Unidad 1 - 2020 - Introduccion BMyC y Celulas

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Biología Molecular & Celular

Introducción a la Biología Molecular y Celular


Dominios de la Vida - Células - Herramientas
de Estudio

María Fernanda Izaguirre - 2020


UNIDAD Nº 1: INTRODUCCIÓN A LA BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR
1.1- Introducción a la Biología Molecular y Celular
1.2- Dominios de la vida en la Tierra
1.2.1- Célula eucariota versus procariota. Clasificación. Organización estructural
y organelas. Componentes inorgánicos y orgánicos de la materia viva.
1.2.2- Pruebas moleculares y estructurales que sustentan la Teoría de evolución
de los seres vivos y sus metabolismos.
1.3- Interacción entre células y su ambiente
1.3.1- Pared celular: estructura y composición en eucariotas versus procariotas.
1.3.2- Estructura y función de la membrana plasmática. Bicapas fosfolipídicas.
Lípidos no fosfolípidos, proteínas e hidratos de carbono de membrana.
Glucocálix. Dominios funcionales de membrana. Transporte molecular a través
de membranas: pasivo (difusión simple y difusión facilitada) y activo (bombas,
co-transporte y endocitosis).
1.3.3- Señalización en la superficie celular. Moléculas de señalización y
receptores de la superficie celular. Moléculas de señalización y receptores
intracelulares. Transducción de señales intracelulares.
1.4- Herramientas de estudio en biología celular
Microscopia de luz, microscopia electrónica y fraccionamiento subcelular.
Modelos y sistemas experimentales.
La Biología Celular (primeramente denominada Citología, del griego κύτος, que
significa ‘célula’),​ es una disciplina académica que estudia las células en lo que respecta
a sus propiedades, estructura, funciones, orgánulos, su interacción con el ambiente y
su ciclo vital.

La Biología Molecular tiene como objetivo el estudio, desde el punto de


vista molecular, de los procesos que se desarrollan en una célula viva. Este área
específica de estudio está relacionada con otros campos de la Biología Celular,
como son la Ingeniería Genética y la Bioquímica.

Biología Celular Biología Molecular de la Célula


Niveles de Organización de la Materia
(Materia: etimológicamente, del latín materia, «sustancia de la que están hechas las
cosas»; en física, todo aquello que se extiende en cierta región del espacio-tiempo,
posee una cierta cantidad de energía y por ende está sujeto a cambios en el tiempo)
La Ingeniería Genética es la tecnología del control y transferencia del ADN de un
organismo a otro, ​lo que posibilita la corrección de los defectos genéticos y la
creación de nuevas cepas de microorganismos, variedades de plantas y razas de
animales para una obtención más eficiente de sus productos.

La Bioquímica es una rama de la ciencia que estudia la composición química de los seres
vivos, especialmente las proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos, además de
otras pequeñas moléculas presentes en las células y las reacciones químicas que sufren
estos compuestos (metabolismo) que les permiten obtener energía (catabolismo) y
generar biomoléculas propias (anabolismo).

APLICACIONES DE LA BIOQUÍMICA
¿Cómo estudiamos las células y sus moléculas?
HERRAMIENTAS DE ESTUDIO EN
BIOLOGÍA MOLECULAR
Espectrofotometría (TPs 3 y 4)
HERRAMIENTAS DE ESTUDIO EN Introducción a la tecnología del ADN
BIOLOGÍA CELULAR recombinante: endonucleasas de
Herramientas de Biología Celular restricción. Generación de moléculas de
(Microscopia Óptica - Microscopia ADN recombinante. Vectores.
Electrónica –Fraccionamiento Secuenciación del ADN. Expresión de
Subcelular (desde el TP No 1) genes clonados. Amplificación de genes
clonados por la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR). Detección de ácidos
nucleicos y proteínas. Cultivos de células
procariotas, animales y vegetales (desde
el TP No 5)
HERRAMIENTAS DE ESTUDIO EN BIOLOGÍA CELULAR
Microscopio Microscopio Electrónico
Óptico

Fraccionamiento Subcelular
HERRAMIENTAS DE ESTUDIO EN BIOLOGÍA MOLECULAR
Cultivos de células procariotas, Introducción a la tecnología del ADN
animales y vegetales recombinante. Expresión de genes clonados

Secuenciación del ADN - Reacción


Detección de ácidos nucleicos y proteínas en cadena de la polimerasa (PCR)
COMBINACIÓN DE HERRAMIENTAS DE ESTUDIO EN
BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR
Modelo experimental Hordeum vulgare (cebada)

