Instructivo de Trabajo Bacteriología
TINTA CHINA
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1. OBJETIVO
Estandarizar los procedimientos preanalíticos, analíticos y pos-analíticos de
laboratorio en la detección criptococos en muestras clínicas, que permitirá
diagnosticar una infección fúngica.
2. CAMPO DE APLICACIÓN
Área de Bacteriología
3. PRINCIPIO DE LA PRUEBA
La tinta china es un método de contraste, no de coloración, que permite destacar
la cápsula de levaduras al no poder penetrarla, produciéndose así un campo
oscuro que permite la observación de la cápsula, un halo transparente dentro del
cuál se observa la levadura. Se emplea especialmente en el diagnóstico de la
criptococosis.
4. APLICACIÓN CLINICA
La criptococosis es una enfermedad sistémica de curso generalmente subagudo o
crónico; la forma primaria es casi siempre pulmonar pero no necesariamente
sintomática que es causa por el C. neoformans que es una levadura oval o
esférica que raramente produce seudomicelios, de tamaño variable y que se
reproduce por gemación.
5. CONSIDERACIONES GENERALES
5.1. Definición del Procedimiento
-Para examinar las muestras clínicas con sospecha de infección por criptococcus
se requiere el proceso de tinción negativa, usando Tinta china, la cual al añadir
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conjuntamente con la muestra sobre una lámina portaobjetos y visualizarla al
microscópico, se podrá observar la capsula de criptococcus sobre un fondo
oscuro.
5.3. Requerimientos Básicos
Equipos Biomédicos
Microscopio compuesto
Cabina de bioseguridad
Material Médico no Fungible
Mechero de alcohol
Asa de siembra en aro
Porta- asa de siembra
Gafas de protección transparente
5.4Reactivos
- Tinta China
5.5.Materiales
- Algodón
- Gorro descartable
- Guantes descartables
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- Frasco estéril, boca ancha
- Laminas portaobjetos
- Mascarilla medica desechable
- Gorro desechable
- Papel absorbente
- Campo de trabajo
- Cubreobjetos
- Alcohol medicinal 70°.
6. CONSIDERACIONES ESPECÍFICAS
6.1. Descripción detallada del Proceso o Procedimiento
-Tiempo: 30 minutos
6.2. Indicaciones pre-analíticas
- La orden médica deberá ser entregada a la recepción del servicio de laboratorio
Clínica, con los datos completos del paciente, sello y firma del médico, sello del
SIS (si corresponde).
- La toma de muestra será realizada por el personal médico.
6.3. Materiales de toma de muestra
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1. Frasco estéril, boca ancha
2. Guantes, mascarilla
6.4. Procedimiento de toma de muestra
-Tipo de Muestra
1. Líquido cefalorraquídeo (LCR)
2. Lavado bronco alveolar (LBA)
6.5. Toma de Muestra de LCR
- Se deberá recolectar como mínimo 1 ml de LCR en un tubo estéril
6.6. Toma de muestra de LBA
-El lavado bronco alveolar se obtiene por fibrobroncoscopía, reduciendo
la presencia de contaminantes de boca y vías respiratorias superiores, la
muestra tomada será colocada en un tubo estéril.
7. TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN
- La muestra recolectada se transportará de inmediato a temperatura ambiente
al Servicio de laboratorio.
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- En situaciones donde no se pueda procesar la muestra de inmediato, se podrá
conservar a temperatura ambiente por un tiempo máximo de 24 horas.
8. PROCEDIMIENTO DE MUESTRAS
1. Centrifugar la muestra a 2500 rpm durante 5 min.
2. Colocar en un portaobjetos nuevo una gota del sedimento y una gota de tinta
china, mezclar y evitar formar burbujas, cubrir con cubreobjetos.
3. La preparación debe ser fina, observándose un color marrón y no negro.
4. Observar al microscopio con objetivo de 10X y luego 40X la totalidad de la
zona que cubre la muestra.
5. Informe de resultados
9.INFORME DE LOS RESULTADOS
5.1. Las muestras serán reportadas como:
Negativas: campo oscuro que puede contener artefactos.
Positivas: La cápsula de C. neoformans aparece como un halo claro y
contra un fondo negro.
10. BIBLIOGRAFIA
https://atalab.com.py/material-de-consulta/tinta-china/
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%20ChinaF.pdf
Instituto Nacional de Salud – INS, Perú. Manual de procedimientos y
técnicas de laboratorio para la identificación de los principales hongos
oportunistas causantes de micosis humanas. Medicina & Laboratorio,
2010, Volumen 16, Números 7-8.
ELABORADO APROBADO Y LIBERADO
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Cargo: Responsable del área de Cargo: Responsable de laboratorio
Bacteriología
Firma y Sello Firma y Sello
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