Clonación Animal Solución A Problemas Reproductivos y Fisiológicos de Animales de Élite
Clonación Animal Solución A Problemas Reproductivos y Fisiológicos de Animales de Élite
Clonación Animal Solución A Problemas Reproductivos y Fisiológicos de Animales de Élite
Artículo de revisión
ABSTRACT INTRODUCCIÓN
The Reproductive biotechnology has opened Cuando se habla de clonación nos estamos
new possibilities unthinkable some years ago and refiriendo a una de las biotecnologías recientes
they are a reality today. Even more we might say que posiblemente tenga más proyección e
a routine reality. Reproductive problems of impacto sobre la sociedad. Cuando nos
animals, whether strictly reproductive, referimos a clonación todo el mundo piensa en
physiological, or because of dead of the animals, la obtención de seres idénticos a partir de la
they are amply solved with cloning methodology. información genética existente en una célula.
To reach it a development and optimization of Este hecho ha de quedar meridianamente claro
different reproductive techniques and control of desde el inicio que no es ni será así. La clonación
many variables are needed. The result is that we no significa eso sino otra cosa. Pero antes de
have a cloning methodology that allows us to sumergirnos en el desarrollo de lo que en el
maintain over time those genotypes or high- título de trabajo queremos expresar hemos de
value animals, whether genetic, economic or comenzar por hacer un brevísimo repaso a las
sentimental. So the development of the nuevas metodologías en biotecnología que han
methodology of nuclear transfer, together with conducido, todas ellas, en mayor o menor escala,
other techniques such as in vitro fertilization al desarrollo de la clonación Animal y sus
(IVF), intracellular sperm injection (ICSI), posibilidades.
embryo transfer (ET) and cell culture
techniques, has led it. We have obtained Las biotecnologías reproductivas están formadas
excellent results in reproductive cloning, rescue por muy diversas metodologías que van desde la
castrated animals and even dead animals in inseminación artificial, iniciada en 1898, hasta la
natural or by accident way. But there is a transgénesis, de muy reciente aparición, pasando
biological fact that should be considered. When por la transferencia embrionaria, iniciada en
we talk about cloning, we can not to say that the 1974; la fecundación in vitro (FIV), iniciada en
animal obtained (clone) will have the same 1991; la transferencia de ovocitos, iniciada en
characteristics as the original animal. The 1995; la inyección espermática intracelular
genome is not static but is constantly influenced (ICSI), iniciada en 1996; el sexado espermático;
and modulated. The phenotype of an animal is el sexado embrionario, hasta la propia clonación
the result of interaction of their own genome iniciada de forma sistemática en animales de alto
and the environment. Epigenetic processes play valor (particularmente equidos) en 2003.
a major role in the outcome. In addition, in the
cloned animal a genetic information from the Toda ésta nueva biotecnología y su importancia
recipient egg of the nucleus of the cell of the científica se inició como consecuencia del
animal to clone, ie maternal mitochondrial nacimiento, el día 25 de Julio de 1978, del primer
genome, also has its influence. “niño probeta”, Louise Brown, como
consecuencia de un proceso de fecundación in
Keywords: cloning, animal, reproduction vitro. Fueron los Dres. Patrick Steptoe y Robert
Geoffrey Edwards los que lo consiguieron ese
año en el Reino Unido. En España se consiguió
en 1984. En 2010 el Dr. Edwards fue
galardonado con el Premio Nobel en Fisiología y
Medicina en reconocimiento a su labor científica.
