Manual Hemato 2024 1

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS Y TECNOLÓGICOS NO.

15 “DIÓDORO ANTÚNEZ ECHEGARAY “
ACADEMICA DE: TÉCNICO LABORATORISTA CLÍNICO
LABORATORIO DE: ANÁLISIS HEMATOLÓGICOS
INSTRUCTIVO DE PRÁCTICAS DE
LABORATORIO ANÁLISIS
HEMATOLÓGICOS
CARRERA TECNICO LABORATORISTA
CLINICO
ELABOR
ADO POR:
Esp. en Odont. Angélica Cadena Rios
Q.F.B. Maribel Cadena Rios
Q.F.B. Erasmo Palafox Moedano
Q.B.P Gabriela Arias Citalan
AGOSTO 2023

CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS Y TECNOLÓGICOS NO. 15
“DIÓDORO ANTÚNEZ ECHEGARAY “
INSTRUCTIVO DE PRÁCTICAS
ANÁLISIS HEMATOLÓGICOS
PROFESOR TITULAR: _________________________________________
PROFESOR (ES) DE LABORATORIO:

_____________________________________________________________
_____________________________________________________________
NOMBRE DEL ALUMNO:

_____________________________________________________________
No. DE BOLETA: ____________ GRUPO: _______ EQUIPO No.:
_______ CICLO ESCOLAR:
_____________________________________________
ELABORADO POR REVISADO POR APROBADO POR AUTORIZADO POR
Angélica Cadena Esp. En Odont. L. en E. Dr. Rafael

Rios Maribel Angélica Yolanda Meza Alfonso Meza
Cadena Rios Cadena Ríos Olivares Villanueva
Erasmo Palafox
Moedano
Gabriela Arias Citalan
Docentes Presidente de Jefe de Área Director del C E C y

Academia Académica T No. 15 “DAE”

LINEAMIENTOS DE TRABAJO PARA LOS LABORATORIO DE LAS UNIDADES DE

APRENDIZAJE DE LA CARRERA DE TÉCNICO LABORATORISTA CLÍNICO (TLC).
Objetivo:
Desarrollar el trabajo académico en las Unidades Aprendizaje de la carrera de Técnico Laboratorista
Clínico en un ambiente incluyente e igualitario en aras de una cultura de paz y justicia, durante las sesiones
de trabajo teórico y práctico con base a los siguientes lineamientos:
1. Podrán realizar las prácticas los estudiantes que estén inscritos oficialmente o con la autorización del
profesor titular, (Reglamento Interno del IPN; Titulo Tercero, Capitulo 1, Art. 77 y Reglamento General de estudios;
Art. 36 apartado I)
2. Se impartirá una sesión por semana a cada grupo, tomándose la asistencia al inicio de cada una de ellas
con un margen de tolerancia de cinco minutos después de la hora señalada para ingresar al laboratorio,
(Código de Ética del IPN, Capitulo IV.2 apartado1 y Reglamento Interno del IPN, Sección Séptima, Titulo Tercero,
Capítulo VI).
3. Es obligación de las alumnas y alumnos asistir con puntualidad y constancia a sus clases, la academia
acuerda que la asistencia se registrara al inicio de cada sesión, dando como tolerancia de ingreso lo
enunciado en el punto 2 de estos lineamientos, (Reglamento Interno del IPN, Sección Séptima, Titulo Tercero,
Capítulo VI).
4. Cuando todo el grupo deje de asistir a alguna práctica y no exista causa justificada oficialmente, esta se
dará por vista registrándose como No Presentada y podrá ser tema de cualquier evaluación, (Código de
Ética del IPN, Capitulo IV.2 apartado1 y Reglamento Interno del IPN, Sección Séptima, Titulo Tercero, Capítulo VI
5. Solo podrán ser justificadas las inasistencias mediante el justificante oficial emitido por la Institución, práctica
no realizada se calificará con cero, ya que, si no se realiza una práctica, no se puede evaluar , (Reglamento
Interno del IPN, Sección Séptima, Titulo Tercero, Capítulo VI).
6. Para garantizar espacios confiables y seguros, la entrada al laboratorio será con bata blanca de manga
larga, vestida correcta y perfectamente abotonada; la cual se deberán quitar al salir de laboratorio, (Manual
de Bioseguridad en el Laboratorio de la OMS y NOM-017-STPS-2008).
7. Para salvaguardar la integridad física de alumnas, alumnos, profesoras y profesores se requiere que
ingresen con zapatos cerrados, cabello recogido, uñas cortadas y sin esmalte, (Manual de Bioseguridad en el
Laboratorio de la OMS y NOM-017-STPS-2008).
8. Entre las buenas prácticas de laboratorio se indican: no comer, beber, fumar y aplicar cosméticos dentro del
laboratorio, (Manual de Bioseguridad en el Laboratorio de la OMS, Capitulo 3; apartado de Código de Prácticas y
Protección Personal).

9. Cada alumno deberá trabajar durante todo el curso en el equipo y mesa de trabajo asignado al inicio de
este, salvo que los profesores lo cambien para mejorar su atención, (Código de Ética del IPN, Capitulo IV.2
apartado1).
10. Es necesario que los alumnos guardar orden, disciplina y atención durante la estancia en el laboratorio para
prevenir accidentes y daños al equipo, (Código de Ética del IPN, Capitulo IV.2 apartado1 y Reglamento Interno
del IPN, Sección Séptima, Titulo Tercero, Capítulo VI).
11. Para evitar retraso durante el desarrollo de la práctica a realizar, los alumnos y alumnas deberán estudiarla
cuidadosamente antes de ingresar al laboratorio, de esta forma se promueve la adquisición de
conocimientos y se resolverán las actividades previas indicadas por los y las profesoras, (Código de Ética
del IPN, Capitulo IV.2 apartado1).
12. De acuerdo con las necesidades del trabajo desarrollado en el laboratorio, los profesores darán las
indicaciones en el uso de aparatos electrónicos, (Código de Ética del IPN, Capitulo IV.1 apartado2 y
Reglamento Interno del IPN, Sección Séptima, Titulo Cuarto, Capítulo I).
13. Con base a lo establecido en la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002, los RPBI generados (no anatómicos,
punzocortantes, cultivos y cepas.) durante el desarrollo de la practicas deberán separarse y depositarse en
las bolsas rojas y contenedores indicados.
14. Los residuos sólidos urbanos deberán separarse y depositarse en los botes colocados debajo de cada
mesa y no en las tarjas cónicas de las mismas ni en los contenedores indicados para RPBI, (NADF-024-
AMBT 2013).
15. El material que se utiliza en la práctica deberá quedar en el lugar que se indique y perfectamente limpio y
seco. (Manual de Bioseguridad en el Laboratorio de la OMS).
16. La entrega del informe práctico se hará conforme lo acuerden los profesores de cada Unidad de
Aprendizaje, después de la fecha indicada no se recibirá, (Código de Ética del IPN, Capitulo IV.1 apartado2 y
Reglamento Interno del IPN, Sección Séptima, Titulo Cuarto, Capítulo I).
17. Para tener derecho a presentar el examen ordinario “C”, será requisito indispensable tener mínimo el 80%
de asistencias y prácticas realizadas, (si no se justifican las inasistencias); si se tiene menos del porcentaje
indicado para poder acreditar el curso, se deberá presentar una evaluación extraordinaria o ETS, los cuales
serán teórico-prácticos, los cuales incluirán los contenidos del programa de estudio correspondiente,
(Reglamento general de estudios del IPN, capitulo sexto, artículos 45 y 48).
18. El programa de estudios de la carrera de Técnico Laboratorista Clínico está conformado por Unidades de Aprendizaje
Teórico – Practicas, por tal motivo del 100 % de la evaluación el 40 % comprende la parte teórica y un 50% la parte
práctica, así mismo se incluye la evaluación del Proyecto Aula, al cual se le asigna un 10 % en los parciales A y B, en el
parcial C la ponderación del proyecto aula será del 20 %, realizando los ajustes correspondientes a la parte práctica,
(Reglamento de Academias del IPN,
Capítulo I, Art. 3 y Capitulo II Art. 7).

