Guia Práctica Lab. Sem 02. Reconocimiento de Macromoleculas

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FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE

PRÁCTICA

RECONOCIMIENTO DE MACROMOLÉCULAS
I. INTRODUCCIÓN.

Los docentes de Biología necesitan que sus alumnos entren en contacto con el laboratorio, ya que
es allí donde comprenderán los conceptos explicados en la teoría. Para esto, son necesarias una
serie de prácticas acordes con lo estudiado. Es por esto que, en el presente informe se analiza y
explica los experimentos realizados en laboratorio. Pero antes, se da la definición de conceptos
importantes a tener en cuenta. El almidón es una sustancia que utilizan las plantas como forma de
almacenar energía. Para detectar la presencia de este compuesto se utiliza una sustancia llamada
lugol. En presencia de almidón, el lugol reacciona cambiando de color marrón (u ocre) al color violeta
Para determinar la presencia los azúcares reductores existen varias pruebas cualitativas y
cuantitativas, como la prueba Benedict, el reactivo de Fehling, el reactivo de Tollens, encontrados
normalmente en laboratorios. La presencia de un lípido se puede detectar fácilmente por su
insolubilidad en agua. Además, se puede detectar si un lípido es saponificable, mediante la reacción
de saponificación, o formación de jabón. Los ésteres de ácidos grasos sufren hidrólisis en presencia
de un álcali. Las proteínas , debido al gran tamaño de sus moléculas, forman con el agua soluciones
coloidales. Estas soluciones pueden precipitar con formación de coágulos al ser calentadas a
temperaturas superiores a los 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas, ácidos, alcohol, etc.

II. OBJETIVOS
● Identificar la presencia de azúcares reductores a través de la reacción de Fehling.
● Identificar lípidos por Sudán III y demostrar la saponificación.
● Reconocer el proceso de desnaturalización de las proteínas por acción de metales
pesados, temperatura y pH.
● Reconocer la estructura química de los ácidos nucleicos ADN y ARN.
● Verificar la solubilidad de los lípidos
● Identificar y reconocer los hidratos de carbono, lípidos y proteínas mediante reactivos de
laboratorio.
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II. PROCEDIMIENTO:

DETERMINACIÓN DE AZÚCARES REDUCTORES.


1. Coloque en una gradilla 5 tubos de ensayo rotulados.
2. Luego proceda según el cuadro siguiente:

Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5


Sol. Glucosa 2 ml. 1 ml
Sol. Almidón 2 ml 1 ml
Lugol 2 gotas 2 gotas
Frugos o Pulp 1 ml
Fehling A 1 ml 1 ml 1 ml
Fehling B 1 ml 1 ml 1 ml

Tubos 1 y 2 � Observar, esquematizar y explicar.


Reconocimiento de la Solución de Glucosa y la solución de Almidón:
En primer lugar, en dos tubos de ensayo se coloca 2 ml de cada sustancia. En el tubo G, glucosa +
lugol no se tiñe, no hay reacción (puede ser que uno de mis compañeros han agregado gotas de
mas, por eso se ve de color amarillo); En el tubo A, el almidón + lugol se tiñe de color violeta
oscuro.
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Tubos 3, 4 y 5. Calentar en baño María. Observar, esquematizar y explicar.

Reconocimiento de azúcares reductores:


En primer lugar, en tres tubos de ensayo previamente rotulados se coloca 1 ml de cada sustancia: En el tubo
3 (almidón), en el tubo 4 (glucosa) y en el tubo 5, frugos (fructosa). Luego, a cada una de las soluciones se
les agrega una gotas del reactivo Fehling A y del reactivo Fehling B; automáticamente las sustancias se
teñirán de un color verde oscuro. Después, estas deberán ser llevadas a baño maría durante 5 minutos, esto
permitirá reconocer los azúcares reductores tiñendo las mezclas a un color anaranjado o rojizo, como el
caso de la glucosa y la fructosa.
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DETERMINACIÓN DE LÍPIDOS:
a) RECONOCIMIENTO DE LÍPIDOS
- Rotular dos tubos de ensayo

- Luego proceda según el siguiente cuadro:

Tubo 1 Tubo 2
Aceite 3 ml

Frugos 3ml

SUDAN III 3 gotas 3 gotas


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- Observar, esquematizar y explicar.