El paso al uso de ésta metodología en animales
se retrasó algo iniciándose alrededor de los años
90. En el presente artículo haremos una breve
revisión de la clonación como una técnica
biotecnológico-reproductiva de gran importancia
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para la resolución de muchos problemas de ganado vacuno que han sido clonados en todo el
índole reproductivo y productivo. mundo según la Autoridad Europea de
Seguridad Alimentaria (EFSA).
económico y prestigio social como son los 90 los casos de potros nacidos mediante ésta
dedicados al deporte del Polo y de la metodología era muy escaso. En realidad existen
competición ecuestre (Hípica) aunque pocas referencias, en comparación con otras
actualmente la reproducción artificial de los especies de animales domésticos, de éxitos en la
équidos de estas especialidades está prohibida FIV. Por ejemplo en 1991 se publicaron dos
por las normas que regulan las competiciones. casos solamente.
Pero pese a esto último y desde el punto de vista
del uso de ésta metodología, hemos de señalar El primer paso en la FIV es proceder a la
que existen hechos fundamentales. El primero es capacitación espermática, uno de los procesos
que disponemos de una técnica que se realmente complejos, que puede ser obtenida
encuentra perfectamente puesta punto en por diversas técnicas. Se ha establecido, en la
équidos; el segundo es que su aplicación no activación espermática, que la hiperactivación del
depende nada más que de tener paciencia y esperma equino usando procaína incrementa de
dinero y el último es que, actualmente, un clon forma sustancial y reproducible el éxito en la
comercial de caballo cuesta en torno a unos FIV, con el consiguiente aumento de la tasa de
80.000 euros, pudiéndose estimar ésta cantidad fertilización en más del 60%, según McPartlin et
como ridícula en comparación al valor de los al., 2009. Por otra parte y para facilitar el proceso
animales sobre los que se quiere conseguir de fertilización se han puesto a punto otras
clones. técnicas para ayudar al espermatozoide. Así se
pensó en primer lugar que, como no podían
Pero no todo es tan fácil. Existen tres grandes fácilmente atravesar la zona pelúcida, había que
problemas de los que poco a poco se van ayudarles. Para ello se aplican técnicas con el
conociendo cómo ir resolviéndolos. En primer objetivo de perforar la zona pelúcida (pelúcida
lugar nos encontramos que el esperma de caballo drilling) obteniéndose una “zona drilling”.
no tiene una gran capacidad fecundante debido a Existen diversas metodologías como es el caso
varias causas. Por una parte el efecto individual. del uso de un taladro piezo-eléctrico que ayuda a
Existen grandes diferencias entre caballos debilitar (perforar) dicha zona facilitando la
respecto a la calidad de sus espermatozoides. entrada del espermatozoide o bien usando una
Además si usamos como fuente de embriones la micropipeta, contactando con la zona pelúcida,
metodología de fecundación in vitro (FIV) (de presionando sobre ella y produciendo una
otro modo sería muy difícil obtener suficientes presión negativa sobre la misma de forma que la
embriones), es necesario que los depresión debilite dicha zona. Otra metodología
espermatozoides sufran la capacitación es el proceso de una inyección subzonal del
espermática con la reacción acrosómica y sin espermatozoide que consiste en colocarlo entre
perder su motilidad (algo difícil en ésta especie). la pelúcida y el ovocito. También se puede usar
En segundo lugar, la disponibilidad de ovocitos un láser para producir la debilitación de ésta
de la madre para poder obtener embriones es zona (Laser Assisted. Zona Drilling). Otro
muy escasa. Tenemos que señalar que si en método que ha sido usado en el ganado equino
ganado vacuno de un ovario podemos obtener es el de la transferencia ovocitaria que consiste
unos 10 ovocitos de clase A, los perfectos para básicamente en la transferencia, al lugar de
FIV, en yeguas esa cantidad queda reducida a 2-3 fecundación en la yegua receptora sincronizada
máximo además de la dificultad de detectar los (el infundíbulo), de ovocitos maduros obtenidos
