen hierro.
Prusia

Infección bacteriana
COMPONENTES DEL SEDIMENTO ORINA
o Pielonefritis
o cistitis
CLASIFICACIÓN DE LOS SEDIMENTOS URINARIOS oProstitis
o Uretritis
✓ Organizado
✓ Desorganizado Infección no bacteriana
o glomerulonefritis,
A. SEDIMENTOS URINARIOS ORGANIZADOS o LES, o intersticial, o nefritis, tumores
1. Las células rojas de la sangre
✓ Eosinófilos : poco frecuentes; asociado con
✓ Discos incoloros sin núcleo, de 7 micras de nefritis intersticial inducida por fármacos (ITU
diámetro. y trasplante renal)
✓ Frecuentemente confundido con células de
levadura, gotas de aceite y CaOx. 3. Células epiteliales
✓ NV: 0-2/hpf o 0-3/hpf a. células escamosas
✓ Apariencia: ✓ Las células epiteliales más frecuentes y menos
o Orina hipotónica (diluida y alcalina): significativas.
células hinchadas/fantasmas o células
en sombra
✓ Derivado del revestimiento vaginal y de las
porciones inferiores de la uretra masculina y
o Orina hipertónica (concentrada): femenina.
crenada ✓ Células más grandes del cuerpo, tienen

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CORPORALES ✓
RMT, MT(ASCPi),
abundante MSMT
citoplasma irregular.
✓ Ponga una gota de NSS para separar las células
diabetes mellitus, casos de traumatismos.
Los lípidos también se observan en la orina cuando
escamosas agrupadas que se encuentran en la el paciente consume una mayor ingesta de
muestra. alimentos grasos.
✓ Células clave : indicativas de infección vaginal por ✓ Célula de burbuja : RTEc que contiene vacuolas
G. vaginalis que cubre la mayor parte de la grandes llenas de no lípidos
superficie celular y se extiende más allá de los
bordes de la célula. 4. Moldes
✓ Formado principalmente dentro de la “lumen
b. Células epiteliales de transición/uroteliales/ de DCT y conductos colectores”.
con la cola ✓ Se excreta a un ritmo constante por el túbulo
✓ Se originan en el revestimiento de la pelvis renal, renal.
la vejiga y la uretra superior. ✓ Proporciona protección inmunológica contra
✓ Más pequeñas que las células escamosas, infecciones.
esféricas, caudadas o poliédricas con núcleo ✓ Geles (formas) durante la estasis del flujo de
central. orina, acidez y presencia de sodio y calcio.
✓ Tiene capacidad de reabsorber grandes cantidades ✓ Refleja el diámetro y la forma del origen de la
de agua. luz.
✓ Rara vez importancia patogénica. ✓ Composición:
a. 1/3: proteína Tamm-Horsfall –
c. Células epiteliales tubulares renales (RTEc) glicoproteína excretada por las células
✓ Lo más significante; Su presencia indica “necrosis RTE; forma la matriz de todos los elencos
tubular” y “rechazo del injerto renal”. b. 2/3: Albúmina y Globulina
✓ Generalmente es redondo, un poco más grande ✓ Cilindroides : modelos con extremos cónicos
que el WBC, con un núcleo único, redondo y producidos en la unión del asa ascendente de
ubicado excéntricamente. Henle y DCT
✓ La presencia de >2/hpf células RTE indica lesión ✓ Cinlindriduria o Cynlinduria – presencia de
tubular yeso en la orina
✓ Clínico. Firma:
o daño tubular, pielonefritis, reacciones
tóxicas, infecciones virales, rechazo de TIPOS DE FUNDIDOS
aloinjertos, efectos secundarios de la a. Cilindros hialinos
glomerulonefritis ✓ Incoloro, homogéneo y con el mismo índice de
refracción que la orina.
d. Cuerpos grasos ovalados : células tubulares ✓ Compuesto enteramente de proteína Tamm-
renales que contienen lípidos Horsfall
✓ Visto en conjunto con gotitas de grasa que flotan ✓ Indicado “daño renal leve”
libremente. ✓ 0-2/hpf se considera normal
✓ Bajo luz polarizada exhibe “apariencia de cruz de ✓ Clínico. Firma:
Malta” No patógeno
✓ La identificación se confirma mediante Sudan III o o Ejercicio extenuante
Oil Red O (microscopía polarizada) o Deshidratación
✓ Lipiduria : asociada con daño al glomérulo causado o Exposición al calor
por síndrome nefrótico, necrosis tubular severa, o Estrés emocional

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CORPORALES
RMT, MT(ASCPi), MSMT
Patógeno
o Glomerulonefritis aguda
✓ la presencia en orina presenta pronóstico
grave, denominado “modelos de insuficiencia
o Pielonefritis renal”
o Enfermedad renal crónica
o Insuficiencia cardíaca congestiva
5. Hilos de moco
b. yesos de eritrocitos ✓ material proteico producido por glándulas y
✓ Hemorragia indicada en los Túbulos Renales, células epiteliales en el tracto genitourinario y
Nefritis Aguda activa” RTEC
✓ Encontrado en individuos sanos después de ✓ Proteína Tamm-Horsfall: constituyente
participar en “deportes de contacto” principal
c. moldes del WBC ✓ Se producen mayores cantidades en
“contaminación vaginal” e “irritación” de
✓ Presencia significa "infección e inflamación" cualquier tipo.
dentro de la nefrona.
✓ Se observa con mayor frecuencia en 6. bacterias
pielonefritis.
✓ Presencia indicó la necesidad de realizar ✓ solo se informa cuando se observa en
cultivos bacterianos. muestras frescas junto con WBC
✓ Cuando se deja reposar la orina, se producirá
d. Cilindros de células epiteliales una multiplicación bacteriana que puede
✓ Observado junto con moldes de glóbulos rojos provocar una elevación falsa en el recuento
y leucocitos en glomerulonefritis y bacteriano.
pielonefritis. ✓ Positivo para la presencia de leucocitos, nitrito
y esterasa leucocitaria.
e. Moldes granulares ✓ confirmado con urocultivo positivo
✓ Generalmente se ve acompañando a los yesos ✓ la presencia es indicativa de ITU inferior o
hialinos después de períodos de estrés y superior; generalmente entéricos,
ejercicio extenuante. Staphylococcus .
✓ Puede ser en forma de molde granular fino o ✓ No se tiñen bajo el microscopio, por lo que es
molde granular grueso. importante reducir la intensidad de la luz del
✓ Determine la presencia de este yeso bajo lpf y microscopio.
verifique su apariencia bajo hpf.
7. Células de levadura
f. moldes cerosos ✓ visto en diabetes mellitus, moniliasis vaginal,
✓ Indica "estasis extrema del flujo de orina" pacientes inmunocomprometidas
✓ Refráctiles de textura rígida, lo que hace que ✓ Se confunde fácilmente con los glóbulos rojos
se fragmenten a su paso por los túbulos. y se observa en formas en gemación.
✓ La presencia de células fúngicas en la orina es
g. moldes grasos un indicador de un sistema inmunológico muy
✓ visto junto con cuerpos grasos ovalados en débil
trastornos que causan “lipiduria” como el ✓ Se confunde fácilmente con los glóbulos rojos
síndrome nefrótico y se observa en formas en gemación.
✓ Generalmente se ve en la orina = Candida spp.
h. moldes amplios

