Fundamentos de Agares-1
Fundamentos de Agares-1
Fundamentos de Agares-1
Agar MacConkey: es un medio selectivo y diferencial para bacterias Gram negativas, especialmente enterobacterias;
el cristal violeta y las sales biliares inhiben el crecimiento de bacterias Gram positivas y un indicador de pH rojo neutro
para la detección de la enzima lactasa.
Si el medio y sus colonias se tornan de un color rojizo es señal de lactosa (+) acidificando el medio
Si el medio no vira a ningún color particular y las colonias son blancas o incoloras es señal de lactosa (-)
produciendo amoniaco y utilizando peptonas en vez de lactosa.
Agar Sangre: Es un medio nutritivo no selectivo que gracias a la sangre añadida permite observar si los microorganismos
realizan hemólisis (Beta, Alfa y Gamma) por medio de los halos hemolíticos cuyos colores en orden son:
β = Staphylococcus aureus
β = Alfa Streptococcus pyogenes
γ = Neisseria meningitidis
γ = Beta Staphylococcus epidermidis
α = Streptococcus pneumoniae
Agar Manitol Salado: Es un medio de cultivo selectivo que permite el crecimiento de bacterias Gram positivas, su
concentración de NaCl del (7.5% a 10%) siendo selectivo para Staphylococcus y Micrococcaceae e inhibitorio para
bacterias Gram negativas, sumado el Manitol que es otro inhibidor de Gram negativas y un indicador de pH rojo fenol.
Este agar busca evidenciar si los microorganismos a analizar (en su mayoría Staphylococcus) son coagulasa (+) o (-).
Si es coagulasa (+) producen colonias de color amarillo y un medio circundante del mismo color (positivo para
Staphylococcus aureus)
Si es coagulasa (-) producirá colonias de color rojo y no producen un cambio de color en el medio.
Agar Baird Parker: Es un medio de cultivo selectivo y diferencial para Staphylococcus coagulasa (+) para comprobar
la reducción de telurito y detectar la enzima lecitinasa. Es altamente nutritivo para los Staphylococcus, gracias a que el
telurito de potasio y el cloruro de litio actúan como agentes inhibidores a la flora acompañante dejando exclusivo para
Staphylococcus y la yema de huevo permite visualizar la actividad lecitinásica.
Si los Staphylococcus reducen el telurito a teluro y originan colonias de color grisáceo-negro y tienen actividad
lecitinásica producirá un halo claro alrededor de la colonia.
Agar DNAsa: Es un medio de cultivo diferencial (principalmente) entre especies de Serratia spp con Klebsiella y
Enterobacter. Busca detectar la presencia de la enzima desoxirribonucleasa en el microorganismo a analizar, gracias a la
alta concentración de ácido desoxirribonucleico en el medio.
Si el microorganismo hidroliza el ADN este tornará un halo traslucido alrededor de la colonia, si no, este no
tendrá un halo y el medio será opaco.
Agar Mueller Hinton: Es un medio de cultivo altamente recomendado para las pruebas de sensibilidad a antimicrobianos
es altamente nutritivo y para su siembra se utiliza la técnica de siembra masiva creando una suspensión bacteriana con una
turbidez del 0.5 escala Mc Farland.
Agar Chocolate: Es un medio de cultivo enriquecido no selectivo para microorganismos patógenos fastidiosos como
Haemophilus spp (influenzae) o Neisseria spp (gonorrhoeae).
Agar SIM: Es un medio semisólido y diferencial para la identificación de bacterias principalmente las Enterobacterias,
permite la ejecución de 3 pruebas importantes: producción de indol, sulfuros y movilidad bacteriana.
Indol: Las bacterias que contengan la enzima triptofanasa encargada de utilizar el aminoácido triptófano
produciendo indol que al agregar el reactivo de Kovacs se presencia la formación de un anillo de color rojo sobre
el medio.
Sulfuros: Las bacterias usan el azufre del Tiosulfato de sodio produciendo gases de H 2S que reaccionan con las
sales de hierro presentes en el medio formando un precipitado de color negro llamado sulfuro de hierro por todo el
agar.
Movilidad: El crecimiento de las colonias es visible ya que se extienden por el agar; también una prueba de
sulfuros positiva indica movilidad
Agar EMB: Es un medio selectivo y diferencial de bacterias Gram negativas de rápido crecimiento y poco exigentes
también permite el desarrollo para todas las familias de Enterobacterias. La eosina y azul de metileno actúan como
agentes inhibidores para bacterias incapaces de utilizar lactosa y/o sacarosa y un amplio espectro de bacterias Gram
positivas
Glucosa y/o lactosa (+): colonias de color negro azulado o amarronado. Pueden tener centro oscuro y brillo
metálico.
