UNIDAD 1.

BACTERIAS GRAM POSITIVAS

1.1. Cocos Gram positivos

1.1.1. Género Staphylococcus

Docente: Ana Carolina González. Ph.D

 Infecciones con abundante producción de pus.
 Cocos grampositivos:

Staphylococcus : S. aureus,
Staphylococcus coagulasa negativa
(SCN).
Streptococcus:
S. pyogenes

S. agalactiae

S. pneumoniae

S. mutans
Género Especies Morfología Localización Fisiología Entidades clínicas
importantes y anatómica
disposició
n
Staphylococcus S. aureus Mucosa nasal Nutricional Infecciones
S. epidermidis Piel mente no cutáneas, celulitis,
S. lugdunensis exigente bacteremias

S. saprophyticus Tracto Urinario Infecciones del

tracto urinario
Streptococcus S. pyogenes Orofaringe Muy Faringitis,
S. agalactiae Canal vaginal exigentes infecciones
Faringe nutricional cutáneas
Mucosa oral mente Infecciones en
neonatos
S. pneumoniae Neumonia,
S. mutans meningitis
Caries dental

Enterococcus E. faecalis Intestino Nutricional Infecciones

sp. E. faecium mente no urinarias,
exigente bacteremias,
endocarditis
Taxonomía
Staphylococcus aureus
 Componentes de la estructura de la pared

Cápsula Inhibe la quimiotaxis y la fagocitosis; inhibe la proliferación de

las células mononucleares; facilita la adherencia a los cuerpos
extraños.
Proporciona estabilidad osmótica; estimula la producción de
Peptidoglucano pirógenos endógenos (actividad de tipo endotoxina);
quimioatrayente leucocitario (formación de abscesos); inhibe la
fagocitosis

Ácido teicóico Regula la concentración catiónica de la membrana celular; se une

a la fibronectina.

Proteína A Inhibe la eliminación mediada por anticuerpos al unirse a los

receptores Fe de lgG1, lgG2 e lgG4; quimioatrayente leucocitario;
anticomplemento.

Membrana Barrera osmótica; regula el transporte hacia el interior y el

citoplásmica exterior de la célula; localización de enzimas biosintéticas
y respiratorias.
Murray,2006
 Toxinas estafilocócicas
Citotoxinas (a, p\ 8, Tóxicas para muchas células, incluyendo leucocitos,
y, eritrocitos, macrofagos, plaquetas y fibroblastos
y leucocidina)

Toxinas exfoliativas Proteasas séricas que rompen los puentes intercelulares

(ETA, ETB) del estrato granuloso de la epidermis

Enterotoxinas (A-E, Superantígenos (estimulan la proliferación de los

G-l) linfocitos T y la liberación de citocinas); estimulan la
liberación de mediadores inflamatorios en los mastocitos,
aumentando el peristaltismo intestinal y la pérdida de
líquidos, así como la aparición de náuseas y vómitos.

Síndrome del shock Superantígeno (estimula la proliferación de los linfocitos T

tóxico y la liberación de citocinas); produce la
toxina-1 extravasación o la destrucción celular de las células
endoteliales
 Enzimas
Coagulasa Convierte el fibrinógeno en fibrina

Catalasa Cataliza la conversión del peróxido de hidrógeno

Hialuronidasa Hidroliza los ácidos hialurónicos en el tejido

conectivo, facilitando la diseminación de los
estafilococos en los tejidos

Fibrinolisina Disuelve los coágulos de fibrina

Lipasas Hidroliza los lípidos

Nucleasas Hidroliza el ADN

Penicilinasas Hidroliza las penicilinas

Procesos patológicos causados por Staphylococcus aureus

Mecanismo Enfermedad Factores de virulencia

Invasivo • Infecciones de la piel Enzimas:

• Osteomielitis • Hemolisinas
• Neumonía • Lipasas
• Bacteriemia • Proteasas
• Dnasa
• Hialuronidasa
• Fibrolisina
• Coagulasa
Toxigénico • Enteritis • Enterotoxinas
(A,B,C y otras)
• Síndrome de Piel • Exfoliatinas
escaldada (ETA, ETB)

Inmunitario • Síndrome de Shock • Toxina del Shock

Tóxico Tóxico ( TSST-1)

Prats, 2012
 Staphylococcus coagulasa negativo

Determinantes de Patogenicidad:

✓ Las infecciones por SCN suelen asociarse a la

presencia de dispositivo artificiales como catéteres,
sondas.

