Facultad de Ciencias y Filosofía Alberto Cazorla Talleri

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y FISIOLÓGICAS

GUÍA DE PRÁCTICAS
Biología: Ingeniería Biomédica.

Laboratorio N°1:
Microscopio compuesto I: partes, enfoque y mediciones de células.

Grupo: 13
Nombres: - Jose Fernando Mamani Condori
- Miguel Eduardo Isidro Baez
- Edgar Antonio Aguilar Ocas
Coordinador:
Dr. Víctor Neyra Chagua.
Docentes:
Mg. Luis Rossi.
Mg. Denis castillo
Lic. Xiomara Merino

Primer semestre 2023

Lima – Perú
Práctica N°01: MICROSCOPIO COMPUESTO I: PARTES, ENFOQUE Y MEDICIÓN.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
 Reconocer las partes de un microscopio óptico.
 Conocer la función de cada parte componente y los cuidados en su uso.
 Analizar imágenes y establecer los sistemas de medición en microscopia.

INTRODUCCIÓN
El entendimiento de la detallada arquitectura moderna de la célula ha sido posible gracias a la
microscopía. Dado que no existe una correcta visión de la célula, es importante entender las
características de las técnicas de visualización de las células, los tipos de imágenes que éstas producen
y sus limitaciones.

La naturaleza de las imágenes depende del tipo de microscopio utilizado y de la forma en la que la
muestra ha sido tratada. Cada técnica es diseñada para enfatizar las características estructurales de la
célula.

El microscopio óptico, el más común de los microscopios usados en la actualidad, contiene algunos
lentes que magnifican la imagen del espécimen bajo estudio. Sin embargo, la más importante
propiedad de cualquier microscopio es su poder de resolución, o resolución, es decir, su habilidad
para poder distinguir entre dos objetos muy cercanos.

ACTIVIDAD ASINCRÓNICA:

1. Materiales:
- Microscopio compuesto de Luz Interactivo.
- Enlace: https://www.ncbionetwork.org/iet/microscope/

2. Procedimiento:
2.1. Uso del Microscopio Compuesto de Luz interactivo:

Paso 1: Dirígete a la sección de GUIDE en el simulador de microscopio virtual e ingrese a la

sección MICROSCOPE CARE. Explora sobre el manejo, cuidado y almacenamiento del
microscopio.

Paso 2: Para revisar la terminología propia de las partes del microscopio, sus funciones y
entendimiento de la información incluida en cada parte del microscopio, dirígete a la sección
OVERVIEW del microscopio virtual. Allí podrás identificar algunas de las partes mecánicas y
algunas de las partes ópticas del microscopio.
 Paso 3: Observa con detenimiento la sección OBJECTIVE LENSES y la sección IMMERSION
OIL LENS. Para revisar los detalles en los objetivos del microscopio y su cuidado.

Paso 4: Utiliza la sección LEARN para ayudarte a completar las partes del microscopio en la
Ilustración 1. Haz click en cada parte para conocer su nombre y función.

Paso 5. Revisa el cuestionario del laboratorio (refuerza tus respuestas durante el desarrollo del
laboratorio presencialmente).

ACTIVIDAD PRESENCIAL EN EL LABORATORIO:

1. PARTES DEL MICROSCOPIO OPTICO COMPUESTO:

Partes mecánicas: Partes ópticas:

- base - ocular: 10X, 15X.
- brazo - objetivos: 4X, 10X, 40X, 100X
- platina - condensador
- carrito o vernier - espejo o
- tubo portalentes - foco
- revolver
- diafragma
- anillo portafiltro
- tornillo macrométrico
- tornillo micrométrico
- base del espejo o
- interruptor del foco de luz
- regulador intensidad de luz

COLOQUE LOS NOMBRES DE CADA PARTE DEL MICROSCOPIO SEÑALADAS (Usa la

información del material asincrónico y la información obtenida durante el desarrollo de la
práctica presencialmente):
Ilustración 1: Microscopio óptico. Completar sus partes.
2. MATERIALES

- Microscopio compuesto de Luz, Nikon E100.

- 6 - 8 láminas porta objetos por grupo
- 6 - 8 lámina cubreobjetos por grupo
- 10 goteros con agua
- Papel periódico
- Papel lente
- 10 tijeras
- Laminas preparadas
- Lamina patrón

3. PROCEDIMIENTOS

3.1. Asegúrate de revisar nuevamente la sección de uso del Microscopio Compuesto de Luz
en tu material asincrónico, en esta sección se recapitulará dicha información.

