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Trichoderma

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Revista de Protección Vegetal, Vol. 33, No.

3, 2018, E-ISSN: 2224-4697


Artículo Original
Aislamiento, identificación y evaluación de cepas
autóctonas de Trichoderma spp. antagonistas de
patógenos del suelo
“Isolation, identification, and evaluation of indigenous
strains of Trichoderma spp. as antagonistic fungi of soil http://opn.to/a/4herH

pathogens”

Luz María Samaniego-Fernández 1 * , Maimouna Harouna 1 , Odalys Corbea 2 , Ana


Julia Rondón-Castillo 1 , Iraní Placeres-Espinosa 1
1
Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Matanzas, Cuba. Autopista a Varadero Km 31/2
CP: 44740
2
Aeropuerto Internacional “Juan Gualberto Gómez”, Matanzas, Cuba. Autopista a Varadero Km 31/2
CP: 44740
RESUMEN: Con el fin de aislar, identificar y evaluar cepas autóctonas de Trichoderma spp. de la
provincia Matanzas, Cuba, se realizó una prospección en dos agroecosistemas con suelo ferralítico
rojo; a partir de uno de ellos, se aislaron e identificaron tres cepas autóctonas de este hongo. Mediante
la técnica de cultivo dual se evaluó el antagonismo in vitro de las especies autóctonas obtenidas y de
las especies de referencia Trichoderma harzianum Rifai 3(A-34)2 y Trichoderma viride Persoon
5(TS-3)1 contra los hongos fitopatógenos Rhizoctonia solani Kühn, Fusarium spp. y Sclerotium rolfsii
Sacc., causantes de enfermedades en cultivos agrícolas de la provincia. Se determinaron el crecimiento
lineal diario (radios de las colonias), la velocidad de crecimiento y el porcentaje de inhibición del
crecimiento radial (PICR) de los antagonistas. Sus valores se procesaron mediante Análisis de
Varianza Simple. Las cepas autóctonas de Trichoderma aisladas e identificadas fueron Trichoderma
2T-aislado, T. harzianum 6(A-53)2 y T. viride 4(TS-3)1, de las cuales, Trichoderma 2T-aislado resultó
el antagonista in vitro más eficiente contra los tres hongos fitopatógenos, seguida de T. viride 4(TS-3)1
(biocontrolador de R. solani y S. rolfsii y con menor capacidad antagónica contra Fusarium spp.) y T.
harzianum 6(A-53)2. Entre las cepas de referencia, T. harzianum 3(A-34)2 presentó el mayor
antagonismo contra estos hongos. Tanto las cepas autóctonas como las de referencia, presentaron
diferentes niveles de actividad antagónica in vitro contra los fitopatógenos.
Palabras clave: antagonismo, competencia, control biológico, micoparasitismo, Trichoderma.
ABSTRACT: A survey was carried out in two agroecosystems with a red ferralitic soil in the province
of Matanzas, Cuba, to isolate, identify and evaluate autochthonous strains of Trichoderma spp. From
only one of the ecosystems, three autochthonous strains of this fungal species were isolated and
identified. The in vitro antagonism of the autochthonous species obtained and of the reference species
Trichoderma harzianum Rifai 3 (A-34) 2 and Trichoderma viride Persoon 5 (TS-3) 1 against the
phytopathogenic fungi Rhizoctonia solani Kühn, Fusarium spp., and Sclerotium rolfsii Sacc., causal
agents of crop diseases in the province, was evaluated using the dual culture technique. The daily
linear growth (colony radii ), growth rate and percentage of radial growth inhibition (PICR) of the
antagonists were determined. Their values were processed by Simple Variance Analysis. Trichoderma
autochthonous strains isolated and identified were Trichoderma 2T-isolate, T. harzianum 6 (A-53) 2
and T. viride 4 (TS-3) 1, of which, Trichoderma 2T-isolate was the most efficient in vitro antagonist
against the three phytopathogenic fungi, followed by T. viride 4 (TS-3) 1 (biocontroller of R. solani
and S. rolfsii and with less antagonistic capacity against Fusarium spp.) and T. harzianum 6 (A-53) 2.
Among the reference strains, T. harzianum 3 (A-34) 2 presented the greatest antagonism against these
fungi. Both autochthonous and reference strains showed different levels of in vitro antagonistic
activity agains tthe phytopathogens.
Key words: antagonism, competition, biological control, micoparasitism, Trichoderma.