Fraccionamiento Subcelular Bioquímica Espectrofotometría


PARA COMPRENDER “LA BIOLOGÍA MOLECULAR DE LAS CÉLULAS”, LOS ALUMNOS
DEBERÁN REPASAR Y/O ESTUDIAR LOS CONTENIDOS CORRESPONDIENTES A:
- COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LA MATERIA VIVA.
Definiciones de ión – molécula –macromolécula – radical libre
Componentes inorgánicos: agua: propiedades e importancia biológica. Iones: aniones y cationes
de importancia biológica.
Componentes orgánicos: concepto – estructura – clasificación – distribución y funciones
principales de:
Hidratos de carbono: monosacáridos – oligosacáridos – polisacáridos.
Lípidos: simples: grasas – aceites – ceras. Lípidos compuestos. Lípidos asociados.
Aminoácidos. Péptidos: Polipéptidos. Proteínas. Niveles de organización proteica. Enzimas.
Nucleótidos - Ácidos nucleicos: tipos – localización – estructura química. Ribozimas.
- TIPOS CELULARES: PROCARIOTAS Y EUCARIOTAS.
Organización y organelas. Ejemplos de representantes de cada Dominio y Reino de la vida.
- APRENDER A INTERPRETAR MICROFOTOGRAFÍAS, ESQUEMAS Y
REPRESENTACIONES DE CÉLULAS Y SUS PROCESOS A NIVEL MOLECULAR.
- LOS PRIMEROS CAPÍTULOS DE LOS LIBROS BÁSICOS DE BIOLOGÍA DE LA CÉLULA
ABORDAN UNA INTRODUCCIÓN A ESTOS CONTENIDOS.
- ESTUDIAR DE LAS PRESENTACIONES DE TEORÍAS, ADEMÁS DE LOS LIBROS.

Iniciaremos el desarrollo de los contenidos desde superficie celular


Células Eucariotas & Procariotas

EUCARIOTA

PROCARIOTA
TEORÍA CELULAR
Célula: unidad estructural y funcional más pequeña de
la vida.
 Célula: unidad morfológica y fisiológica de todos los
organismos vivientes.
Las propiedades de un organismo dependen de la/s de
su/s célula/s individual/es.
Las células se originan únicamente de otras células y su
continuidad se mantiene a través de su material
genético.
Cada célula contiene al menos 10.000 moléculas diferentes ( y varias
copias de cada una).
Los principios que regulan las funciones de una célula (procariota o
eucariota) son los mismos que gobiernan los 60 billones de células
que componen a un ser humano.
Células de especies de todos los Reinos conocidos
Bacterias Arquibacteria Hongo Planta

Animal

Levaduras

Protozoo

60 billones de células
Representación

Reinos BACTERA VEGETAL ANIMAL FUNGI PROTISTA ARCHAEA


Representantes Cianobacterias Otras Eubacterias Plantas Animales Hongos Protozoos Arquibacterias

Aparición de Envoltura Nuclear


cloroplastos

Teoría endosimbionte

mitocondrias

Aparición de Último ancestro común entre


Envoltura Nuclear, Arqueas y Eucariotas ?
según John Fuerst

Modelo evolutivo de Último ancestro común entre


organismos existentes?
descendencia de los seres vivos
Ancestro común
EUBACTERIAS PROTISTA ANIMAL
Microscopia
Electrónica de
Transmisión
(MET)
Escherichia coli Alga esférica unicelular
Macrófago
Gemmata obscuriglobus
Los virus son organismos?
Ser vivo u organismo, conjunto de átomos y moléculas Virus, conjunto de átomos y
que forman una estructura muy organizada y moléculas, que forman una estructura
compleja, con sistemas de comunicación molecular, muy organizada y compleja, se
que lo relacionan con el ambiente, intercambiando reproducen y evolucionan, pero no
materia y energía de manera ordenada y que tienen metabolismo ni desarrollo.
desempeña las funciones básicas de la vida que son la Hay opiniones científicas encontradas,
nutrición, la relación, el desarrollo, la reproducción y respecto de considerarlos organismos.
la evolución. Los seres vivos actúan y funcionan por sí Si definimos a la vida como un sistema
mismos sin perder su nivel estructural hasta su muerte. “autosuficiente”, el virus no cuenta con
Ontogenia celular Desarrollo de un pluricelular esta cualidad, dado que siempre debe
parasitar un organismo vivo, para que
le proporcione su maquinaria
metabólica y funcional.

Reproducción viral

Metabolismo celular
Estructura tipo de un virus ADN
Genoma:
ADN o ARN
proteínas doble o
simple
cadena

proteínas
ADN doble
cadena
Comparación de tamaños entre
bacterias, ribosomas y virus

Hemihebra de ADN

intrón
exón
Modelo de reproducción de un virus ARN

Secuencia de eventos
intracelulares del material
genético del virus

El virus emplea las organelas


celulares núcleo, ribosomas y
Aparato de Golgi para
reproducirse
¿Cómo se llegó en la Tierra, desde un
mundo prebiótico (pre-vida) “viral” al
mundo viviente celular?
Genoma:
ADN o
proteínas ARN doble
o simple
cadena

proteínas
ADN doble
cadena

Eucariota

Hemihebra de ADN

intrón
exón
Escala Temporal de la
Presente
Evolución de los Seres
Vivos
Lectura recomendada: Polvo
Vital. El Origen y Evolución de Organismos
la Vida en la Tierra. (1999). De multicelulares
Duvé C. R Editorial Norma.