A. ¿Cómo debo movilizar correctamente el microscopio? Movilización:

B. ¿Cómo debo limpiar los lentes del microscopio? Limpieza:

3.2. Uso del Microscopio Compuesto de Luz: Frente a ti encontrarás un microscopio. En este
punto ya eres capaz de identificarlo.
A. Identifica los distintos componentes del microscopio, tanto las partes mecánicas como ópticas
(ayúdate de la Ilustración 1 y la orientación de tu profesor).
B. Localiza:
a. El interruptor, y enciende tu microscopio, asegurándote que la lámpara no esté en la
máxima potencia. Al finalizar apaga la lámpara.
b. Los lentes oculares por lo general tienen un aumento de 10X. En cada uno hay un anillo
que gira, sirve para regular la diferencia de dioptrías entre los 2 ojos.
c. El revólver sostiene 4 lentes objetivos. Cada objetivo presenta un anillo de color,
colócalo en el cuadro:

OBJETIVOS ANILLO DE COLOR

4X (panorámico) ROJO
10X AMARILLO
40X AZUL CELESTE
100X (inmersión) BLANCO

Al iniciar la práctica tu microscopio debe estar en el objetivo de menor aumento, de no

ser así mueve o gira el revolver de modo que el objetivo haga clic, lo que significa que
estará alineado permitiendo el paso de la luz desde la fuente luminosa hasta el ojo del
observador. Al finalizar la práctica posiciona el lente de menor aumento alineado con la
fuente de luz.
d. Observa por los oculares. El círculo blanco de luz que ve es el CAMPO DE VISION.
e. Localiza el diafragma, muévelo en ambas direcciones, mira por los lentes notando el
cambio en la intensidad de luz.
f. Si tu microscopio presenta una estructura filamentosa en el campo, esta sirve de puntero,
de lo contrario considera el campo como si fuese la esfera de un reloj analógico, esto te
ayudará a identificar lo observado por tus compañeros.
g. Los tornillos macrométrico y micrométrico sirven para controlar el enfoque por un
 movimiento de la platina. Se enfoca primero con el macrométrico que realiza
movimientos largos y controla el enfoque grueso y luego el micrométrico para el enfoque
fino. El tornillo macrométrico solo se debe usar con el objetivo de 4X.
h. Las perillas de control de ejes coordenadas se ubican debajo de la platina.

3.3. Amplificación total del Microscopio Compuesto de Luz:

La amplificación total del microscopio se obtiene multiplicando el aumento del ocular por el aumento
del objetivo que está en posición vertical. Por lo tanto, la amplificación total del microscopio es de
1000X al usar el ocular de 10X y el objetivo de 100X.

3.4. Observación de una muestra:

1. Toma una letra "a”, y colócala en el centro de una lámina portaobjetos limpia. Usa un gotero para
colocar una gota de agua sobre la letra.
2. Toma un cubreobjetos limpio con los dedos, asegúrate de cogerlo por los bordes para evitar
engrasarlo. Apoya primero un lado del cubreobjetos y lentamente baja el resto sobre la letra "a"
para evitar que queden burbujas atrapadas entre el cubreobjetos y la lámina portaobjetos.
3. Coloca tu muestra en la platina del microscopio. Cerciórate (mirando desde afuera y no por el lente
ocular) de colocar la letra "a" en su posición normal de lectura. Ubique la letra "a" debajo de los
lentes objetivos, comenzando con el de menor aumento, con la ayuda del vernier o carrito.
4. Mira el microscopio por un costado y mueve la perilla macrométrica de manera que acerque el
lente objetivo lo más próximo a la lámina sin tocarla. Mira a través del lente ocular y mueve la
perilla macrométrica para alejar el lente objetivo de la muestra hasta que enfoque (hasta que la
imagen se vea). Para evitar que choque el lente objetivo con la lámina, nunca bajes el lente
objetivo hacia la platina con la perilla del ajuste macrométrico mientras observas a través del
ocular. Mueve la perilla del ajuste micrométrico para lograr un enfoque más fino.
5. Puedes mover el diafragma para ajustar la cantidad de luz de manera que veas el objeto claramente
y con el contraste adecuado. Al observar por el ocular del microscopio puede haber una raya o
pelo, el cual sirve de puntero para señalar detalles dentro de la muestra.
6. Observando la letra "a”, mueva las perillas de coordenadas de la platina y nota en qué sentido se
desplaza la imagen con respecto a la lámina.
7. Una vez enfocada la letra "a" con el objetivo de menor aumento, mueve la lámina con el vernier
hacia la derecha, la izquierda, arriba y abajo. Observa cuidadosamente el movimiento desde un
costado del microscopio y a través del ocular.
8. Estando bien enfocada la letra "a", mueve el revólver para colocar el objetivo seco de mayor
aumento 40X (asegúrate de escuchar que haga clic). Mira a través del lente ocular y realiza el
enfoque fino con la perilla del ajuste micrométrico. Nunca uses el tornillo macrométrico cuando
utilices el lente objetivo de mayor aumento (40X - 100X). Si no es posible enfocar, vuelve al lente
objetivo de menor aumento y enfoca nuevamente.
9. ¡No utilizaremos el lente de inmersión 100X en la presente práctica!

10. Dibuja cómo se ve la letra “a” a través del menor objetivo y del mayor objetivo (40X)
AUMENTO TOTAL: _____40X______ AUMENTO TOTAL:
_____400X______

Objetivo: ____4X___ Objetivo: ____40X_____

11.Realiza ahora la observación de las láminas preparadas que ha recibido tu grupo y obsérvalas a una
amplificación total de 40X, 100X y 400X. Dibuja tus observaciones en cada aumento.

