Membrana Mitocondrial

1. MITOCONDRIAS
 Concepto
Hoy en día en ocasiones se denomina a la mitocondria central de
energía de las células, porque estas organelas producen la mayoría
de la energía obtenida de los alimentos, es decir, parte de la
energía química necesaria para activar las reacciones bioquímicas
de la célula. Además de suministrar energía, la mitocondria
también ayuda en el control de la concentración de agua, calcio y
otras partículas cargadas (iones) en el citoplasma.
La energía química producida por las mitocondrias se almacena en
una molécula energizada llamada trifosfato de adenosina (ATP). Las
mitocondrias contienen su propio cromosoma (ADN) y ribosomas
que se parecen a los de las células procariotas (sin núcleo). La
cantidad de este ADN no nuclear varía significativamente en los
diferentes organismos.
Las mitocondrias desempeñan un papel muy importante en el
metabolismo energético de las células y también están relacionadas
en la regulación de la vida y la muerte celular determinada por la
apoptosis y la necrosis.
 La apoptosis es una forma de muerte celular programada, o
"suicidio celular". Es diferente de la necrosis, en la cual las
células mueren debido a lesiones.
 La apoptosis es un proceso ordenado donde el contenido
celular se empaca en pequeños paquetes membranosos para
que las células imnunitarias "recojan los desperdicios".
  La apoptosis retira las células durante el desarrollo, elimina
las células infectadas de virus y las potencialmente
cancerosas, y mantiene el equilibrio en el organismo.

Necrosis (la manera desordenada)

Cuando se dañan las células por factores nocivos (como lesión o

productos químicos tóxicos), usualmente “derraman sus entrañas”
en cuanto mueren. Debido a que la membrana plasmática de la
célula dañada ya no puede controlar el paso de iones y de agua, la
célula se hincha y su contenido se fuga a través de los agujeros en
la membrana plasmática. Esto a menudo causa inflamación en el
tejido que rodea la célula muerta.
 Función general
Algunos tipos de células tienen diferentes cantidades de
mitocondrias porque necesitan más energía. Así, por ejemplo, el
músculo tiene una gran cantidad de mitocondrias, al igual que el
hígado, el riñón, y en cierta medida, el cerebro, que se mantiene de
la energía producida por esas mitocondrias. Por este motivo, si
usted tiene un defecto en las vías que las mitocondrias utilizan
habitualmente, va a tener síntomas en los músculos, en el cerebro,
y a veces también en los riñones; o sea, muchos tipos diferentes de
síntomas. Y eso que, probablemente, no conocemos todas las
enfermedades causadas por la disfunción mitocondrial.
Es la producción de energía para la célula mediante la respiración
celular. La mitocondria utiliza el oxígeno y las moléculas orgánicas
como el azúcar, los ácidos grasos y los aminoácidos para generar
ATP, que es la moneda energética de la célula. La mitocondria
también participa en otros procesos como la regulación de la
temperatura, el control del ciclo celular, el almacenamiento de
calcio y la síntesis de hormonas sexuales.

 Respiración celular mediante el uso de oxígeno: son el ciclo

de Krebs, una ruta metabólica en la que se libera energía por
la oxidación del acetil coenzima A, el proceso de fosforilación
oxidativa y la cadena de transporte de electrones.
 Producción de energía química: se guarda en forma de ATP o
adenosintrifosfato, ya que este fosfato genera un enlace de
gran energía. Este ATP es catalizado con ayuda de la enzima
transmembranal ATP sintasa, a partir de la oxidación de
aminoácidos, ácidos grasos y azúcares, y es esto a lo que se le
conoce como fosforilación oxidativa.
En la membrana interna de las mitocondrias hay complejos
enzimáticos compuestos por varias proteínas que tienen múltiples
actividades:
 Uso de oxígeno molecular.
 Reducción y oxidación de diferentes compuestos orgánicos:
de esta manera una cadena por la que se transportan
electrones.
 Bombeo de los protones: hacia el espacio intermembranal
mitocondrial.