_______________________________
Autor para correspondencia: Luz María Samaniego-Fernández. E-mail: luz.samaniego@umcc.cu
*

Recibido: 03/10/2017
Aceptado: 26/03/2018
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condiciones de baja humedad, con amplio rango


INTRODUCCIÓN de pH y temperatura (6).
Entre los microorganismos antagonistas del Las especies de Fusarium son agentes causales
suelo, empleados en la agricultura como de enfermedades fúngicas que ocasionan en
biocontroladores eficientes de diferentes diferentes cultivos síntomas en raíces, tallos y
patógenos, se destacan diversas especies del hojas, tales como pudriciones radicales,
género Trichoderma, como Trichoderma pudriciones secas, necrosis del tallo y de las
harzianum Rifai y Trichoderma viride Persoon, hojas, marchiteces y defoliaciones (7,8). Diversas
capaces de colonizar sustratos rápidamente, cepas de Trichoderma evidenciaron tener efecto
desarrollar actividad antagónica contra un amplio sobre estos tres hongos fitopatógenos (9).
rango de agentes fitopatógenos, activar Al evaluar la actividad micoparasítica in vitro
resistencia sistémica inducida en plantas y de 73 aislamientos de Trichoderma spp. sobre
promover el crecimiento vegetal (1). dos aislamientos de Rhizoctonia provenientes de
Las especies de Trichoderma son versátiles, arroz y de frijol, se encontró que los aislamientos
adaptables y de fácil manipulación, lo que de T. harzianum T53 (que constituían el 31,5 %
permite utilizarlas en el manejo de enfermedades de todos los aislamientos probados de esta
causadas por patógenos fúngicos del suelo en especie) resultaron tener antagonismo in vitro
varios cultivos (2). Su presencia en suelos sobre cinco de los seis aislamientos de
agrícolas y naturales las reafirma como fitopatógenos evaluados (10).
competidores por espacio y nutrientes, capaces de Los aislamientos nativos de Trichoderma spp.
colonizar los sustratos disponibles o sobrevivir, presentaron efecto antagónico sobre S. rolfsii
en forma de clamidosporas o conidios, cuando aislado de cacahuate, en experimentos de
estos son escasos (1). laboratorio, donde el porcentaje de inhibición del
El empleo de fórmulas comerciales de crecimiento radial (PICR) varió entre 10 y 94,40
Trichoderma contra hongos fitopatógenos en %, en dependencia de la cepa de Trichoderma
determinadas regiones agrícolas, sin tener en empleada; el aislado Tcn-11 (T. harzianum)
cuenta las condiciones edafoclimáticas inhibió el crecimiento del fitopatógeno y evitó su
específicas, condujo a un efecto biorregulador no desarrollo en el 80,0 % de la superficie del medio
uniforme, inadaptabilidad y baja eficacia de las en la placa Petri (11).
cepas en las aplicaciones, por lo que es La evaluación del efecto antagonista in vitro de
recomendable la búsqueda de aislamientos varios aislados de Trichoderma spp. contra F.
autóctonos de este hongo, con el fin de encontrar oxysporum (Schlechtend. Fr) f. sp. lycopersici
cepas mejor adaptadas a las condiciones donde (Sacc.) Snyder & Hans procedente de tomate,
serán utilizadas para el biocontrol (3). mostró mayores valores de PICR (56,92 %) y de
Rhizoctonia solani Kühn. provoca pudrición de porcentaje de inhibición de la esporulación (PIE)
la raíz y el cuello de las plantas de tomate (92,11 %) de este fitopatógeno, en comparación
(Solanum lycopersicon L.) y ocasiona pérdidas con otros aislados biocontroladores en este
severas que afectan la calidad y la cantidad de la cultivo, como Bacillus sp., por lo que se informa
producción en este cultivo (4). En el cultivo de la un antagonismo destacado de Trichoderma sobre
papa (Solanum tuberosum L.), la enfermedad F. oxysporum, no solo por la inhibición sino
causada por este hongo constituye uno de los también por la invasión de su crecimiento
problemas fitosanitarios más importantes (5). Por (12,13).
otra parte, Sclerotium rolfsii Sacc. es un hongo No existen indicios de que Trichoderma sea
patógeno del suelo, de amplia distribución y patógeno sobre alguna planta, lo que lo convierte
capaz de ocasionar pérdidas considerables en en un microorganismo de incalculable valor
diversos cultivos, entre los que se destacan la agrícola (14). Un incremento en la disponibilidad
soya (Glycine max L.) y el garbanzo (Cicer de cepas autóctonas de Trichoderma spp.
arietinum L.) y su supervivencia en suelos se permitiría emprender más eficientemente las
relaciona con la formación de esclerocios que estrategias de lucha integrada contra diferentes
permanecen viables por varios años en patógenos del suelo en varios cultivos en la