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CORPORALES
8. ParásitosRMT,
en la MT(ASCPi),
orina MSMT

✓ Trichomonas vaginalis – adquirida a través del
Asociado con “artritis gota”, “síndrome de
Lesch-Nyhan” y pacientes con leucemia que
contacto sexual; Este organismo es muy móvil reciben quimioterapia
y puede causar “infección por ping pong” o 3. Oxalato de calcio
tricomoniasis. ✓ Aparecen principalmente en forma de sobre o
✓ Balantidio coli de mancuerna u ovoides (dihidratos)
✓ esquistosoma haematobio ✓ forma monohidrato: mancuerna y rectángulo
✓ Enterobius vermicularis ovoide observado en casos de intoxicación por
etilenglicol
9. Espermatozoide ✓ derivado de diversos alimentos, en particular
✓ Se encuentra en la orina después de las espinacas, ruibarbo, bayas y tomates.
relaciones sexuales, emisiones nocturnas o
masturbación. II. CRISTALES NORMALES EN LA ORINA ALCALINA
✓ (+) Tira reactiva de proteínas en mayor 1. fosfato amorfo
cantidad de
✓ Granular, similar a los uratos amorfos, turbidez
semen blanca macroscópica
✓ No reportamos presencia de 2. Carbonato de calcio
espermatozoides. ✓ También se ve en orina neutra.
✓ Geriatría: indicación de fuga de líquido ✓ Gránulos incoloros más grandes que los
seminal; puede haber un problema en el fosfatos amorfos.
tracto genitourinario ✓ A menudo aparecen como “formas de
mancuernas o formas esféricas”.
✓ Si el paciente es menor de edad, no divulgar el 3. biurato de amonio
resultado a menos que lo indiquen los ✓ Marrón amarillento/dorado, “manzanas
superiores, especialmente en posibles casos espinosas”/cubiertas de espículas
de violación. ✓ Sólo el urato se encuentra en la orina alcalina.
B. SEDIMENTOS URINARIOS NO ORGANIZADOS
✓ Se convierte en cristal de ácido úrico cuando
se agrega ácido acético glacial.
1. Cristales : se encuentran por precipitación de sales
4. Fosfatos de calcio
de orina sometidas a cambios de pH, temperatura o
concentración que afectan su solubilidad.
✓ Placas rectangulares planas e incoloras sobre
prismas delgados , a menudo en formación de
✓ pH – más valioso en la identificación de rosetas.
cristales ✓ Constituyente de los cálculos renales
5. triple fosfato
✓ También conocido como fosfato de amonio y
I. CRISTALES NORMALES EN LA ORINA ÁCIDA magnesio.
1. uratos amorfos ✓ Conocidos como cristales de tapa de ataúd.
✓ Rosa macroscópico tras la refrigeración. ✓ Con menos frecuencia: forma de hoja de
✓ Color rojo ladrillo microscópico o marrón helecho plana, láminas y escamas.
amarillento. ✓ Sugerir estasis de orina en riñón y vejiga.
2. Ácido úrico ✓ Visto en orina altamente alcalina asociada con
✓ Asume la mayor variedad de formas (rómbica, la presencia de bacterias que dividen la urea.
piedra de afilar, roseta, rebabada, cuadrada,
mancuerna, cuñas) III. ORINA ÁCIDA ANORMAL

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CORPORALES
1. cistinaRMT, MT(ASCPi), MSMT
✓ Placas hexagonales; incoloro, altamente
refractario y grueso/delgado
✓ A menudo se confunde con ácido úrico, pero
se disuelve en HCl diluido (el ácido úrico no).
✓ En los trastornos del metabolismo de la cistina
puede haber un notable "olor a azufre" en la
orina.
2. Colesterol
✓ Placas planas grandes con una o más esquinas
cortadas. apagado; placas con muescas
✓ Visto en condiciones nefróticas y necrosis
lipídica.
✓ Soluble en cloroformo
3. leucina
✓ Esferas amarillas o marrones que se asemejan
a glóbulos grasos con delicadas estrías
radiantes y concéntricas.
✓ Menos visto que la tirosina, soluble en
álcali/alcohol caliente.
✓ "Cristal con apariencia de vieira"
4. tirosina
✓ Agujas finas incoloras agrupadas en racimos
(pueden aparecer negras en el centro), rosetas
o haces que se cruzan en varios ángulos.
✓ Visto junto con cristal de leucina, (+) prueba de
bilirrubina
✓ Soluble en álcali y calor.
✓ Tiene olor “ácido y rancio”
5. Bilirrubina
✓ Cristales amarillo-rómbico/rojo rubí/agujas o
gránulos agrupados con amarillo característico

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CORPORALES
✓ Soluble enRMT,
cloroformo.
ácidoMT(ASCPi),
acético, HCl,MSMT
NaOH, éter y

6. Sulfonamidas
✓ Causa de formación: hidratación inadecuada
del paciente.
✓ Color verde, soluble en acetona.
✓ Menos encontrados: agujas, rómbicos,
piedras de afilar, gavillas de trigo, rosetas con
colores que van del incoloro al marrón
amarillento.
✓ Clínico. Sig: Daño tubular
7. tinte radiográfico
✓ Similar al cristal de colesterol y altamente
birrefringente.
8. ampicilina
✓ Aparecen como agujas incoloras que tienden

a formar haces después de la refrigeración.