2. ESTRUCTURA Y COMPOSICIÓN DE LA
MITOCONDRIA
 Función de cada parte
Las mitocondrias están suspendidas en el citosol gelatinoso de la
célula. La estructura de varios compartimentos de la mitocondria
podría parecernos muy complicada. Es cierto, pero resulta ser muy
útil para la respiración celular, ya que permite separar las
reacciones y mantener concentraciones distintas de las moléculas
en diferentes "habitaciones".
Aunque la estructura de las mitocondrias puede ser variable, por lo
general siempre presentan unas básicas. Estas son las partes de la
mitocondria:
Membrana externa
La primera parte de las mitocondrias que vemos es la membrana
externa, con las que se delimitan del exterior y permiten al mismo
tiempo estar comunicadas. Las mitocondrias reciben mucha
información de la célula y para esto tienen proteínas con orificios
llamadas porinas para permitir el paso de iones y otras proteínas
de menor tamaño hacia el espacio intermembranal. Todas las
proteínas que entran deben estar desplegadas, cosa que ocurre
gracias a las proteínas chaperonas. También se ayudan de
complejos proteicos para introducir proteínas.
Membrana interna
Por dentro, la siguiente parte de las mitocondrias es la membrana
interna que forma la matriz. Es análogo al citoplasma de la célula.
De esta región proviene la energía en forma de ATP. Aquí ocurren
procesos metabólicos como:
 La fosforilación oxidativa.
 La producción de ATP.
 El ciclo de Krebs.
  La oxidación del piruvato.
 La oxidación de aminoácidos.
 La oxidación de ácidos grasos.
También tiene función estructural porque es aquí donde se
disponen los demás micro orgánulos de las mitocondrias como los
ribosomas, ADN, iones, y metabolitos. La membrana interna está
configurada por una bicapa lipídica donde hay complejos
enzimáticos compuestos por diferentes proteínas necesarias para la
cadena de transporte de electrones.
La membrana interna resulta especialmente impermeable a iones,
debido a su alto contenido en el fosfolípido cardiolipina y a la gran
cantidad de bombas y transportadores específicos (como el
translocador de nucleótidos de adenina (ANT). Por el contrario, la
membrana externa carece de crestas, por lo que en condiciones
fisiológicas su permeabilidad es menos selectiva gracias a la
presencia de una proteína denominada porina o canal aniónico
dependiente de voltaje (VDAC), que permite el paso de iones y
metabolitos con pesos moleculares inferiores a 6,000 Da
Crestas
Las membranas externas e internas son partes de la mitocondria
que se doblan para formar crestas, en forma de plegamientos. Se
localizan principalmente a las orillas de la mitocondria, pero
delimitadas hacia afuera por la membrana externa. Se acomodan
de modo perpendicular a la delimitación de la mitocondria. En las
membranas de estas crestas es donde ocurren las funciones más
importantes de la mitocondria:
 El transporte de electrones: con ayuda de los complejos
enzimáticos que transfieren los electrones de un sitio a otro.
  La fosforilación oxidativa.
 El compacto y la maximización de la transferencia de
electrones.
Espacio intermembranal mitocondrial
Entre la membrana interna y la externa existe un espacio llamado
espacio intermembranal mitocondrial, que es de vital importancia
para la actividad celular. Tiene un alto contenido de enzimas
necesarias para la respiración. Su función principal es la recepción
de protones provenientes del bombeo de los complejos
enzimáticos. Es de consistencia acuosa. Aquí hay enzimas y
proteínas que asisten en el proceso celular. También ocurre aquí la
translocación, proceso donde las proteínas de la matriz
mitocondrial son transportadas desde fuera de la mitocondria. Por
último, transportan ácidos grasos.
Mitorribosomas
La mitocondria también tiene ribosomas, llamados mitorribosomas
o ribosomas mitocondriales, con la misma función de los
ribosomas: sintetizar proteínas mediante la traducción genética.
Ellos reciben la información en forma de ARN para traducirla a
ADN.
Mitogenoma o mtADN
Las mitocondrias tienen su propio ADN. De hecho, son el único