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provincia Matanzas. La presente investigación marzo hasta junio. Para la prospección de nuevos
tuvo como objetivo ampliar la disponibilidad y la aislamientos de Trichoderma spp., a partir de
diversidad de cepas autóctonas de Trichoderma muestras de suelo, se utilizó la metodología de
spp. mediante su aislamiento, identificación y Bateman (17).
evaluación in vitro a partir de dos Del bosque del agroecosistema Matanzas, se
agroecosistemas de la provincia. tomaron tres muestras de suelo. Del
agroecosistema San Miguel de los Baños se
MATERIALES Y MÉTODOS tomaron dos muestras de pino (P. cubensis) y una
La investigación se desarrolló en dos etapas: I) de marabú (D. cinerea).
toma de muestras del suelo, aislamiento e Todas las muestras se tomaron a tres
identificación de los aislados; II) evaluación del profundidades: (a) en la superficie, (b) entre 0 y
efecto in vitro de los aislados de Trichoderma 10 cm y (c) entre 10 y 15 cm; sumaron en total
autóctonos de la zona muestreada sobre 18.
aislamientos de hongos fitopatógenos R. solani, En el momento del muestreo, las áreas del
S. rolfsii y Fusarium spp. agroecosistema Matanzas presentaban 37 % de la
Las muestras de suelo se extrajeron de dos capacidad de campo; 4,5 % de materia orgánica y
agroecosistemas de los municipios Matanzas y suficiente iluminación; mientras que, en el
San Miguel de los Baños, de la provincia agroecosistema San Miguel de los Baños, la
Matanzas; ambos con suelo ferralítico rojo (15) capacidad de campo fue de 40 %, el por ciento de
que no recibieron, históricamente, aplicaciones materia orgánica de 4,2 y la iluminación fue
de medios químicos ni biológicos. Estos fueron: suficiente; todos estos valores fueron cercanos a
Agroecosistema Matanzas, consistente en un los informados por otros investigadores (18,19).
área boscosa de vegetación muy variada ubicado Los muestreos se realizaron mediante el método
al norte de la provincia, a 1 km de distancia del de “Bandera Inglesa”. Las muestras tomadas se
río Buey Vaca, 400 m del Ferrocarril Central y vertieron, individualmente, en bolsas de nylon, se
300 m de la Carretera Central (Figura 1) (16). La sellaron y se llevaron al Laboratorio Provincial
zona presenta un promedio anual de de Sanidad Vegetal y al Laboratorio de Sanidad
precipitaciones de 1181 mm. La dirección del Vegetal de la Facultad de Ciencias Agropecuarias
viento es de Norte a Oeste. de la Universidad de Matanzas para su
Agroecosistema San Miguel de los Baños, con conservación en frío, a una temperatura
dos áreas, una sembrada de pinos (Pinus cubensis aproximada de 18°C, hasta el momento de su
Griseb) y otra cubierta de marabú (Dichrostachis procesamiento, después de registrar todos los
cinerea L.). Esta zona se caracteriza por presentar datos pertinentes.
precipitaciones variables, con incrementos desde

FIGURA 1. Mapa satelital de la localidad de Guanábana, municipio de Matanzas. La imagen


muestra el área boscosa donde se realizó la colecta de las muestras y sus coordenadas geográficas. /
Satellite map of the locality of Guanábana, Matanzas municipality. The image shows the forest area
where the samples were collected and its geographic coordenates. Fuente: http://
mapasamerica.dices.net/cuba/mapa.php?nombre=Guanabana&id=23634.

