TEMA: GENÉTICA MOLECULAR

Hasta 1940, los genetistas no pudieron demostrar que esa molécula era del ADN y no
las proteínas. Este esquema fue considerado durante muchos años el “dogma central
de la biología molecular”.

REPLICACIÓN O DUPLICACIÓN DEL ADN

Es la capacidad de hacer copias de sí mismo. Esto permite transmitir la información

genética a las células hijas. La replicación permite a las células hijas contener el mismo
ADN que la célula madre. Las células duplican su ADN antes de la división celular (en
eucariotas en la fase S de la interfase).

¿Dónde ocurre?
En el núcleo (eucariotas), nucleoide (procariotas), matriz (mitocondrias), estroma
(cloroplastos).

¿Cuándo ocurre?
En las eucariotas, en la fase S del ciclo celular (en interfase).
En las procariotas, en la fase de replicación cromosómica.

Características de la replicación
● Es semiconservativa
● Se produce por adición de mononucleótidos en sentido 5’⇨ 3’
● Es bidireccional. Se forman dos horquillas de replicación que avanzan en
sentidos opuestos.
● En virus y bacterias hay un único punto de inicio, mientras que en eucariotas hay
varios.
● Es semidiscontinua. En una cadena conductora se sintetizan fragmentos
bastantes grandes de forma continua, mientras que en la otra cadena retardada
la síntesis es discontinua, es decir, se sintetizan pequeños fragmentos de forma
separada y después se unen los fragmentos de Okazaki. Ello se debe a que las
dos cadenas son antiparalelas y a que la síntesis es siempre en sentido 5’ ⇨ 3’

¿Qué necesitamos?
● ADN molde
● Nucleótidos: ATP, GTP, CTP, TTP
● Proteínas SSB (impiden que enrede el ADN)
● Enzimas: helicasas, topoisomeras, ADN ligasas, ADN polimerasas, nucleasas y
ADN polimerasa

Mecanismo de la replicación en procariotas

 ➔ Fase de iniciación:
Comienza en una secuencia de nucleótidos en el ADN llamada origen de replicación,
que actúa como señal de iniciación. Esta secuencia es distinta según la especie, pero
tiene abundantes timinas y adeninas.

Intervienen las siguientes proteínas:

-Helicasas: Reconocen la secuencia de nucleótidos y rompen los puentes de H
entre las bases nitrogenadas complementarias, abriendo la doble hélice.

-Topoisomerasas: Se encargan de liberar las tensiones de superenrollamientos

entre las cadenas. Cortan una o las dos cadenas de ADN, y cuando no existen esas
tensiones, las ligasas las empalman nuevamente.

-Proteínas SSB: Son las proteínas estabilizadoras que se unen a cada cadena de
ADN separada por la helicasa para que no vuelvan a unirse.

➔ Fase de elongación:
El ADN polimerasa sintetiza las cadenas hijas complementarias.

Primero interviene una ARN polimerasa que sintetiza un pequeño fragmento de unos
diez nucleótidos de ARN como cebador. La ADN polimerasa introduce los nucleótidos
en dirección 5’ — 3’ por lo que sólo puede sintetizar de manera contínua una parte de
dentro de la horquilla de replicación.

En cada horquilla de replicación, la cadena adelantada y la retardada crecen de distinta

forma:

● Síntesis de la cadena adelantada: Es la cadena complementaria a la cadena

3'→5'.
Después de que el ARN polimerasa ha sintetizado el primer, ARN cebador, el ADN
polimerasa III, comienza a sintetizar la nueva cadena en dirección 5'→3'. Esta nueva
cadena es de crecimiento continuo.

● Síntesis de cadena retardada:

En la otra cadena complementaria, la ADN polimerasa debería leer la cadena en sentido

5'→3', añadiendo nucleótidos a la nueva cadena en sentido 3´→5´, lo que no es posible.
Esta nueva cadena es de crecimiento discontinuo, a partir de fragmentos de ADN
separados. Este proceso se va repitiendo según se van separando las dos cadenas que
sirven como molde.