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CAPÍTULO CORPORALES
RMT, MT(ASCPi), MSMT
9: DETECCIÓN METABÓLICA EN cistinosis
ORINA Homocistinuria
TRASTORNOS
Tabla 9-2
DESBORDAMIENTO VERSUS TRASTORNOS
RENALES Trastornos principales del metabolismo de
proteínas y carbohidratos asociados con
✓ La aparición de sustancias metabólicas constituyentes urinarios anormales
clasificados como defectos funcionales
anormales en la orina puede ser causada por Desbordamiento heredado
una variedad de trastornos que generalmente Metabólico
se pueden agrupar en dos categorías: TIPO Renal
enfermedad de
DESBORDAMIENTO y TIPO RENAL. Fenilketonuria tirosinemia infantil Hartnup

✓ Trastornos por desbordamiento : resultan de


Tirosinemia

alcaptonuria
melanuria

indicanuria
cistinuria

la alteración de una vía metabólica normal Enfermedad de la orina con


que provoca un aumento de las jarabe de arce
Acidemias orgánicas
Ácido 5-hidroxiindolacético
Porfiria
concentraciones plasmáticas de sustancias no cistinosis

metabolizadas. Porfiria Mucopolisacaridosis


o Anulan la capacidad de reabsorción de Galactosemia
Enfermedad de Lesch-Nyhan
PRUEBAS DE DETECCIÓN DEL
RECIÉN NACIDO
los túbulos renales o normalmente no ✓ Tradicionalmente, los análisis de orina se
se reabsorben porque solo están realizan para detectar y controlar los IEM.
presentes en cantidades mínimas. ✓ Los defectos deben detectarse temprano en la
✓ Trastornos renales: causados por disfunciones vida porque muchos de los trastornos provocan
en el mecanismo de reabsorción tubular. la acumulación de ingredientes alimentarios
✓ Las anomalías más frecuentes están asociadas tóxicos no metabolizados.
a alteraciones metabólicas que producen un ✓ Sangre : muestra obtenida mediante punción en
desbordamiento urinario de sustancias el talón del bebé porque las sustancias están
implicadas en el metabolismo de proteínas, más elevadas en la sangre que en la orina.
grasas y carbohidratos debido a la gran ✓ Espectrofotometría de masas en tándem
cantidad de enzimas utilizadas y al hecho de (MS/MS) : capaz de analizar la muestra de
que su función es esencial. sangre del bebé en busca de sustancias
✓ La alteración de la función enzimática puede específicas asociadas con IEM particulares.
deberse a: ✓ También se está desarrollando rápidamente un
o Error innato del metabolismo (IEM): método para realizar pruebas genéticas
incapacidad de heredar el gen para específicas.
producir una enzima particular, o
o por mal funcionamiento de órganos
debido a enfermedades o reacciones
tóxicas.
CONSTITUENTES O CONDICIONES METABÓLICAS ácido Fenilcetonuria cistina
ANORMALES DETECTADAS EN EL ANÁLISIS DE ORINA homogeneístico
DE RUTINA Enfermedad del
Melanina leucina
Color Olor Cristales jarabe de arce

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Indicano
CORPORALES
RMT, MT(ASCPi),
acidemia MSMT
isovalérica
tirosina
fenilpiruvato.
o Esto ocurre cuando se altera la
Enfermedad de conversión de fenilalanina en tirosina.
Porfirinas cistinuria o La interrupción de la vía produce niños de
Lesch-Nyhan
TRASTORNOS DE AMINOÁCIDOS tez clara (incluso familias de piel oscura)
debido a la disminución de la producción
FENILALANINA – TRASTORNOS DE LA TIROSINA de tirosina y su metabolito de
✓ Muchos de los procedimientos especiales de pigmentación, la melanina.
análisis de orina solicitados con mayor ✓ La PKU es causada por la falta de herencia del
frecuencia están asociados con la vía gen que produce la enzima fenilalanina
metabólica de fenilalanina-tirosina. hidroxilasa.
✓ Los defectos metabólicos provocan la o Se hereda como un rasgo autosómico
producción de cantidades excesivas de recesivo ✓ Hay pruebas de detección disponibles
melanina. para la detección temprana de la anomalía.
o Si se detectan, los cambios en la dieta que
eliminan la fenilalanina, un componente
importante de la leche, de la dieta del bebé
pueden prevenir la acumulación excesiva de
fenilalanina sérica y, por lo tanto, evitar
daños a las capacidades mentales del niño.
o A medida que el niño madura, se desarrollan
vías alternativas del metabolismo de la
fenilalanina y se pueden aliviar las
restricciones dietéticas.
o Los productos que contienen grandes
cantidades de fenilalanina tienen
advertencias para personas con PKU, como
el aspartamo .
✓ El aumento de los niveles sanguíneos de
Ácido fumarilacetoacético fenilalanina debe ocurrir antes de la excreción
urinaria del ácido fenilpirúvico, lo que puede
ácido fumárico y tardar de 2 a 6 semanas.
ácido acetoacético
✓ Se debe obtener una muestra de sangre antes de
1. Fenilcetonuria que el recién nacido sea dado de alta del hospital.
✓ Aminoacidurias ✓ La fenilalanina se puede detectar tan pronto como
✓ Se estima que ocurre en 1 de cada 10.000 a 4 horas después del nacimiento y, si el nivel de
20.000 nacimientos y, si no se detecta, corte para resultados normales se reduce de 4
provoca un retraso mental grave. mg/dL a 2 mg/dL, se debe detectar la presencia de
PKU.
✓ Identificado por primera vez en Noruega por
Ivan Follling en 1934 o La madre de otros niños ✓ Más niñas que niños escapan a la detección de PKU
con retraso mental informó un olor peculiar a durante las primeras pruebas debido a aumentos
ratón en la orina de su hijo. más lentos en los niveles de fenilalanina en sangre.
o El análisis de orina mostró mayores ✓ Las pruebas de orina se realizan como:
cantidades de cetoácidos, incluido el o Procedimiento de seguimiento en casos de
diagnóstico dudoso,