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Las muestras de suelo se procesaron mediante todos los aislamientos realizados y de las cepas
la metodología de Sandoval y Stefanova (20), de referencia en el centro de placas Petri con
con el empleo de las diluciones decimales PDA (24). Posteriormente, las placas se
seriadas. Se pesó 1 g de suelo y se diluyó en 9 ml incubaron a 25 ± 2oC bajo un régimen de luz/
de agua destilada estéril para preparar una oscuridad y se midió diariamente (en cm) el radio
solución madre, agitando durante varios minutos. de crecimiento de cada colonia durante siete días.
A partir de esta se realizaron cuatro diluciones Evaluación del antagonismo in vitro
decimales seriadas sucesivas hasta el valor 10-4. mediante la técnica de cultivo dual.
De cada dilución (entre 10-1 y 10-4) se tomó 0,1 Competencia por espacio y nutrientes
ml para realizar la siembra en placas Petri de 10 Se utilizaron cepas de los hongos
cm de diámetro con medio Papa Dextrosa Agar fitopatógenos R. solani, S. rolfsii y Fusarium spp.
(PDA) (pH = 5,6 ± 0,2) y se sembraron tres provenientes de papa, soya y tomate,
réplicas por dilución por muestra de suelo. respectivamente, identificadas morfológicamente
Las placas se incubaron a 25 ± 1oC por siete en el Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal y
días para realizar observaciones diarias. De las depositadas en el cepario de esta institución. De
placas que mostraron mayor crecimiento, al igual modo, se usaron las cepas de referencia de
séptimo día se tomó una porción superficial de Trichoderma 1 [T. harzianum 3(A-34)2] y 2 [T.
esporas de las colonias con características viride 5(TS-3)1], del Laboratorio Provincial de
similares a Trichoderma spp.; se preparó una Sanidad Vegetal de Matanzas, empleadas en
suspensión de estas y se realizó la siembra en Cuba para el control de Fusarium, Phytophthora,
placas con medio Agar Agua. A partir del Pythium y Rhizoctonia (25). La capacidad
crecimiento en este medio se tomó, de cada antagónica de los aislamientos seleccionados e
placa, una espora germinada bajo el Microscopio identificados de Trichoderma, procedentes del
Estereoscópico para lograr los aislados agroecosistema Matanzas y ubicados en los
monospóricos que garantizaron la pureza de las Grupos 1 (T. harzianum 6(A-53)2), 2 (T. viride
cepas. Las colonias puras se pasaron a tubos de 4(TS-3)1) y 3 (Trichoderma 2T-aislado), se
ensayos que contenían PDA para su verificó mediante enfrentamientos duales entre
conservación. La identificación de las especies de estos y los hongos fitopatógenos antes
Trichoderma aisladas se realizó según los mencionados, según procedimiento de Morton y
criterios de Rifai (21), Samuels (22) y Barnett y Stroube (26). También se enfrentaron contra estos
Hunter (23). Para ello, se prepararon fitopatógenos las cepas de referencia 1 [T.
microcultivos de cada muestra y se realizaron harzianum 3(A-34)2] y 2 [T. viride 5(TS-3)1].
observaciones microscópicas con lente objetivo Para ello, se realizaron con antelación siembras
100X, para un aumento total de 1000 y así por dispersión sobre PDA de todos los
apreciar con calidad las características aislamientos de los potenciales antagonistas, de
morfológicas de micelio, fiálides, conidióforos, las cepas de referencia y de los fitopatógenos, los
conidios y clamidosporas. Para todos los que se incubaron a 25 ± 2o C bajo un régimen de
aislamientos, las cepas obtenidas se separaron en luz/oscuridad durante 8-16 horas, con el fin de
los Grupos 1, 2 y 3, sobre la base de las obtener discos de crecimiento de todas las
características morfológicas de las estructuras colonias de las diferentes cepas. Posteriormente,
observadas, la coloración de las colonias, su se sembró un disco de crecimiento de cada
textura y el mayor o menor diámetro de antagonista potencial y de cada cepa de
crecimiento lineal alcanzado en igual tiempo. referencia en un lado de las placas, mientras que
Crecimiento lineal micelial de las cepas el lado opuesto se colocaba cada uno de los
potencialmente antagonistas de hongos fitopatógenos, de modo que estos
Trichoderma spp. quedaran próximos a los bordes de las placas y
Para determinar el crecimiento lineal micelial equidistantes de antagonistas y cepas de
de las cepas antagonistas se realizaron siembras referencia. El esquema general de los
por punción de las colonias puras obtenidas de enfrentamientos duales se presenta en la Figura 2.

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En cada enfrentamiento se utilizaron cinco correspondientes testigos, en los que solamente


placas Petri: cuatro con el antagonista y una placa se sembraron los patógenos. La unidad
control sin el antagonista. Para analizar el experimental estuvo representada por una placa
antagonismo de las cepas se tuvieron en cuenta Petri con medio PDA, para medir el crecimiento
las variables radio de crecimiento del antagonista de cada uno de los antagonistas potenciales por
y radio de crecimiento del patógeno. El índice de placa y de las dos cepas de referencia por placa.
antagonismo considerado fue la proporción de Todas las placas con los enfrentamientos y los
invasión del antagonista sobre la superficie del testigos se incubaron a temperatura de 27oC
micelio patógeno, según la Escala de Elías et al. durante siete días. Las evaluaciones se realizaron
(27). (Tabla 1) diariamente mediante mediciones del radio de las
Determinación del PICR. El PICR de los tres colonias, con el empleo de una regla graduada,
hongos fitopatógenos por las cepas aisladas y de hasta que el antagonista y la cepa de referencia
referencia se utilizó para evaluar el antagonismo llegaron a cubrir el total de la superficie del
mediante competencia por nutrientes y espacio medio.
entre las cepas de Trichoderma y los tres hongos Los resultados alcanzados se procesaron
fitopatógenos; se calculó mediante la fórmula de mediante un Análisis de Varianza Simple. Las
Worasatit et al. (28), que a continuación se medias del crecimiento lineal se docimaron
muestra: mediante el Test de Rangos Múltiples de Duncan
PICR = [(D1 - D2) / D1] x 100 (p≤0,01), disponible en el paquete estadístico
donde: Statgraphic Plus, Versión 5.0.
D1 - diámetro de las colonias de los hongos
fitopatógenos creciendo en placas Petri con RESULTADOS Y DISCUSIÓN
PDA libre de antagonistas. Aislamiento e identificación. A partir de los
D2 - diámetro de las colonias de los hongos aislamientos realizados se seleccionaron las
fitopatógenos creciendo en placas Petri con colonias que, por sus características morfológicas
PDA enfrentadas con las cepas antagonistas. y culturales, se ajustaron a las descritas para el
El experimento se desarrolló bajo un diseño género Trichoderma (21,22,23). Estos
completamente aleatorizado, con 15 tratamientos aislamientos solo se obtuvieron del
y tres réplicas por tratamiento, con sus agroecosistema Matanzas. En el agroecosistema