organelo con ADN particular. Siempre trabaja en conjunto con el
ADN del núcleo para lograr coordinar actividades y tiene una forma
pequeña y circular. Este ADN mitocondrial se hereda únicamente
de la madre, no del padre y tampoco por recombinación genética.
En este ADN mitocondrial pueden presentarse fallas genéticas con
resultados patógenos de enfermedades como por ejemplo el
Parkinson, a causa de su cercanía con el metabolismo oxidativo.
También, carece de histonas protectoras, a diferencia del ADN del
núcleo celular, que sí que lo tiene.
Este ADN ha sido de gran interés evolutivo, ya que se explicó
mediante los principios de la teoría de la endosimbiosis: donde una
célula procariota engulló a una bacteria de respiración aeróbica
para obtener sus organelos, creando una célula eucarionte y de
relación simbiótica. Es comprensible entonces que la mitocondria
sea un organelo especial con varios micro organelos dentro de ella,
como si se tratara de una pequeña célula por sí misma.
Ambas membranas están formadas por una bicapa de
fosfolípidos, pero tienen algunas diferencias importantes:
- La membrana externa es más lisa y contiene porinas.
- La membrana interna está plegada y forma las crestas
mitocondriales, que aumentan el área de superficie para la
actividad enzimática. La membrana interna contiene complejos
proteicos que intervienen en la cadena de transporte de electrones,
el ciclo de Krebs y la síntesis de ATP.
- Entre las dos membranas hay un espacio intermembranal, que
contiene enzimas y citocromo c, una proteína involucrada en la
respiración celular.
3. CADENA RESPIRATORIA
 Componentes
 Fisiología básica de los complejos
La cadena respiratoria mitocondrial o cadena de transporte de
electrones está embebida en la membrana interna mitocondrial, y
la constituyen cinco complejos multienzimáticos (I, II, III, IV y V o
ATP sintasa) y dos transportadores de electrones móviles (coenzima
Q o ubiquinona y citocromo c).
Su principal función es el trasporte coordinado de protones y
electrones, para producir energía en forma de ATP a partir de ADP y
fosfato inorgánico. El transporte de electrones genera energía que
es utilizada para transportar protones de la matriz mitocondrial al
espacio intermembrana situado entre las membranas
mitocondriales externa e interna. Este proceso genera un gradiente
electroquímico de protones, que es utilizado por el complejo V (ATP
sintasa) para generar ATP a medida que los protones fluyen de
nuevo desde el espacio intermembrana a la matriz mitocondrial. El
ATP generado es exportado al citoplasma a través del
transportador de nuecleótidos de adenina (ANT).
De las aproximadamente 85 proteínas que constituyen la cadena,
únicamente 13 están codificadas por el ADNmt, estando el resto
codificadas por el ADNn. Siete de estas trece proteínas, las
denominadas ND 1,2,3, 4L,5 y 6, son componentes del complejo I o
NADH: ubiquinona óxido-reductasa; una de ellas (citocromo b) es
un componente del complejo III o ubiquinol: citocromo c óxido-
reductasa; tres (CO I, II, III) forman parte del complejo IV o
citocromo c oxidasa, y dos de la ATP sintetasa del complejo V. El
resto de las proteínas de estos complejos, así como todo el
complejo II, están codificados por el ADNn, se deben sintetizar en
ribosomas del citoplasma y posteriormente importarse a la
mitocondria, ensamblándose con las proteínas codificadas en el
ADNmt.
Por tanto, para la biosíntesis del sistema OXPHOS se requiere la
expresión coordinada de los dos sistemas genéticos de la célula.
4. FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
Tú, al igual que muchos otros organismos, necesitas oxígeno
para vivir. Si alguna vez has tratado de aguantar la respiración
por mucho tiempo, ya sabrás que la falta de oxígeno puede
hacer que te sientas mareado o incluso te desmayes, y una falta
prolongada de oxígeno puede causar la muerte. Pero, ¿alguna
vez te has preguntado por qué sucede eso o qué es exactamente
lo que hace tu cuerpo con todo ese oxígeno?
Pues resulta que la razón por la que necesitas oxígeno es para