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CORPORALES
RMT,
o Prueba MT(ASCPi),
de cribado MSMT un
para asegurar
adecuado control dietético en casos
previamente diagnosticados, y
o Medios para controlar la ingesta dietética de
mujeres embarazadas que se sabe que
carecen de fenilalanina hidroxilasa.
✓ Ensayo de inhibición microbiana de Guthrie: el
análisis de sangre más conocido para la PKU.

PROCEDIMIENTO PARA EL ENSAYO DE INHIBICIÓN


MICROBIANA POR GUTHRIE

✓ Sangre de un pinchazo en el talón absorbida en


círculos de papel de filtro.
✓ El círculo debe estar completamente saturado con
una sola capa de sangre.

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✓ CORPORALES
RMT, MT(ASCPi), MSMT
Luego, los discos impregnados de sangre se
colocan en medios de cultivo sembrados con la
✓ (+) Color azul verdoso permanente

bacteria Bacillus subtilis .


TIROSILURIA
✓ Aumento del nivel de fenilalanina: se observará
crecimiento alrededor de los discos de papel. ✓ Debido a que el metabolismo de la tirosina
o La fenilalanina contrarresta la acción de la implica dos vías, la orina puede contener un
beta-2-tienilalanina, un inhibidor de B. exceso de tirosina o sus productos
subtilis que está presente en el medio. metabólicos, ácido p-hidroxifenilpirúvico y
ácido p-hidroxifenilláctico.
✓ En los bebés prematuros, la tirosinemia
transitoria se observa con frecuencia debido al
subdesarrollo de la función hepática necesaria
Figura 9-2 Prueba de Guthrie para producir la enzima necesaria para el
metabolismo completo de la tirosina.
✓ Las modificaciones de la prueba de Guthrie
también pueden detectar: ✓ Realice una prueba en tubo de cloruro férrico
o Enfermedad de la orina con jarabe de arce, para evitar confusión entre PKU y tirosina
o Homocistinuria, durante las pruebas de detección urinaria. El
o tirosinemia, color verde se desvanece rápidamente cuando
o Histidinemia, hay tirosina presente.
o Valinemia, y ✓ La tirosiluria también se observa en pacientes
o Galactosemia. con enfermedad hepática grave adquirida,
✓ Pruebas MS/MS para muchas sustancias que similar a la tirosinemia transitoria, pero más
también se pueden detectar a partir de sangre grave. Se pueden observar cristales de tirosina
seca extraída mediante punción en el talón: y leucina durante el examen microscópico del
o Hormonas tiroideas sedimento de orina.
o tripsina
o Biotinidasa ✓ Los trastornos hereditarios, que causan
enfermedad de los túbulos hepáticos y renales
✓ Las pruebas de orina para detectar ácido
fenilpirúvico se basan en la reacción del cloruro y aminoaciduria generalizada, suelen ser
férrico realizada mediante una prueba en tubo. mortales.
o La prueba de cloruro férrico es una reacción ✓ La prueba de nitroso-naftol se utiliza para
inespecífica y reaccionará con muchos detectar tirosina y sus metabolitos. No es
otros aminoácidos y medicamentos específico y reacciona con sustancias distintas
comúnmente ingeridos. de la tirosina y sus metabolitos. Una reacción
o Las marcas de pañales desechables también positiva es de color rojo anaranjado, lo que
producen reacciones falsas positivas para indica que se requieren más pruebas.
PKU cuando se analizan con cloruro ✓ Prueba de nitroso-naftol para tirosina
férrico. o Reactivos: 1 mL de ácido nítrico 2,63 N,
o Resultado positivo en orina: Color azul 1 gota de nitrito de sodio al 21,5 %,
verdoso permanente. 0,1 mL de 1-nitroso-2-naftol
oh Orina: 5 gotas
PROCEDIMIENTO PARA LA PRUEBA DEL TUBO DE oh (+) color rojo anaranjado
CLORURO FÉRRICO
✓ Observa el color.

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✓ CORPORALES
RMT, MT(ASCPi), MSMT
La espectrometría de masas en tándem
(MS/MS) está disponible para detectar
tirosinemia tipos 1 y 2.

✓ Colocar 1 mL de orina en un tubo.


✓ Agregue lentamente 5 gotas de cloruro
férrico al 10%.
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TRASTORNOS HEREDITARIOS DE LA TIROSINEMIA precursor (5,6-dihidroxiindol), que luego
- deficiencia de se oxidaría a melanógeno y luego a
fumarilacetoacetat melanina, provocando que la orina se
o hidrolasa oscureciera.
- Él causas
Tipo i tubular renal REACCIONES DE MELANINA CON TEST DE
generalizado DETECCIÓN
Pruebas de cribado Reacción positiva de la
trastorno melanina.
y progresivo Prueba de cloruro férrico Precipitado gris/negro
insuficiencia Nitroprusiato de sodio color rojo
- Deficiencia de
tirosina
aminotransferasa ✓ Para evitar la interferencia de acetona y
- Se piensa que creatinina, agregue ácido acético glacial. Cuando
causa tirosina se agrega ácido acético glacial, la melanina se
Tipo II cristalización en vuelve negra verdosa, la acetona se vuelve
células, lo que violeta y la creatinina se vuelve ámbar.
resulta en córnea
erosión
ALCAPTONURIA
y lesiones en las
palmas, dedos y ✓ El tercer defecto importante de la fenilalanina.
- Deficiencia de p- La vía de la tirosina está causada por la ausencia
hidroxifenilpirúvico del gen necesario para producir la oxidasa del
ácido homogentísico. Como resultado, la vía
ácido fenilalanina-tirosina no puede completarse y el
dioxigenasa. ácido homogentísico se acumula en la sangre,
Tipo III
- Puede causar los tejidos y la orina. Aunque no se observa una
problemas mentales manifestación completa durante la primera
retraso si infancia, se han informado pañales manchados
no se implementan de negro y rojo.
restricciones ✓ En los adultos, el depósito de ácido
dietéticas de homogentísico en el cartílago provoca artritis.
MELANURIA secretarían una melanina incolora
o La melanina es el pigmento que da color PRUEBA DE DETECCIÓN DE RUTINA PARA ÁCIDO
al cabello, la piel y los ojos oscuros. El HOMOGENTÍSICO
albinismo resultaría de una falta de Reacción positiva
producción de melanina. Prueba de cloruro férrico Color profundo transitorio
o Cuando la orina con altos niveles de Clinitest Precipitado amarillo
melanina se expone al aire, la orina se Alcalinización de la orina Color oscurecimiento
oscurece. Los niveles elevados de fresca.
melanina pueden indicar
sobreproliferación de melanocitos o ✓ Esta prueba se ve dificultada por los altos niveles
melanoma maligno. Estos tumores de ácido ascórbico, así como por la adición de