FIGURA 2. Esquema general de los enfrentamientos duales entre las cepas antagonistas del
Agroecosistema Matanzas, las cepas de referencia y los hongos fitopatógenos. / General scheme of the
dual clashes between the antagonistic strains from Matanzas Agroecosystem, the reference strains and
the phytopatogenic fungi.
TABLA 1. Escala de Elías et al. (27) para la evaluación del antagonismo in vitro./ Elías et al. (27)
scale for the evaluation of in vitro antagonism.
GRADO CAPACIDAD ANTAGÓNICA
0 Ninguna invasión de la superficie de la colonia del hongo fitopatógeno
1 Invasión de ¼ de la superficie de la colonia del hongo fitopatógeno
2 Invasión de ½ de la superficie de la colonia del hongo fitopatógeno
3 Invasión total de la superficie de la colonia del hongo fitopatógeno
4 Invasión total de la superficie de la colonia del hongo fitopatógeno; esporulación sobre esta

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San Miguel de los Baños no se presentaron unicelulares. Las características culturales de sus
colonias con dichas características. Según sus colonias se observan en la Figura 5.
caracteres morfológicos y culturales, todos los Grupo 3. Identificado como Trichoderma 2T-
aislamientos de Trichoderma se identificaron en aislado, según criterios de Rifai (21), de
tres grupos, que se describen a continuación y se características morfológicas diversas y con
ilustran en las Figuras 3, 4 y 5. tendencia a la incertidumbre, por lo que sus
Grupo 1. Identificado como T. harzianum, integrantes solo pudieron identificarse en la
según criterios de varios autores (21,22,23) y con categoría de género.
las siguientes características morfológicas: Hifas Las cepas con caracteres morfológicos bien
septadas, de 7-10 µm de ancho; conidios definidos y mayor crecimiento radial en medio de
ovalados, unicelulares, de color verde, de 4-5 µm cultivo PDA fueron: T. harzianum 6(A-53)2 en el
de diámetro, en conidióforos hialinos Grupo 1; T. viride 4(TS-3)1 en el Grupo 2 y
ramificados; fiálides sencillas o en grupos; Trichoderma 2T- aislado en el Grupo 3.
clamidosporas unicelulares. Las características Crecimiento lineal micelial de las cepas
culturales de sus colonias se observan en las potencialmente antagonistas de
Figuras 3 y 4. Trichoderma spp.
Grupo 2. Identificado como T. viride, según T. harzianum 3(A-34)2 y Trichoderma 2T-
criterios de varios autores (21,22,23) y con las aislado presentaron las mejores respuestas, con
siguientes características morfológicas: Hifas los mayores crecimientos lineales miceliales
septadas, de 6-9 µm de ancho; conidios promedio (Fig. 6) y un comportamiento similar
unicelulares ovalados, de color verde, de 3-5 µm en cuanto a su crecimiento y desarrollo en medio
de diámetro, en conidióforos hialinos de cultivo PDA. Las diferencias altamente
ramificados; fiálides en grupos; clamidosporas significativas (p≤0,01) de ambas cepas con las
restantes y sus mayores valores de crecimiento

FIGURA 3. Colonias aisladas de Trichoderma harzianum obtenidas a partir del análisis


microbiológico de muestras de suelo./ Trichoderma harzianum colonies isolated from the
microbiological analysis of soil samples.

FIGURA 4. Características culturales de un cultivo puro de T. harzianum en medio PDA a las 96


horas de incubación / Cultural characteristics of T. harzianum pure culture on PDA medium after 96
hours of incubation

FIGURA 5. Características culturales de los aislamientos de T. viride./ Cultural characteristics of T.


viride isolates.