folículos. Por lo tanto y de cara a obtener gran de folículos preovulatorios de ovarios de yeguas
cantidad de embriones para la clonación, es de matadero Por último disponemos del
imprescindible la aplicación de la metodología método más efectivo a la hora de obtener
FIV sobre óvulos extraídos de yeguas grandes cantidades de embriones equinos, el
sacrificadas. Pero hay que señalar que éste método denominad ICSI (inyección intra-
proceso es muy complejo particularmente en citoplásmica de esperma). Ésta técnica permite
caballo, de ahí que hasta comienzos de los años producir embriones equinos in vitro, permitiendo
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fertilizar ovocitos obtenidos de ovarios de Después de haber hecho éste breve repaso a las
matadero u ovocitos aspirados por punción metodologías que pueden ser usadas en la
transvaginal. El uso de ésta metodología permite especie equina para obtener grandes cantidades
avanzar en los trabajos encaminados a la de embriones, vamos a referirnos a su aplicación
investigación básica en los estudios de cultivo de a la clonación, entendida pretendidamente como
éste tipo celular y a la vez ir optimizando los la biotecnología reproductiva que permite
resultados obtenidos en su uso tanto en yeguas obtener animales idénticos a partir de células
como en caballos de alto valor genético. somáticas de donantes de gran valor, ya sea
comercial o sentimental. Al final haremos una
¿Porqué usamos la ICSI?. brevísima reflexión sobre si de lo que hablamos
es de clonación o de algo diferente.
La respuesta es bien simple. Por una parte para
solucionar problemas de animales con muy poca Cuando procedemos a realizar la clonación nos
motilidad espermática y por otro lado para encontramos con tres grandes problemas:
solucionar problemas de la FIV en algunas primero que el esperma equino no tiene una gran
especies como es el caso de la especie equina. La capacidad fecundante; segundo que los ovocitos
ICSI fue empleada por primera vez en 1996 con disponibles de las yeguas son escasos y tercero el
éxito. También se ha combinado con el uso de la bajo porcentaje de blastos para se transferidos
metodología “drilling”, usando el piezo-drill o que podemos obtener. Por otra parte hemos
bien el Láser. visto que la ICI es la mejor de las metodologías a
usar pero que también tiene sus propios
¿En qué se diferencian la FIV y la ICSI? inconveniente y, también hay que decirlo, sus
ventajas. Entre sus ventajas se encuentran que
Los dos procesos son prácticamente similares soluciona los problemas que afecten al
solo diferenciados en uno de los pasos, el de la espermatozoide y que es la única forma de
propia FIV o ICSI. El proceso es el siguiente: fecundar in vitro con éxito en équidos hasta el
Colección de Gametos; Maduración Ovocitaria; momento presente y, como desventaja, que se
Selección y Capacitación Espermática; “FIV o trata de una técnica muy cara y por tanto poco
ICSI”; Cultivo Embrionario y por último usada, más allá del nivel experimental.
Transferencia.
Al proceso de clonación se le abren tres
¿Cuáles son los problemas derivados de la ICSI? posibilidades de aplicación. Una de ellas es la de
la clonación embrionaria; la segunda la
La principal dificultad existente es llevar al reproductiva y la tercera es la terapéutica. Desde
embrión desde las primeras 24 horas hasta el 7º nuestro punto de vista productivo las más
día o su llegada a estadio de blasto. En éste interesantes son las dos primeras. En cuanto a la
proceso existen varios puntos clave: medio de clonación embrionaria ya Ozil et al.., 1982
cultivo usado, atmósfera gaseosa y recambio de publicaron algunos resultados en ganado vacuno
medio o feeding. Cada uno de ellos es sobre la obtención de terneros idénticos como
fundamental. En total podemos señalar que los consecuencia de la bisección de embriones en
resultados medios observados en la literatura estadio de mórula siendo todos ellos idénticos y
actualmente de todo el proceso de cultivo in vitro similares a los gemelos univitelinos. Desde ese
ronda el 10% de llegada al estadio de blasto. Al momento se han “clonado” no solamente