~1.500 – 1.000 Primeros eucariotas


millones de años

Hipótesis de Lynn Margulis, 1960 Metabolismo oxidativo


Evolución biológica: endosimbiosis Fotosíntesis

~3.800 millones de Primeras células


años, procariotas
Mundo prebiótico
Hipótesis de Alexandre I. Oparin
& John Haldane, 1922
Formación de
Evolución química: inorgánica a
La Tierra
orgánica
Replicación del ARN
Formación Espontánea de Algunas pruebas
Moléculas Orgánicas
moleculares y
experimentales sobre el
Electrodo surgimiento de la vida
Moléculas Encapsulamiento del ARN en una membrana fosfolipídica
Inorgánicas

Descarga
Eléctrica

Refrigerante
Agua

Moléculas
Generación de Energía Metabólica
Orgánicas
Genera 2 ATP
Alanina Glucólisis
Glucosa
Ác. aspártico
Ác. glutámico
Glicina
Urea Fotosíntesis
Ác. láctico Glucosa
Ác. acético
Ác. fórmico Respiración Celular
Genera 36-38 ATP
Glucosa
Basado en los experiomentos de
Stanley L. Miller y Harold Urey, 1953
Algunas Pruebas/Características Moleculares que Abonan la
Hipótesis de que el ARN fue el Material Genético de los
Primeros Seres Vivientes
1. El ARNmensajero (ARNm) provee información genética.
2. La información genética fluye sólo desde los ácidos nucleicos a las proteínas.
3. Ciertas moléculas de ARN poseen actividad catalítica (ribozimas), por lo que pudieron
actuar catalizando la síntesis de todas las moléculas y estructuras celulares y cumplir
las funciones que hoy cumplen las proteínas (efectores celulares).
4. El ARN es capaz de: (a) llevar información genética (ARNm), (b) transportar
aminoácidos para la síntesis proteica (ARNtransferencia) y (c) catalizar la síntesis
polipeptídica (ARNribosomal).
5. Los ARNs poseen uracilo, a partir del cual se origina timina (presente en el ADN) por
metilación.
6. La desoxigenación de la pentosa ribosa del ARN origina 2´-desoxirribosa del ADN.
7. El ARN puede sintetizarse a partir de ribonucleótidos trifosfato (síntesis de novo, a
diferencia del ADN que requiere cebadores ARN para comenzar).
8. Los sistemas prebióticos tales como los virus, pueden poseer ADN ó ARN como
material genético, los seres vivos sólo poseen genomas de ADN doble cadena.
Algunas Pruebas/Características Moleculares que Abonan la
Hipótesis de que el ARN fue el Material Genético de los
Primeros Seres Vivientes
El ARNm provee información genética
Código genético

proteína

La información genética fluye sólo desde los ácidos nucleicos a las proteínas
Algunas Pruebas/Características Moleculares que Abonan la
Hipótesis de que el ARN fue el Material Genético de los
Primeros Seres Vivientes
Ciertas moléculas de ARN poseen actividad catalítica (ribozimas), por lo que pudieron
actuar catalizando la síntesis de todas las moléculas y estructuras celulares y cumplir
las funciones que hoy cumplen las proteínas (efectores celulares)

Subunidad
mayor del Sitio catalítico
ribosoma

El ARN es capaz de: (a) llevar información genética (ARNmensajero), (b)


transportar aminoácidos para la síntesis proteica (ARNtransferencia) y
proteína
(c) catalizar la síntesis polipeptídica (ARNribosomal)
Algunas Pruebas/Características Moleculares que Abonan la
Hipótesis de que el ARN fue el Material Genético de los
Primeros Seres Vivientes
Por metilación del uracilo de los ARNs se origina timina (presente en el ADN)
Por la desoxigenación de la pentosa ribosa del ARN origina 2´-desoxirribosa del ADN
uracilo timina

Información genética de Información genética de


células primitivas células actuales
Algunas Pruebas/Características Moleculares que Abonan la
Hipótesis de que el ARN fue el Material Genético de los
Primeros Seres Vivientes