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lineal micelial en PDA (Fig. 6), reafirman la Evaluación del antagonismo in vitro
facilidad de crecimiento y desarrollo de mediante la técnica de cultivo dual.
Trichoderma en medios de cultivo apropiados Competencia por espacio y nutrientes.
(24). Estos valores también se aproximan a los Determinación del PICR
obtenidos para T. harzianum (cepa A-34), del A las 96 horas, Trichoderma 2T-aislado, T.
cepario de mantenimiento del Laboratorio harzianum 6(A-53)2, T. harzianum 3(A-34)2 y T.
Provincial de Sanidad Vegetal de Las Tunas viride 5(TS-3)1 mostraron porcentajes de
(LPSVLT) (29) e indican sus ventajas en la inhibición que no diferían significativamente para
competencia por espacio y nutrientes y para S. rolfsii y Fusarium spp., pero sí con respecto a
ejercer biocontrol por reducción o completa R. solani. Sin embargo, para T. viride 4(TS-3)1
detención del desarrollo micelial de los los PCIR provocados no presentan diferencias
patógenos estudiados (29). significativas entre los tres patógenos (Fig. 7). En
T. viride 4(TS-3)1 ocupó un segundo lugar en general, los mayores PCIR contra los tres
el crecimiento lineal micelial promedio (Fig. 6) y patógenos los mostraron Trichoderma 2T-aislado
presentó diferencias altamente significativas y T. harzianum 3(A-34)2.
(p≤0,01) con el resto de las cepas. T. viride Resultados similares se observaron al evaluar
5(TS-3)1 y T. harzianum 6(A-53)2 mostraron los in vitro diferentes aislados de Trichoderma contra
menores valores de crecimiento lineal micelial R. solani aislada de piña, los que inhibieron el
promedio (Fig. 6), sin diferenciarse crecimiento radial de este patógeno en 40-50 %
significativamente entre ambas, pero sí (p≤0,01) (30) y en el antagonismo de T. harzianum contra
con el resto de las cepas. T. harzianum 6(A-53)2 S. rolfsii (26).
muestra aquí un comportamiento que difiere de la Los enfrentamientos de aislamientos nativos de
cepa T. harzianum A-53 del cepario del LPSVLT T. harzianum contra Fusarium oxysporum, en
(Fig. 6) (29), lo que puede atribuirse a las condiciones in vitro, demostraron la represión del
características propias de los suelos de diferentes crecimiento del patógeno por parte del
procedencias. antagonista (31). Al crecer, el micelio de
Trichoderma spp. compitió por espacio y
nutrientes del medio de cultivo y generó un

Letras desiguales difieren significativamente. Duncan para p≤0,01. N = 25.


FIGURA 6. Crecimiento lineal micelial promedio (medido en cm) de las cepas de Trichoderma
spp. a los siete días./ Average linear mycelial growth (measured in cm) of the strains of Trichoderma
spp. at seven days.

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Letras desiguales difieren significativamente. Duncan para p≤0,01. N= 25.


FIGURA 7. PICR de las cepas de Trichoderma aisladas y de referencia contra los tres patógenos /
PICR of isolated and reference strains against the three pathogens.
efecto indirecto de reducción del crecimiento
radial del patógeno, al ocupar su espacio y
CONCLUSIONES
extraer los suministros de nutrientes (32). • Se aíslan e identifican las cepas autóctonas
Investigaciones sobre el antagonismo de T. Trichoderma 2T-aislado, Trichoderma
harzianum A-34 y T. harzianum A-53 frente a R. harzianum 6(A-53)2 y Trichoderma viride
solani aislado de tallo, hojas y raíces afectadas de 4(TS-3)1 a partir de un suelo ferralítico rojo,
arroz (Oryza sativa L.) permitieron observar que procedente de un agroecosistema de la
ambos aislados del antagonista mostraron una provincia Matanzas; Trichoderma 2T-aislado
actividad antagónica elevada y buenas resultó el antagonista in vitro más eficiente
potencialidades de biocontrol contra este contra los hongos fitopatógenos Rhizoctonia
patógeno (29). Al tratar in vitro con T. viride solani, Fusarium spp. y Sclerotium rolfsii.
(cepas PDBCTV 23 y 32) semillas de garbanzo • Entre las cepas de referencia, Trichoderma
afectadas por R. solani se observó la más baja harzianum 3(A-34)2 presentó el mayor
incidencia de la enfermedad en las semillas antagonismo contra los tres hongos
germinadas; resultado que permite corroborar las fitopatógenos.
posibilidades de antagonismo de la cepa T. viride
• Se demuestra que, tanto las cepas autóctonas
4(TS-3)1 contra el patógeno en cuestión (33). Al
como las de referencia, presentaron diferentes
enfrentar in vitro los aislamientos TWN1, TGN1,
niveles de actividad antagónica in vitro contra
TJP1, TWC2 (T. harzianum) contra S. rolfsii,
los tres hongos fitopatógenos.
todos inhibieron el crecimiento micelial de este
patógeno en más de 50 % y el aislamiento TWN1 REFERENCIAS
(T. harzianum) lo hizo con un por ciento de 1. Hoyos L, Chaparro P, Abramsky M, Chet I,
inhibición altamente significativo (76,3 %) de Orduz S. Evaluación de aislamientos de
este patógeno (34). Trichoderma spp. contra Rhizoctonia solani y
Finalmente, se aprecia que T. harzianum Sclerotium rolfsii bajo condiciones in vitro y
3(A-34)2 y Trichoderma 2T-aislado presentaron de invernadero. Agron. Col. 2008; 26:
las mejores potencialidades para ejercer un buen 451-458.
control in vitro sobre los tres patógenos. (Fig. 7)

