Este documento describe los pasos para preparar un medio de cultivo de agar nutritivo. Explica que el agar se obtiene de algas y se usa como medio de cultivo para bacterias y hongos. Luego resume diferentes tipos de agar como el MacConkey, manitol-sal, nutritivo, verde brillante y otros; y sus usos. Finalmente, detalla el procedimiento para preparar 20 ml de agar nutritivo en el laboratorio.
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Este documento describe los pasos para preparar un medio de cultivo de agar nutritivo. Explica que el agar se obtiene de algas y se usa como medio de cultivo para bacterias y hongos. Luego resume diferentes tipos de agar como el MacConkey, manitol-sal, nutritivo, verde brillante y otros; y sus usos. Finalmente, detalla el procedimiento para preparar 20 ml de agar nutritivo en el laboratorio.
Este documento describe los pasos para preparar un medio de cultivo de agar nutritivo. Explica que el agar se obtiene de algas y se usa como medio de cultivo para bacterias y hongos. Luego resume diferentes tipos de agar como el MacConkey, manitol-sal, nutritivo, verde brillante y otros; y sus usos. Finalmente, detalla el procedimiento para preparar 20 ml de agar nutritivo en el laboratorio.
Este documento describe los pasos para preparar un medio de cultivo de agar nutritivo. Explica que el agar se obtiene de algas y se usa como medio de cultivo para bacterias y hongos. Luego resume diferentes tipos de agar como el MacConkey, manitol-sal, nutritivo, verde brillante y otros; y sus usos. Finalmente, detalla el procedimiento para preparar 20 ml de agar nutritivo en el laboratorio.
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Nombre de la institución :
Cecytem # 12 M.C Julio Antonio Luna Garcia
Materia: Microbiologia
Titulo: Preparacion de medio de cultivo agar nutritivo
Alumno: Allisson Michelle Bustamante Balbuena
Nombre del profesor: Merari Elizabeth Zarate Garcia
Especialidad: Quimico Laboratorista
Grupo y grado: 308-D
Lugary fecha: Morelia Mich, 13 de noviembre de 2023
Introducción ¿Que son los agares?
El término agar, de acuerdo al diccionario de la Real Academia Española (RAE), es sinónimo de
agaragar o agar-agar. Se trata de una sustancia de tipo gelatinosa que se obtiene a partir de ciertas algas.
El agar es un polisacárido compuesto por galactosa, un azúcar simple. Cuando se disuelve en agua a alta temperatura y luego se lo enfría, adquiere su consistencia de gelatina.
Esta sustancia se emplea en diversos contextos. El agar puede utilizarse para espesar preparaciones gastronómicas y para aclarar la cerveza, por ejemplo. Además sirve como medio de cultivo para el desarrollo de hongos y de bacterias.
Ahora veremos cuales son los tipos de agares y para que nos sirve cada uno :
Agar Mack Conkey: MacConkey Agar es un medio de cultivo ampliamente utilizado en laboratorios de microbiología. Fue desarrollado por Alfred Theodore MacConkey en 1900, lo que lo convirtió en el primer medio diferencial sólido formulado en el siglo XX. Este agar es selectivo y diferencial, diseñado para promover el crecimiento de bacterias gramnegativas y diferenciarlas en función de su capacidad para metabolizar la lactosa. El agar MacConkey original contiene proteínas, sales biliares, cloruro de sodio y dos colorantes , que carece de cristal violeta. La peptona peptona y la proteosa en el medio sirven como fuentes de carbono, nitrógeno, aminoácidos de cadena larga y otros nutrientes esenciales para el crecimiento. La acción selectiva de MacConkey Agar se debe a la presencia de sales biliares, que inhiben a la mayoría de las bacterias grampositivas. Las bacterias gramnegativas, por otro lado, pueden crecer bien en este medio. La diferenciación de estas bacterias se basa en su capacidad para fermentar lactosa. Las cepas fermentadoras de lactosa producen ácido a partir de la lactosa, lo que provoca una caída del pH del medio. Esta producción de ácido hace que las colonias se vuelvan rojas o rosadas, debido a la absorción del rojo neutro y al posterior cambio de color del tinte. Por el contrario, las cepas no fermentadoras de lactosa como Shigella y Salmonella, no cambian la apariencia del medio y normalmente forman colonias incoloras y transparentes.