que tus células puedan usar esta molécula durante la
fosforilación oxidativa, la etapa final de la respiración celular. La
fosforilación oxidativa se conforma de dos componentes
estrechamente relacionados: la cadena de transporte de
electrones y la quimiosmosis. En la cadena de transporte de
electrones, los electrones se transportan de una molécula a otra,
y la energía liberada cuando se transfieren los electrones se
utiliza para formar un gradiente electroquímico. En la
quimiosmosis, la energía almacenada en el gradiente se utiliza
para sintetizar ATP.
Entonces, ¿qué tiene que ver el oxígeno con todo esto? El
oxígeno se encuentra al final de la cadena de transporte de
electrones, donde recibe electrones y recolecta protones para
formar agua. Si el oxígeno no se encuentra ahí para recibir
electrones (como cuando una persona no respira suficiente
oxígeno, por ejemplo), la cadena de transporte de electrones se
detendrá y la quimiosmosis no sintetizará más ATP. Sin el ATP
suficiente, las células no podrán llevar a cabo las reacciones que
necesitan para funcionar e incluso podrían morir después de un
cierto periodo de tiempo.
En conjunto, la cadena de transporte de electrones y la
quimiosmosis constituyen la fosforilación oxidativa. Los pasos
clave de este proceso, incluyen:
 Entrega de electrones por NADH y FADH\[_2\]. Los
acarreadores de electrones (NADH y FADH\[_2\]) reducidos
en otros pasos de la respiración celular transfieren sus
electrones a las moléculas cercanas al inicio de la cadena de
transporte. En el proceso se convierten en NAD\[^+\] y FAD,
que pueden ser reutilizados en otros pasos de la respiración
celular.
 Transferencia de electrones y bombeo de
protones. Conforme se mueven los electrones en la cadena,
se desplazan de un nivel de energía más alto a uno más bajo,
lo que libera energía. Parte de esta energía se utiliza para
bombear iones de H\[^+\], lo que los desplaza fuera desde la
matriz hacia el espacio intermembranal. Este bombeo
establece un gradiente electroquímico.
 Separación de oxígeno molecular para formar agua. Al final
de la cadena de transporte de electrones, los electrones se
transfieren a una molécula de oxígeno, la cual se rompe a la
mitad y recolecta H\[^+\] para formar agua.
 Síntesis de ATP impulsada por un gradiente. Cuando fluyen
por el gradiente de regreso hacia la matriz, los iones de H\
[^+\] pasan a través de una enzima llamada ATP sintasa, la
cual aprovecha el flujo de protones para sintetizar ATP.
 Todos los electrones que entran en la cadena de transporte
provienen de moléculas de NADH y FADH\[_2\] que se producen en
fases más tempranas de la respiración celular: glucólisis, oxidación
del piruvato y el ciclo del ácido cítrico.
 El NADH es muy bueno donando electrones en reacciones redox (o
sea que sus electrones están en un nivel de energía alto), por lo que
puede transferir sus electrones directamente al complejo I y se
transforma otra vez en NAD\[^+\]. El movimiento de los electrones
a través del complejo I en una serie de reacciones redox libera
energía, la cual el complejo usa para bombear protones desde la
matriz hacia el espacio intermembranal.
 El FADH\[_2\] no es tan bueno para donar electrones como el
NADH (o sea que sus electrones se encuentran en un nivel de
energía más bajo), por lo que no puede transferir sus electrones
hacia el complejo I. En su lugar, introduce los electrones a la cadena
de transporte a través del complejo II, el cual no bombea protones
a través de la membrana.
Debido a esto, las moléculas de FADH\[_2\] producen un menor
bombeo de protones (y contribuyen menos al gradiente de
protones) comparadas con las de NADH.
 Teoría quimiosmótica de Michell
La energía liberada por el transporte de electrones se utiliza para
bombear protones desde la matriz al espacio intermembrana (en
mitocondrias); o desde el estroma al interior del tilacoide (en
cloroplastos). El bombeo de protones se realiza a través de
transportadores localizados en complejos enzimáticas existentes en
la membrana (de las crestas mitocondriales o membrana tilacoidal,
