2

I. OBJETIVOS

● Cuantificar el Cromo (VI) en una muestra acuosa, utilizando la

espectrofotometría.
● Evaluar la recta de calibrado obtenida para Cromo hexavalente

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

2.1. CROMO EN EL AMBIENTE

El cromo es un elemento natural, que se encuentra en las rocas, plantas, suelos, animales,
en humos y gases volcánicos. Puede reaccionar utilizando distintas valencias y en el
ambiente se encuentra en distintas formas; siendo la más común, la proveniente del cromo
trivalente (Cr III), esta variación del cromo es esencial para los seres humanos en los que
promueve la acción de la insulina. Por otro lado tenemos al cromo metálico o cromo cero
(0) y los derivados del cromo hexavalente (Cr VI), que usualmente son de origen
antropogénico, siendo esta última la más tóxica entre las demás formas (MARN, 2010).

2.2. APLICACIÓN DEL CROMO HEXAVALENTE

Según OEHHA (2016), el Cromo hexavalente (Cr6+) se utiliza en:

● Galvanoplastia

● Fabricación y soldadura de acero inoxidable

● Pigmentos y colorantes

● Revestimientos de superficies

● Curtido de cuero

2.3. MÉTODO PARA DETERMINAR CROMO HEXAVALENTE

El analito se puede determinar por método colorimétrico que se basa en la reacción

del cromo hexavalente con 1,5-difenilcarbazida en medio ácido, lo que produce la
formación de un compuesto desconocido de color rojo violeta. Éste puede ser medido
espectrofotométricamente a una longitud de onda de 540 nm y la absorbancia es
proporcional a la concentración de cromo en la muestra. Para determinar cromo total,
la muestra debe ser sometida a digestión ácida y oxidación con permanganato de
potasio, previo a la reacción con la difenilcarbazida (Severiche y González, 2013).

3
 2.4. INTERFERENCIAS EN EL MÉTODO PARA DETERMINAR CROMO
HEXAVALENTE

Según Cruz-Monzón (2021), indica las posibles interferencias siguientes:

● El cromo (IV) puede reducirse a cromo (III) debido a la presencia de sustancias

reductoras, tales como As2+ , Fe2+, Sb2+, Sb4+, sulfitos, sulfuros.

● Por otro lado, también tenemos al Fe el cual interfiere cuando su concentración

excede 1 mg/L.

● En presencia de Pb2+, se forma cromato de plomo, insoluble, lo que disminuye la

concentración de Cr6+ en solución y genera resultados por defecto.

III. MATERIALES Y REACTIVOS

3.1. Soluciones y/o reactivos

● Solución madre de Cromo (VI): Disolver 0,1410 g de K2Cr2O7 en agua y

diluir a 1000 mL con agua destilada.

Figura 1.
Dicromato de potasio.

Nota: Tomado de “Dicromato de potasio: fórmula, propiedades,

riesgos y usos”, R. Díaz,
2019.
https://www.lifeder.com/dicromato-de-potasio/

4
● Solución patrón de Cromo: Diluir 10 mL de la solución madre a 100 mL
con agua destilada.

Figura 2.
Dicromato de potasio diluido.

Nota: Tomado de “Equilibrio Químico”, B. Chura,

2012.
https://es.slideshare.net/bisus/1-equilibrio-quimico

● Solución de Difenilcarbazida: Disolver 0,150 g de 1,5-difenilcarbazida en 50

mL de acetona. Almacenar al frasco ámbar, en caso de decoloración descartar.

Figura 3.
1,5- difenilcarbazida

Nota: Tomado de “Estructura del acomplejante 1,5-difenilcarbazida”, A. Hormaza.

https://www.researchgate.net/figure/Figura-1-Estructura-del-acomplejante-1-5-dife
nilcarbazida_fig1_262754382

5
 ● Solución de H2SO4 0,2000 N

Figura 4.
Ácido sulfúrico

Nota: Tomado de “Ácido sulfúrico 0.5 M H2SO4

(1.0N) en solución acuosa ≥99.9% Reag. Ph. Eur.
solución volumétrica, Fluka”, Avantor, 2021.
https://es.vwr.com/

3.2. Equipos y/o instrumentos

● Fiolas de 50, 100, vasos de 80 y 400 mL

Figura 5.
Fiolas de Laboratorio.