Glucosa y/o lactosa (-): colonias incoloras iguales al color del medio.
Agar TSI: Es un medio de cultivo utilizado como prueba bioquímica para la diferenciación de Enterobacterias en base de
la fermentación de glucosa, lactosa y sacarosa y producción de H2S.
Si el microorganismo tiene la enzima Citrato Permeasa, este utilizará el citrato y alcalinizará el medio
produciendo amoniaco que gracias al indicador de pH azul de bromotimol hará que el medio vire a un color azul.
Agar Urea: Medio de cultivo utilizado como prueba bioquímica para la identificación de la enzima Ureasa, mostrando la
hidrólisis de la urea presente en el medio.
Es positivo para fermentación por vía del Butilenglicol si el medio vira a un color rojo luego de agregar el
reactivo de Barret + KOH 40%
Medio Rojo de Metilo: Medio indicador para la producción estable de productos terminales de la glucólisis tras usar la
vía de ácidos mixtos.
Es positivo para fermentación por vía de ácidos mixtos si el medio vira a un color rojo luego de agregar el
reactivo rojo de metilo.
Prueba Glucosa OF: Es una prueba que indica el metabolismo energético del microorganismo si es respirador o
fermentador, se utiliza glucosa como sustrato y se detecta la acidificación del medio gracias al azul de bromotimol. Se
inoculan ambos tubos con la bacteria y se deja una en aerobiosis y la otra se cubre con parafina o aceite mineral dejándola
en anaerobiosis.
Si el tubo en aerobiosis vira a amarillo por la superficie del agar, pero el de anaerobiosis no vira de color, se
considera que el microorganismo es respirador/oxidador.
Si los tubos en aerobiosis y anaerobiosis viran a un color amarillo, se considera que el microorganismo es
fermentador.
Si no vira a amarillo en ninguno de los casos, el microorganismo no produce ácidos
Prueba Bilis-Esculina: Este es un medio selectivo para Streptococcus del grupo D (enterococos y no enterococos) y que
sirve como indicador de que el microorganismo es capaz de hidrolizar esculina el cual es un compuesto glucosídico
formado por glucosa y aglucona. La bilis acuta como agente inhibidor para enterobacterias y Streptococcus no
pertenecientes al grupo D y le permite al Streptococcus del grupo D desarrollarse.
Si el medio vira a un color marrón casi negro es positivo para hidrólisis de Esculina.
Agar XLD: También llamado agar xilosa, lisina, desoxicolato; Es un medio selectivo y diferencial utilizado para la
identificación de enterobacterias del genero Shigella. La degradación de los carbohidratos presentes (Xilosa, sacarosa,
lactosa) produce ácido haciendo virar el medio a un color amarillo debido al indicador de pH rojo fenol. El desoxicolato
es un inhibidor de bacterias Gram positivas. La Xilosa es fermentada por prácticamente todas las enterobacterias con
excepción de la Shigella. Y la Lisina es utilizada para identificar bacterias lisina (+) que en su mayoría son patógenas.
Producción de colonias incoloras u rojas (No fermentan: xilosa, sacarosa ni lactosa; no descarboxilan lisina)
positivo para Shigella
Producción de colonias grandes y amarillas sin precipitado de bilis, positivo para E. coli
Producción de colonias rojas con centro negro, positivo para Salmonella
Agar Rambach: Es un medio de cultivo que permite el crecimiento de Enterobacterias y permite diferenciarlas según su
tipo; El desoxicolato de sodio es un agente inhibidor de bacterias Gram positivas; el medio contiene propilenglicol las
cuales las bacterias que utilicen este polímero crean ácido que en presencia del rojo fenol hacen virar las colonias a un
color rojo; gracias al cromógeno permite diferenciar las Salmonella de las Coliformes debido al β-galactosidasa propias de
las Coliformes que al fermentar lactosa forman colonias de un azul violeta y las Proteus y/o Pseudomonas forman
colonias incoloras / amarillentas.
Los microorganismos fermentadores de glucosa acidifican el medio virándolo de un color púrpura a amarillo
debido al indicador de pH púrpura de bromocresol.