Después, el ADN polimerasa I, por su función exonucleasa, elimina los ARN cebadores,
y más tarde, por su función polimerasa, rellena los huecos que ocupaban los
ribonucleótidos con nucleótidos de ADN. Por último, la ADN-ligasa, une con un enlace
fosfodiéster los diferentes fragmentos de Okazaki.

Distinguimos: ADN polimerasa, ADN polimerasa I, ADN polimerasa II, ADN polimerasa
III.
➔ Fase de terminación:
La elongación termina cuando el ADN está totalmente replicado. Como el crecimiento
es bidireccional, ambas cadenas se unirán en un lugar opuesto al origen de replicación.

La ADN polimerasa I eliminará el último cebador y los fragmentos unidos por la ADN
ligasa.

Corrección de errores durante la replicación

La actividad de polimerasas debe ser rápida y fiel, de forma que la información genética
pase con fidelidad de generación en generación.

Las ADN polimerasas I y III en E. coli conlleva un error de apareamiento cada 106
nucleótidos. Ambas enzimas, tienen actividad exonucleasa. Estas enzimas
“comprueban” el nucleótido adicionado y, si es incorrecto, lo eliminan y sustituyen por el
adecuado. La actividad correctora reduce las probabilidades de error a uno por cada 108
pares de bases.

Mecanismos de reparación de errores trás la replicación

Existe un mecanismo de reparación donde participan varias enzimas:
- Endonucleasas que detectan errores y cortan la cadena de ADN errónea.
- Exonucleasas que eliminan los nucleótidos colocados incorrectamente.
- ADN polimerasas que eliminan los nucleótidos erróneos y sintetizan la parte
correspondiente al trozo eliminado.
- ADN ligasas que unen los segmentos generados al resto de la cadena de ADN.

Replicación en las eucariotas

-Los fragmentos de Okazaki en eucariotas son más cortos, entre 150-200 nucleótidos
(procariotas 1000-2000)
-La replicación se inicia simultáneamente en carios puntos del cromosoma llamados
replicones.
-Existen cinco tipos de ADN polimerasas
-Las histonas se duplican durante la replicación. Junto al ADN formarán el nucleosoma.
Los nuevos nucleosomas se incorporan a la hebra retardada y los viejos en la
conductora.

Telomerasa: Enzima de las células que las ayuda a mantenerse vivas al agregar ADN a
los telómeros. Cada vez que una célula se multiplica, los telómeros pierden una
cantidad pequeña de ADN y se acortan. Los cromosomas se dañan y las células
mueren.

¿Qué es un gen?
Es la unidad molecular de la herencia genética, ​pues almacena la información genética
y permite transmitirla a la descendencia.

TRANSCRIPCIÓN
Es la síntesis de ARN mensajero, a partir de las secuencias de ADN mediante una
enzima llamada ARN polimerasa. Ocurre en el núcleo.

Transcripción: Formación de ARN a partir de ADN. Tanto en procariotas como en

eucariotas tiene los mismos pasos. Aunque el proceso de maduración es muy diferente.
-Fase de iniciación, elongación, terminación y maduración

Proceso de transcripción

1-Iniciación:
La ARN- polimerasa reconoce los centros promotores (ricos en A y T). Luego abre la
doble hélice para que los ribonucleótidos se unen a la cadena molde.

2-Elongación:
La ARN polimerasa avanza en sentido 3’---5’ y sintetiza el ARN en sentido 5’---3’.

3-Terminación:
El ARN polimerasa reconoce en el ADN unas señales de terminación que indican el final
de la transcripción. En procariotas son secuencias palindrómicas.

Promotores en el ADN

Un promotor es una región de ADN que controla la iniciación de la transcripción. La

región promotora está compuesta por una secuencia específica de ADN localizada justo
donde se encuentra el punto de inicio de la transcripción del ADN y contiene la
información necesaria para activar o desactivar el gen que regula.

➔ En procariotas: El promotor es la secuencia que señala el comienzo de la

transcripción del ADN a ARN, y es por ello el lugar de enlace de la ARN
polimerasa.