EVALUACIÓN
PARCIAL A y B PARCIAL C
1. Reporte de práctica: 10% 1. Reporte de práctica: 10%
2. Evaluación continua: 10% (Guía de 2. Evaluación continua: 10%

desempeño o evaluación (Guía de desempeño o
escrita) evaluación escrita)
3. Examen de laboratorio: 30% 3. Examen de laboratorio: 20%
REPORTE DE PRACTICAS
Aspecto a evaluar Puntaje
1. Titulo y aprendizaje esperado 1 pto

2. Fundamento 1 pto
3. Desarrollo con flujograma 2 ptos
4. Resultados 3 ptos
5. Analisis de resultados 2 ptos
6. Cuestionario 1 pto
7. Fuentes referenciales (2 libros y 1 electronica)
TECNOLÓGICOS NO. 15 “DIÓDORO ANTÚNEZ

ECHEGARAY “
ACADEMICA DE: TÉCNICO LABORATORISTA
CLÍNICO LABORATORIO DE: ANÁLISIS
HEMATOLÓGICOS
ÍNDICE DE PRÁCTICAS
No.
Práctica
CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS Y Nombre Pagina
1. Toma de muestra venosa y capilar con diferentes

1
anticoagulantes
2. Tinción y características morfológicas de los

11
eritrocitos
3. Determinación de hemoglobina, hematocrito e

17
Índices hemáticos
4. Recuento de Reticulocitos y determinación de

26
Velocidad de sedimentación globular
EXAMEN PRÁCTICO A
5. Leucopoyesis y morfología de los leucocitos 32 6. Cuenta diferencial
de Leucocitos 35 7. Cuenta total de leucocitos 39 8. Citometria hematica
45
EXAMEN PRÁCTICO B
9. Reconocimiento de algunas características

48
morfológicas de células inmaduras en sangre
periférica.
10. Cuenta de plaquetas. 53
11. 12. 56
Tiempo de sangrado
13. Tiempo de coagulación. EXAMEN PRÁCTICO C

59


Clave: AH-P1 Revisión: Julio 2023 Fecha de emisión: Agosto 2023 Página: 1 de 64
PRÁCTICA NO. 1
TOMA DE MUESTRA VENOSA Y CAPILAR CON DIFERENTES
ANTICOAGULANTES.
APRENDIZAJE ESPERADO: Describe las generalidades de análisis hematológicos, las etapas

de la hematopoyesis y la eritropoyesis mediante preparaciones fijas de médula ósea como
auxiliar en el Diagnóstico
INTRODUCCIÓN:
La sangre es una suspensión de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en un líquido de compleja

composición, llamado plasma. Al impedirse el mecanismo de coagulación sanguínea pueden
separarse los elementos formes de este líquido, el cual tiene un color paja claro. Cuando la
sangre se coagula se obtiene otro líquido al separar el coágulo formado, a este líquido se le
llama suero, el cual es de composición diferente al plasma. La diferencia entre estos dos líquidos
obtenidos de la sangre radica en su composición, pues al inhibir la coagulación de la sangre se
conserva el fibrinógeno en el plasma, mientras que el suero carece del mismo por su
transformación a filamentos insolubles de fibrina por la activación de proteínas coagulantes
durante la hemostasia.
El torniquete utilizado para una punción venosa no deberá aplicarse tan apretado que el pulso de
la arteria radial se pierda y debe permanecer un minuto como máximo. El objetivo del torniquete
es aumentar el llenado de las venas para que éstas se hagan más prominentes. Bokelund et al.
han establecido que el torniquete contribuye ampliamente a la variabilidad de los resultados.
Algunos factores fisiológicos específicos del paciente pueden afectar los resultados de las
pruebas de laboratorio, dentro de los cuales pueden ser:
● Postura: Un cambio de posición supina (boca arriba) o una posición sentada o acostada
genera un paso de agua de los vasos sanguíneos a los espacios intersticiales provocando
que la sangre se concentre.
● Ritmo circadiano: El hecho de tomar una muestra durante el día o por la noche provoca un
cambio en los resultados.
● Ejercicio: Incrementa el metabolismo de algunos analitos y por lo tanto puede generar
resultados erróneos.
● Estrés.
● Dieta: ayuno prolongado o muy corto.
● Hábito de fumar: Dificulta las punciones cutáneas por las alteraciones circulatorias que
genera.
1
Zonas de recolección
Especímenes venosos. Las venas superficiales de la cara anterior del antebrazo son las más
comunes para la venopunción, las tres venas principales para la recolección son:
1. Vena cefálica, ubicada en la parte superior del antebrazo y en dirección del pulgar de la
mano.
2. Vena basílica, ubicada en la parte inferior del antebrazo y en dirección contraria al pulgar.
3. Vena cubital mediana, ubicada en la parte anterior del codo y conecta las venas cefálica y
basílica; a esta zona se le llama fosa antecubital. Esta vena es la de elección para los
especímenes venosos.
Fig. 1 Zonas de recolección venosa
Especímenes capilares o cutáneos. Debido a que este tipo de sangre difiere ligeramente en la
composición de la sangre venosa, su obtención queda restringida a casos especiales tales como,
pacientes pediátricos, personas obesas a las cuales no se les pueda localizar una vena y en
pacientes quemados o con quimioterapia. También este tipo de sangre es empleada para algunos
tipos de estudios, por ejemplo, tiempo total de coagulación y tiempo de sangrado. Existen tres
zonas para poder obtener estos especímenes sanguíneos:
1. Yema de los dedos
2. Lóbulo de la oreja
3. Talón (solo neonates

Fig. 2 Sitios de punción cutánea (sangre capilar).
Especímenes arteriales. Este tipo de sangre rara vez se emplea para estudios de rutina, pero
esto no la descarta de emplearse para cualquier tipo de estudio, sin embargo, su principal empleo
es para la determinación de gases sanguíneos. Debido al riesgo que conlleva la obtención de
tales especímenes, estos únicamente deberán ser obtenidos por un médico, un químico o una
enfermera con entrenamiento especial.
Los sitios habituales para obtener sangre

arterial son:
1. Arteria radial
2. Arteria braquial o humeral
3. Arteria femoral
Fig. No. 3 Principales sitios de punción arterial

Instrumentos para recolección
Un flebotomista debe mantener buena salud e higiene personal, con su ropa, cabello y
uñas. Torniquete
Se emplea como barrera contra el flujo de sangre venosa, con el objetivo de visualizar una vena
con mayor facilidad. Puede ser una tira o manguera de látex, una correa de velcro o bandas
ajustables. En la actualidad existen una gran variedad de formas para los torniquetes, las cuales
dan una mejor presentación, pero sobre todo mayor comodidad tanto para el paciente como para
el flebotomista.
Solución para la asepsia de la piel
La solución aséptica más común es el alcohol isopropílico al 70%. Debe aplicarse con torundas
empapadas de esta solución. Pueden emplearse también soluciones de etanol al 70% (ya no es
recomendable), cloruro de benzalconio (cloruro de zefirán) o soluciones antisépticas comerciales.
Jeringas
Son sistemas integrados por un cilindro graduado en mililitros, un émbolo y una aguja con punta
en un solo extremo y una base para montarse en el cilindro de la jeringa (Figura No. 4). Las
agujas para jeringa son de toma única. Deben emplearse en la extracción de sangre en
pacientes pediátricos, geriátricos o en caso de pacientes con venas frágiles o diminutas que no
puedan resistir la presión negativa del sistema al vacío.
Fig. No. 4 Jeringas.
4
Sistema al vacío
1. Agujas: Son estériles y presentan varias longitudes y anchos (calibre o apertura).

Diseñadas para encajar en el sistema de sujeción del tubo al vacío mediante una rosca.
Son consideradas de toma múltiple por el capuchón de goma en el extremo posterior al
bisel para impedir la salida de sangre. Calibre para adultos: 21, longitud de 1 pulgada (2.4
cm). Ejemplos de agujas, son la aguja Eclipse Blood Collection Needle (BD) y el
dispositivo Vacu-Pro Venipuncture Needle Protection Device (Concord Portex).
2. Dispositivo de sostén: Son bases plásticas diseñadas para sujetar las agujas, son
desechables y de uso único, pero pueden limpiarse sumergiéndolas en solución de
lavandina al 10%. Ejemplos: sostén BD Pronto Quick Release Needle Holder, dispositivo
Safety-Lok Needle Holder (BD) y Saf-T Clic (Winfield Medical).
3. Tubos al vacío: Son de plástico o vidrio, contienen una cantidad preestablecida de un

aditivo sellado al vacío. El vacío corresponde al volumen indicado en la etiqueta. Por lo
general están recubiertos con silicona para disminuir las posibilidades de hemólisis.
Estos tubos se manejan por código de colores en el tapón, el cual depende del aditivo
que contiene en su interior, en la Tabla No. 1 se muestra el color del tapón y el aditivo
que contienen los tubos más empleados en Hematología.
4. Equipos de infusión alados (mariposas = butterflies) Dispositivos intravenosos que

presentan una aguja corta y una sonda delgada con alas plásticas adheribles. Pueden
conectarse a los dispositivos de sostén Vacutainer, jeringas o frascos para hemocultivo
con adaptadores especiales. Son empleados en la toma de muestra de niños o pacientes
internados difíciles de extraerles sangre.
Fig. 5 Elementos empleados en los sistemas al vacío.

CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS Y TECNOLÓGICOS NO. 15 “DIÓDORO ANTÚNEZ ECHEGARAY “
Tabla 1 Tubos al vacío

FUNDAMENTO:
Los resultados de un examen de laboratorio como toda prueba analítica consisten de tres etapas;
pre analítica, analítica y postanalítica, por lo tanto, la etapa pre analítica es la de mayor
importancia pues de la calidad del espécimen sanguíneo dependerá el resultado final del examen
realizado. Para que el resultado de un examen sea idealmente significativo, el espécimen de
sangre debe reflejar el estado fisiológico del paciente en el momento de la recolección. La
exactitud y precisión de los datos de un laboratorio dependen fundamentalmente de la calidad
del espécimen
MATERIAL:
- Gradilla
- 2 tubos de ensaye 13 x 100
- 2 jeringas de plastico esteril 3 mL
- Lancetas desechables
- Tubos al vacío
- Torniquete (ligadura)
- Agujas para toma múltiple (Vacutainer)
- Soporte para el sistema al vacio
- Torundas de algodón humedecidas en isopropanol al 70 %
- Capilares
DESARROLLO:
Obtención de sangre venosa con jeringa o sistema al vacío
1. Antes de tomar la muestra; solicitar al paciente se ponga cómodo, puede ser sentado o
recostado, apoyando bien el brazo en posición horizontal
2. Identificar al paciente mediante la confirmación de su nombre.
3. Verificar el protocolo de trabajo y la selección de los tubos.
4. Etiquetar los tubos con la identificación correspondiente del paciente
5. Elegir la vena adecuada, de preferencia la vena cefálica o basílica, de la muñeca, tobillo o
mano, ya que se palpan fácilmente.
6. Enroscar la aguja al adaptador vacutainer o la aguja a la jeringa adecuada. 7. Asegurarse
de que la jeringa no contenga aire (el émbolo de la jeringa debe estar hasta el fondo).
8. Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la flexión del codo. 9.
Solicitar al paciente que estire el brazo con la palma de la mano hacia arriba; que abra y
cierre la mano varias veces, para visualizar las venas superficiales.
10. Una vez elegida la vena a puncionar; el técnico debe colocarse frente al paciente; en
dirección a la vena del brazo a puncionar.
11. Desinfectar la piel en un área de 2 pulgadas con una torunda de algodón impregnada con
alcohol al 70%, de arriba hacia abajo y girando la torunda.
7
12. Sujetar el brazo del paciente con la mano libre (normalmente la izquierda), estirando
ligeramente para sujetar la vena. El adaptador o la jeringa se mantiene entre el dedo
pulgar derecho y los tres últimos de la mano, con el bisel de la aguja hacia arriba y en
dirección de la vena en un ángulo de 15°.
13. Introducir la aguja con el bisel hacia arriba perforando la piel hasta llegar a la vena a una
profundidad de entre 0.5 a 1 cm.
14. Retirar la ligadura jalando del extremo doblado e indicar al paciente que abra la palma de
la mano.
15. Con la jeringa jalar lentamente el émbolo hasta obtener el volumen de sangre requerido.
Con el sistema al vacío, una vez que la aguja este en la vena; introducir el tubo en el
adaptador; el volumen de sangre obtenido está definido por el vacío del tubo.
16. Una vez concluida la extracción de sangre; sacar la aguja de la vena. En el sistema al
vacío, primero se retira el tubo y después se retira la aguja con el adaptador. Si se
requiere mayor volumen de sangre, se retira el tubo y se inserta otro nuevo.
17. Colocar una torunda de algodón seco en el sitio de la punción; puede también colocar un
parche.
18. Pedir al paciente que presione firmemente el algodón durante 5 minutos, con el brazo
extendido o doblado.
19. En el caso de la extracción con jeringa, separar la aguja y la jeringa. Descargar la sangre
por las paredes del tubo para evitar hemólisis y formación de espuma.
20. Separar las agujas de la jeringa o adaptador con precaución para evitar picarse
accidentalmente.
21. Depositar las agujas en el contenedor de punzocortantes.
Fig 6 Toma de muestra venosa

8

Punción capilar
1. Producir un flujo sanguíneo libre mediante calentamiento o ligero masaje de la zona

elegida.
2. Limpiar el lugar de punción con una torunda impregnada de alcohol al 70%. 3. Con una
lanceta desechable se practica un pinchazo limpio y rápido de unos 2 a 2.5 mm de
profundidad en el sitio elegido.
4. La primera gota de sangre se elimina con una gasa estéril o una torunda de algodón seca;
las siguientes gotas se colectarán para la realización de la prueba.
5. Evitar comprimir la extremidad para obtener sangre porque se altera la composición
sanguínea.
6. Una vez concluida la extracción con una torunda, ejercer una ligera presión en el lugar de
la punción hasta que cese la hemorragia.
Fig. 7 Técnica capilar
TRABAJO DEL ALUMNO:
1. Realizar la punción venosa de acuerdo al procedimiento con sistema al vacío o con jeringa,
centrifugar los tubos y observar las muestras obtenidas en los diferentes tubos con
anticoagulantes o aditivos.
2. Realizar la punción capilar siguiendo las recomendaciones ya descritas; colectar la muestra
en un tubo capilar
RESULTADOS: Registra el éxito en la toma de muestra
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
9
CUESTIONARIO
1. ¿Por qué deben ser estériles las agujas y las jeringas utilizadas en la extracción de
sangre venosa?
2. ¿Qué recomendaciones se deben hacer al paciente antes de la extracción de la muestra?
3. ¿Dónde se efectúa la punción venosa en los niños?
4. ¿Por qué al poner la sangre en el tubo con anticoagulante debe quitarse la aguja?
5. ¿Cuál es el orden para tomar muestra si vas a ocupar varios tubos?
6. ¿Por qué la cantidad de anticoagulante debe ser proporcional a la cantidad de sangre?
7. ¿Cuál es la diferencia entre suero y plasma?
8. ¿Cuáles son las diferencias entre una punción capilar y una venosa?
9. Menciona las precauciones que se deben tomar en cuenta en una punción capilar.
10. ¿Cuáles serían las ventajas y desventajas entre una punción capilar y una
venosa?
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
10
PRÁCTICA NO. 2
TINCIÓN Y CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS ERITROCITOS
APRENDIZAJE ESPERADO:
Describe las características morfofisiológicas normales para la identificación de las

anormalidades de los eritrocitos mediante técnicas de laboratorio
INTRODUCCIÓN:
El frotis de sangre periférica es un examen para el diagnóstico hematológico que conduce a

imágenes microscópicas, en las que se encuentran tres tipos de células en un individuo normal:
leucocitos, eritrocitos y plaquetas. Los eritrocitos representan alrededor del 45% del volumen de
la sangre y la variación en su forma, tamaño y textura puede estar asociada a la presencia de
diversas enfermedades. Bajo el microscopio, los eritrocitos normales (normocitos) se pueden
observar como estructuras altamente circulares cuyo diámetro oscila entre 7 y 9 µm, con una
palidez central que refleja su forma de disco bicóncavo. Cualquier variación en estas
características debe considerarse anormal, pues podría indicar la existencia de algún tipo de
patología, que puede ir desde úlcera péptica y deficiencias patológicas y renales, hasta diferentes
tipos de cáncer, entre muchas otras. Por esta razón, los expertos basan el diagnóstico
hematológico en distintos aspectos morfológicos de los eritrocitos.
Fig. 7 Eritrocitos
11

La detección de tales alteraciones morfológicas es de gran importancia en aplicaciones clínicas,

pues pueden indicar presencia de patologías que incluyen trastornos hereditarios, deficiencias
hepáticas o renales, diferentes tipos de anemias y hasta distintas formas de cáncer, por ejemplo
Fig. 8 Anormalidades de los eritrocitos

12

En caso de enfermedad se observan anormalidades morfológicas y se clasifican en 4 categorías:
a) Anormalidades en el tamaño (Anisocitosis): Son variaciones anormales en el

tamaño de los eritrocitos; es una característica de la mayoría de las anemias. ●
Macrocitos
● Microcitos
● Megalocitos
b) Anormalidades en la forma (poiquilocitosis): Son variaciones en anormales en

la forma del eritrocito.
● Esferocitos
● Codocitos
● Drepanocitos
● Eliptocitos
● Crenocitos o equinocitos
● Acantocitos
● Dacriocitos
● Esquistocitos
● Estomatocitos
● Rouleaux
c) Variación en el color: Los eritrocitos normales tienen un HCM de aproximadamente 30 pg.