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RMT,e MT(ASCPi),
nitrato de plata hidróxido de MSMT
amonio. concentraciones de cetoácidos en la orina.
Está incluido en muchos perfiles de detección
Trastornos de la vía Pruebas de cribado de recién nacidos que utilizan MS/MS.
fenilalanina-tirosina ✓ La prueba de detección de orina para MSUD
Fenilcetonuria Prueba de tubo de cloruro es 2,4-dinitrofenilhidrazina (DNPH)
Prueba de tubo de cloruro o Reactivo: 10 gotas de 2,4-DNPH al 0,02%
tirosiluria
férrico Prueba de nitro- en HCl 2N
Prueba de tubo de cloruro o Orina: 1mL
alcaptonuria férrico
oh (+): precipitado amarillo/blanco
Clinitest
oh Interferencia: Grandes dosis de
Prueba de tubo de cloruro
ampicilina.
melanuria férrico Prueba de
nitroprusiato de sodio ACIDEMIAS ORGÁNICAS
Prueba de Ehrlich
✓ Las acidemias orgánicas pueden causar
TRASTORNOS DE AMINOÁCIDOS DE CADENA enfermedades graves, como vómitos, acidosis
RAMIFICADA metabólica, hipoglucemia, cetonuria y
aumento del amoníaco sérico.
✓ Una característica distintiva es su grupo metilo
unido a la cadena de carbono alifática ✓ Los tres trastornos más frecuentes son la
principal. acidemia isovalérica, propiónica y
✓ En general, la presencia de cetonuria en un metilmalónica.
recién nacido es un hallazgo de laboratorio ACIDEMIA ISOVALERICA
importante en los trastornos de los
✓ Los pacientes con esta afección tienen
aminoácidos de cadena ramificada.
deficiencia de isovaleril coenzima A en la vía
ENFERMEDAD DE LA ORINA POR JARABE DE ARCE de la lucina. La ausencia de enzima conduce a
la acumulación de isovalerilglicina. No existe
✓ Es un rasgo hereditario autosómico recesivo
ninguna prueba de detección para esta
causado por un error congénito del
enfermedad.
metabolismo. Donde la muestra de orina
✓ El ejemplar presenta un característico olor a
produce un fuerte olor parecido al jarabe de pies sudorosos.
arce.
✓ Los aminoácidos implicados son leucina, ACIDEMIAS PROPIONICAS Y METILMALONICAS
isoleucina y valina.
✓ Errores en la ruta metabólica que convierte
✓ La vía metabólica comienza normalmente, con
isoleucina, valina, treonina y metionina en
la transaminación de los tres aminoácidos
succinil coenzima A.
(leucina, isoleucina y valina) en el hígado a
✓ El ácido propiónico es el precursor inmediato
cetoácidos (a-cetoisovalérico, a- del ácido metilmalónico en esta vía.
cetoisocaproico, a-ceto-B-metilvalérico). ✓ Prueba de orina para aciduria metilmalónica
✓ La falta del gen necesario para la carboxilación o Reactivo: p-nitroanilina o (+): verde
oxidativa de estos cetoácidos da como esmeralda
resultado su acumulación en la sangre y la
orina.
✓ MSUD es manejable si la enfermedad se TRASTORNOS DEL TRIPTÓFANO
detecta antes del día y con una regulación
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✓ La principal preocupación en el metabolismo
dietética y un control cuidadoso de las del triptófano es el aumento de la excreción

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urinariaRMT, MT(ASCPi), MSMT
de metabolitos: Indican y ácido 5-
hidroxiindolacético (5-HIAA).