Este medio ácido favorece a la actividad enzimática de la L-descarboxilasa y metaboliza la lisina alcalinizando el
medio haciéndolo virar a un tono púrpura
Microorganismos fermentadores de glucosa y Lisina (-) producen un medio totalmente amarillo
Purpura / purpura: descarboxilación de Lisina (+)
Purpura / amarillo: descarboxilación de Lisina (-)
Rojo / amarillo: desaminación de Lisina (+)
H2S: precipitado negro por todo el agar (+)
Agar Cetrimida: Es un medio selectivo para Pseudomonas aeruginosa y otras de su mismo género. El medio permite
el crecimiento de las bacterias Pseudomonas y estimula la formación de pigmentos; el cloruro de magnesio y sulfato de
potasio promueven la formación de pigmentos como la piocianina, pioverdina, piomelanina y fluoresceínas muy comunes
de P. aeruginosa. La Cetrimida es un detergente catiónico que inhibe el desarrollo de flora bacteriana liberando
nitrógeno y fósforo de dicha flora acompañante, aunque, puede inhibir algunas especies de Pseudomonas.
Agar TCBS: “Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa” Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae,
Vibrio parahemolyticus y otras especies de Vibrio. La bilis de buey, el citrato de sodio y el pH alcalino inhiben el
desarrollo de flora acompañante, favoreciendo el crecimiento de Vibrio spp; El cloruro de sodio mantiene el balance
osmótico y debido a su alta concentración también contribuye a la selectividad del medio; La sacarosa es el hidrato de
carbono fermentable y el azul de bromotimol y azul de timol son los indicadores de pH
Agar Thayer-Martin Modificado: Medio selectivo que permite el crecimiento de Neisserias patógenas. es un medio
ampliamente nutritivo por la presencia de Agar Base GC, hemoglobina y el suplemento de enriquecimiento Britalex
Agar BHI: Es un medio de uso general adecuado para el cultivo de una amplia variedad de tipos de organismos, incluidos
las bacterias, levaduras y hongos filamentosos, a partir de muestras clínicas. Obtiene los nutrientes de la infusión de
cerebro y corazón, la peptona y la glucosa. Las peptonas y la infusión son fuentes de nitrógeno orgánico, carbono,
azufre, vitaminas y sustancias de traza. La glucosa es la fuente de carbohidratos que los microorganismos utilizan
mediante fermentación. Se utiliza fosfato disódico como tampón en el medio.
Medio CTA: Es un medio de cultivo para el mantenimiento de microorganismos. También se utiliza para la detección de
movilidad bacteriana y, con la adición de carbohidratos, para las reacciones de fermentación de microorganismos
exigentes, es decir, Neisseria, neumococos, estreptococos y anaerobios no formadores de esporas.
Para los clostridios, bacilos, micrococos comunes, bacilos entéricos y otros organismos no considerados generalmente
como exigentes para la nutrición, se recomienda el uso de la base de agar Trypticase en lugar de CTA Medium.
Agar Palcam:
Agar MGIT
Agar Lowenstein Jensen
Priviet995
Antibióticos para Gram positivos: Macrólidos, Meticilina, Trimetoprima sulfametoxazol, Amoxicilina + ácido
clavulánico, Piperacilina/tazobactam
Antibióticos para Gram negativos: Trimetoprima sulfametoxazol, Aminoglucósidos (Amikacina, Kanamicina,
Gentamicina), Cefalosporina III – IV, Fluoroquinolonas, cefotaxima, carbapenémicos, piperacilina-tazobactam
SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS
para S. aureus
Amoxicilina 25 ug 16 21
S.Aureus
para S. aureus
Citrato Simmons
(+) +/- (-)
(Vira azul) (Verde)
PRUEBA OF
Fermentador (anaerobio facultativo) Oxidador (aerobio)
E. coli Pseudomonas
Citrobacter Acinetobacter
Enterobacter
Shigella
Prueba Yersinia
Bioquímica Vibrio
Serratia
Klebsiella
Morganella
Providencia
Salmonella
Proteus
Ureasa
(+) variable (-)
Prueba Morganella Enterobacter Shigella
Bioquímica Proteus Yersinia Salmonella
Providencia Citrobacter E. coli
(P. rettgeri) (P. stuartii) Pseudomonas
Klebsiella Acinetobacter Acinetobacter
Pseudomonas Vibrio
Serratia
(P. alcalifaciens)
Fenilalanina
(+) (-)
Enterobacter
E. coli
Morganella Yersinia
Prueba Proteus Shigella
Bioquímica Providencia Serratia
Citrobacter
Salmonella
Vibrio
Klebsiella
Pseudomonas
Acinetobacter
O1 sensible a 50 UI Polimixina B
VP: Tor (+); Clásico (-)
β-hemolisis (Tor)
CAMP: Tor (+); O1, no O1 y no O139 (-)
Cuerda: Tor y Clásico (+); no O1 y no O139 (-) (DEBIL)