En estas mezclas, el sudán solo hace efecto al contacto con el aceite,


más no ante el contacto con el frugos.
Fundamente la acción del SUDÁN III:
Una vez que el Sudan III se ha unido a los lípidos, cambia de color y
adquiere un tono rojo intenso o rojo anaranjado, dependiendo de la
concentración de lípidos y la forma de la muestra. Este cambio de color
es fácilmente observable y se utiliza como indicador de la presencia de
lípidos en la muestra.

b) SAPONIFICACIÓN
1. En un tubo de ensayo colocar 0.5 cc de aceite.
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2. Añadir 1 o 2 cc de alcohol para facilitar la saponificación.

3. Agregar 5 a 6 gotas de solución de hidróxido de sodio concentrado.

4. Calentar por unos minutos (agitando con precaución)


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5. Dejar enfriar y añadir 5 cc. de agua.

6. Agitar fuertemente el tubo de ensayo.


7. Observar la formación de espuma que indica la presencia de jabón.

8. Fundamente la reacción química de la saponificación.


● La saponificación se utiliza para convertir grasas o aceites (triglicéridos) en jabón y
glicerina. La reacción química general de la saponificación puede representarse
como:
Triglicérido (aceite) + Hidróxido de Sodio → Glicerina + Jabón (Sales de ácidos grasos.
DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS:
- Se prepara una solución de albúmina (una clara de huevo en 20 volúmenes de agua), se
vierten en cuatro tubos de ensayo 2 ml de solución de proteína respectivamente.

- Luego proceda según el siguiente cuadro:

T1 T2 T3 T4
Ovoalbúmina o 2 ml. 2 ml. 2 ml. 2 ml.
albúmina sérica.
Ácido acético 1-3 gotas
Sulfato cúprico 1-3 gotas
5%
Nitrato de plata 1-3 gotas
3%
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Calentar 1 min.

- Observar y explicar el resultado obtenido.


- Fundamentar la desnaturalización.
T1: Al agregar ácido acético a la ovoalbúmina se
produce un proceso de desnaturalización de la
proteína debido a la alteración de estructura
tridimensional de la proteína dando así un color
amarillento de
T2: La desnaturalización de la ovoalbúmina inducida
por el sulfato cúprico puede deberse a varios
factores, incluidos cambios en el pH y las
interacciones entre iones y grupos cargados en la
proteína obteniendo un color verde.
T3: Cuando se mezcla la ovoalbúmina con nitrato de
RECONOCIMIENTO DE LA ESTRUCTURA QUÍMICA DEL ADN Y ARN

a) Observe las siguientes imágenes, describa y señale las partes de la estructura química
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Podemos encontrar lo mismo de la figura de abajo


solamente que cambia en este caso entra la adenina y
timina.

Podemos encontrar a la guanina, citosina,


desoxirribosa y las moléculas orgánicas que son el
oxígeno, carbono, nitrógeno,etc.
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IV. EVALUACIÓN:
b) Escriba las semejanzas y diferencias entre el ADN y ARN

Semejanzas:
- Los dos son ácidos nucleicos.
- Tienen 4 nucleótidos y 4 bases nitrogenadas.
- Tanto el ADN y el ARN tienen fosfato.
- Son los ácidos nucleicos que intervienen en los procesos de transmisión
de la información hereditaria de padres a hijos.
- En ambos las bases nitrogenadas se unen por puentes de hidrógeno.

Diferencias:
- El ADN es una estructura bicatenaria, porque posee dos hebras de lado y
lado que se unen en medio gracias a puentes de
hidrógeno.
- El ADN presenta adenina, timina, citosina y guanina mientras que el ARN
presenta uracilo en lugar de timina.
- El azúcar presente en la estructura del ADN es una desoxirribosa y el
azúcar presente en la estructura del ARN es ribosa.
- La ubicación del ADN está principalmente en el núcleo y el ARN puede
encontrarse en el núcleo y el citoplasma de la célula.

c) Explique la función de cada una de las moléculas.


