Guia Practica de Microbiologia-S07
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PRÁCTICA N° 7
"MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO
GASTROINTESTINAL
PROTOZOARIOS INTESTINALES"
INTEGRANTES:
ARGOMEDO MARQUINA CIELO
BARDALES PLASENCIA ANA PAULA
CHAVEZ PAJARES JEFERSON JOEL
ESPINOZA PARDO MICHELLY TATIANY
NIETO TELLO CLAUDIA ANDREA
DOCENTE:
Dr. DIANA VIRGINIA MORILLOS CARRASCO
EXPERIENCIA CURRICULAR:
MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
TRUJILLO
2023- I
INDICE
I. OBJETIVOS
II. MATERIALES
1. Metodos
2. Cryptosporidium spp
3. Iodamoeba spp
4. Giardia lamblia
5. Isospora Spp
6. Entamoeba Coli
III. DESARROLLO
IV. CONCLUSIONES
V. REFERENCIAS
PRÁCTICA N° 7
MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES DEL TRACTO
GASTROINTESTINAL
PROTOZOARIOS INTESTINALES
I. OBJETIVOS
1. Fundamentar e interpretar los métodos de diagnóstico para enteroparásitos:método Directo,
método de concentración de Telemann, coloración Kinyoun.
2. Identificar los protozoarios intestinales: Giardia lamblia, Entamoeba histolytica, Cryptosporidium.
II. MATERIALES
Muestras de heces (material externo) Guantes
Recipientes estériles descartables (material externo) palitos de madera
Solución salina y Lugol
Láminas portaobjeto y Laminillas cubreobjeto8 microscopios
3 copas fondo cónico
6 tubos de fondo cónico Reactivos para Telemann Reactivos para Kinyoun
III. DESARROLLO:
1. METODOS:
A) MÉTODO DIRECTO: Utiliza solución salina fisiológica y Lugol.
Preparación de la muestra: En una lámina portaobjeto, se coloca una gota de solución salina
fisiológica y con un mondadientes o una baqueta fina, se pone una pequeña cantidad de materia
fecal a examinar, luego observación microscópica a menor y mayor aumento.
B) POR SEDIMENTACIÓN:
Bareman modificado en copa: Se utiliza para recuperar formas móviles de los parásitos: larvas y
trofozoitos, por que usa solución salina, también se recuperan quistes y huevos. Colocar la muestra
de heces en un colador con gasa y dejar que se humedezca la muestra, dejar reposar por 45 a 60
minutos, las formas móviles descienden y se toman con una pipeta del fondo de la copa, observar
entre lámina y laminilla.
POR FLOTACION: Las soluciones utilizadas tienen mayor densidad que los huevos, quistes, larvas, por
lo que estos flotan en la superficie de la solución, tomándose la muestra con una laminilla o pipeta.
Willis: Utiliza una solución saturada de NaCl.
Faust: Utiliza una solución saturada de sulfato de zinc.
2. CRYPTOSPORIDIUM SPP
Cryptosporidium spp, causante de la enfermedad llamada criptosporidiosis, es un parásito
microscópico constituido por una sola célula que infecta el intestino, puede provocar diarreas
acuosas muy severas e inclusive llevar a la muerte del hospedero. Todo el ciclo de vida de este
parásito transcurre en un solo individuo, que lo adquiere a partir de la ingesta de huevec illos
(denominados ooquistes) presentes en agua y alimentos contaminados con heces. Además, el
contacto de persona a persona con malos hábitos higiénicos es otro factor que contribuye a la
Infección.
DIAGNÓSTISCO:
Los ovoquistes pueden ser concentrados mediante la técnica de flotación centrífuga del sulfato
de zinc modicada o mediante el procedimiento de flotación en azúcar de Sheather. Las muestras
pueden ser teñidas con el método modificado de ácido resistencia o bien por inmunofluorescencia
indirecta. Pruebas de enzimoinmunoanálisis e inmunocromatografía para detectar antígenos
fecales.
PROCEDIMIENTOS:
PROCEDIMIENTO: Método en fresco
1.
Recolección de la muestra de
heces: Se le proporciona al
paciente un recipiente estéril para
recolectar una muestra de heces.
2. Preparación de la muestra: Se
toma una pequeña cantidad de la
muestra de heces recolectada
utilizando un aplicador o una
espátula estéril. La muestra se
coloca directamente en un
portaobjetos limpio y se extiende
en una capa delgada.
3. Examen microscópico en fresco: El
portaobjetos se coloca en el
microscopio
MICROSCOPIO:
Interpretación
Tinción: Hematoxilina férrica
Aumento: 40X
3. IODAMOEBA SP:
Es un parásito oportunista de baja virulencia, se cree que la transmisión ocurre principalmente a
través de la ingestión de quistes, que son la forma de resistencia del parásito. Los quistes son
liberados en las heces de individuos infectados y pueden sobrevivir en el medio ambiente durante
períodos prolongados.
La principal vía de transmisión es fecal-oral, lo que significa que la persona se infecta al ingerir agua
o alimentos contaminados con quistes de Iodamoeba sp.