Muestra: _lamina de muestras Muestra: _Lamina_ Muestra: Lamina_

Objetivo: ______4x_____ Objetivo: _______10x____ Objetivo: _____10x______
Aumento total: ___40x____ Aumento total: __100x_____ Aumento total: ___100x__

3.5. Mediciones en Microscopia

Todo lo que observamos a través del microscopio tiene una medida en nuestro sistema métrico. Por
ello debe usarse una escala de medición apropiada que permita calibrar nuestro microscopio, esta
escala la constituye la lámina patrón, en la cual cada unidad de la lámina mide 10um (0.01mm).

Esta escala se usa en el microscopio para calibrar unidades de medida en cada objetivo, le damos
unidades de medida a una escala sin unidades. Esta escala se puede colocar en el ocular donde se le
denomina ocular micrométrico.

Ilustración 2. Lamina patrón. Ilustración 3. Ocular micrométrico.

Ilustración 4. Lámina patrón y ocular micrométrico.

Durante la práctica el profesor encargado hará uso de un microscopio especial que tiene una cámara
incorporada y a un programa de medición con el cual se hará lo siguiente:
1. La calibración con la lámina patrón para un objetivo del microscopio, y luego, con un
programa especial y usando un monitor de computadora se harán mediciones de las muestras
que son colocadas.

Ilustración 5. Microscopio compuesto “trinocular” con cámara acoplada.

4. CUESTIONARIO:

A. Cuando se está limpiando el objetivo de inmersión de 100X, ¿Qué debo usar? ¿Qué pasa
si utilizo algún otro material no recomendado?
- El lente de inmersión se limpia con papel lente de microscopio de alta calidad y alcohol
isopropílico. De lo contrario si se utiliza algún otro material dicho lente podría llegar a
rayarse o quedar con residuos en la lente lo cual afectaría la calidad de imagen.

B. ¿Qué significa la apertura numérica en un microscopio?

- Es una medida de la capacidad del objetivo para poder captar los rayos refractados por las
estructuras finas de las cuales está constituido la muestra (cantidad de luz que puede captar
y luego enviar a la preparación). En otras palabras, podemos decir que es el poder de
formar imágenes que muestren detalles finos de la muestra, es el poder de resolución del
objetivo. Por eso la apertura numérica de un objetivo guarda relación directamente
proporcional con el aumento del objetivo y de mostrar mayores detalles de este.

C. Dentro de la nomenclatura incluida en los lentes objetivos, ¿qué significa la “X” o “XR”?
- La “X” representa la amplitud de la muestra, en otras palabras, el número de veces que es
aumentado. Por ejemplo “4X” nos indica que la muestra está siendo observada 4 veces su
tamaño original. Por otro lado, “XR” por su significado “extra refractive”, puede significar
“reforzado” y se usa para indicar que el objetivo está diseñado con una mayor corrección
de aberraciones ópticas, en otras palabras, se usa para decir que la muestra se verá más
nítida de mayor calidad y resolución.
D. ¿Qué nombres reciben los lentes objetivos en base a su función? Incluye el código de
color de cada magnificación.

- 4X: recibe el nombre de “Low Power”, baja potencia, se usa para poder observar mejor los
objetos grandes. Se le representa con un anillo de color rojo.
- 10X: recibe el nombre de “Medium Power”, media potencia también conocido como
 objetivo de enfoque, el cual se utiliza para poder observar objetos mas de tamaño mediano. Se
le representa con un anillo de color amarillo.
- 40X: recibe el nombre de “High Power”, alta potencia, el cual se utiliza para poder
visualizar finas estructuras en la muestra. Se le representa con un anillo de color azul celeste.
- 100X: recibe el nombre de “Oil Inmersion Objective”, objetivo de inmersión en aceite, el
cual se utiliza para visualizar muestras transparentes. Se le representa con un anillo de color
blanco.

E. ¿Cómo se realiza el cálculo del aumento total utilizado en una muestra? Calcula el
aumento total para un lente con aumento 5X con un objetivo de 40X.
- El cálculo del aumento total de una muestra se realiza multiplicando el aumento de
aumentos del lente con el número de aumentos del objetivo (Aumento total = Aumento
del lente*Aumento del objetivo). Para un lente con aumento 5X y un objetivo 40X se
realiza el calculo (5X*40X = 200X) dándonos como resultado que el aumento total es de
200X

F. A pesar de haber mejorado en la calidad de los lentes a través del tiempo, cual es la
principal limitante en el microscopio compuesto por lo cual no se pueda mejorar la
resolución.

G. ¿Cuáles serían dos formas de obtener las métricas de una muestra en el microscopio
óptico? Describe el procedimiento.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Narvaez D. (2003) “Microscopia: Herramienta para estudiar células y tejidos” Texto
electrónico. Facultad de Medicina. Universidad de los Andes. Venezuela.
http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo4_6.htm

2. Microscopio compuesto. Website: https://www.ncbionetwork.org/iet/microscope/