Chicha de Jora

“Año del Bicentenario, de la consolidación de
nuestra Independencia, y de la conmemoración de

las heroicas batallas de Junín y Ayacucho”
 NOMBRE:
ANAYELY MARISOL OVIEDO RODRIGUEZ
 TEMA:
TINCION DE GRAM
 CURSO:
ANALISIS MICROBIANO EN LA INDUSTRIA
FARMACEUTICA
 PROFESOR:
CESAR AUGUSTO GARCÍA GUZMÁN
PRACTICA DE LABORATORIO: TINCION DE
GRAM
INTRODUCCIÓN
En este informe, se llevará a cabo la tinción de Gram O Coloración utilizando la
chicha de jora, con el objetivo de reconocer diferentes formas bacterianas. La
coloración resultante nos permitirá identificar y clasificar las bacterias presentes
en la muestra, contribuyendo así al estudio de la microbiología y al
conocimiento de la diversidad bacteriana. En este contexto, se busca explorar
la eficacia de la tinción de Gram con la chicha de jora en la identificación de las
características morfológicas de las bacterias.
El fundamento de la técnica se hace con base a las paredes celulares de las
bacterias; Gram positivas y Gram Negativas. La pared celular de las
bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglucano.
Además de dos ácidos ticónico. La capa de peptidoglucano de las Gram
negativas es delgada, y se encuentra unida a una segunda membrana
plasmática exterior por medio de lipoproteínas.
OBJETIVOS
Reconocer diferentes formas bacterianas utilizando la técnica de tinción gram
FUNDAMENTOS TEÓRICOS
Tinción: proceso y resultado de teñir (agregar color a una cosa) es una
técnica que se emplea en el laboratorio con el fin de optimizar la visión de
aquello que se observa en un microscopio. La tinción de este modo consiste
en aplicar los colorantes a una sustancia o un tejido para que resulte más
simple detectarlo y analizarlo.
Bacterias: Organismos unicelulares, procariotas con un solo cromosoma

sin núcleo ni clorofila, que pueden presentarse desnudas o con una
capsula gelatinosa aisladas o en grupos, las bacterias es el más simple y
abundante de los organismos y pueden vivir en tierra, agua, materia
orgánica o en plantas y animales. Son también muy importante en las
fermentaciones y aprovechadas por industrias y la producción de antibióticos.
Tienen diferentes formas: Bastones (bacilos) Redondos (coco) o en espiral

(espirilos). Los cocos pueden asociarse: diplococos, estafilococos,
estreptococos (cadenas)
Reactivos: Es una sustancia, que como su nombre lo indica reacciona con otra
para así poder determinar de qué tipo son es un elemento que se une con otro
y permite la preparación de una muestra para su posterior estudio.
Gram positivas: se designan como Gram positivas las bacterias que parasen
coloreadas de color violeta en un microscopio cuando se emplea la técnica
de coloración de Gram tienen una pared muy rica en ácido teicoico y en
peptidoglucano y muy espesas.
Gram negativas: Estas bacterias aparecen teñidas de rojas, su pared
celular está formada por dos membranas lipídicas, una interna
(citoplasmática) y otra externa con un espacio entre ellas que se denomina
espacio periplasmatico en este espacio se encuentra el peptidoglicano.
Grupos taxonómicos: Caracteres morfológicos que son propios o comunes

a un grupo de organismos y sirven para diferenciar unos seres vivos de
otros tales como (presentar el cuerpo cubierto de pelos) este tipo de
carácter se denomina taxonómicos. Todo tipo de carácter debe ser taxonómico
debe ser constante. Pueden ser citológicos, morfológicos, bioquímicos
fisiológicos y etológicos.
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA EXPERIMENTAL

MATERIALES:
 AGUA
 LAMINA PORTAOBJETOS
 MECHERO
 MICROSCOPIO
 PIPETA PASTE
 ACEITE DE INVERSION
COLORANTES
 COLORANTE SUFRANINA
 CRISTAL VIOLETA
REACTIVOS
 LUGOL
 DECOLORANTE DE GRAM (ALCOHOL ACETONA)
 CHICHA DE JORA (MUESTRA)
Procedimiento:
1. verter la sustancia a analizar en un recipiente y extraer de ella con la
pipeta paste una muestra de chicha de jora. Esterilizar brevemente por
el mechero la lámina porta objetos. Y colocar la muestra esparciéndola
por la lámina. Flameando la muestra para que esta quede fija.
2. Después de haber secado y flameado la lámina portaobjetos, se procede
a la aplicación de los reactivos con la pipeta paste.
reactivo 1. Colorante cristal violeta por 1min.con ayuda del ketopasteo
removiendo el sobrenadante y lavando a chorro suave escurriendo la
muestra para aplicar el siguiente reactivo.
3. Posteriormente agregamos lugol por 2 min y eliminamos sobrenadantes
de la lámina portaobjetos. Que tiene como función fijar el cristal violeta a
la pared celular de la muestra.
4. Agregamos el DECOLORANTE DE GRAM, hecho de cristal acetona.
Que tiene como función sacar el exceso de cristal violeta de la pared de
la bacteria.
5. Para finalizar agregamos colorante de contraste SAFRANINA(ROJO)
por 30 segundos
6. Luego de haber sido tratada la muestra por los reactivos y colorantes.
Hacemos la técnica de Flameo para con el calor secar la humedad que
pueda haber en ella. Por un tiempo de 2-3min. Procedemos a analizarlas
en el microscopio.
VISTA EN MICROSCOPIO:
añadimos 1 gota de aceite de inmersión a un objetivo de 100 para ver la muestra en
microscopio.
RESULTADOS
Luego de ver la muestra bajo el microscopio óptico a 100x empleando el aceite
de inmersión.
Identificamos bacterias Gram positivas y negativas. Por su parte, las teñidas de
rojo son Gram negativas y las teñidas de morado- violeta son Gram positivas.
Como características las bacterias alargadas son bacilos y se tiñen de morado
mientras que las levaduras no se tiñen en esta práctica.
CONCLUSIONES
Como conclusión mediante la observación de la práctica identificamos la
presencia de bacterias Gram positivas y Gram negativas en la chicha de jora, lo
cual muestra la diversidad microbiana en el producto fermentado a lo largo del
desarrollo de esta práctica.
Tal cual podemos afirmar en el estudio de la muestra que la mayoría de las
bacterias son Gram positivas por su color violeta distintivo.
RECOMENDACIONES
 Usar un área limpia y ordenada para el desarrollo de la practica
 Instrumentación para la práctica correctamente esterilizada y
microscopio correctamente calibrado.
 Calcular tiempo preciso de aplicación de los reactivos y colorantes para
resultados más exactos.
 Tener cuidado al momento de la exposición con el fuego puesto a que
trabajamos con materiales peligrosos como son el fuego y el vidrio.
ANEXOS
Reactivos y colorantes tecnica de flameo
Removiendo el colorante Cristal violeta con chorro ligero de agua

Flameando la muestra para retirar excesos de humedad vista en microscopio a 100x

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