Nota: Tomado de “Fiolas De Vidrio De 50 Ml Clase A”,

Mercado Libre, 2021.
https://articulo.mercadolibre.com.pe

6
 ● Pipetas de 5 y 10 mL

Figura 6.
Pipetas graduadas.

Nota: Tomado de “Pipetas graduadas”, Suministros Clínicos Lanau,

2021. https://weblanau.com/pipetas-desechables/1625-pipetas-graduadas

● Equipo Colorimétrico: Puede utilizarse un espectrofotómetro para usar a 540

nm con un paso de luz de 1 cm, o mayor.

Figura 7.
Espectrofotómetro y muestras de laboratorio.

Nota: Tomado de “Espectrofotómetro de rango visible V-1100”,

Microscopio Mania.com, 2021. https://www.microscopiomania.com

IV. PROCEDIMIENTO

Según Cruz (2021), en Laboratorio de Análisis Instrumental, se sigue los siguientes

pasos:

A. Preparación de la recta de calibración de Cr (VI)

1. Tomar 6 matraces de 125 mL y numerarlas.

7
 2. Depositar volúmenes adecuados para tener 0,00; 0,05; 0,10; 0,15; 0,20 y
6+
0,25 ppm 𝐶𝑟 .

3. Agregar unos 40 mL de agua destilada.

4. Agregar 5 gotas de 𝐻 𝑃𝑂 y 1 gota de 𝐻 𝑆𝑂 cc. Agitar.

3 4 2 4

5. Usando el pH-metro, verifique que el pH esté entre 1,6 - 2,2.

6. Agregar gota a gota una solución de 𝐻 𝑆𝑂 0,200 N hasta ajustar el pH

2 4

entre 1,6 - 2,2.

7. Calentar a ebullición cada matraz hasta concentrar a un volumen aprox de 30

mL. Enfriar.

8. Trasvasar cuantitativamente a respectivas fiolas numeradas de 50 mL.

9. Adicionar 2 mL de la solución de Difenilcarbazida. Agitar.

10. Dejar reposar por 5 a 10 min para que desarrolle el color. Aforar con agua
destilada.

11. Utilizando la fiola N° 1 (blanco) calibrar el equipo a cero usando una λ = 540
nm.

12. Leer secuencialmente cada una de las fiolas anotando sus valores de
absorbancia.

13. Graficar la Absorbancia vs concentración de Cr (VI).

14. Obtenga la ecuación de recta que ajusta los valores a la ley de Beer.

B. Preparación y medición de la muestra

a. Oxidación del cromo trivalente en muestra digerida:

1. En vaso de 125 mL, depositar 50 mL (V1) de muestra digerida en

𝐻𝑁𝑂
3

2. Agregar 5 gotas de 𝐻 𝑃𝑂 y 1 gota de 𝐻 𝑆𝑂 cc. Agitar.

3 4 2 4

3. Usando el pH-metro, verifique que el pH esté entre 1,6 - 2,2.

8
 4. Agregar gota a gota una solución de 𝐻 𝑆𝑂 0,200 N hasta ajustar el
2 4

pH entre 1,6 - 2,2.

5. Calentar la mezcla a ebullición.

6. Agregar gota a gota solución 𝐾𝑀𝑛𝑂 hasta coloración grosella

4
permanente.
7. Calentar la solución a ebullición.

8. Agregar 1 mL de azida de sodio, (𝑁𝑎𝑁 ), hasta decoloración.

3

9. Enfriar y adicionar 5 gotas de 𝐻 𝑃𝑂 cc.

3 4

10. Concentrar o diluir hasta regresar al volumen de 50 mL(V1).

b. Medición del cromo total en muestra digerida:

1. Tomar una fiola de 50 mL.

2. Depositar 10 mL de muestra digerida ajustada a pH 2 con 𝐻 𝑆𝑂

2 4

0,20N.

3. Agregar agua destilada hasta aproximadamente la mitad. Agitar.

4. Adicionar 2 mL de la solución de Difenilcarbazida. Uniformizar.

5. Dejar reaccionar entre 5 a 10 min.

6. Aforar a la marca con agua destilada.

7. Usando el blanco, calibrar el instrumento a λ = 540 nm.

8. Leer la absorbancia de muestra.

9. Usando la absorbancia leída y la recta de calibración, determine la [

6+
𝐶𝑟 ] total.