Los ARNs se sintetizan a partir de ribonucleótidos trifosfato (síntesis de


novo, a diferencia del ADN, que requiere cebadores ARN para comenzar)
Algunas Pruebas/Características Moleculares que Abonan la
Hipótesis de que el ARN fue el Material Genético de los
Primeros Seres Vivientes
Los sistemas prebióticos tales como los virus, pueden poseer ADN ó ARN
doble o simple cadena como material genético, los seres vivos sólo poseen
genomas de ADN doble cadena
Clasificación de Virus
De acuerdo a:
-Naturaleza genoma (ARN/ADN)
-Ácido nucleico
monocatenario/bicatenario/1
molécula/fragmentado
-Peso molecular
-Estrategia de replicación
-Lugar celular de replicación y
ensamblaje (núcleo/citoplasma)
-Tamaño y morfología (simetría
cúbica/helicoidal)
-Desnudos o envueltos
-Presencia o no de espículas,
tipo y composición antigénica.
-Enzimas específicas
-Sensibilidad al éter y a otros
solventes orgánicos
-Mecanismos naturales de
transmisión
-Tipos de huésped, tejido y
tropismos celulares
-Anátomopatologia
Clasificación de células de acuerdo a
su diseño: procarionte o eucarionte
Célula, unidad estructural y funcional de todos los seres vivos. Sistema en
constante mutación, intercambia materia y energía con el ambiente. Regula
sus procesos fisiológicos y tiene la potencialidad de auto-reproducirse.
Presenta una estructura organizada en la que intervienen desde las simples
moléculas inorgánicas hasta las más complejas macromoléculas.
En la enorme diversidad de los seres vivos, las células han debido adaptarse a
diferentes ambientes y a una multitud de funciones, por lo que es posible
encontrar una inmensa gama de formas, dimensiones y grado de diferenciación
celular. Sin embargo, dentro de esta variedad puede detectarse un diseño básico
que presenta sólo dos modelos: célula procariota (pro = previo, karyon = núcleo)
y célula eucariota (eu = verdadero, karyon = núcleo).
Los humanos y otros vertebrados obtienen 200 tipos celulares funcionalmente
diferentes por el proceso de diferenciación celular, lo que refleja la gran
diversidad, pero a su vez, resulta notable la similitud básica en el diseño de todos
ellos, ya que todas son eucariotas.
Clasificación de Células

De acuerdo a
su diseño: procarionte o
eucarionte

De acuerdo a
su morfología y función

UNICELULARES UNICELULARES PLURICELULARES


Diferenciación Celular
Progenie u ontología celular durante la diferenciación celular
“desarrollo de una célula dentro de un organismo pluricelular”

Célula madre totipotente


Autorrenovación
“indefinida”

Célula madre pluripotente Autorrenovación


“más limitada”

Otra célula madre Célula madre sanguínea


especializada
Autorrenovación
“limitada”

Glóbulo blanco
Eritroblasto
C. muscular o ortocromático
Adipocito miocito
Neurona Glóbulo rojo
Desde el punto de vista del diseño citológico,
existen dos tipos de células
Animal Bacterias

Vegetal CÉLULA EUCARIOTA CÉLULA PROCARIOTA


10-100μm 5-10μm
Arquibacterias
Protista

Fungi

 Envoltura  Sin envoltura


nuclear, que nuclear, se
distingue
define un nucleoide
nucléolo ADN
núcleo nucleoide ADN cápsula
 Sin nucléolo
pared celular
 Uno o más núcleo  Una, dos o pocas
nucléolos moléculas de
 En general, ADN dúplex
varias “circular”
moléculas de cerrado,
ADN dúplex ribosomas MP asociado a
lineal, proteínas no
asociado a mitocondrias histónicas,
proteínas poliaminas o
RE
histónicas y polietilenaminas
HMG
Otras Características del Diseño Celular

Célula eucarionte Célula procarionte


 Ribosomas 80S (organela sin  Ribosomas 70S (organela sin
membrana) membrana)
 Numerosas organelas limitadas por  “Aparentemente” sin organelas de
membranas, con división de membrana; las funciones celulares se
funciones: Golgi, RER, mitocondrias, realizan en la matriz celular, ribosomas
cloroplastos, lisosomas, REL, y sobre la membrana plasmática o sus
peroxisosomas, sistema vacuolar, invaginaciones, pero no dentro de
centríolos compartimentos cerrados por
membrana
 Pueden presentar flagelos y cilias, de
organización compleja basada en  Pueden presentar flagelos de
microtúbulos. estructuras compleja basada en
flagelina y otras proteínas.
 Citoesqueleto de microtúbulos,
filamentos intermedios y  Poseen homólogos de los tres tipos de
microfilamentos (actina) proteínas del citoesqueleto eucarionte
(actina, tubulina y de filamentos
intermedios (Microbiol Mol Biol 2006;
Science 2008; PNAS 2016)
Presente

Organismos
Hipótesis sobre el Origen de
Organelas de Membrana
multicelulares

Metabolismo oxidativo
Fotosíntesis
cubierta nuclear
Primeras células retículo
endoplasmático
Teoría de la Endosimbiosis
Formación de núcleo mitocondria
La Tierra

invaginación Eucariota
Célula con ancestral
de la MP núcleo y fotosintética
sistema de
endomembranas plástido

endosimbiosis
de procariota
ADN fotosintética
endosimbiosis de
citoplasma
procariota
Procariota
heterotrófica
ancestral aeróbica
Eucariota
ancestral
membrana heterotrófica
mitocondria
plasmática
(MP)
Lynn Margulis, 1960
¿Por qué es tan importante entender la gran
complejidad de una célula procarionte, tanto como la
de una célula eucarionte, para los futuros
Bioingenieros y Bioinformáticos?
Porque

- Ambos tipos celulares son el resultante evolutivo de una complejísma


trama de moléculas, macromoléculas, organelas, sistemas de
organelas y rutas de comunicación y coordinación, cuyo estudio,
posibilita organizar y entender los datos biológicos coherentemente,
así como imitarlos para generar modelos, diseños, prototipos y
productos que mejoren la vida de nuestras sociedades.