En frotis teñidos, el eritrocito tiene un área central de palidez de más o menos la tercera
parte del diámetro de la célula. En ciertos trastornos las células llegan a contener menos
hemoglobina de lo normal. El único eritrocito que dispone de más hemoglobina de lo
normal en relación con su
volumen es el esferocito.
● Hipocromía
● Hipercromía
● Policromatofilia
● Anisocromía
d) Inclusiones anormales en los eritrocitos: que son

● Punteado Basófilo
● Anillos de Cabot
● Cuerpos de Howell-Jolly
● Cuerpos de Pappenheimer
● Siderocitos
13

FUNDAMENTO:
Las células progenitoras de la serie roja que normalmente se encuentra en la médula ósea, pero
cuando éstas pasan a sangre periférica antes de su maduración en normocitos o hematíes
pueden sufrir ciertos cambios en su morfología, provocadas por ciertas patologías como
leucemias, anemias u otras alteraciones celulares.
MATERIAL:
- Gradilla
- Tubos al vacío con EDTA
- Soporte para el sistema Vacutainer
- 10 portaobjetos
- Pipeta pasteur
DESARROLLO:
Preparación de frotis sanguíneo por método del portaobjetos
1. Homogeneizar la muestra de sangre en forma manual (invertir el tubo de 6 a 8 veces) con

agitador mecánico dos minutos aproximadamente.
2. Con una pipeta Pasteur o con el tapón del tubo, colocar una pequeña gota de sangre
(aproximadamente 2 mm de diámetro) sobre un portaobjetos limpio y seco a 1 cm de uno
de sus extremos.
3. El extremo opuesto se sujeta con los dedos índice y pulgar de la mano izquierda. 4. Con la
mano derecha se toma un segundo portaobjetos y se apoya en el primer portaobjetos por
delante de la gota de sangre; formando un ángulo de 30o a 45°; por capilaridad extender la
gota de sangre por todo el borde del portaobjetos. 5. Deslizar el segundo portaobjetos
suavemente y a velocidad moderada sobre el primer portaobjetos en sentido longitudinal
(adelante o hacia atrás), hasta que la gota de sangre quede bien extendida sobre la
superficie del primer portaobjetos.
6. El grosor del frotis sanguíneo depende del ángulo entre los dos portaobjetos. Si el ángulo
es mayor a 45o, la extensión será gruesa y corta y si el ángulo es menor a 45o será larga
y fina.
7. Dejar secar el frotis a temperatura ambiente y en posición horizontal.
Fig. 9 Método para realizar frotis
14
Preparación de frotis sanguíneo por el método de los cubreobjetos
1. Tomar dos cubreobjetos limpios, sin grasa y secos.

2. Colocar una pequeña gota de sangre en el centro de un primer cubreobjetos y colocarlo
sobre un segundo cubreobjetos; de manera que las esquinas de los dos cubreobjetos
formen una estrella de 8 picos. No olvidar homogeneizar la muestra antes de tomar la gota
de sangre.
3. La gota de sangre se extenderá uniforme y rápidamente sobre las dos superficies,
formando una capa fina entre ambos cubreobjetos.
4. Separar los cubreobjetos uno del otro en sentido opuesto con un movimiento firme, rápido
y paralelo a sus superficies.
5. Dejar secar los cubreobjetos con la extensión hacia arriba, sobre un papel limpio. NOTA: Si
se trata de sangre capilar, el cubreobjetos no deberá tocar la piel del paciente y se debe
cuidar que la muestra no se coagule antes de separar los cubreobjetos.
Fig. 9 Método para realizar frotis por el método de cubreobjeto
TRABAJO DEL ALUMNO:

1. Realizar la punción venosa de acuerdo al procedimiento con sistema al vacío o
con jeringa.
2. Con las muestras de sangre obtenidas preparar frotis sanguíneos con los métodos
portaobjetos y cubreobjetos.
3. Observar los frotis al microscopio (objetivos 10X, 40X y 100X), esquematizar y
colorear las células sanguíneas identificadas.
4. Observar también un frotis teñido previamente, para identificar y diferenciar las diferentes
células de la sangre
15
RESULTADOS: Esquematiza lo observado y cada una de las alteraciones morfológicas

revisadas.
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS:
CUESTIONARIO:
1. Explica en qué patologías se presenta cada una de las alteraciones de los glóbulos rojos
antes mencionadas.
2. Investiga qué otras alteraciones en los glóbulos rojos existen.
3. Menciona otras causas no patológicas que provoquen este tipo de alteraciones
16

PRÁCTICA NO. 3
DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA, HEMATOCRITO E ÍNDICES HEMÁTICOS
APRENDIZAJES ESPERADOS.
Aplica las técnicas de la serie roja normal y patológica mediante la determinación de los
parámetros hemáticos Hemoglobina y Hematocrito para coadyuvar en el diagnóstico
clínico.
INTRODUCCIÓN.
Hemoglobina (Hb).
La Hb se mide en gramos por decilitro (g/dl) y representa la cantidad de esta proteína por unidad
de volumen. Este parámetro debe ser el único a emplear para definir si hay o no anemia, es decir,
sólo si las cifras de hemoglobina son inferiores a los valores normales puede asegurarse que
existe anemia. Las cifras “normales” o de “referencia” de la hemoglobina son variables y
dependen de: edad, sexo, altura del sitio de residencia, etcétera. A la altura de la Ciudad de
México (2240 m sobre el nivel del mar), las cifras inferiores normales de hemoglobina en adultos
son 12.5g/dL, para mujeres y de 15.5g/dL, para varones. Las cuantificaciones de Hb inferiores a
las mencionadas permiten establecer el diagnóstico de anemia. Las cifras de hemoglobina
superiores a 16.6g/dL para mujeres y 19.5g/dL para varones permiten establecer diagnóstico de
eritrocitosis, a la altura de la Ciudad de México. El término de policitemia debe reservarse para
situaciones en las que además de eritrocitosis, hay leucocitosis o trombocitosis.
Hematocrito (Hct).
Se mide en porcentaje (%) y representa la proporción de eritrocitos en el total de la sangre. Este

parámetro no debe emplearse para establecer la existencia de anemia. Los valores normales del
hematocrito dependen también del sexo, la edad y altura del sitio de residencia. A nivel de la
Ciudad de México, el hematocrito de referencia oscila entre 46 y 56% para varones y entre 39 y
50% para mujeres.
17
Número de glóbulos rojos (GR)
Se mide en millones por microlitro (millones/µL). Su valor normal depende también de los factores
señalados para los otros dos parámetros (Hb y Hct). Para la altura del altiplano mexicano, los
valores de referencia en adultos: varones 5.0 a 6.3millones/µL; mujeres 4.1 a 5.7millohes/µL. El
empleo actual de contadores de partículas por citometría de flujo permite calcular con gran
exactitud este parámetro eritrocítico. Cuando no se cuenta con citómetro de flujo para hacer la
medición del número de GR, es preferible no proporcionar este dato, dado el margen de error tan
grande de la cuantificación con métodos manuales.
Índices eritrocitarios.
El volumen corpuscular medio (VCM), la hemoglobina corpuscular media (HbCM) y la