10. Determinar la concentración real usando el factor de dilución

correspondiente.

9
 Para la presente marcha tenemos:

𝑝𝑝𝑚 𝐶𝑟
𝑟𝑒𝑎𝑙 = 𝑝𝑝𝑚 𝐶𝑟
𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑜
𝑥 ( 𝑚𝐿 𝑓𝑖𝑜𝑙𝑎 𝑎𝑓𝑜𝑟𝑜
𝑚𝐿 𝑎𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎

𝑝𝑝𝑚 𝐶𝑟
𝑟𝑒𝑎𝑙 = 𝑝𝑝𝑚 𝐶𝑟
𝑔𝑟á𝑓𝑖𝑐𝑜 𝑥 ( )50
10

V. CÁLCULOS

DATOS EXPERIMENTALES

1. Determinación de la masa teórica a tomar de la K2Cr2O7 para la preparación teórica

de 100 mL de una solución que sea de 350 ppm Cr ( VI )

Tabla 1.
Masa molar del reactivo K2Cr2O7

ppm Cr (Vl)requerida 350

Vol.S. Stock 0.1

Masa molara K2Cr2O7 294.2

Masa molar Cr6+ 104

Pureza(%) 99.4

K2Cr2O7 a tomar g 0.0990

+6
*Nota: la tabla representa los datos de Cr utilizados para
calcular la masa teórica a tomar de la K2Cr2O7

2. Determinación de la [ ] real para un peso real de 0,0945 g K2Cr2O7

Tabla 2.
ppm de Cr+6 real preparado

Masa tomada K2Cr2O7 g 0.0945

volumen a preparar L 0.1

Pureza K2Cr2O7 (%) 99.4

Masa fórmula Cr+6 104

Masa molar K2Cr2O7 294.2

ppm, Cr+6 real preparado 332.0541

10
3. Preparación de 50 mL de solución de trabajo de 20 ppm Cr(VI):

C1 *V1 = C2* V2

Tabla 3.
volumen inicial a tomar de la solución

ppm, Cr+6 inicial real preparado 332.0541

ppm, Cr+6 (final )requerido 20

Vol final a separar S. Trab (mL) 50

vol. Inicial a toma (mL) 3.0116

Vol inicial a tomar (uL) 3011.5573

*Nota: la tabla representa los datos de volumen inicial de Cr6+

4. Determinación de [ ] real ajustando el volumen teórico a 0,70 mL

C1* V1 = C2 * V2

Tabla 4.
ppm de Cr+6 de la solución de trabajo

ppm, Cr+6 inicial real preparado 332.0541

vol. Inicial a toma (mL) 0.7

Vol. final a preparar S.trab (mL) 50

ppm Cr6+ sol. Trabajo 4.6488

6+
*Nota: la tabla representa los datos de ppm de Cr de la solución de trabajo

5. Preparación teórica de las soluciones estándar para recta de calibrado de Cr, usando
solución de trabajo real

Aplicando ecuación de dilución: C1 V1 = C2 V2

Tabla 5.
volumen a tomar de la solución (mL)

Std ppm final Aforar a pp inicial Vol a Vol. A

teórico tomar tomar (uL)
(mL)

1 0 50 332.0541 0.0000 0.0000

2 0.05 50 332.0541 0.0075 7.5289

11
 3 0.1 50 332.0541 0.0151 15.0578

4 0.15 50 332.0541 0.0226 22.5867

5 0.2 50 332.0541 0.0301 30.1156

6 0.25 50 332.0541 0.0376 37.6445

*Nota: la tabla representa los datos de volumen a tomar (uL) en base al pp inicial.