➔ En eucariotas: Sólo tienen una polimerasa, los eucariotas tienen tres ARN
polimerasa distintas. Cada una de ellas tiende a reconocer secuencias de
promotores específicas. Los promotores tienen secuencias de nucleótidos
definidas. Los promotores se localizan al principio del gen a transcribir,
apuntando en la dirección 5’ de la hebra molde.

Resumen transcripción en eucariotas

1-existen tres tipos de polimerasas (en procariotas 1 tipo)

2-Las secuencias consenso promotoras para el inicio de la transcripción son CAAT y
TATA a diferentes distancias del punto de inicio de la transcripción.
3- La transcripción es muy específica y regulada, lo que les confiere una expresión muy
controlada, compleja y precisa. Existen proteínas llamadas factores de transcripción que
regulan la transcripción.
4-Los ARN que se forman son monocistrónicos (contienen información para una sola
cadena polipeptídica)
5-El ARNm sufre procesos de modificación y maduración.
-Durante la elongación se introduce una capucha de metil-guanosina-trifosfato en el
extremo 5’.
-Tras la finalización se introduce en el extremo 3’ la cola poli-A (entre 50-250 de
ribonucleótidos de adenina)
-Maduración mediante la eliminación de intrones por el complejo formado entre la
proteína ribonucleoproteína pequeña nuclear y el ARN pequeño nuclear.

TRANSCRIPCIÓN REVERSA
● Es la síntesis de ADN de doble cadena a partir de ARN
● En los retrovirus, mediante la enzima transcriptasa reversa
● Se utiliza mucho en biotecnología. RT-PCR (para detectar el virus)

Características del código genético

➔ Está organizado en tripletes o codones: cada aminoácido está determinado por

tres nucleótidos.
➔ Es degenerado: un mismo aminoácido puede estar determinado por más de un
triplete o codón.
➔ La lectura del ARN mensajero es continua, sin interrupciones.
➔ Universal

Codón: Es una secuencia de tres nucleótidos de ADN o ARN que corresponde a un

aminoácido específico.
El código genético describe la relación entre la secuencia de bases del ADN (A,C,G y T)
en un gen y la secuencia correspondiente de la proteína que codifica. La célula lee la
secuencia del gen en grupos de tres bases.

Existen 64 codones diferentes: 61 son específicos de aminoácidos, mientras que los

tres restantes se utilizan como señales de parada (stop). El codón AUg que codifica
para el aminoácido metionina es la señal de inicio.

ETAPAS DE LA SÍNTESIS DE PROTEÍNAS

● Pre-traducción o activación de los aminoácidos

 ● Traducción
-Iniciación de la síntesis
-Elongación de la cadena polipeptídica
-Terminación
● Asociación. Una vez formadas las cadenas polipeptídicas se asocian entre ellas
o incluyen grupos prostéticos.

TRADUCCIÓN
Es la síntesis de la secuencia de aminoácidos de una proteína siguiendo el mensaje del
ARNm. Tiene lugar en los ribosomas. Intervienen tres tipos de ARN en el proceso.
- ARNm: lleva la información genética del ADN nuclear a los ribosomas
- ARNr: forma parte esencial de los ribosomas
- ARNt: transporta los aminoácidos a los ribosomas según sea la secuencia de
bases del ARNm.

Fases de la traducción

➔ Iniciación de la traducción:
El ARNm se une a la subunidad menor de un ribosoma. La subunidad se mueve por el
ARNm hasta el codón de inicio (AUG)
El codón AUG se une al aminoacil iniciador. Se une la subunidad ribosómica mayor para
formar el complejo ribosomal.

➔ Elongación:
Llega el nuevo aminoacil ARNt al ribosoma a la centro A. El grupo carboxilo de la
metionina se une con el grupo amino del nuevo aminoácido por enlace péptido. La
unión cataliza la enzima peptidil transferasa y el aminoácido se traslada al otro ARNt.