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INDICANURIA RMT, MT(ASCPi), MSMT ✓ Componente principal de alimentos como
plátanos, piñas y tomates.
CONDICIONES NORMALES
La mayor parte del triptófano que ingresa al intestino ✓ Normalmente, el cuerpo utiliza la mayor parte de
la serotonina y pequeñas cantidades de su
es:
producto de degradación, el ácido 5-
✓ Reabsorberse para ser utilizado por el cuerpo
en la producción de proteínas. hidroxiindolacético (HIAA), están disponibles para
✓ Convertido en indol por las bacterias su excreción en la orina.
intestinales y excretado en las heces. ✓ carcinoide tumores que involucran argentafina
Cuando se desarrollan células enterocromafines,
CIERTOS TRASTORNOS INTESTINALES se producen cantidades excesivas de serotonina,
o Obstrucción lo que produce una elevación de los niveles
o Presencia de bacterias anormales. urinarios de 5-HIAA.
o Síndromes de malabsorción ✓ Aparición de color púrpura a negro, debido a la
o enfermedad de Hartnup adición de ácido nitroso y 1-nitroso-2-naftol a la
orina que contiene 5-HIAA.
✓ Cantidades mayores de triptófano se ✓ 2 a 8 mg – excreción diaria normal de 5-HIAA
convierten en indol. ✓ Mayor a 25 mg/24 h - indicación de
✓ Exceso de indol: se reabsorbe desde el Tumores de células argentafines.
intestino al torrente sanguíneo y circula por el
hígado. ✓ La prueba se puede realizar en una muestra
✓ Hígado: donde se convierte en indicativo y aleatoria o en la primera mañana.
luego se excreta en la orina. ✓ Pueden producirse resultados falsos negativos
✓ El indicador excretado en la orina es incoloro según la concentración de la muestra y porque es
hasta que se oxida (por exposición al aire) al posible que el 5-HIAA no se produzca a una
colorante azul índigo. velocidad constante.
✓ Si la muestra de 24 horas es usado -
preservar con
ENFERMEDAD DE HARTNUP ácido clorhídrico o bórico.
✓ Trastorno hereditario poco común ✓ Medicamentos que causan interferencias:
✓ Diagnóstico precoz: “Síndrome del pañal azul” fenotiazinas y acetanilidas. (sostener
– tinción azul de los pañales del bebé.
medicamentos por 72 horasantes de la muestra
✓ El indicador urinario reacciona con el cloruro
férrico ácido para formar un color azul intenso recopilación)
o violeta. (extraído en cloroformo)
✓ Afecta no sólo la reabsorción intestinal de
triptófano sino también la reabsorción tubular
de otros aminoácidos dando lugar a –
Aminoaciduria generalizada (síndrome de
Fanconi)

ÁCIDO 5-HIDROXIINDOLEACÉTICO
✓ Serotonina
o Producido a partir de triptófano por las
células argentafines del intestino.
o Transportado por el cuerpo
principalmente por plaquetas.

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RMT, MT(ASCPi), MSMT
Reabsorbido del intestino al torrente sanguíneo
oh herencia heterocigota
Triptófano o Herencia homocigota
(normal)
Anormal
o Personas con cualquier forma de
trastorno
5-hidroxitriptófano
herencia pueden formar cálculos
renales. (menos común en lisina y
cistina se ven afectados)

CISTINA
✓ Mucho menos soluble que los otros tres
aminoácidos.
✓ Determinaciones de cribado en laboratorio:
basadas en la observación de cristales de
5- Ácido hidroxiindolacético
cistina en el sedimento de muestras
(5-HIAA) concentradas o de primera mañana.
✓ Único aminoácido encontrado durante el
análisis de los cálculos.
Figura 9-3 - Metabolismo del
triptófano ✓ Prueba de detección química: realizada con
cianuro-nitroprusiato.
TRASTORNOS DE LA CISTINA ✓ Reducción de cistina con cianuro de sodio
seguida de la adición de nitroprusiato de sodio
Los dos trastornos distintos son: = rojo-púrpura.
o Heredado ✓ Se producen reacciones falsas positivas en
o Presentar manifestaciones renales. presencia de cetonas y homocistina.
o Puede haber un olor notable a azufre.
CISTINOSIS
CISTINURIA
✓ IEM genuino
✓ Marcado por cantidades elevadas de ✓ Puede ocurrir en tres variaciones, que van
aminoácido cistina en la orina. desde un trastorno fatal grave que se
✓ Debido a la incapacidad de los túbulos renales desarrolla en la infancia hasta una forma
para reabsorber la cistina filtrada por el benigna que aparece en la edad adulta.
glomérulo. (no debido a un defecto en el
Dos categorías generales:
metabolismo de la cistina)
1. nepropático
✓ Defecto en el transporte tubular renal de
✓ Subdividido en:
aminoácidos.
o Infantil
Dos modos de herencia: o Cistinosis de aparición tardía
1. Se ve afectada la reabsorción de los cuatro ✓ El defecto en las membranas lisosomales
aminoácidos: cistina, lisina, arginina y ornitina. impide la liberación de cistina al citoplasma
2. Sólo la cistina y la lisina no se reabsorben. celular.
✓ El metabolismo incompleto da como resultado
el depósito de cistina en:
Los estudios genéticos han agrupado la cistinuria en
o córnea
función de:
oh Médula ósea
oh Dos genes heredados

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ohRMT, MT(ASCPi),
ganglios linfáticos MSMT
o órganos internos
o Realizado originalmente utilizando una
modificación del ensayo de inhibición
microbiana de Guthrie o Reemplazado
✓ Síndrome de Fanconi: también se produce un con pruebas MS/MS.
defecto importante en el mecanismo de ✓ Prueba de cianuro-nitroprusiato: da un
reabsorción tubular renal. resultado positivo cuando hay un aumento de
homocistina en orina.
✓ Túbulos contorneados proximales: afectados
por depósitos de cistina que interfieren con la ✓ Prueba de nitroprusiato de plata: prueba de
reabsorción. detección adicional para homocistinuria
(después de una prueba positiva de cianuro).
✓ El depósito continuo de cistina produce
prueba de nitroprusiato)
insuficiencia renal (si no se trata)
o Sólo reaccionará la homocistina
✓ De inicio tardío, hay progresión gradual hasta
o Uso de nitrato de plata (en lugar de cianuro
insuficiencia renal total.
de sodio): reduce la homocistina a su
2. Nefrohepático infantil forma reactiva con nitroprusiato, pero no
✓ Hay una rápida progresión a insuficiencia reduce la cistina.
renal. La reacción o (+) confirma la presencia de
✓ Relativamente benigno pero puede causar homocistinuria.
algunos trastornos oculares. ✓ Orina fresca: se debe utilizar al realizar pruebas de
✓ Hallazgos de laboratorio de rutina: homocistina.
o Poliuria
o Aminoaciduria generalizada TRASTORNOS DE PORFIRINAS
o (+) resultado de la prueba para sustancias
reductoras ✓ Porfirina: compuestos intermedios en la
o Falta de concentración urinaria producción de hemo.
✓ Tres porfirinas primarias
o uroporfirina
HOMOCISTINURIA o coproporfirina
✓ Los defectos en el metabolismo del o protoporfirina
aminoácido metionina producen un aumento ✓ Precursores de porfirina
de homocistina en todo el cuerpo. oh Ácido Α-aminolevulínico (ALA)
✓ El aumento de homocistina puede provocar: o Porfobilinógeno
o No prosperar ✓ Bloqueo de la vía: da como resultado la
o Cataratas acumulación de la forma del producto.
o Retraso mental ✓ La detección e identificación de este producto en
o Problemas tromboembólicos orina, bilis, heces o sangre puede ayudar a
o Muerte determinar la causa de un trastorno específico.
✓ Puede aliviar los problemas metabólicos: ✓ La solubilidad de los compuestos de porfirina varía
oh Detección temprana con
oh Cambio en la dieta (excluyendo su estructura
alimentos ricos en ALA, porfobilinógeno y Más soluble y aparece
metionina) uroporfirina fácilmente en la orina.
✓ Detección de homocistina: incluida en la
mayoría de los programas de detección de Menos soluble pero
coproporfirina
recién nacidos. se encuentra en la
✓ Pruebas de detección del recién nacido