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2. Guédez C, Cañizalez LM, Castillo C, Olivar 12. Pérez H, Sanabria N. Control in vitro e in
R. Evaluación in vitro de aislamientos de vivo de Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici
Trichoderma harzianum para el control de con Trichoderma spp. y Bacillus spp. Cursos-
Rhizoctonia solani, Sclerotium rolfsii y foros del XXIII Congreso Venezolano de
Fusarium oxysporum en plantas de tomate. Fitopatología. Caracas, Venezuela. 2013;
Rev. Soc. Ven. Microbiol. 2012; 32 (1):12. [https://sites.google.com/site/
3. Bale J, Van Lenteren JC, Bigler F. Biological cursosforosdelxxiiicongvenfito/congreso/
control and sustainable food production. Phil. resumenes-socializados/trabajos-por-
Trans. R. Soc. B. 2008; 363: 761-776. instituciones/universidad-central-de-
venezuela-ucv] [Consulta: 15 de abril de
4. Mendoza C. Enfermedades fungosas de
2018].
hortalizas. Universidad Autónoma de
Chapingo. 1996; Chapingo, Edo. de México, 13. Infante A, Pineda M, Portillo G. Trichoderma
México, 85 pp. harzianum Rifai como agente biocontrolador
in vitro de enfermedades fungosas asociadas a
5. Guchi E. Disease management practice on
Solanum lycopersicum L. Cursos-foros del
potato (Solanum tuberosum L.) in Ethiopia.
XXIII Congreso Venezolano de Fitopatología.
World Journal of Agricultural Research. 2015;
Caracas, Venezuela. 2013; [https://
3(1): 34-42.
sites.google.com/site/ideafitopatologia2013/
6. Polanco CD, Castro JL. Estudios sobre el home/resumenes-socializados/indice-general-
control biológico de Sclerotium rolfsii. de-resumenes/trichoderma-harzianum-rifai-
Agronomía Tropical. 2005; 27: 539-547. como-agente-de-biocontrolador-in-vitro-de-
7. Espinoza LL, Mendoza C. Etiología de la enfermedades-fungosas-asociadas-a-solanum-
pudrición de raíz y cuello del chile (Capsicum lycopersicum-l] [Consulta: 15 de abril de
annuum L.) ocasionado por el hongo 2018].
Phytophthora capsici en la región de 14. Páez O. Uso Agrícola de Trichoderma. 2006;
Valseguillo, Puebla, México. Fitopatología. [Disponible en: http://www.soilfertility.com/
2001; 30: 47-55. trichoderma/espagnol/index.shtml] [Consulta:
8. Reyes A, Cristóbal J, Ruiz E, Tun JM. 22/5/2016]
Inhibición del crecimiento in vitro de 15. Hernández A, Pérez JM, Bosch D, Castro N.
Fusarium sp. aislado de chile habanero Clasificación de los Suelos de Cuba 2015.
(Capsicum chinensis) con hongos Instituto Nacional de Ciencias Agrícolas.
antagonistas. Fitosanidad. 2012; 16(3): Instituto de Suelos. Ediciones INCA, Cuba,
161-165. 2015; 91p.
9. Kücük C, Kivanc M. Isolation of Trichoderma 16. Google Map. Directorio Cartográfico
spp. and determination of their antifungal, (DICES). 2018; [Disponible en: Disponible
biochemical and physiological features. en: http://mapasamerica.dices.net/cuba/
Turkish Journal of Biology. 2003; 27: 247- mapa.php?nombre=Guanabana&id=23634 ]
253. [Consulta: mayo, 2018].
10. Hoyos L, Duque G, Orduz S. Antagonismo in 17. Bateman R, Carey M. Metodología para la
vitro de Trichoderma spp. sobre aislamientos toma de muestras. Boletín Técnico No. 2.
de Sclerotinia spp. y Rhizoctonia spp. Revista Ediciones CABI, Reino Unido, 1995; 21p.
Colombiana de Ciencias Hortícolas. 2008;
18. Villegas MA. Trichoderma viride Pers.
2(1): 76-86.
Características generales y su potencial
11. Michel AC, Otero MA, Ariza R, Barrios A, biológico en la agricultura sostenible. Orius
Alarcón N. Eficiencia biológica de cepas Biotecnología. Colombia. 2005; [Disponible
nativas de Trichoderma spp., en el control de en: http://www.oriusbiotecnologia.com/site/
Sclerotium rolfsii Sacc., en cacahuate. 16.index.php?id=20,66,0,0,1,0]. [Consulta:
Avances en Investigación Agropecuaria. 2013; 25/4/2016].
17(3): 89-107.