MORFOLOGIA
Etapas de su forma evolutiva:
1. Quiste: El quiste es la forma de resistencia y dispersión de Iodamoeba sp. Es una etapa inactiva que
le permite sobrevivir en condiciones adversas fuera del cuerpo humano. Los quistes son esféricos y
tienen un diámetro de alrededor de 10 a 20 micrómetros. Dentro del quiste, se puede observar un
núcleo central y una estructura granular.
2. Trofozoíto: El trofozoíto es la forma activa de Iodamoeba sp. que se encuentra dentro del tracto
digestivo humano. Es la etapa en la que el protozoo se alimenta y se reproduce. Los trofozoítos son
ameboides, es decir, tienen la capacidad de moverse y cambiar de forma. Se alimentan de bacterias
y otros materiales presentes en el intestino.
PROCEDIMIENTO:
2. Preparación de la muestra: Se
toma una pequeña cantidad de
la muestra de heces recolectada
utilizando un aplicador o una
espátula estéril. La muestra se
coloca directamente en un
portaobjetos limpio y se
extiende en una capa delgada.
Interpretación
Tinción: Hematoxilina férrica
Aumento: 40X
4. GIARDIA LAMBLIA
Método diagnóstico:
PROCEDIMIENTO:
8. Observación al microscopio:
Coloca el portaobjetos en el
microscopio y ajusta el
objetivo a 100x de aumento.
Observa cuidadosamente el
área donde se encuentra la
muestra y busca la presencia
de quistes y trofozoítos de
Giardia lamblia. Los quistes y
los trofozoítos deben
aparecer de color marrón
oscuro o dorado debido a la
tinción de Lugol.
MICROSCOPIO:
MUESTRA: Giardia Lamblia sp
AUMENTO: X 100
COLORACION: Tinción de Lugol
Descripción:
5. ISOSPORA SP
PROCEDIMIENTO
METODO EN FRESCO
1. Recolección de la muestra de
heces: Se le solicita al paciente
que recoja una muestra de heces
en un recipiente limpio y
adecuado para el transporte de
muestras biológicas. Es
importante seguir las
instrucciones proporcionadas
por el profesional de la salud
para obtener una muestra
adecuada.
2. Preparación de la muestra:
Se toma una pequeña cantidad de la
muestra de heces y se coloca en un
frasco o tubo de ensayo. Se puede
agregar una solución de flotación
adecuada, como sulfato de zinc o
sulfato de sodio, en una concentración
específica. La solución de flotación se
mezcla con la muestra de heces para
crear una suspensión homogénea.
Métodos de diagnóstico:
El examen directo de las heces frescas o concentradas es el método de detección de la infección por
I. belli, puesto que los ooquistes son visibles al microscopio óptico sin teñir. Es frecuente la aparición
de cristales de Charcot-Leyden. Los coccidios se identifican a nivel de especie por la estructura de
su ooquiste esporulado. En las heces recién emitidas los ooquistes son ovalados, de 20-33 µm por
10-19 µm y, generalmente, contienen uno o dos esporontes inmaduros. El ooquiste maduro, que a
su vez incluye dos esporoquistes con cuatro esporozoítos cada uno, aunque se desarrolla en el
medio externo, puede ocasionalmente observarse en las heces, siendo la forma i nfecciosa para el
hombre. Los métodos de concentración son más sensibles que los exámenes directos sobre heces
frescas, siendo el método de flotación de Sheater un método excelente para la detección de I. belli.
Algunos conservantes como el alcohol polivinílico pueden deformar la pared del ooquiste siendo
difícil de observar su estructura.
6. ENTAMOEBA COLI
Muestra: Diarrea SS
Aumento: 100x Coloración:
Gram Observación:
En la muestra se puede obervar una gran serie de
microorganismos tales como cocos en cadenas,
cocos libres, de igual manera de llegan a distinguir
basitolas gram positivos y gram negativos asi como
tambien bacilos esporulados los cuales son bacilos
rectos, que se pueden encontrar solos o agrupados
en cadenas y no esporulados que son bacilos gram
Clostridium negativos no fermentadores (BGNNF)
2. Antes de que los parásitos microscópicos pasen a las heces, se recubren con costras duras
llamadas "quistes" que les permiten sobrevivir fuera del intestino durante meses. Una vez
que están dentro de un huésped, los quistes se disuelven y los parásitos se liberan, causando
mucho daño.
V. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Patrick Murray, Ken S. Rosenthal, Michael A. Pfaller. Elsevier Mosby, Elsevier España,
S.A. Génova 17, 3º.
2. Jawetz, Melnick & Adelberg Microbiología Médica, 28e
3. Revista Venezolana de Salud Pública. 2 (1): 45-46. Enero-junio 2014.
4. M.A. Méndez Busteloa, M. do Muiño Joga. Blastocystis hominis, un gran desconocido. Rev. Pediatr.
Aten. Primaria. [Internet] 2015. vol (17) no (65) Disponible en:
https://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1139-76322015000100009
5. María R, María A. Giardiasis intestinal. Invest. clín [Internet]. 2002. Maracaibo vol (43) n (2).
Disponible en: http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0535 -
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