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RMT, MT(ASCPi),
protoporfirina No MSMT
ver en la orina 1. reacción de erhlich
o Sólo para la detección de ALA y
porfobilinógeno
✓ Análisis fecal: para la detección de coproporfirina y o Se debe agregar acetilacetona a la
protoporfirina.
muestra para convertir el ALA en
✓ Bilis – muestra más aceptable para evitar falsas porfobilinógeno.
interferencia positiva.
2. Técnica fluorescente: debe utilizarse para
✓ Análisis de sangre total: para detectar la presencia otras porfirinas.
de protoporfirina eritrocitaria libre (FEP) como o Descarta porfobilinógeno y ALA
prueba de detección de intoxicación por plomo.
o No distingue entre uroporfirina,
(recomendado por los CDC)
coproporfirina y protoporfirina.
PORFIRIAS o Utiliza su extracción en una mezcla de ácido
✓ Trastornos del metabolismo de las porfirinas. acético glacial y acetato de etilo.
✓ Puede heredarse o adquirirse de: o Capa de disolvente: la que se va a examinar.
oh Mal funcionamiento eritrocítico y o Fluorescencia azul tenue – reacciones
hepático. negativas
oh Exposición a agentes tóxicos. o Violeta, rosa, rojo – reacciones positivas
✓ Causas comunes de porfirias adquiridas: o Si se sospecha la presencia de una sustancia
o Envenenamiento por plomo que interfiere -> la capa orgánica se
o Exposición excesiva al alcohol. puede retirar a un tubo separado ->
o Deficiencia de hierro agregar 0,5 ml de ácido clorhídrico.
o Enfermedad hepática crónica o Las porfirinas, que solo se extraen en la
o Enfermedad renal
capa ácida, producen una apariencia de
✓ Causa de las porfirias hereditarias (mucho más color rojo anaranjado brillante.
raras):
o No heredar el gen que produce una
enzima necesaria en la vía metabólica.
✓ Pruebas para detectar la presencia de
porfobilinógeno: son más útiles cuando el
✓ Porfirias hereditarias – frecuentemente paciente presenta síntomas de un ataque agudo.
clasificadas según sus síntomas clínicos:
o Ya sea neurológico/psiquiátrico o
✓ Aumento de porfobilinógeno – asociado con
porfiria aguda intermitente.
cutáneo. fotosensibilidad
o
✓ Aumento de protoporfirina: se mide mejor en
sangre total.
combinación de ambos
SÍNTESIS DEL HEMO

PORFIRINURIA Glicato y Succinil-CoA j


- = ~ Antmotevulinic acad sintetasa |

✓ Observación del color rojo o vino de Oporto “r-Aminovevulinato(ALA)


en la orina después de la exposición al aire. "-'
Aniincdevulínico y sintetasa | ----------------------------- 1 Exposición al plomo
--------1


Porfiria por deficiencia de ALA hidratasa
Color de la orina vino de Oporto: más Porfobilinógeno
frecuente en las porfirias eritropoyéticas. ' Uroporfirinógeno sintasa j

✓ También pueden producirse manchas en los Porfiria I aguda intermitente

dientes. | Hidroxi metanfetamina yiMane |

✓ Decoloración del pañal de un bebé, a veces Uroporfirinógeno cosintasa |

Porfiria eritropoyética congénita


sospechosa de porfiria congénita.
✓ Dos pruebas de detección de porfirinuria bajo Uroporfirinógeno (UPG)
luz ultravioleta en el rango de 550 a 600 nm. Uroporfirinógeno descarboxilasa j

Porfiria cutánea tardía


Coproporfirinógeno (CFG) |

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, - Coproporfirinógeno oxidasa |