según el caso).
De esta manera se genera un gradiente electroquímico de protones
que ejerce lo que se conoce como fuerza protonmotriz, ya que
cuando los protones atraviesan de nuevo la membrana interna
(mitacondrial o tilacoidal) a favor del gradiente, lo hacen a través
del sistema ATP-sintetasa, que se encuentra en dichas membranas,
donde la energía protonmotriz se transforma en energía de enlace
en moléculas de ATP .
El proceso se podría comparar con este símil:
El flujo de protones cumple el papel de transductor de energía, del
mismo modo que el vapor que suministra una caldera puede
utilizarse para generar energía eléctrica: el calor aplicado a la
caldera (flujo de electrones) calienta el agua y forma vapor de agua
(gradiente electroquímico de H+), cuya presión (fuerza
protonmotriz) se puede acoplar a las turbinas de un generador
eléctrico (ATP sintetasa) para producir electricidad (ATP).
5. REGULACIÓN DE LA CADENA RESPIRATORIA
Enzimas alostéricas y control de las vías:
En muchos casos, las vías se regulan por enzimas que catalizan
pasos individuales de la vía. Si la enzima de un paso en particular
está activa, este paso puede ocurrir rápidamente; pero si la enzima
está inactiva, el paso ocurrirá lentamente o simplemente no
ocurrirá. Por lo tanto, si una célula quiere controlar la actividad de
una vía metabólica, necesita regular la actividad de una o más de
las enzimas en esa vía.
El objetivo principal de la regulación de una vía bioquímica suele
ser menudo la enzima que cataliza el primer paso comprometido de
la vía (es decir, el primer paso que no es fácilmente reversible). El
concepto de un paso comprometido puede complicarse un poco
cuando hay muchas vías metabólicas que se cruzan, como en la
respiración celular, pero aun así es una idea útil para tener en
cuenta.
Cierto número de las enzimas de la respiración celular controla su
actividad por la unión de moléculas reguladoras en uno o más sitios
alostéricos. (Un sitio alostérico es simplemente un sitio regulador
diferente al sitio activo). La unión de un regulador con el sitio
alostérico de una enzima altera su estructura y causa una mayor o
menor actividad.
Las moléculas que se unen a enzimas de la respiración celular
actúan como señales, dando información a la enzima sobre el
estado energético de la célula. El ATP, ADP y NADH son ejemplos de
moléculas que regulan las enzimas de la respiración celular. El ATP,
por ejemplo, es una señal de "alto": niveles elevados significan que
la célula tiene suficiente ATP y no necesita hacer más con la
respiración celular. Este es un caso de inhibición por
retroalimentación, en el que un producto "retroalimenta" para
apagar su vía.
Regulación de la glucólisis:
Existe regulación en varios pasos de la glucólisis, pero el punto de
control más importante es el tercer paso de la vía, el cual es
catalizado por una enzima llamada fosfofructocinasa (PFK). Esta
reacción es el primer paso de compromiso en la glucólisis, por lo
que la PFK es uno de los principales blancos regulatorios de toda la
vía de la glucólisis\[^1\].
La PFK se regula por ATP, un derivado del ADP llamado AMP y
citrato, así como otras moléculas que no discutiremos aquí.
 ATP. El ATP es un regulador negativo de la PFK, lo cual tiene
sentido: si la célula ya tiene una buena cantidad de ATP, no
hay necesidad de que la glucólisis produzca más.
 AMP. El adenosín monofosfato (AMP) es un regulador
positivo de la PFK. Cuando tiene muy poco ATP, una célula
comenzará a obtener ATP de moléculas de ADP
convirtiéndolas en ATP y AMP (ADP + ADP \[\rightarrow\] ATP
+ AMP). Una alta concentración de AMP implica que a la
célula se le ha terminado la energía y que la glucólisis debe
proceder rápidamente para reponer ATP\[^2\].
 Citrato. El citrato, primer producto del ciclo del ácido cítrico,
también puede inhibir la PFK. Si aumenta la cantidad de
citrato, esto es señal de que la glucólisis puede ir más lento,
porque el ciclo del ácido cítrico cuenta con suministros
suficientes y no necesita más combustible.