Manito-sal: Selectivo para estafilococos, La mayoría de los microorganismos no crecen a esta
concentración de sal. Incorporan manitol como fuente de carbono y rojo fenol como indicador, permite aprovechar la correlación existente entre la patogenia y la fermentación del manitol de los estafilococos para establecer un diagnóstico; Los estafilococos patógenos fermentan el manitol y producen colonias amarillas. Los estafilococos no patógenos no lo fermentan y producen colonias de color rosa.
Agar nutritivo: Medio sólido que se prepara añadiendo agar a un caldo nutritivo. Existen diversas clases de agar nutritivo comercializadas: agar infusión de cerebro y corazón (agar BHI), agar triptona de soja (TSA), agar brucela, agar Columbia
Verde brillante: Medio altamente selectivo para el aislamiento de especies de Salmonella
excepto S. typhi y S. paratyphi. No se recomienda para aislar Shigella. Incluye lactosa, sacarosa y rojo fenol. El verde brillante es el agente inhibidor. Las colonias de Salmonella se ven de color rosa o blanco, o transparentes, sobre un fondo rojo.
Agar dextrosa sabouraud: es un medio de cultivo sólido, especialmente enriquecido para el
aislamiento y desarrollo de hongos, como levaduras, mohos y dermatofitos.
Este medio es necesario para investigar la presencia de hongos patógenos u oportunistas, tanto de muestras clínicas como no clínicas. Es ideal para el crecimiento de bacterias filamentosas como Streptomices y Nocardias.
Agar dextrosa y papa: es un medio de cultivo nutritivo sólido, no selectivo. En él pueden crecer especies bacterianas y fúngicas, pero su uso está indicado especialmente para el aislamiento de hongos filamentosos y levaduras.
Agar estrafilococos: Es un medio altamente selectivo para el aislamiento e investigación de
estafilococos.
El medio contiene: gelatina y manitol facilitando así el aislamiento de estafilococos que atacan y degradan dichas sustancias
Agar eosinia y azul de metileno : s un medio de cultivo sólido selectivo y diferencial utilizado para el aislamiento de bacilos gramnegativos, principalmente de la familia Enterobacteriaceae, y otros bacilos gramnegativos no exigentes. También se le conoce con las siglas EAM, que significa eosina- azul de metileno. Contiene peptona, lactosa, sacarosa, fosfato dipotásico, agar, eosina, azul de metileno y agua. Es muy similar al agar MacConkey, sobre todo si se usa el agar EMB modificado por Levine, que no contiene sacarosa.
Pondremos al agar nutritico como ejemplo sobre como se prepara un agar .
1.- En un vaso de precipitados, se añaden 28 gramos del polvo deshidratado o del medio preparado en el laboratorio a 1000 mililitros de agua destilada o desionizada.
2.-Luego, la suspensión se calienta a ebullición para disolver el medio por completo.
3.-A continuación, el medio disuelto se esteriliza en autoclave a una presión de 15 libras (121 ° C) durante 15 minutos.
4.-Una vez que se completa el proceso de esterilización en autoclave, el vaso de precipitados se
saca y se enfría a una temperatura de aproximadamente 40-45 ° C.
5.-Si se desea enriquecimiento, la adición de sangre o fluidos biológicos se puede realizar después del proceso de esterilización en autoclave.
6.-A continuación, el medio se vierte en placas de Petri estériles en condiciones estériles.
7.- Una vez que el medio se solidifica, las placas se pueden colocar en el horno de aire caliente a una temperatura más baja durante unos minutos para eliminar la humedad presente en las placas antes de su uso.
Objetivo de la practica: Preparar y conocer la técnica de la esterilización de medio y vaciado en la placa
Material: Usaremos el material que previamente esterilizamos en la primera practica
Sustancia : Agar nutritivo
Procedimiento: 1. Preparar 20 ml del medio de agar nutritivo 2. Pesamos los gramos correspondientes al agar a preparar en la balanza analítica y agregarlos al matraz 3. Medir en la probeta 20 ml de agua y vertirlos en el matraz 4. Llevar previamente a calentamiento hasta ebullición 5. Sellar y llevar a refrigeración hasta la próxima siembra
Calculo 23 gramos – 1000ml 0.46 gramos-20 ml
Evidencias Observaciones Omitimos la parte de llevar a esterilizar las placas porque no teníamos auto clave Al momento de poner a ebullición el agar teníamos que tener cuido porque se podía saber Para esterilizar la mesa usamos fenol y lo esparcimos con la esponja
Conclusión Desde mi punto de vista si se logró el cultivo ya que no tuvimos ninguna complicación a excepción de la falta del auto clave