Coproporfiria hereditaria

Protoporfinmógeno | ✓
heredó.
Pruebas de detección utilizadas con
Protoporfirinógeno oxidasa J
frecuencia:
Porfiria variada
Protoporfirina IX |
o Ácido-albúmina
Ferroquelatasa | «----------------- 1 Exposición al plomo | o Pruebas de turbidez con bromuro de
Protoporfiris eritropoyética cetiltrimetilamonio (CTAB)
hemo
o Pruebas puntuales de tinción
RESUMEN DE LAS PORFIRIAS MÁS COMUNES metacromática.
Porfiria Elevado Síntomas Prueba de ✓ La orina que contiene mucopolisacáridos
Compuesto clínicos laboratorio produce una mancha azul que no se puede
ALA Porfo Neurológico/ Reacción en eliminar con una solución diluida de metanol
Inter aguda bilinógeno psiquiátrico orina/Ehrlic h acidificado.
porfiria
intermitente
✓ Las mucopolisacaridosis comunes son el
síndrome de Hurler, el síndrome de Hunter y el
Porfiria uro porfirina Foto
fluoruro de síndrome de Sanfilippo.
cutánea sensibilidad
orina esencia 1. Síndrome de Hurler
tardía
eritro Foto Orina/heces ✓ Los mucopolisacáridos se acumulan en la
congénito uro porfirina sensibilidad fluoradas córnea del ojo.
porfiria copro esencia ✓ La estructura esquelética es anormal y hay
poiética porfirina retraso mental severo.
Porfiria copro Bilis/heces 2. síndrome de cazador
variegada porfirina Fotosensibilida fluoradas ✓ Se hereda como recesivo ligado al sexo y rara
d/neurológica esencia vez se observa en mujeres.
prototipo Foto Sangre FEP ✓ Sin tratamiento, ambos síndromes suelen ser
eritro porfirina sensibilidad Bilis o heces mortales durante la infancia.
protopoiétic fluoradas 3. síndrome de sanfilippo
o porfiria esencia ✓ La anormalidad es el retraso mental.
Envenenami Proto ALA neurologico Ácido ✓ Tratamiento de los trastornos de
ento por porfirina acetoacético mucopolisacáridos
plomo en oh Trasplantes de médula ósea
orina/Reacció oh Terapia de reemplazo genético
n de Ehrlic h
TRASTORNOS DE MUCOPOLISACÁRIDO Sangre FEP TRASTORNOS DE LAS PURINAS
✓ También conocido como. Los 1. Lesch-Nyhan
glucosaminoglicanos son un grupo de grandes ✓ La enfermedad es un trastorno del
compuestos ubicados principalmente en el metabolismo de las purinas. Se hereda como
tejido conectivo. un recesivo ligado al sexo y produce una
✓ Los productos que se encuentran con mayor excreción masiva de cristales de ácido úrico en
frecuencia en la orina son: o Dermatan la orina.
sulfato o sulfato de queratán ✓ La falta de herencia del gen para producir la
oh sulfato de heparina enzima hipoxantina guanina
o Sustancia particular determinada por el fosforribosiltransferasa es responsable de la
error metabólico específico que se acumulación de ácido úrico en todo el cuerpo.

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Complicaciones:
o defectos del motor
o retraso mental
o autodestrucción
o gota o cálculos renales.
✓ Signos y síntomas
o Primer síntoma: cristales de ácido úrico
que se asemejan a la arena
anaranjada de los pañales.

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TRASTORNOS DE CARBOHIDRATOS
1. melituria oxidasa con tira reactiva sugiere fuertemente
✓ La melituria o el aumento de azúcar en la orina un trastorno del metabolismo de los
se debe con mayor frecuencia a un trastorno carbohidratos.
hereditario. ✓ Se pueden utilizar pruebas adicionales, incluida
✓ Afortunadamente, la mayoría de las meliturias la cromatografía, para identificar otras
no provocan alteraciones del metabolismo sustancias reductoras distintas de la glucosa.
corporal.
✓ Causas
o Lactosa
o Fructosa
o pentosa
✓ La orina pediátrica debe examinarse de forma
rutinaria para detectar la presencia de
sustancias reductoras utilizando Clinitest.
2. galactosuria
✓ Galactosuria, la incapacidad de metabolizar
adecuadamente la galactosa en glucosa.
✓ Causado por una deficiencia en:
o galactosa-1-fosfato uridil transferasa
(GALT)
o galactoquinasa
o UDP-galactosa-4-epimerasa
✓ La deficiencia de GALT causa síntomas graves,
posiblemente fatales, asociados con la
galactosemia.
✓ La deficiencia de galactosa quinasa puede
provocar cataratas en la edad adulta.
✓ La deficiencia de UDP-galactosa-4-epimerasa
puede ser asintomática o producir síntomas
leves.
3. lactosuria
✓ Puede verse durante el embarazo y la lactancia.
4. Fructosuria
✓ Asociado a alimentación parenteral y pentosuria
con ingestión de grandes cantidades de fruta.

PRUEBA CLÍNICA PARA IDENTIFICAR EL METABOLISMO


DE CHO
✓ El hallazgo de un resultado positivo en la prueba
de reducción de cobre combinado con un
resultado negativo en la prueba de glucosa

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COMPARACIÓN DE PRUEBAS DE DETECCIÓN URINARIA
Prueba Trastorno Observación
Negro
Alcaptonuria Melanuria Negro
Color Azul oscuro
Indicanuria Porfirinuria
Vino de
Oporto
Ratoncillo
Fenilcetonuria Jarabe de
Jarabe de arce
arce en orina ds. Academia
Pies sudorosos
isovalérica Cistinuria
Azufre Azufre
Cistinosis Homocistinuria
Azufre
Olor
tirosiluria Vainas de
agujas finas
cistinuria Placas
hexagonales
incoloras
Enfermedad de Lesch- Amarillo
Nyhan cristales
Cristales marrones
Azul-verde
Fenilcetonuria Tirosiluria Verde
transitorio
alcaptonuria
Azul
Prueba de transitorio
Melanuria Enfermedad de
tubo de Gris-negro
la orina con jarabe de arce
cloruro Verde-gris
Indicanuria
férrico
Azul violeta
con
5-HIAA
cloroformo
Azul verdoso
Rojo
Tirosiluria Jarabe de arce Rojo
nitroso naftol
en orina ds. 5-HIAA Violeta con
ácido nítrico
Amarillo
Fenilcetonuria Tirosiluria
Amarillo
2,4-Dinitro Jarabe de arce en orina ds.
Amarillo
fenilo Acidemia isovalérica
Amarillo
hidracina Acidemia propiónica
Amarillo
Acidemia metilmalónica
Amarillo

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Orina de jarabe de arce ds.
Púrpura
Acidemia isovalérica
Púrpura
Acetest Acidemia propiónica
Púrpura
Acidemia metilmalónica
Púrpura Rojo
Melanuria

p-Nitro- verde
Acidemia metilmalónica
anilina esmeralda

Rojo purpura
Cianuro cistinuria
Rojo purpura
nitro prusida Cistinosis Homocistinuria
Rojo purpura

nitro de Homocistinuria Rojo-morado


plata prusida Alcaptonuria Negro

reacción de Rojo
Porfirinuria Melanuria
ehrlich Rojo

Cetiltrimetil
Turbidez
o bromuro de Mucopolisacaridosis
blanca
amonio

mucopolio
papel Mucopolisacaridosis mancha azul
sacárido

Rojo naranja
Melituria Cistinosis
Clinitest Rojo naranja
Alcaptonuria
Rojo naranja

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