concentración de hemoglobina corpuscular media (CHbCM) son los índices eritrocitarios. Éstos
se calculan para determinar el tamaño y el contenido de Hb medios de los eritrocitos. Además de
servir como un control de calidad, los índices pueden usarse para diferenciar las anemias.
Volumen globular medio (VGM)
Se mide en femtolitros (fL) o micras cúbicas. Este índice eritrocítico, medido directamente con
citometría de flujo, es de gran valor en el esclarecimiento de la causa de anemia. Los valores del
VGM permiten saber si una anemia es macrocítica (VGM mayor a los límites normales) o
microcítica (VGM menor a los límites normales, que a la altura de altiplano mexicano es 83 a 98
fL para varones y de 78 a 103fL para mujeres). Más del 80% de los casos de anemia en la
República Mexicana está dado por anemias microcíticas (VGM bajo), y de ellas, la más frecuente
es la anemia por deficiencia de hierro, si bien no se deben olvidar las talasemias como causa de
anemia microcítica. En algunas comunidades de la costa del Golfo de México, hasta 15% de los
habitantes es portador de talasemia, en la mayoría de los casos de talasemia beta. Los valores
de VGM, son habitualmente más bajos en talasemia que en deficiencia de hierro que en la
talasemia. Las anemias que cursan con cifras anormales altas de VGM, también llamadas
megaloblástica (carencia de folatos o de vitamina B12), a mielodisplasias, anemia aplásica,
etcétera.
18
Hemoglobina corpuscular media (HCM)
Se expresa en picogramos (pg) y representa la cantidad promedio de hemoglobina en cada

eritrocito. Los citómetros de flujo determinan este índice dividiendo la Hb entre el número de GR y
multiplicando el cociente por 10. En virtud de que este índice se calcula a partir de dos datos
obtenidos directamente de la citometría de flujo, se trata de un índice muy confiable. A la altura de
la Ciudad de México, los valores de referencia de la HCM son de 27 a 34 pg. Este índice debe ser
el único que emplee para referirse a la cantidad de hemoglobina contenida en cada eritrocito, es
decir, se hablará de hipocromía y normocromia cuando el valor de HCM sea subnormal o normal,
respectivamente. La asociación de un valor subnormal de HCM (hipocromía) con un valor
subnormal de VGM (microcitosis), permite establecer la entidad de microcitosis e hipocromía, que
pueden acompañarse o no de anemia. En la República Mexicana, la causa más frecuente de
anemia microcítica hipocrómica es la deficiencia de hierro, seguida de la talasemia, la utilidad de
HCM para estas consideraciones sólo es válida cuando la CH se ha llevado a cabo por medio de
citrometría de flujo; el HCM no es confiable cuando se emplean métodos manuales para su
determinación.
Concentración media de hemoglobina (CmHb)
Este índice eritrocítico, medido como porcentaje (%), se determina dividiendo la Hb multiplicada
por 100 entre el Htc. Como el Htc es un parámetro eritrocítico calculado a partir de GR y del VGM
con los citómetros de flujo, la CmHb es un dato de referencia menos útil e inexacto. Los valores
de referencia de CmHb son de 32 a 34% para varones y de 30 a 34% para mujeres (adultos en el
altiplano mexicano).
La molécula de hemoglobina es una proteína conjugada. La hemoglobina es el componente

principal de los eritrocitos; su concentración en ellos es de alrededor de 34g/dL. Es un pigmento
rojo con un peso molecular de 68 000 daltons y actúa como vehículo para el transporte de
oxígeno en el organismo.
19
MATERIAL EQUIPO.
❖ Tubos capilares ❖ Microcentrífuga

❖ Gradilla para tubos de ensayo ❖ Centrífuga
❖ Tubos de ensaye de 13x100mm ❖ Espectrofotómetro
❖ Torundas con alcohol al 70% ❖ Equipo vacutainer
❖ Ligadura ❖ Mechero Bunsen.
❖ Cánula metálica
❖ Tubo de Wintrobre
❖ Pipeta pasteur
❖ Papel absorbente
❖ Tubos al vacio con E.D.T.A
❖ Micropipeta
❖ Cubetas
REACTIVOS.
❖ Reactivo de Drabkin
FUNDAMENTO
1. Hemoglobina.
La hemoglobina de los glóbulos rojos reacciona con el Ferricianuro de potasio (reactivo de

Drabkin). El ferricianuro oxida al hierro de la hemoglobina de ferroso (++) a férrico (+++) para
formar la metahemoglobina, la cual se combina con cianuro potásico resultando un pigmento
estable; la cianometahemoglobina (color rojizo). La intensidad de color es directamente
proporcional a la concentración de hemoglobina presente en la muestra.
2. Hematocrito.
Cuando la sangre con anticoagulante es centrifugada por un tiempo establecido, los eritrocitos
sedimentan formando un paquete globular, mientras que en la parte superior queda el plasma;
líquido claro y ligeramente amarillento. EL cociente entre el volumen de elementos formes y el
volumen de sangre total es lo que se denomina hematócrito.
20
DESARROLLO:
1. Hemoglobina por el metodo de Cianometahemoglobina
1. Obtener sangre por punción venosa y colocarla en un tubo que contenga

anticoagulante (E. D. T. A.). Homogeneizar manualmente por inversión del tubo o en
agitador mecánico.
2. Llenar la pipeta de Sahli con la sangre aforando hasta la marca de 20, equivalente a
0.02mL (20 µL).
3. Limpiar el exceso de sangre de la pipeta.
4. Depositar la sangre en un tubo que contenga 5mL. de reactivo de Drabkin. 5.
Homogeneizar mediante burbujeo con la pipeta de Sahli o por inversión del tubo. 6.
Dejar reposar 10 minutos a temperatura ambiente.
7. Leer a 540 nm, ajustando a cero con el blanco de reactivos.
8. Interpolar la lectura de absorbancia del problema en la curva de calibración para conocer
la concentración de la hemoglobina. La concentración del problema también puede
conocerse mediante el uso de la fórmula siguiente:
��
��
�� = ��.
��
VALORES DE REFERENCIA(Hb):
Hombres: 15.5 a 19.5g/dL
Mujeres: 12.5 a 16.6g/dL
2. Hematócrito
a) Macrométodo:
1. Obtener sangre venosa con anticoagulante. No olvidar homogeneizar el tubo de la

muestra.
2. Con una cánula metálica conectada a una jeringa o con una pipeta Pasteur; aspirar sangre
completa del tubo de muestra.
3. Llenar el tubo de Wintrobe comenzando desde el fondo, conforme se llena el tubo se va
sacando la cánula, hasta la marca de 0 – 10 (evitar la formación de burbujas durante el
llenado).
21
4. Centrifugar a 3000 r.p.m. durante 30 minutos.
5. Realizar la lectura del hematócrito (columna de glóbulos rojos), la franja blanca es de
leucocitos
6. y no se toma en cuenta. Con la escala de abajo hacia arriba se determina el % de
hematocrito; cada subdivisión en mm equivales a 1%; por lo tanto 10 cm equivale a un
100%
b) Micrométodo:
1. Se obtiene sangre venosa o capilar.

2. Tomar un tubo capilar y llenarlo tres cuartas partes.
3. Sellar el tubo capilar en el extremo contrario al llenado; a la flama del mechero, girar el tubo
capilar.
4. Centrifugar durante 10 minutos en la microcentrifuga (10,000 r.p.m.) 5. Al término de la
centrifugación; calcular el % de hematocrito por regla de 3 (figura 2) o en el lector de
microhematócrito (dispositivo de plástico con escala en porcentaje %).
Fig. 1 Hematocrito
22

VALORES DE REFERENCIA(Hto):
Hombres: 46 a 56%
Mujeres: 39 a 50%
3. Indices Eritrocitarios
Volumen corpuscular medio.
El VCM es el volumen medio de los eritrocitos, expresado en femtolitros (fL), o sea 10 -
15
L: VCM = Hto(%)x10/recuento de eritrocitos(x1012/L)
�� =��(%)
��. �� (10)
Ejemplo.
VCM = 45X10/5 = 90fL
Hemoglobina corpuscular media
La HbCM es el peso medio de la Hb en un eritrocito, expresado en picogramos (pg), o sea, 10-12

g:
��
�� =��( ��)
��. �� 10
Por ejemplo, si la Hb = 16g/dL y el recuento de eritrocitos = 5,0 x 1012/L
HbCM = 16x10/5 = 32pg.
Concentración de hemoglobina corpuscular media
La CHbCM es la concentración media de Hb en cada eritrocito. Las unidades usadas son gramos
por decilitro (antes se expresaba en porcentaje):
�� =��(��)
��(%)x100
23
Por ejemplo, si la H b = 16g/dL y el Hto = 48%,
CHbCM = 16X100/48 = 33.3g/dL
VALORES DE REFERENCIA (Índices hemáticos):
VCM: de 83 a 98fL en hombres y de 78 a 103fL en mujeres
HCM: 27 a 34pg.
CmHb: de 32 a 34% en hombres y de 30 a 34% en mujeres
Los valores de las células normocrómicas varían de 32 a 37 g/dL, los de las células hipocrómicas
son menores de 32 g/dL y los de las células hipercrómicas son mayores que 37 g/dL. Los
eritrocitos hipocrómicos se encuentran en las talasemias y en la deficiencia de hierro.
TRABAJO DEL ALUMNO.
1. Realizar la calibración de la cianometahemoglobina y graficar en papel milimétrico. 2.