✓ Algunas cepas de S. epidermidis sintetizan sustancias

con actividad bactericida, enzimas extracelulares y
toxinas.
 Staphylococcus coagulasa
negativa
✓ Tienen la capacidad de sintetizar el biofilm o biopelícula

1 fase: Adhesión de las células bacteriana a la superficie protésica

2 fase: Acumulación de agregados celulares favorecidos por la síntesis

de un polisacárido que funciona como adhesina intercelular
 Staphylococcus coagulasa
negativa

S. epidermidis

S. lugdunensis
 Diagnóstico microbiológico
Pre-análisis
• Datos clínicos , microbiológicos y
epidemiológicos del paciente.
• Proceso infeccioso: Tipo, tiempo
de evolución ( fase de la
enfermedad).
• Selección adecuada de la muestra
y del método microbiológico para
el diagnóstico certero de la
enfermedad
 Diagnóstico microbiológico
Análisis
• Características macroscópicas y
microscópicas de la muestra.

 Microscopía óptica: Exámenes

directos: GRAM: Abundantes
leucocitos polimorfonucleares y
cocos grampositivos en pares ,
tétradas o racimos.
 Diagnóstico microbiológico
Análisis
 Método convencional: Cultivo , aislamiento,
identificación y pruebas de susceptibilidad
del microorganismo

Aerobiosis por 24 horas

Agar sangre

Agar manitol salado

 Identificación
bacteriana

Coloracion de Gram: Cocos grampositivos rácimos

Prueba de la catalasa: Positivo

Prueba de la coagulasa: divide al género en dos grandes grupos:

Staphylococcus coagulasa positiva:
Complejo Staphylococus aureus ( S. aureus, S. argenteus y S. schweitzeri).
Grupo de Staphylococcus coagulasa negativa.
Género Staphylococcus

IDENTIFICACION BACTERIANA
CARACTERISTICAS DE IDENTIFICACIÓN
Staphylococcus

Positiva COAGULASA Negativa Manitol

Manitol negativo
positivo
Staphyloccus coagulasa negativa
Staphylococcus aureus
Novobiocina 5 mcg

Esquema Sensible Resistente

simple de las
siete pruebas
Staphyloccus coagulasa negativa S. saprophyticus
IDENTIFICACIÓN PRESUNTIVA DE SCN POR EL
ESQUEMA SIMPLE

Especies Novobiocina Ureasa Manosa PYR Ornitina

5 mg
más frecuentes
S. epidermidis* S + + - +/-
S. haemolyticus* S - - + -
S. saprophyticus* R + - - -
S. lugdunensis S +/- + + +
S. warneri* S + - - -
S. schleiferi subs. S - + + -
schleiferi
* Grupo bacteriano De Paulis y col., 2003
Diagnóstico microbiológico
Análisis
Pruebas de susceptibilidad

Método de Kirby- Bauer y Método

epsilométrico (E-test)

Disco de cefoxitin de 30mcg : Evaluación de susceptibilidad a oxacilina o meticilina

Vancomicina: Sólo cuantitativo por CIM ( Concentración Inhibitoria Mínima).
 Cocos Gram positivos anaerobios
facultativos de importancia médica

Familia Streptococcaceae
 Género Streptococcus
• Cocos Gram positivos, en pares o cadenas,
anaerobios facultativos
• Requerimientos nutricionales complejos
Medios enriquecidos con sangre o suero
• Fermentan azúcares con producción de
ácido
• Catalasa negativos
Diferencia con los Staphylococcus
 Caracteristicas Fisiológicas
y de Cultivo
✓Fermentan carbohidratos

✓No producen gas

✓Catalasa negativo

✓Producen hemólisis: β, α, γ

✓No son esporulados

✓Algunas especies son capsuladas

 Género Streptococcus
Clasificación

• Clínica: Estreptococos piogénicos,

orales, entéricos
• Serológica: Grupos de Lancefield (A-H, K-V)

• Hemólisis: b-hemolíticos (completa)

a-hemolíticos (incompleta)
g-hemolíticos (nula)
• Bioquímica: Propiedades fisiológicas
 ClASIFICACIÓN GÉNERO Streptococcus

Grupo Serológico o Lancefield: según el polisacárido:

A,B,C,D
 Streptococcus
clasificación según hemólisis

a-hemólisis b-hemólisis

g-hemólisis
Placa de agar sangre
Streptococcus de importancia médica
Especie Hemólisis Serología
S. pyogenes b A
S. agalactiae b (a veces a, g) B
S. anginosus b (a veces a, g) C, F, G
S. bovis a (a veces g) D
S. pneumoniae a -
Grupo viridans a (a veces g) -
S. anginosus, S. bovis
S. mutans, S. mitis
S. salivarius
S. sanguis
 Streptococcus b-hemolíticos
Productos tóxicos

Hemolisinas:
• Estreptolisina O: hemolisina inestable frente al
oxígeno. Causa lisis de GR, PMN y plaquetas.
Inmunogénica títulos de ASO (diagnóstico)

• Estreptolisina S: estable frente al O2. No

inmunogénica. Producida por SBHA
Procesos patológicos causados por Streptococcus pyogenes

Mecanismo Enfermedad Factores de virulencia

Invasivo • Faringitis Enzimas:

• Erisipela • Estreptolisinas
• Impétigo ( hemolisinas)
• Celulitis • Estreptocinasa,
Dnasas
• Hialuronidasas

Toxigénico • Escarlatina • Toxina eritrogénica

(Superantígeno)

Inmunitario • Fiebre reumática • Reacción cruzada

• Glomerunefritis • Complejos inmunes
aguda.

