La práctica de tinción de Gram tuvo como objetivo identificar la composición de la pared celular de bacterias a través de la tinción. Se realizó el procedimiento completo que incluyó la incubación de cultivos, preparación de frotis, tinción con cristal violeta, lugol, alcohol-acetona y safranina, y observación microscópica. Los resultados mostraron que ambos cultivos eran gram positivos.
0 calificaciones0% encontró este documento útil (0 votos)
15 vistas19 páginas
La práctica de tinción de Gram tuvo como objetivo identificar la composición de la pared celular de bacterias a través de la tinción. Se realizó el procedimiento completo que incluyó la incubación de cultivos, preparación de frotis, tinción con cristal violeta, lugol, alcohol-acetona y safranina, y observación microscópica. Los resultados mostraron que ambos cultivos eran gram positivos.
La práctica de tinción de Gram tuvo como objetivo identificar la composición de la pared celular de bacterias a través de la tinción. Se realizó el procedimiento completo que incluyó la incubación de cultivos, preparación de frotis, tinción con cristal violeta, lugol, alcohol-acetona y safranina, y observación microscópica. Los resultados mostraron que ambos cultivos eran gram positivos.
La práctica de tinción de Gram tuvo como objetivo identificar la composición de la pared celular de bacterias a través de la tinción. Se realizó el procedimiento completo que incluyó la incubación de cultivos, preparación de frotis, tinción con cristal violeta, lugol, alcohol-acetona y safranina, y observación microscópica. Los resultados mostraron que ambos cultivos eran gram positivos.
Descargue como PDF, TXT o lea en línea desde Scribd
Descargar como pdf o txt
Está en la página 1/ 19
TECNOLÓGICO NACIONAL DE MEXICO
INSTITUTO TECNOLOGICO JOSE MARIO MOLINA PASQUEL Y HENRÍQUEZ
UNIDAD ACADÉMICA TAMAZULA DE GORDIANO
CARRERA INGENIERIA EN INNOVACIÓN AGRICOLA SUSTENTABLE
MATERIA Microbiología
DOCENTE Guadalupe Ruiz Ibarra
SEMESTRE 4C
ACTIVIDAD Práctica tinción de gram
ALUMNA Aide Dioselin Arias Sosa
FECHA Tamazula de Gordiano Jalisco 24 de Febrero del 2023
1 Revisión de literatura Composición química de la pared celular de las bacterias: La pared celular se sitúa externamente a la membrana plasmática, se sintetiza por la propia célula y está formada fundamentalmente por celulosa, además de otros polisacáridos, glicoproteínas e iones. Distintos tipos celulares presentan diferencias en composición y organización en su pared celular dependiendo de la función que estén desarrollando. De hecho, los diferentes tipos celulares de las plantas se pueden identificar por las características de sus paredes celulares. La pared celular tiene una función mecánica. Es la responsable de la forma y tamaño de las células de las plantas y a su vez la estructura que las protege y las mantiene a modo de exoesqueleto. En la mayoría de los tejidos son importantes para la adhesión intercelular. Como consecuencia, también es responsable de la rigidez de la planta para mantener erguidas sus estructuras aéreas y los órganos que la forman. Por ejemplo, debe resistir las tremendas presiones que ejercen cuerpos vegetales como los de los grandes árboles, pero también tienen que ser flexibles para no acomodarse a la velocidad del viento. Además, ha de ser resistente a las presiones osmóticas que provienen desde el interior celular.
Importancia de la incubación de los microorganismos para su estudio:
La incubación de cultivos microbianos es el proceso de cultivar células microbianas en un entorno controlado, con el fin de promover su crecimiento y desarrollo. Los cultivos microbianos se incuban a menudo en medios de cultivo específicos, diseñados para proporcionar los nutrientes necesarios para el crecimiento de las células. Durante la incubación, se controlan factores como la temperatura, la humedad, la luz y la agitación, para asegurar que las células crezcan en condiciones óptimas. La incubación de cultivos microbianos es importante porque permite a los investigadores y a los profesionales de la industria estudiar y manipular las células microbianas con fines de investigación, diagnóstico y producción. Los cultivos microbianos se utilizan en una amplia variedad de aplicaciones, incluyendo la producción de alimentos, bebidas, productos farmacéuticos, cosméticos y productos químicos. Los equipos utilizados en la incubación de cultivos microbianos varían según la aplicación específica y las necesidades del experimento. Sin embargo, aquí están algunos de los equipos más comunes utilizados en la incubación de cultivos microbianos
2 ● Incubadora: Una incubadora es un dispositivo que se utiliza para controlar la temperatura, la humedad y otras condiciones ambientales para el crecimiento de los cultivos microbianos. Las incubadoras pueden ser de diferentes tamaños y formas, pero en general, están diseñadas para proporcionar un ambiente controlado y estéril para el cultivo de células microbianas. ● Agitador orbital: Un agitador orbital es un dispositivo que se utiliza para agitar suavemente los cultivos microbianos en un recipiente, como una placa de Petri o un frasco. El movimiento orbital proporciona una agitación suave y uniforme, lo que puede ayudar a promover el crecimiento de las células. ● Microscopio: Un microscopio se utiliza para observar las células microbianas durante la incubación. Los microscopios pueden ser de diferentes tipos, incluyendo microscopios ópticos y microscopios electrónicos, dependiendo de la aplicación específica.