- El hombre está inserto en un ecosistema en donde todas las especies


cumplen un papel imprescindible.

- Mantener viva la curiosidad humana es una herramienta poderosa de


aprendizaje y transformación.
Interacción eucarionte-procarionte Interacción eucarionte-eucarionte

Dos macrófagos humanos (ámbar) fagocitando Varios macrófagos humanos (ámbar) fagocitando un
bacterias de Escherichia coli (rojo) gusano (parásito) de Wuchereria bancrofti (gris)
E. coli vive en los intestinos de animales humanos y no humanos Wuchereria bancrofti, nematode causante de la parasitosis humana
sanos. Mientras la mayoría de las variedades son inofensivas o filariasis linfática, transmitida por varias especies de mosquitos.
causan diarrea breve, algunas cepas peligrosas causan cólicos Afecta a más de 120 millones de personas, principalmente
abdominales intensos, diarrea con sangre y vómitos. Se puede en África, Sudamérica y otros países tropicales y subtropicales. De
estar expuesto a E. coli proveniente del agua o de los alimentos no tratarse la infección, puede resultar en elefantiasis. Las
contaminados (vegetales crudos y carne vacuna poco cocida). modalidades de tratamiento son limitadas y no se han
Los adultos sanos se recuperan de la infección en una semana, desarrollado vacunas preventivas.
pero los niños pequeños y otros adultos corren riesgo elevado
de síndrome urémico hemolítico, comprometiendo la vida y
posibilitando la insuficiencia renal crónica.
membrana plasmática
Célula
citoplasma
Procariota ADN

nucleoide

cápsula
pared
celular
MP

ribosomas

Aún cuando parezca


sencilla, cuenta con gran pili
organización y
complejidad intracelular. flagelo
Este conocimiento quedó
algo relegado debido a su
diminuta naturaleza.
Estructura de la Célula Procariota
ESTRUCTURAS SIEMPRE PRESENTES
 Pared celular
 Membrana plasmática
 Mesosoma
 Citoplasma
 Nucleoide ó genóforo
 Ribosomas y polirribosomas

ESTRUCTURAS A VECES PRESENTES


 Flagelos  Endosporas
 Fimbrias y pili  Inclusiones
 Glucocálix  Plásmidos
 Vesículas gasíferas
Funciones de las estructuras de células procariotas
Barrera permeable selectiva, frontera mecánica de la célula,
Membrana transporte de nutrientes y residuos, detección de señales
plasmática ambientales quimiotácticas, localización de muchos procesos
metabólicos (respiración, fotosíntesis)
Vacuola de gas Hincha la célula para flotar en un medio acuático
Ribosomas Síntesis de proteínas
Cuerpos de inclusión Almacenamiento de carbono, fosfato , S, otras sustancias
Nucleoide o Genóforo Localización del material genético (ADN)
Contiene enzimas hidrolíticas y proteínas de unión para la
Espacio periplásmico
captura y transporte de nutrientes
Confiere a las bacterias una forma rígida y las protege frente a la
Pared celular
lisis en soluciones diluidas
Resistencia frente a la fagocitosis, adherencia a superficies
Cápsulas y «slime»
Fimbrias y pili Adherencia a superficies, conjugación bacteriana
Flagelos Movimiento
Endosporas Supervivencia en condiciones ambientales adversas
Tamaño Célula Procariota

Longitud
promedio 1 m
Morfología
Cocos
espiroqueta

Bacterias con apéndices


Bacilos y esporas

Espirilos

Filamentosas

Vibriones
Agrupaciones bacterianas
Diplococos
Estreptococos: crecen en cadenas o pares,
donde cada división celular ocurre a lo largo de un eje. De
allí que su nombre, del Griego streptos, significa que se
dobla o retuerce con facilidad, como una cadena.
De cocos
Tétradas o sarcinas

Racimos o estafilococos: se
dividen usando varios ejes, forman agrupaciones
racimosas de células

De bacilos Estreptobacilos
Microfotografías de Células Procariotas

Bacillus Bordatella Clostridium Escherischia

Spirullina Staphylococcus Streptococcus Salmonella

Microscopia electrónica de barrido (MEB o SEM) con pseudocolor


Microfotografías de Staphylococcus aureus (Procariotas)
Microscopia óptica, coloración Gram (+) SEM (scanning electron microscopy) de colonias en racimos

50.000 X

Se han reportado casos de cepas de


S. aureus que se encuentran
recubiertas por una capa de
polisacáridos externos, la cual
recibe el nombre de slime o cápsula
mucoide, que incrementa su
capacidad de adherencia, así como
refuerza el efecto antifagocítico.
COLORACIÓN DE GRAM
(Herramienta de Biología Celular)
1. Coloración con cristal violeta Diferencia bacterias
2. Fijación con mordiente lugol
3. Decoloración con alcohol por su pared celular
4. Contratinción con safranina (TP No 1)

Gram (+)

Gram (-)
GRAM (-) GRAM (+)
Pared Celular Capa Externa
de la Pared Peptidoglucan
o