Procesar la muestra del paciente de acuerdo a la metodología establecida. 3. Determinar la
concentración de hemoglobina del paciente en g/100mL en base a la curva de calibración y
mediante la fórmula.
4. Promediar los resultados de la concentración de hemoglobina obtenidos para hombres y
mujeres del grupo.
5. Realizar macro y microhematócrito.
6. Calcular los valores del micro hematocrito por los diferentes dispositivos. 7. Calcular por
medio del hematocrito la cantidad de glóbulos rojos del paciente. 8. Con los datos obtenidos
de hemoglobina y de glóbulos rojos calcular los Índices Hemáticos 9. Realizar una tabla de
resultados por grupo.
RESULTADOS
24

CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la utilidad de la hemoglobina en el diagnóstico clínico?

2. La hemoglobina se combina con el oxígeno para formar oxihemoglobina, ¿Es ésta reacción
fácilmente reversible?
3. ¿Menciona la composición química del reactivo de Drabkin?
4. Mencione las ventajas y desventajas de la técnica de la hemoglobina.
5. Menciona la función de la hemoglobina.
6. En la determinación del hematocrito, mencione las ventajas y desventajas del
macrométodo con respecto al micrométodo.
7. En la determinación del hematocrito; mencione ventajas y desventajas de los que métodos
automatizados con respecto al método que utilizaste.
8. De los dispositivos para calcular el % de hematocrito, ¿Cuál consideras que sea el más
confiable y por qué?
9. ¿Qué importancia tiene el hematocrito en el diagnóstico clínico?
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
25

PRÁCTICA NO. 4
RECUENTO DE RETICULOCITOS Y DETERMINACIÓN DE VELOCIDAD DE
SEDIMENTACIÓN GLOBULAR
Aplica las técnicas de la serie roja normal y patológica mediante la determinación de los
parámetros hemáticos para coadyuvar en el diagnóstico clínico.
FUNDAMENTO:
1. El RNA residual de los hematíes inmaduros (reticulocitos) es precipitado y teñido con una
tinción supravital de azul de cresil brillante, lo cual permite identificarlos. Se preparan las
extensiones y se cuentan las células que contienen precipitados (reticulares) teñidos.
Los resultados se expresan en porcentajes de los reticulocitos examinados y en cifras
absolutas por milímetro cúbico.
2. La velocidad de sedimentación globular (VSG) constituye una medida indirecta del grado
de inflamación presente en el organismo. La prueba está midiendo en realidad la
velocidad de caída (sedimentación) de los eritrocitos o hematíes (glóbulos rojos) de la
sangre en un tubo de ensayo largo y estrecho
INTRODUCCIÓN:
Los reticulocitos son eritrocitos jóvenes anucleados, pero que contienen RNA residual y
mitocondrias en el citoplasma. El RNA residual le da un tinte azuloso con la tinción de WRIGHT.
La célula puede describirse en forma más apropiada como un eritrocito policromátofilo. Los
reticulocitos son algo más grandes que el eritrocito maduro y constituyen alrededor del 1% de los
glóbulos rojos circulantes. Estas células pueden ser identificadas por su reacción con los
colorantes supravitales, azul de metileno o azul de cresilo brillante. Con este método los
reticulocitos son identificados por la presencia de inclusiones azul púrpura. Los reticulocitos
suelen permanecer de 2 a 3 días en la médula ósea y un día adicional en la sangre periférica
antes de convertirse en eritrocitos maduros. La cuenta de reticulocitos en la sangre periférica
indica el grado de eficacia de la actividad en la médula ósea y es una de las pruebas de
laboratorio más eficaces en relación con el costo dentro de la clasificación de la fisiopatología de
la anemia. En la persona sana de edad avanzada parece disminuir el periodo de vida del
eritrocito.
Esto se compensa por una médula ósea activa, de tal modo que la hemoglobina y el hematócrito
permanecen dentro de los límites de referencia de otros adultos. No obstante, hay una ligera
reticulocitosis que refleja el aumento en la producción de eritrocitos. El número de reticulocitos se
26

expresa como porcentaje del número total de eritrocitos contados. Pueden producirse
interpretaciones erróneas cuando solo se informa el porcentaje de reticulocitos presentes en la
sangre periférica, ya que estos resultados dependen del número total de eritrocitos presentes en
la sangre periférica.
Si la cifra total de eritrocitos está disminuida, el porcentaje de reticulocitos no refleja de manera

precisa la producción de nuevos eritrocitos por la médula ósea
Cuando se deja reposar sangre que tiene anticoagulante, los eritrocitos se aglutinan formando
cilindros de células llamadas pilas, y luego se sedimentan. La velocidad con la que ocurre ésta se
llama Velocidad de Sedimentación Globular. La velocidad de este proceso depende de varios
factores, los más importantes son la velocidad a la cual se forman las pilas y su tamaño; este a su
vez depende del fibrinógeno plasmático y las globulinas. No todas las muestras de sangre
sedimentan con la misma velocidad y en este determinismo intervienen otros factores, como por
ejemplo la viscosidad, la carga iónica de los hematíes, elementos lipídicos, etc.
Las muestras de sangre que sedimentan con rapidez presentan conglomerados de hematíes en
forma de pilas de monedas que se unen luego a otros conglomerados semejantes. En cambio, la
sangres que se sedimentan con lentitud presentan algunos conglomerados semejantes, pero la
mayor parte de los glóbulos rojos permanecen formando paquetes aislados e irregulares.
De acuerdo con Barcells-Gorina, el valor diagnóstico de la eritrosedimentación
reside en los siguientes fundamentos:
a) Índice de la intensidad de un proceso patológico.

b) Aporta datos útiles: el color de la columna de plasma puede demostrar la existencia de
una hiperbilirrubinemia cuando aún la ictericia no es manifiesta.
c) El aspecto lechoso permite detectar una hiperlipemia. Desde luego, la eritrosedimentación
presenta limitaciones porque es inespecífica, tiene un carácter en general tardío y es
inconstante.
Existen sistemas para la medida de la VSG con aspiración neumática de la sangre

y cierres herméticos de la parte inferior y superior.
Los métodos más empleados para la determinación de la VSG son el de Wintrobe,
el de Westergen y el micrométodo.
MATERIAL:
- Gradilla
- Tubos al vacío con EDTA
- Soporte para el sistema Vacutainer
- 4 portaobjetos
- Pipeta pasteur
- Tubos de ensayo de 10 x 75 mm
- Pipetas Pasteur con bulbo de hule
- Portaobjetos
- Puentes de vidrio para tinción
27

- Solución colorante de nuevo azul de metileno

- Solución de azul de cresil brillante
- Tubo de wintrobe
- Gradilla de sedimentación
- Cánula metálico
DESARROLLO:
1. RETICULOCITOS
1. Colocar en un tubo de ensaye limpio y seco 12 gotas de sangre y 12 gotas de colorante

azul de cresil brillante o colorante nuevo azul de metileno.
2. Mezclar e incubar durante 10 a 15 minutos a baño maría a 37°C.
3. Decantar el sobrenadante (aproximadamente la mitad del mismo).
4. Con el sobrenadante obtenido, mezclar y realizar frotis (procurar que el frotis no sea tan
grueso ni tan delgado)
5. Enfocar el microscopio a 10X y 100X (objetivo de inmersión) y contar el número de
reticulocitos encontrados en 1000 eritrocitos (aproximadamente en 5 campos donde se
observen reticulocitos).
6. Mediante una proporción directa calcular el porcentaje de reticulocitos en 1000 eritrocitos
como se indica a continuación:
% �� =��.��
��
��
Corrección de la Cuenta de Reticulocitos cuando hay Anemia:

% ��
ℎ��
��
ℎ��
��
/
��

�� /��3 = ��.
�� . ��ó��
��/��3
28
Fig. 1 Reticulocitos
VALORES DE REFERENCIA:
Adultos: 0.5 a 1.5%
Recién nacidos: 2.5 a 6.0%
2. VSG
1. Se recoge la sangre con EDTA como anticoagulante en el tubo de hemólisis mezclado

suavemente.
2. Con la ayuda de la cánula metálica o pipeta Pasteur llenar el tubo de Wintrobe
hasta la marca 0-10, evitando la formación de burbujas.
3. Colocar en la gradilla de sedimentación verticalmente durante 1 hora. 4. Medir
la Velocidad de Sedimentación Globular después de 1 hora (observar la lectura cada
15 minutos).
29
Fi
g. 2 Gradilla de sedimentacion y tubo wintrobe
Hombres 0 a 7 mm/hora
Mujeres 0 a 15 mm/hora
Niños 0 a 15 mm/hora
TRABAJO A DESARROLLAR POR EL ALUMNO:
1. Realizar la determinación de VSG por el método macro y micrométodo.