inicio de las investigaciones los resultados no ganado vacuno sino otras muchas especies tales
alcanzaban el 2%, llegando a obtenerse en la como los ratones e incluso monos (caso de
actualidad hasta el 30% en algunos casos Tetra, el primer mono clonado). Pero donde más
(Hinrichs et al.., 2010). importancia puede tener la clonación es el
aspecto reproductivo. El uso de esta
metodología para obtener animales “clonados” a
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El método de clonación que se usa más Pero es la especie equina en la que más
importante es el método descrito por el equipo importancia tiene la clonación al tratarse de
de Ian Wilmut, el de la transferencia nuclear, es animales de muy altos valores genéticos y por
decir, el método SCNT o transferencia de supuesto económicos. Desde un punto
núcleos de células somáticas. Consiste estrictamente de clonación hay tres vías de
básicamente en enuclear una célula somática; actuación. Por una parte la clonación de
enuclear un ovocito maduro, transferir el núcleo animales importantes desde la óptica de su valor
somático dentro del ovocito enucleado; demostrado en las distintas actividades que
activación del ovocito inducida por pulsos desarrollan. Una gran mayoría de los clones
eléctricos; comienzo de la mitosis somática; comerciales obtenidos se refieren a animales de
obtención de dos, cuatro, etc. células hasta llegar Polo, deporte que en algunos países como
a estadios de mórula y blasto y la transferencia a Argentina tienen una importancia deportiva y
la hembra receptora. Éste es el proceso básico sobre todo económica fundamental. Pues bien
pero con muchísimas variables que hay que ir una de las primeras yeguas clonadas fue
controlando, algunas de ellas las hemos visto Cuartetera, yegua emblemática en éste deporte
anteriormente. en ese país. Sus dos primeros clones obtenidos
mediante la metodología de la trasferencia
DISCUSIÓN nuclear se subastaron el 17 de Noviembre de
2010 y fueron adquiridos por la cantidad de
Como hemos indicado, el objetivo de la 800.000 dólares. Toda ésta metodología la lleva a
clonación no es sino el de poder obtener copias cabo en Argentina una empresa privada creada
de un animal para nuestro propio interés. Es una en 2008 en Estados Unidos. Además de ésta
técnica que se ha puesto a punto en diversas yegua se han clonado varios ejemplares más de
especies sin grandes problemas técnicos o bien gran valor y además de otros ejemplares como es
con problemas fáciles de resolver. No obstante el caso de Colibrí, Lapa, Nona, Aiken Cura,
se ha observado que el éxito depende muchísimo Buenaventura y Small Person, todos ellos
de la especie que se quiera clonar. animales de deporte de élite y de alto valor
económico. Como hemos referido anteriormente
La clonación de animales de alto valor uno de los problemas que están resultando
económico o genético ha sido todo un éxito y difíciles de controlar es la disponibilidad de
así, por señalar el primer caso en Sudamérica, en óvulos por lo que se hace necesario disponer de
2002 el equipo dirigido por el Dr. A. Muto, un gran número de ellos para conseguir el éxito
consiguió el primer clon de un vacuno al nacer esperado. Es por esto que los investigadores
en la Universidad San Martín (BsAs) un clon de hacen uso de los ovarios de yeguas sacrificadas,
un toro de raza Brangus del que se tomó células donde se pueden obtener mucho más óvulo de
de la oreja, se seleccionaron óvulos de vacas y lo que se consiguen con otras técnicas
después de la transferencia nuclear se obtuvieron reproductivas como obtención de óvulos por
embriones de los que nació un ternero de laparoscopia. Obviamente la puesta a punto de
nombre Ciruelo. Posteriormente y mediante ésta ésta biotecnología reproductiva genera unos
metodología han nacido muchos más incluso beneficios económicos y de valor añadido que
transgénicos, como es el caso en 2004 de hace que países como Argentina sean referentes
"Pampero", el primer macho clonado y en éste campo.
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REFERENCIAS
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