9
Revista de Protección Vegetal, Vol. 33, No. 3, 2018, E-ISSN: 2224-4697

19. Arias M. Hongos antagonistas o 28. Worasatit N, Sivasithamparam K, Ghisalberti


micopatógenos. En: Guía de insumos EL, Rowland C. Variation in pyrone
biológicos para el Manejo Integrado de production, lytic enzymes and control of
Plagas. Corporación para Desarrollo de Rhizoctonia root rot of wheat among single-
Insumos y Servicios Agroecológicos spore isolates of Trichoderma koningii.
Harmonia (Ed.). 2004; 59-62. ISBN: Mycological Research. 1994; 98:1357-1363.
958-33-5875-4. 29. Reyes T, Rodríguez G, Pupo A, Alarcón L,
20. Sandoval I, Stefanova M. Efectividad de Limonta Y. Efectividad in vitro de
biopreparados de Trichoderma spp. en el Trichoderma harzianum Rifai para el
control de los hongos fitopatógenos del suelo. biocontrol de Rhizoctonia solani Kühn y
Boletín Técnico No. 2. Instituto de Pyricularia grisea Sacc. aislados en el cultivo
Investigaciones de Sanidad Vegetal (INISAV). del arroz (Oryza sativa L.). Fitosanidad. 2007;
La Habana, Cuba. 2000; 22 p. 11 (1): 29-33.
21. Rifai MA. A revision of the genus 30. Hernández A, Sierra A, Carr A. Evaluación
Trichoderma. Mycological Papers. 1969; in vitro del antagonismo de especies de
116:1-56. Trichoderma sobre hongos fitopatógenos que
22. Samuels GJ. Trichoderma: Systematics, the afectan las vitroplantas de piña (Ananas
sexual state, and ecology. Phytopathology. comosus (L.) Merr). Fitosanidad. 2006; 10 (2):
2006; 96(2): 195-206. 105- 108.
23. Barnett HL, Hunter BB. 1998. Illustrated 31. Fernández RJ, Suárez CL. Antagonismo in
genera of imperfect fungi. (4th Ed). The vitro de Trichoderma harzianum Rifai sobre
American Phytopathological Society. 1998; St. Fusarium oxysporum Schlecht f. sp.
Paul, Minnesota, USA. pp. 218. passiflorae en maracuyá (Passiflora edulis
Sims var. flavicarpa) del municipio zona
24. Vero S, Mondino P. Curso de Control
bananera colombiana. Rev. Fac. Nac. Agron.
Biológico de Enfermedades de Plantas
Medellín. 2009; 62(1): 4743-4748.
(PEDECIBA Química); Unidad de
Fitopatología. Anexo prácticos. 2003. 32. Caballero AJ, Pocasangre LE, Casanoves F,
[Disponible en: http://www.pv.fagro.edu.uy/ Avelino J, Tapia AC, Ortiz JL. Uso de
fitopato/Curso_CB/Anexo_practicos.html (pp. aislamientos endofíticos de Trichoderma spp.
3)] [Consulta: 16/02/2017]. para el biocontrol del Fusarium oxysporum f.
sp. cubense (Mal de Panamá) raza 1 en
25. Stefanova M, Vázquez L. Características y
vitroplantas de banano del cultivar Gros
uso de bioplaguicidas contra plagas del suelo.
Michel (AAA) en condiciones de invernadero.
Manual para la Adopción del Manejo
Universitas, 2013; 4 (1): 71-82.
Agroecológico de Plagas en Fincas de la
Agricultura Suburbana. Ed. Asociación 33. Srivastava RK, Prasad RD, Rangeshwaran R,
Cubana de Técnicos Azucareros y Forestales Kannan P. Detection and Quantification of
(ACTAF). La Habana. 2011; pp. 245-265. Proteins Induced by Trichoderma in Chickpea-
Rhizoctonia System. Plant Disease Research,
26. Morton DJ, Stroube WH. Antagonistic and
2002; 17(2): 252-255.
stimulatory effects of soil microorganisms
upon Sclerotium rolfsii. Phytopathology. 34. Kumar K, Amaresan N, Bhagat S, Madhuri
1955; 45: 417-420. K, Srivastava RC. Isolation and
Characterization of Trichoderma spp. for
27. Elías RO, Arcos O, Arbeláez G. Estudio del
Antagonistic Activity Against Root Rot and
antagonismo de algunas especies de
Foliar Pathogens. Indian J Microbiol. 2012;
Trichoderma aisladas de suelos colombianos
52(2): 137-144.
en el control de Fusarium oxysporum y
Rhizoctonia solani. Agron. Colomb. 1993;
10:52-61.

10
Revista de Protección Vegetal, Vol. 33, No. 3, 2018, E-ISSN: 2224-4697

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