2. Realizar un cuadro con los resultados de los equipos e interpretarlo. 3.
Mientras se mide la VSG
4. Realizar frotis y tinción para identificar con claridad la morfología de los reticulocitos.
5. Identificar los reticulocitos en el microscopio
6. Realizar esquemas de los mismos.
7. Realizar el correcto conteo de los reticulocitos.
8. Realizar los cálculos correspondientes.
RESULTADOS:
ANÁLISIS DE RESULTADOS:
30

CUESTIONARIO:
1. Mencione otros métodos de laboratorio para el recuento de reticulocitos. 2. ¿Qué

importancia tiene el recuento de reticulocitos en el diagnóstico clínico? 3. ¿Qué
otros colorantes se pueden utilizar para la tinción de reticulocitos? 4. ¿Cuáles
fueron las dificultades que encontraste en el desarrollo de esta prueba? 5. ¿Qué
importancia tiene la determinación de la VSG para el diagnóstico clínico? 6. ¿Qué
ventajas y desventajas tiene el método utilizado con otros métodos? 7. Mencione
los factores que puedan alterar los resultados.
8. Mencione las patologías en que se encuentra alterada la VSG
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
31

PRACTICA No. 5
LEUCOPOYESIS Y MORFOLOGIA DE LEUCOCITOS
APRENDIZAJE ESPERADO
Describe los órganos leucopoyéticos y linfopoyéticos, así como el proceso de leucopoyesis
mediante preparaciones fijas de médula ósea y sangre periférica auxiliar en el diagnóstico.
INTRODUCCIÓN.
La leucopoyesis, o desarrollo de leucocitos, con excepción de los linfocitos, se produce en el
mismo lugar de la eritropoyesis. Estos sitios cambian a lo largo de la vida, comenzando en el
saco vitelino del mesénquima, seguido del bazo y el hígado, y por último la médula ósea. La
leucopoyesis es el proceso general de formación de los leucocitos. Incluye a la granulopoyesis y
la agranulopoyesis. El primer término se refiere a la producción de granulocitos que da origen a
todas las células de la línea granulocítica (neutrófilos, eosinófilos y basófilos), mientras que el
segundo, a la generación de los agranulocitos (monocitos y linfocitos).
Otra característica importante en lo morfologia de los leucocitos es la coloración, dentro de los
leucocitos granulosos; los que tienen gránulos específicos que se tiñen ávidamente con
colorantes ácidos, se llaman leucocitos granulosos acidófilos ya que la resina es el colorante que
suele emplearse.
Los que tienen gránulos que se tiñen intensamente con colorantes básicos se llaman
leucocitos granulosos basófilos o sencillamente basófilos.
Fig. 1. Clasificación de leucocitos.

32

A partir de un frotis sanguíneo teñido puede observarse la morfología y el número de leucocitos.

La extensión sanguínea, una vez seca, debe someterse a un proceso de fijación para poder ser
teñida mediante el colorante de elección. Este paso es omitido cuando se emplea la tinción de
Wright, pues el colorante ya contiene un fijador a diferencia de otros colorantes. La fijación tiene
lugar en el primer minuto cuando se aplica un colorante sin diluir. Con los colorantes acuosos hay
que emplear agentes químicos o calor antes de la aplicación del colorante. La mayoría de los
colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales
celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente
(cationes) o negativamente (aniones).
• Colorantes ácidos: Son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los
constituyentes celulares cargados positivamente, tales como las proteínas. También son llamados
basófilos, el ejemplo más común es la eosina.
• Colorantes básicos: Son compuestos catiónicos con afinidad por los constituyentes celulares
cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos; a estos
colorantes también se les conoce como acidófilos. Ejemplo de colorantes acidófilos son el azul de
metileno.
• Colorantes policromáticos: Tradicionalmente, las tinciones se han logrado mediante el uso de

colorantes que con frecuencia derivan de la anilina (tinciones tradicionales o clásicas). Los
colorantes policromáticos son el resultado de la combinación de un colorante básico (azul de
metileno) y un colorante ácido (eosina), que, al reaccionar entre sí, generan
FUNDAMENTO
Los colorantes tipo Romanowsky están formados por Azul de Metileno y sus derivados
oxidados, colorantes básicos, y el colorante ácido Eosina. Los colorantes básicos se unen a los
componentes ácidos de las células, ácidos nucleicos, gránulos en neutrófilos y proteínas ácidas
que se tiñen de un color rojo púrpura más o menos intenso, mientras que la eosina se une a la
hemoglobina, componentes básicos de las estructuras celulares y los gránulos de los
eosinófilos.
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS
Material de laboratorio Equipo

1 pipeta pasteur con bulbo Microscopio
10 portaobjetos Contador mecánico
Gradilla Reactivos
Puente de tinción Colorante de Wright
Equipo vacutainer/agujas Torundas con alcohol al 70% Gradilla Aceite de
inmersión
Ligadura o tubo látex Solución Buffer de fosfatos
33

DESARROLLO:
Tinción de Wright
1. Hacer un frotis sanguíneo.

2. Colocarlo sobre el puente de tinción.
3. Al frotis se le agrega colorante de Wright cubriendo toda la extensión.
4. Inmediatamente después se le agrega el buffer, dejando reposar de 5 a 10 minutos.
También se puede agregar los reactivos por separado, primero el colorante de Wright
durante 10 minutos, cubriendo totalmente la extensión y posteriormente la solución buffer
durante 8 minutos. El tiempo para la tinción va a depender de la madurez del colorante,
entre más maduro menor es el tiempo de tinción.
5. Con la pipeta Pasteur soplar a la muestra para mezclar el colorante de Wright y la solución
buffer
6. Lavar a chorro de agua procurando no dañar la película de sangre.
7. Dejar secar el frotis teñido a temperatura ambiente limpiando el excedente de colorante de
la parte posterior con una torunda de alcohol.
8. Enfocar con el objetivo de 10X y observar al microscopio con el objetivo de inmersión
(100X).
Trabajo a desarrollar por el alumno
1. Realizar un Frotis sanguíneo y teñirlo con el colorante de Wright.

2. Observar el Frotis al microscopio a 10X, 40X y 100X.
3. Identificar las características morfológicas y tintoriales de los leucocitos 4. Hacer
esquemas de los 5 tipos de leucocitos y reportar las características tintoriales de cada uno
5. Así mismo identificar las demás células presentes en el frotis.
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1. Menciona las características tintoriales que presentan los leucocitos al teñirlos con
colorante de Wright.
2. Menciona la composición del colorante de Wright
3. Menciona otros ejemplos de tinciones del tipo Romanowsky
4. Define el concepto de basófilo y acidófilo
5. Menciona la afinidad de las estructuras celulares de los leucocitos con los colorantes que
componen el colorante de Wright
34
PRACTICA No.6
CUENTA DIFERENCIAL Y VALORES ABSOLUTOS DE LEUCOCITOS
Analiza los parámetros de la serie blanca bajo los lineamientos de control de calidad y las buenas
prácticas de laboratorio, para coadyuvar el diagnóstico clínico manteniendo la bioseguridad en el
laboratorio clínico.
INTRODUCCIÓN
La morfología de las células sanguíneas es el complemento de la biometría hemática. Sólo a