Bacteriana Membrana Membrana


Plasmática Plasmática
Peptidoglucan
o

Peptidoglicanos Peptidoglicanos

Membrana
Membrana
Periplasma
Lipopolisacárdos y proteínas

MET

Herramientas de
estudio en Biología
Celular
MEB
Cápsula y Capas Mucilaginosas
• Cápsulas, en sentido estricto, son rígidas e integrales
• Las capas mucilaginosas son flexibles y periféricas
• Glucocálix: capas superficiales compuestas de polisacáridos
• Sirven para adhesión entre células y colonización de nichos; mejora difusión
nutrientes, Protección contra la desecación y predación
• En muchas patógenas sirven, además, para protegerse de agentes
antibacterianos

Cápsulas, Streptococcus pneumoniae Superficie del Bacillus anthracis (Mesnage et al. 1998,
(neumococo). Microscopia óptica, tinción especial Journal of Bacteriology 180, 52-58).
Flagelos Bacterianos
Filamento
Flagelina Flagelina

Gancho
Anillo L
Membrana
Externa
(LPS)

Anillo P

Espacio
Periplasmático Peptidoglicanos
Anillo S-M

Proteína Mot
MP
Proteínas Fli
(conmutador de movimiento)

Presentes en G+ y G-; su movimiento es


impulsado por fuerza protón-motriz
Membrana Plasmática Procarionte

CITOSOL

Modelo de mosaico fluido de S. Jonathan Singer y Garth Nicholson


Funciones de la MP Procariota
• Retiene el citoplasma y lo separa del medio exterior.
• Barrera selectivamente permeable: selecciona el paso de iones y
moléculas particulares hacia dentro y fuera de la célula. Por ello,
actúa en la absorción de nutrientes, la excreción de residuos y la
secreción de proteínas.
• Aquí se desarrollan numerosos procesos metabólicos:
respiración celular, fotosíntesis, síntesis de lípidos y de
constituyentes de la pared celular y, probablemente, la
segregación cromosómica.
• Contiene moléculas receptoras especiales para detectar y
responder a sustancias químicas del medio exterior.
Estructuras membranosas
intracitoplásmicas

• Estructuras derivadas de invaginaciones de la


membrana plasmática
– Mesosomas
– Cromatóforos
– Otras invaginaciones
• Tilacoides de cianobacterias (orgánulos?)
Estructura y función de los
mesosomas en debate
Al microscopio electrónico se observan en tabiques transversales o en zonas cercanas a los
nucleoides. Suelen ser muy patentes en bacterias G+ y con invaginaciones repetidas primarias y
secundarias, con forma de sáculos . Posibles funciones: formación del septo transversal; regulación
de autolisinas; anclaje del cromosoma bacteriano y plásmidos; segregación de cromosomas
replicados en células hijas; secreción de exoenzimas.

Gránulo reserva
Bacillus

Nucleoide

Mesosoma

Micrografías electrónicas de transmisión de Bacillus y Staphylococcus, mostrando mesosomas


Otras invaginaciones de MP
Cromatóforos: túbulos aislados o en haces o Citomembranas: membranas paralelas.
repliegues concéntricos en bacterias Función: aumentar superficie para albergar
fotosintéticas anoxigénicas purpúreas. Función: cadenas transportadoras de electrones en
aumentar la superficie de membrana útil capaz bacterias quimiolitoautótrofas nitrificantes;
de albergar el aparato fotosintético. aumentan la tasa respiratoria.

Cromatóforos de Rhodospirillum rubrum (TEM, 30.000 X) Citomembranas de Nytrocystis oceanus (n:


nucleoplasma, TEM)
Tilacoides
• Sacos membranosos aplastados de cianobacterias, con centros de reacción
fotosintéticos
• No estarían en conexión con la membrana plasmática
• En su cara externa
posee filas de
ficobilisomas con
pigmentos antena
• El conjunto de
{tilacoides +
ficobilisomas}
contiene el
aparato
fotosintético de las
cianobacterias
Citoplasma Procarionte
Es un sistema coloidal:
– Fase dispersante: agua con sustancias en disolución
(citosol)
– Fase dispersa: macromoléculas y partículas
supramoleculares: cromosoma y plásmidos (no en
todas), ribosomas, inclusiones, orgánulos de
cubiertas no lipídicas (no en todas, tales como
carboxisomas, vacuolas de gas, clorosomas,
magnetosomas)
– No existen orgánulos procarióticos rodeados de
unidad de membrana (“podrían ser una excepción
los tilacoides de las cianobacterias”)
Carboxisomas (cuerpos poliédricos)
• Reserva de RuBisCo (ribulosa-bifosfato-carboxilasa), enzima clave del ciclo de Calvin que
interviene en la fijación del CO2
• Presentes en bacterias fotoautótrofas, cianobacterias, algunas anoxigénicas purpúreas y en
quimiolitoautótrofas (nitrificantes como Thiobacillus )