Pombal, M. M. P. M. M. Á. (s. f.). La célula. Ampliaciones. Pared celular.
Atlas de Histología Vegetal y Animal. https://mmegias.webs.uvigo.es/5-celulas/ampliaciones/2-pared-
Técnicos, M. I. (2023, 8 marzo). incubación de cultivos microbianos. Mym
Objetivo Identificar con base en la tinción de Gram la composición química de la pared celular y observar las características morfológicas de las bacterias.
4 Resultados y discusión Paso 1: Sacar las cajas petri de la incubadora
Paso 2: Mirar cual de las cajas tuvo mayor contaminación
5 Paso 3: Escojer una caja con un hongo y una bacteria
Paso 4: Prender los mechero para empezar a trabajar
6 Paso 5: Poner una gota de agua destilada en el centro del portaobjetos y dispersar
Paso 6: Con el aza bacteriológica añadir una pequeña muestra
del hongo y dispersar por el portaobjetos
7 Paso 7: Pasar el portaobjetos por el mechero hasta que la muestra esté completamente seca
Paso 8: Poner el asa bacteriológica en el mechero hasta que se
caliente
8 Paso 9: Añadir un agota de agua destilada al segundo portaobjetos y dispersarse por en medio
Paso 10: Con el asa bacteriológica caliente, añadir una
pequeña muestra del cultivo con la bacteria
9 Paso 11: Pasar el portaobjetos con el mechero hasta que seque completamente
Paso 12: Cubrir las dos preparaciones con la solución cristal
violeta y dejar actuar durante un minuto
10 Paso 13: Escurrir el colorante y lavar con bastante agua destilada
Paso 14: Cubrir las preparaciones con lugol y dejarlas actuar
durante 15 segundos
11 Paso 15: Quitar el lugol y enjuagar con agua destilada
Paso 16: Añadír alcohol-aceton las preparaciones y dejarlo
durante 30 a 60 segundos
12 Paso 17: Después del tiempo dicho, lavar el portaobjetos con bastante agua destilada
Paso 18: Ahora cubrir las preparaciones con safranina y
dejarlo por un minuto
13 Paso 19: Después del minuto, lavar con bastante agua
Paso 20: Dejar que las muestras se sequen al aire libre, más o menos por 6 o 7 minutos
14 Paso 21: Ya que este completamente secos, poner un cubreobjetos en cada uno
Paso 21: Observar en el microscopio si es gram positivo o gram
negativo
15 Resultados
Las dos pruebas de
cultivo nos dieron como resultado, gram positivo
Conclusión Para concluir estoy consistente de lo importante que es hacer adecuadamente una practica asi, ya que cada paso es importante para que nuestro resultados salga como debe ser, me di cuenta que la tinción de gram es algo complicado pero a la vez sencillo haciendo las cosas bien, espero poco a poco ir aprendiendo más sobre esto.
Cuestionario 1.- ¿Qué es un frotis? Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados.
16 2.- Investiga el fundamento de cada uno de los reactivos utilizados para la tinción de Gram.
➢ Cristal violeta: De naturaleza básica con afinidad a sustancias
cargadas negativamente como las paredes celulares bacterianas, así se tiñen de morado las bacterias Gram positivas y Gram negativas inicialmente. Enjuague con agua.
➢ Lugol para gram: El lugol lo que hará, será fijar el colorante del cristal violeta a las bacterias, con el alcohol (o mezcla decolorante), lo que haremos será eliminar el cristal violeta de las gram negativas y por último, la safranina, va a teñir solamente a las gram negativas que son las que están decoloradas.
➢ Alcohol acetona: La mezcla alcohol-acetona disuelve la
membrana externa de las bacterias Gram negativas (más fina que la de las Gram positivas) extrayéndose el cristal violeta. Después se tiñen solo las Gram negativas con safranina.
➢ Safranina: Es un colorante catiónico que aporta color rojo a
las estructuras histológicas. Es muy usada en histología vegetal donde tiñe de rojo los núcleos y la lignina de las paredes celulares secundarias, además de otras estructuras. También se usa en las tinciones Gram para bacterias
3.- Explique las propiedades de los colorantes básicos y ácidos
17 Los colorantes (alcalinos) básicos son sales coloreadas básicas. Están positivamente cargadas (catiónicas). Como colorante usado internamente, requieren la ayuda de un complejo colofonia-alúmina, ácido tánico o algún mordiente sintético.
Los colorantes ácidos son compuestos aniónicos que se unen a sustancias
con carga positiva, como las proteínas y las estructuras celulares básicas. antes se utilizan para teñir tejidos y células en microbiología, y se caracterizan por su afinidad hacia los componentes celulares básicos
Bibliografìa IBD GIPUZKOAko UBI: Entrar al sitio. (s. f.).