La oxidación del piruvato:

El siguiente punto de control ocurre después de la glucólisis,
cuando el piruvato se convierte en acetil-CoA. Este paso de
conversión es irreversible en muchos organismos y controla la
cantidad de acetil-CoA que "alimenta" al ciclo del ácido cítrico\
[^3\]. La enzima que cataliza la reacción de conversión se llama
piruvato deshidrogenasa.
 El ATP y el NADH disminuyen la actividad de esta enzima, mientras
que el ADP la hace más activa. De esta forma se produce más acetil-
CoA cuando hay poca energía almacenada.
 El propio sustrato de la piruvato deshidrogenasa, el piruvato,
también activa la enzima, que a su vez es inhibida por su producto,
el acetil-CoA. Esto asegura que el acetil-CoA se produzca solo
cuando se necesita (y cuando hay suficiente piruvato disponible).

El ciclo del ácido cítrico:

El ingreso al ciclo del ácido cítrico se regula principalmente
mediante la piruvato deshidrogenasa (arriba), la enzima que
produce el acetil-CoA. Sin embargo, hay dos pasos adicionales en el
ciclo que se encuentran sujetos a regulación. Estos dos pasos son
los que liberan moléculas de dióxido de carbono, que también son
los pasos en los que se obtienen las dos primeras moléculas de
NADH en el ciclo.
 La isocitrato deshidrogenasa controla el primero de estos dos
pasos en el que una molécula de seis carbonos se convierte en una
de cinco. Esta enzima se inhibe con ATP y NADH, pero el ADP la
activa.
 El α-cetoglutarato deshidrogenasa controla el segundo de estos
dos pasos en el que el compuesto de cinco carbonos obtenido del
paso previo se convierte en uno de cuatro que además está unido a
CoA (succinil-CoA). Esta enzima se inhibe con ATP, NADH y otras
varias moléculas, incluida la succinil-CoA misma.
Hay muchos otros mecanismos regulatorios en la respiración
celular además de los que analizamos aquí. Por ejemplo, la
velocidad de la cadena de transporte de electrones se regula por la
concentración de ADP y ATP, y muchas otras enzimas están sujetas
a regulación. Sin embargo, estos ejemplos te dan una idea del tipo
de lógica y las estrategias que utilizan las células para regular los
procesos metabólicos.
En cada etapa, podemos ver elementos similares. Por ejemplo,
vemos la inhibición por retroalimentación en muchas etapas, a
nivel de vías y de reacciones individuales. Monitorear el estado
energético de la célula por la concentración de moléculas como el
ATP, ADP, AMP y el NADH es otra característica común.
El siguiente diagrama resume las enzimas clave que hemos
discutido, junto con algunos de sus reguladores más importantes.
 Interrelación entre glicolisis, ciclo de Krebs y
fosforilación oxidativa como procesos generadores de
energía
La glicolisis, el ciclo de Krebs y la fosforilación oxidativa son tres
procesos que forman parte de la respiración celular, una vía
metabólica que permite obtener energía a partir de la glucosa.
Estos procesos están interrelacionados de la siguiente manera:
- La glicolisis es el primer paso de la respiración celular y consiste en
la degradación de la glucosa en dos moléculas de piruvato,
generando dos moléculas de ATP y dos moléculas de NADH².
- El piruvato producido en la glicolisis se transporta a la matriz
mitocondrial, donde se oxida a acetil-CoA, liberando una molécula
de CO2 y produciendo una molécula de NADH por cada piruvato.
- El acetil-CoA se introduce en el ciclo de Krebs, una serie de
reacciones que ocurren en la matriz mitocondrial y que permiten
obtener dos moléculas de CO2, una molécula de ATP, tres
moléculas de NADH y una molécula de FADH2 por cada acetil-CoA.
- El NADH y el FADH2 generados en la glicolisis, la oxidación del
piruvato y el ciclo de Krebs se utilizan en la fosforilación oxidativa,
un proceso que ocurre en la membrana interna mitocondrial y que
consiste en el transporte de electrones a través de una cadena de
proteínas hasta el oxígeno, que actúa como aceptor final. El
transporte de electrones genera un gradiente electroquímico de
protones que impulsa la síntesis de ATP por medio de la ATP
sintasa, una enzima que se encuentra en la membrana interna
mitocondria.
En resumen, la glicolisis, el ciclo de Krebs y la fosforilación oxidativa
son procesos generadores de energía que se conectan entre sí
mediante el intercambio de metabolitos (piruvato, acetil-CoA) y
acarreadores de electrones (NADH, FADH2). Estos procesos
permiten obtener un balance neto de 36 moléculas de ATP por
cada molécula de glucosa.