Enzimas y proteínas capsulares

Hexámeros Pentágonos
Vesículas gasíferas

Anabaena cylindrica

Cianobacterias
Clorosomas

• Vesículas
oblongas debajo
de la MP de
bacterias
fotosintéticas
verdes
(Chlorobium, etc),
rodeadas de
monocapa de
proteínas

• Contienen
pigmentos antena
Micrografía electrónica de Chlorobium tepidum. Los clorosomas
ovoides pueden verse unidos a la membrana citoplásmica.
Magnetosomas
• Orgánulos (inclusiones)
sensores del campo Las bacterias magneto-tácticas, que se encuentran en sedimentos en
magnético terrestre todo el mundo, sintetizan magnetita u óxido de hierro (Fe3O4) y lo
almacenan en magnetosomas, los cuales actúan como imanes para
• Presentes en ciertas alinear las bacterias con el campo geomagnético terrestre.
bacterias acuáticas
flageladas aerobias o
microaerófilas
• Cristales homogéneos de
magnetita (Fe3O4), de
formas cubo-octaédricas
• Se disponen en filas
paralelas al eje
longitudinal de la célula
• Permiten que las bacterias Aquaspirillum magnetotacticum con cadena de magnetosomas.
se hundan en los fondos Observe la membrana externa de la pared Gram (-) (30.000 X).

limosos donde viven


Inclusiones de Reserva Orgánica
Almidón, glucógeno, poli-hidroxialcanoatos , hidrocarburos (se emplean frente a
limitación de N; son reservas de C osmóticamente inerte). Algunos tienen envuelta
proteica. Gránulos de cianoficina (copolímero de arginina y aspártico ) para reservas de N.

Inclusiones de glucógeno

Ficobilisomas: cilindros o bastones de proteínas


adosadas a la superficie de los tilacoides, que
funcionan como antenas para la captación de
energía de la luz Micrografía electrónica de la bacteria fototrófica
Rhodovibrio sodomensis
Inclusiones de Reserva Inorgánica
Glóbulos de azufre
Otros gránulos

Polifosfatos o volutina (modo


osmóticamente inerte de acumular fosfato
cuando otro nutriente (como el sulfato) se
hace escaso y pueden llegar a ser fuente de
energía, en sustitución de ATP)
Sales minerales e insolubles de calcio (ej.:
CO3Ca) para mantener las bacterias en el
fondo de ríos y lagos

• Presentes en eubacterias que emplean sulfuro de hidrógeno (SH2):


– Bacterias fotosintéticas purpúreas del azufre
– Bacterias filamentosas no fotosintéticas (Beggiatoa, Thiotrhix)
• El SH2 se oxida hasta S0, que se acumula como glóbulos muy
refringentes rodeados por una cubierta proteica
• El S0 se oxida hasta sulfato cuando en el medio se agota el sulfuro
Escherichia coli, modelo clásico de estudio
Sección esquemática de E. coli
Elevada “densidad” del citoplasma procariota, ocupado
mayormente por macromoléculas y partículas
submicroscópicas. Se observa parte del nucleoide, con el
Membrana ADN parcialmente enrollado alrededor de proteínas (azul
plasmática oscuro), gran densidad de ribosomas (rosado) sintetizando
proteínas (cadenas naranja).
Ribosomas
en citosol
ADN

Pared
celular

Flagelo
Cromosomas Bacterianos
Morfología del cromosoma bacteriano
• Cromosoma circular super-
enrollado
• ADN cromosómico asociado y
compactado con poliaminas de
carga positiva y proteínas
• Longitud de 1m (E. coli)
• Tamaño en pares de bases: Organización del genoma bacteriano
3.000-5.000 kpb (bacterias
“típicas” como E. coli ), 700-
1.000 kpb (bacterias pequeñas
como Mycoplasma genitalium y
12.000 kpb (bacterias con ciclos
complejos como Actinomicetos y
cianobacterias
Mycoplasma genitalium
Algunas excepciones al cromosoma
típico procariota
• Borrelia: cromosoma lineal con extremos cerrados
formando un bucle de horquilla
• Streptomyces: cromosoma lineal con extremos a
base de secuencias repetidas acomplejadas con
proteínas
• Bacterias con dos o más cromosomas
– Rhodobacter, Vibrio, Leptospira, Brucella: dos cromosomas
lineales
– Sinorhizobium meliloti: tres cromosomas circulares
– Burkholderia cepacia: 2-4 cromosomas
– Agrobacterium tumefaciens: 1 lineal y 1 circular
Plásmidos (ADN extracromosómico)

• Elementos genéticos extracromosómicos


autorreplicativos
• La mayoría son de ADN
• Episomas: plásmidos que pueden integrarse en el cromosoma bacteriano
• Tamaño: desde 2 kb hasta >1000 kb
• Plásmidos con control de replicación estricto (bajo nº de copias) o relajado
(elevado nº de copias)
• Fenotipos que pueden codificar: resistencia a antibióticos (plásmidos R), a metales
pesados (ej., a Hg)
• Virulencia (toxinas, invasión de tejidos, etc.)
• Producción de bacteriocinas
• Producción de sideróforos
• Utilización de fuentes alternativas de C
• Inducción de tumores en plantas (en Agrobacterium tumefaciens)
• Simbiosis con leguminosas y fijación de nitrógeno (en Rhizobium)
Endosporas, fenotipos de resistencia
bacteriano
Central Subterminal Terminal