Prats, 2012
 Streptococcus pneumoniae

• Características:
• Diplococos Gram positivos
• lanceolados, encapsulados
a-hemolíticos
• Estructura antigénica:
• Polisacárido capsular (94 serotipos)
Clasificación serológica
• Polisacáridos capsulares purificados de los serotipos
más frecuentes (Vacuna polivalente).
• Ac. teicoico rico en galactosamina y colina
• Ácido teicoico expuesto ( polisacárido C)
• Proteína M
 Streptococcus pneumoniae

• Factores de patogenicidad:
• Cápsula: inhibe la fagocitosis
• Neumolisina: degrada la hemoglobina
• Neuraminidasa: degrada glucoproteínas

• Enfermedades:
• Neumonía
• Otitis media, sinusitis
• Meningitis, bacteriemia
 Streptococcus grupo viridans

• Hábitat:
• Principal habitante de la microbiota orofaríngea

• Tracto urogenital y gastrointestinal

• Factores predisponentes de infección:

• Mala higiene dental

• Extracción dental, cirugía bucal

• Enfermedades:
• Endocarditis infecciosa (extracción dental)
 Diagnóstico microbiológico
Pre-análisis
• Datos clínicos , microbiológicos y
epidemiológicos del paciente.

• Proceso infeccioso: Tipo, tiempo de

evolución ( fase de la enfermedad).

• Selección adecuada de la muestra y

del método microbiológico para el
diagnóstico certero de la enfermedad
 Diagnóstico microbiológico
Faríngoamigdalitis
Análisis
• Características macroscópicas
y microscópicas de la
muestra.

 Microscopía óptica:
Exámenes directos: GRAM:
Abundantes leucocitos
polimorfonucleares y cocos
grampositivos en cadenas
cortas o largas.
 Procesamiento de exudado faríngeo

Microaerofilia 24-48 horas a

37ºC

Agar sangre

SGA

Gram
Hansel

Gram
Prueba de la Catalasa: negativa

Caldo BHI 6,5% de NaCl:

Sin crecimiento

Bilis esculina
Negativo
 Prueba con el disco de Bacitracina 0,04 unidades
Streptococcus pyogenes o SGA

Prueba PYR: es un método rápido para la identificación presuntiva de bacterias basadas en

la enzima pirrolidonil arilamidasa.Positiva: S. pyogenes y Enterococcus
Negativa: todos los demás Streptococcus
 Elección de los antibióticos
Pruebas de susceptibilidad

• Penicilina o

Streptococcus β-hemolítico
ampicilina
• Eritromicina
• Clindamicina
• C3G(cefotaxime, Mueller Hinton 5%
ceftriazone)
Sangre de carnero
• C4G(cefepime)
• Levofloxacina
 Diagnóstico microbiológico
Streptococcus pneumoniae Neumococo

Microaerofilia 24-48 horas a

37ºC

Agar sangre

Agar chocolate
Prueba de la Catalasa (-)

Caldo BHI 6,5% de NaCl

Sin crecimiento

Bilis esculina
Negativo
 Diagnóstico microbiológico
Taxo de optoquina (hidrocloruro de etilhidrocupreína): Medir el halo de
inhibición ≥ 14mm Sensible

Solubilidad en bilis: Soluble:

S. pneumoniae

Insoluble: Streptococcus grupo

viridans
 Elección de los antibióticos
Pruebas de susceptibilidad

Streptococcus pneumoniae

• Oxacilina (penicilina)
• ErItromicina
• Clindamicina
• Levofloxacina o Moxifloxacina
• Tetraciclina
• Trimetoprin/sulfametoxazol
• Vancomicina
 Diagnóstico microbiológico

Post-análisis
• Correlación del las etapas de
preanálisis y el análisis.
• Redacción de resultados
definitivos.
• Elaboración y emisión de reporte
definitivo.
 Género Enterococcus
• 16 especies descritas
• Especies de importancia médica:
• E. faecalis 80-90% de infecciones
• E. faecium 10-15% de infecciones
• Hábitat:
Intestino grueso (10 /g de heces)
7

Intestino delgado
Vías respiratorias (raro)
 Género Enterococcus
• Enfermedades causadas:
• Infección urinaria en pacientes
hospitalizados
Sonda vesical
Antibioticoterapia de amplio espectro
• Otras infecciones nosocomiales
• Endocarditis
E. faecium