6. Determinación real de las concentraciones a los valores ajustados de volumen

Tabla 6.
ppm de Cr6+ real corregida

Std Vol. Redond. Vol. Redond. ppm inicial Aforar a ppm Cr6+
A tomar (uL) A tomar (real)
(mL)

1 0 0 4.6488 50 0.0000

2 0.00001 0.01 4.6488 50 0.0009

3 0.00002 0.02 4.6488 50 0.0019

4 0.00002 0.02 4.6488 50 0.0019

5 0.00003 0.03 4.6488 50 0.0028

6 0.00004 0.04 4.6488 50 0.0037

*Nota: la tabla representa los datos de concentración de Cr6+ en ppm real a los valores
ajustados de volumen

12
 7. Lecturas obtenidas en el espectrofotómetro para estándares y muestra
Volumen de muestra de agua tomada para análisis = 10 mL

Tabla 7.
Datos obtenidos en el espectrofotómetro para estándares y muestra

Std ppm Cr6+ (real) Abs

2 0.0009 0.016

3 0.0019 0.035

4 0.0019 0.051

5 0.0028 0.067

6 0.0037 0.086

Muestra 0.052
*Nota: la tabla representa los datos de la Absorbancia y concentración de
Cr6+ en ppm real

VI. RESULTADOS
Finalmente, nos guiamos de la tabla 7 para la construcción de la recta de calibración para
el Cromo Hexavalente.

Figura 8
Recta de calibrado final.

*Nota: Obtenido de los valores de ppm Cr+6 (real) vs Absorbancia para formar la curva de
calibrado. Microsoft Excel, 2021.

13
 Asimismo, determinamos la concentración de Cromo Total y Cr6+

+6
𝐶𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 𝐶𝑟 = 0. 3423𝑋 − 0. 0003

0. 052 = 0. 3423𝑋 − 0. 0003

𝑋 = 0. 1528

Sin embargo, tomando en cuenta el factor de dilución en nuestro caso, se tendrá que:

+6
𝐶𝑜𝑛𝑐. 𝐶𝑟 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 = (0. 1528) ×
𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑎𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑖𝑑𝑎
𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑎𝑙í𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎 𝑑𝑖𝑟𝑒𝑐𝑡𝑎
+6
𝐶𝑜𝑛𝑐. 𝐶𝑟 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 = (0. 1528) × ⎡ 50 ⎤
⎣ 10 ⎦
2−
𝐶𝑜𝑛𝑐. 𝑁𝑂 𝑓𝑖𝑛𝑎𝑙 = 0. 76

VII. CONCLUSIONES

● Se determinó mediante los cálculos realizados que la concentración total

+6
de 𝐶𝑟 es de 0.1528 pero teniendo en cuenta el factor de dilución se
obtuvo finalmente un valor de 0.76.

● Se realizó la recta de calibrado con todos los valores de ppm +6

𝐶𝑟 y
2
absorbancia donde se obtuvo una ecuación de 0. 3423𝑋 − 0. 0003 y un
𝑅
de 0.9993.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Cruz, A. (2021). Práctica 7: Determinación espectrofotométrica de Cromo en

agua, Método de la difenilcarbazida.
https://drive.google.com/file/d/1JRCDKIcpzYXypgHs0jUFAU4aYgkbDzQk
/view

Doria, G., Paz, P. y Hormaza, A. (2013). Estandarización de la difenilcarbazida

como indicador y acomplejante en la identificación de cromo hexavalente
- Cr (VI). Rev. Producción + Limpia, 8(2), 9-20.
http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1909-045520
13000200002

14
Ministerio de Ambiente y Recursos Naturales. (2010). El cromo hexavalente, la
aplicación y riesgo ambiental.
https://www.marn.gob.gt/Multimedios/1992.pdf

OEHHA. (2016). Efectos del Cromo Hexavalente Sobre la Salud.

https://oehha.ca.gov/media/downloads/faqs/sphexchromiumairfact111616. pdf

Severiche, C. y González, H. (2013). VERIFICACIÓN ANALÍTICA PARA LAS

DETERMINACIONES DE CROMO HEXAVALENTE EN AGUAS POR
ESPECTROFOTOMETRÍA. Rev. Ing. USBMed, 4(1), 22-26.
https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=&ca
d=rja&uact=8&ved=2ahUKEwiz8pbqhvj0AhUhHbkGHeZUDW4QFnoECC
EQAQ&url=https%3A%2F%2Ffanyv88.com%3A443%2Fhttps%2Fdialnet.unirioja.es%2Fdescarga%2Farticul o
%2F4694625.pdf&usg=AOvVaw3Alfad-vS6I-dewuFBysCX

15