Grupo Fosfato: El grupo fosfato es responsable de proporcionar carga negativa a la molécula
de nucleótido. Cuando se une a otros nucleótidos, forma enlaces fosfodiéster, creando así la
estructura de cadena larga de ácidos nucleicos, como el ADN y el ARN. También es esencial
para el almacenamiento y transferencia de energía en forma de trifosfato de adenosina (ATP),
que es una molécula clave en el metabolismo celular.
Azúcar (ribosa o desoxirribosa): El azúcar en el nucleótido, ya sea ribosa (en el ARN) o
desoxirribosa (en el ADN), proporciona la estructura de la molécula y actúa como un eslabón
entre el grupo fosfato y la base nitrogenada. También participa en la formación de los enlaces
glucosídicos que unen el azúcar a la base nitrogenada en el nucleósido.
Base Nitrogenada: Las bases nitrogenadas son responsables de determinar la información
genética codificada en los ácidos nucleicos. Hay cuatro bases nitrogenadas en el ADN: adenina
(A), citosina (C), guanina (G) y timina (T), mientras que en el ARN, la timina se reemplaza por
uracilo (U). La secuencia y la combinación de estas bases en una cadena de ácido nucleico
determinan la información genética y las instrucciones para la síntesis de proteínas.
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V. PRECAUCIONES Y BIOSEGURIDAD

1. Ingresar al laboratorio con su guardapolvo. Esta ropa protectora deberá sacarse


inmediatamente antes de abandonar el laboratorio.
2. Es obligatorio la utilización de guardapolvo que cubra brazos, piernas y torso; deben
portar además guantes de látex y mascarilla.
3. Está prohibido el uso de sandalias, pantalones y faldas cortas, gorras, bufandas y
otros accesorios en el laboratorio. La persona inapropiadamente vestida para
trabajar en el laboratorio no podrá ingresar.
4. Toda persona con cabello largo, deberá sujetarlo y recogerlo.

VI. CONCLUSIONES
● Para el reconocimiento de las proteínas se concluye que existen agentes que pueden provocan la
alteración de la estructura de una proteína tenemos a los físicos (calor) y químicos en este caso el
nitrato de plata que nos ayudó a identificarlo.
● En conclusión,mediante las experiencias logramos identificar de manera cualitativa los
comportamientos de cada carbohidrato, lípidos y proteínas y la manera cómo reaccionan.
● Concluimos que, en este informe se facilitan prácticas de bioquímica para realizar en el laboratorio.
Reconocer lípidos, partiendo de aceite vegetal, reconocer glúcidos a partir de Frugos y proteínas
partiendo de la clara de huevo. Gracias a las prácticas podemos reforzar la teoría y fomentar el
trabajo cooperativo.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

1. DESNATURALIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS [Internet]. Institutoclaret.cl. [citado el 16


de septiembre de 2023]. Disponible mi en: https://institutoclaret.cl/wp-
content/uploads/2020/08/Gu%C3%ADa
2. Carvajal CC, editor. Lípidos, lipoproteínas y aterogénesis [Internet]. Editorial Nacional de
Salud y Seguridad Social; 2019 [citado el 16 de septiembre de 2023]. Disponible en:
https://repositorio.binasss.sa.cr/repositorio/bitstream/handle/20.500.11764/721/li%20pido
s.pdf?sequence=1&isAllowed=y
3. Penas M. Desnaturalización de proteínas [Internet]. España : Miriam Penas; 2020.
Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=95m9EDMfn_c
4. Artedinamico. SAPONIFICACION. [citado el 19 de septiembre de 2023]; Disponible en:
https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-ampliado/saponificacion
5. Educativa VI. Saponificación de Lípidos [Internet]. Youtube; 2016 [citado el 19 de
septiembre de 2023]. Disponible en: https://www.youtube.com/watch?v=TdV4OD5eGns

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