➔ Terminación:
El final de la síntesis se da cuando en el ARNm se encuentran los tripletes UAA, UAG, y
UGA. Estos son reconocidos por los factores proteicos de liberación que utilizan GTP
como energía. Estos se colocan en el centro A y liberan la cadena polipeptídica. Las
subunidades ribosómicas se separan.
Asociación de varias cadenas polipeptídicas

Según se sintetiza la cadena polipeptídica va adoptando estructura secundaria y

terciaria mediante enlaces como los de H o los de disulfuro. Las proteínas con
estructura cuaternaria se forman por la unión de subunidades, que pueden ser iguales o
diferentes. Al acabar la traducción unas proteínas son activas y otras necesitan
procesos de activación.

Regulación de la expresión génica

Es el proceso por el cual todos los organismos, tanto procariotas como eucariotas
transforman la información codificada por los ácidos nucleicos en proteínas que son
necesarias para su desarrollo, funcionamiento y reproducción.

● Operon: unidad genética funcional formada por un grupo complejo de genes

capaces de ejercer una regulación de su propia expresión por medio de los
sustratos con los que interactúan las proteínas codificadas por sus genes.

● Operon Lactosa: controla la síntesis de tres enzimas que participan en el

catabolismo de la lactosa. Presenta los siguientes elementos:
-Genes estructurales: codifican proteínas.
Gen lac z: cataliza la reacción de hidrólisis de la lactosa en glucosa y
galactosa.
Gen lac y: cuya función es facilitar el transporte de la lactosa al interior
de la bacteria colocándose en la membrana plasmática y formando un carrier.

Gen lac a: cataliza la transferencia del grupo acetil del acetil Coenzima A
al 6-OH de un receptor tiogalactósido.

-Zona promotora: reconoce el ARN polimerasa para llevar a cabo la transcripción.

-Zona operador: situada entre el promotor y el comienzo de los genes estructurales,
que es reconocida por la proteína represora Lac I.

-Gen represor: reconoce la región operadora, donde se une. Impide la transcripción

de los genes bajo el control del promotor.

● En ausencia de la lactosa:
La proteína represora mantiene su elevada afinidad por la región operadora, impidiendo
que el ARN polimerasa transcriba los genes estructurales. De esta forma, el sistema
permanece cerrado con el consecuente ahorro de energía para la bacteria.

● En presencia de la lactosa:
Es capaz de unirse a la proteína represora y generar un cambio conformacional que
disminuye su afinidad por la región operadora. De esta forma, la región operadora
queda libre, el ARN polimerasa puede transcribir libremente los genes estructurales.
REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA EN EUCARIOTAS
➔ En el humano hay 250 tipos de células diferentes, cada una con sus proteínas
específicas.
➔ En eucariotas se produce a varios niveles:
1.Estructura de la cromatina:
-Eucromatina (menos densa, se transcribe)
-Heterocromatina (+ compacta, no se transcribe (constitutiva y facultativa))
2.Acetilación de histonas (facilitan la expresión)
3.Metilación del ADN (el ADN metilado no se expresa)
4.Control de la transcripción por factores de transcripción o por hormonas.
5.Control de la maduración del ARNm (splicing)
6.Regulación postranscripcional en el citoplasma.

El genoma es la secuencia total de ADN que posee un organismo. En eucariotas

comprende el ADN contenido en el núcleo celular, organizado en cromosomas, y el
genoma de orgánulos celulares, como las mitocondrias y los cloroplastos. En las
procariotas comprenden el ADN de su nucleoide.

● Procariotas
-1 cromosoma circular
-Presencia de plásmidos. Contienen genes no esenciales para el crecimiento y la
reproducción de la célula. Replicación independiente.
-1200-12.000 genes
-Genes continuos.

● Virus
-1 sola molécula lineal o circular de ADN y ARN.

● Eucariotas
-La mayor parte está en el núcleo y una pequeña parte en mitocondrias y cloroplastos.
-25. 000 genes que codifican proteínas y los diversos tipos de ARN
-ADN no codificante.

Objetivos del proyecto genoma humano

1.Conocer en qué orden están colocados los genes
2.Determinar la distancia que existe entre los genes
3.Secuenciar cada gen
4.Determinar la función de cada gen

Aplicaciones del PGH

1. Permite reconocer nuestros genes al comparar nuestro genoma con el de otras
especies.
2. Permite el desarrollo de la medicina genética y personalizada.