Estructura de la espora Exosporio


(fina cubierta proteica)
Cubierta de la espora
Cortex (peptidoglucano)
• Rico en ácido dipicolínico + Ca2+: 10% Pared celular
del peso seco de la espora Protoplasma
(núcleo de la espora)
• Proteínas pequeñas ácidas +ADN
Fases de formación de endosporas

3 Clostridium pasculi

Esporas maduras

2 Célula esporulante

1 Célula vegetativa
Célula
Eucariota
Célula de Arabidopsis thaliana

Célula pancreática
Cl

G M

Célula pancreática, TEM de réplica de criofractura,


R poros nucleares visibles.

célula dendrítica

célula T

Clamidomonas, eucarionte unicelular fotosintético;


núcleo (N), mitocondria (M), cloroplasto (Cl),
reserva de alimentos (R) , Golgi (G)
Células de la piel
Célula stem embrionaria de ratón, nanotubos, SEM Célula escamosa de carcinoma, SEM

Fibroblasto de piel, núcleo (verde), actina (azul), Fibroblasto de piel, núcleo (azul), mitocondria
mitocondria (fucsia) (rojo), actina (verde)
Núcleo
Espacio
intermembrana MNE MNI
REL

Ribosomas Complejo de Lámina Nucléolo Cromatina RER


poro nuclear nuclear
Cromatina - Cromosomas Organización Genoma
cromosoma
cromátida núcleo en división
telómero

centrómero

telómero

nucleosomas

bases
Gen
histonas nitrogenadas Fragmento de ADN que codifica un ARN
o un polipéptido funcional
ADN
dúplex
Flujo de la información genética formación
ribosomas
ADN
ARNm ARNt
transcripción y
procesamiento
ARNr
replicación
aminoácidos
ARN
polimerasa

anticodón
proteínas

ribonucleótidos cadena
polipeptídica

factores
transcripción

ribosoma
codón
ARNm
Citoesqueleto

Filamentos de Actina (~ 7nm) Filamentos intermedios (~ 10nm)

Microtúbulos (~ 25nm)
Modelo de secuencia evolutiva de los
metabolismos energéticos celulares

Glucólisis anaerobiosis
Genera
Glucosa Ácido Láctico

Fotosíntesis

Glucosa

Metabolismo Oxidativo
Genera
Mitocondrias

Célula secretora de glicoproteínas Célula secretora de esteroides

Músculo esquelético Túbulo renal


Plastidios cromatina
nucléolo
centrosoma
RER

REL

ribosomas

vacuola central
dictiosoma tonoplasto
microfilamentos
f. intermedios
microtúbulos

mitocondria
peroxisoma
membrana plasmática cloroplasto
pared celular
pared celular adyascente plasmodesmos

Leucoplastos

Cromoplastos
Peroxisomas
Peroxisomas
Sistema de Endomembranas
Interacción entre células y su ambiente

A partir de un
corte en la piel
Interacción entre células y su ambiente

Interacción entre linfocito T y célula dendrítica Células natural killer atacando una célula cancerosa
Interacción entre células y su ambiente

Representación de la interacción entre neuronas, entre neuronas y células de la glía y


entre éstas y el torrente circulatorio en el sistema nervioso central.
Interacción entre células y su ambiente

La integridad de la barrera del epitelio intestinal, la cual depende de las uniones


intercelulares, nos protege del ingreso de numerosas noxas.
Herramientas de bioinformática y bioingeniería se implementan
para volver menos vulnerables las células a su ambiente

Representación de linfocitos T exhibiendo receptores de membrana CD4 y CCR5. En el


futuro, la manipulación genética de las células madre sanguíneas podrían erradicar el
virus HIV. La personas que poseen un defecto genético en CCR5, no son infectados por
HIV.
Herramientas de bioinformática y bioingeniería se implementan
para volver menos vulnerables las células a su ambiente

Micrografía electrónica de barrido obtenida por scanning electron microscopy o SEM y


pseudocoloreada para resaltar la interacción entre un linfocito T con receptor antigénico
quimérico (amarillo-naranja) para atacar una célula cancerosa de mama (verde) durante la
implementación de un tratamiento.
Herramientas de bioinformática y bioingeniería se implementan
para volver menos vulnerables las células a su ambiente

Una serie de tubos de prueba La tecnología HB4 de resistencia a la


contienen naranjos jóvenes sequía permite obtener semillas
alterados genéticamente, con la transgénicas más tolerantes a la
esperanza de crear plantas sequía y con mayor productividad.
resistentes al huanglongbing, una Fue desarrollada por la Dra. Raquel
enfermedad provocada por Chan, docente investigadora de la
bacterias que están acabando FBCB-UNL junto a su equipo en el IAL.
con los naranjos de Florida.

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