través de un examen cuidadoso de un frotis sanguíneo se pueden obtener indicios adicionales de
la naturaleza de una anemia, una leucemia u otra patología, así como cambios en la forma y
características de tinción de los eritrocitos y leucocitos. El recuento diferencial puede definirse
como un estudio cualitativo de los eritrocitos, plaquetas y leucocitos de cada tipo:
polimorfonucleares, linfocitos y monocitos, junto a un estudio de la edad y anomalías morfológicas
de los mismos. Otra definición sencilla de lo que es una cuenta diferencial es: expresar en
porcentajes las cantidades de cada tipo de leucocitos presentes en la sangre; por lo tanto, se
puede considerar como un análisis cuantitativo y cualitativo simultáneamente. Cuando se realiza
una cuenta diferencial manual se debe tomar en cuenta lo siguiente:
a) Contar como mínimo 100 células, lo ideal sería realizar una cuenta de 200 células, sin
embargo, por la optimización de tiempo 100 células es un número aceptable. La cantidad
de células a contar puede variar dependiendo de la cantidad absoluta de leucocitos, del
criterio y habilidad del analista, tomando en cuenta que entre menos células se cuentan, el
error aumenta y entre más células sean contadas, el error disminuye. Por ejemplo, si se
tiene una cuenta absoluta de <3000 leucocitos/µL sería preferible hacer una cuenta
diferencial en 50 leucocitos, pero si por el contrario, se tiene una cuenta absoluta de más
de 100 x 103 leucocitos/µL, la cuenta diferencial podría aplicar hasta en 500 leucocitos.
b) Los distintos tipos de leucocitos (monocitos, linfocitos o PMN) deben reportarse en
porcentajes relativos. Las células inmaduras también deben reportarse.
c) La presencia de eritroblastos puede generar interferencia en la cuenta total de leucocitos,
por lo cual su cuantificación debe ser independiente de la cuenta diferencial y se debe
mencionar el porcentaje de eritroblastos en el reporte de la cuenta diferencial. d) Observar la
morfología de los leucocitos para identificar cualquier anomalía
35
FUNDAMENTO
La cuenta diferencial se basa en la tinción de Wright, debido a que la eosina y el azul de metileno
reaccionan a los cambios de pH de los distintos componentes celulares, los que poseen carácter
básico fijan en mayor medida la eosina (colorante ácido), mientras que los que poseen carácter
ácido fijan mejor el azul de metileno (colorante básico) y nos dan una gama de colores en las
células hemáticas que permiten clasificar a los leucocitos polimorfonucleares con base a sus
propiedades tintoriales en neutrófilos, eosinófilos y basófilos; diferenciar a los mononucleares
(monocitos y linfocitos) por la coloración de su citoplasma y además permiten observar con mayor
facilidad las anormalidades morfológicas en los mismos.

Gradilla Reactivos
Equipo vacutainer/agujas Torundas con alcohol al 70%
Gradilla Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO
1. Hacer un frotis sanguíneo inmediatamente después de tomar la muestra 2. Colocar el frotis

sobre el puente de tinción. Agregar colorante de Wright cubriendo toda la extensión;
inmediatamente después se le agrega el buffer, dejando reposar de 5 a 10 minutos. 3. También
se pueden agregar los reactivos por separado, primero el colorante de Wright durante 10
minutos, cubriendo totalmente la extensión y posteriormente la solución buffer durante 8
minutos.
4. Con la pipeta Pasteur soplar a la muestra para mezclar el colorante de Wright y la solución
buffer.
5. Enjuagar a chorro de agua procurando no dañar la película de sangre.
6. Dejar secar el frotis teñido a temperatura ambiente limpiando el excedente de colorante de la
parte posterior con una torunda de alcohol.
7. Enfocar con el objetivo de 10X y observar al microscopio con el objetivo de inmersión (100X).
Realizar el conteo de los diferentes leucocitos en el centro del frotis y con desplazamientos en
forma de greca.
36
Fig. 1 Patron a seguir para realizar la cuenta diferencial en un frotis.
La cuenta diferencial se hace de este modo con el objeto de incluir las areas central y periferica del frotis
8. Los diferentes leucocitos se van registrando en el contador manual, hasta contar 100 células.
Como la cuenta diferencial tiene un valor relativo es necesario también reportar la cuenta
diferencial en valores absolutos, para poder apreciar una patología real en la cantidad de cada
tipo leucocitario. Para obtener los valores absolutos se emplea la siguiente fórmula:
�� 3 = ��
��
100 �� % ��
Fig. 2. Morfología de los leucocitos
37

Valores de referencia
Tipo de leucocito Porcentaje (%) Valores absolutos / mL
Linfocitos 18 a 45 1000 - 4200
Monocitos 3 a 10 100 - 800
Eosinófilos 1a4 100 - 200
Basófilos 0a1 < 100
Neutrófilos totales 50 a 70 1500 - 7000
Neutrófilos segmentados 45 a 65 2000 - 6000
Neutrófilos en banda o cayados 2a7 100 - 800
1. Hacer la cuenta diferencial de su frotis y realizar los cálculos necesarios para obtener los
valores absolutos de su muestra.
2. Hacer esquema de las diferentes formas de leucocitos encontrados.
3. Observar las características morfológicas de los eritrocitos en cuanto a forma y tamaño.
4. Anota el nombre, función y 3 características de los leucocitos observados.
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1. ¿Cuáles son las diferencias entre un monocito y un linfocito?

2. Defina los conceptos que muestran las alteraciones de valores absolutos de los
leucocitos, leucocitosis y leucopenia, linfocitosis y linfopenia, etc.
3. Escriba al menos dos ejemplos de patologías en donde se encuentren cifras bajas y
altas de leucocitos
4. ¿Qué es una desviación a la izquierda en una cuenta diferencial?
5. ¿Qué diferencias hay entre un neutrófilo segmentado y un eosinófilo?
38
PRACTICA No. 7
CUENTA TOTAL DE LEUCOCITOS
Analiza los parámetros de la serie blanca bajo los lineamientos de control de calidad y las
buenas prácticas de laboratorio, para coadyuvar el diagnóstico clínico manteniendo la
bioseguridad en el laboratorio clínico.
INTRODUCCIÓN.
El término leucocito incluye todas las células blancas de la sangre y sus precursores de los
órganos productores, células mielocíticas (granulocíticas). Químicamente, los leucocitos se
componen de agua (82%), fosfolípidos, nucleoproteínas, glucógeno, ácido láctico, fosfatasa
alcalina y otras enzimas, histamina y pequeñas cantidades de sodio, potasio, zinc, magnesio,
calcio, cloro, fósforo inorgánico y bicarbonato.
Los leucocitos pueden contarse en forma visual mediante el empleo de un microscopio, un

hemocitómetro y una pipeta de Thoma. La técnica es similar a la del recuento de eritrocitos, pero
la dilución típica es de 1:20 y el diluyente está formado por ácido acético que provoca la lisis de
los eritrocitos.
La disminución en el recuento de leucocitos (menos de 4500/µL se denomina leucopenia y el

aumento del recuento (más de 11500/µL) se llama leucocitosis.
Hay muchas causas de leucocitosis: Infecciones agudas, intoxicaciones metabólicas (uremia,

acidosis, toxemia gravídica, gota aguda) y otras (envenenamiento por químicos o venenos
(mercurio, veneno de arácnidos y adrenalina); hemorragia aguda, hemólisis aguda, leucemias
crónicas (leucemias agudas, policitemia vera), necrosis tisular( infarto de miocardio, necrosis de
tumores, quemaduras, gangrena y necrosis bacteriana) y condiciones fisiológicas ( Ejercicio,
tensión emocional, trabajo de parto y menstruación).
Dentro de leucopenias pueden señalarse las infecciones bacterianas (septicemia, tuberculosis

miliar, tifoidea, brucelosis, tularemia); infecciones virales (mononucleosis infecciosa, hepatitis,
influenza, parotiditis, psitacosis); infecciones por rickettsias (tifo) y otras infecciones (paludismo,
kala-azar). Algunos medicamentos pueden originar también leucopenia (sulfonamidas,
antibióticos, anlagésicos, mielosupresores, arsenicales, fármacos antitiroideo), así como las
radiaciones ionizantes, algunos padecimientos hematológicos como la anemia perniciosa, ciertas
leucemias agudas, la aplasia medular, el hiperesplenismo, la enfermedad de Gacher y el
síndrome de Feltry, etcétera.
39

El hemocitómetro (Cámara de Neubauer)
La cámara de Neubauer está hecha de vidrio óptico especial de precisión, es de base rectangular
y gruesa. En el tercio medio se hallan cuatro ranuras longitudinales y la superficie del puente
central es más profunda que los dos puentes exteriores. En el puente central (fondo de la
cámara) están grabadas las redes de conteo.
Fig.
1 Camara de Neubauer
Pipeta de Thoma para leucocitos
La pipeta de Thoma para leucocitos consiste en un tubo capilar graduado cuyas divisiones están
separadas por un volumen de 0.5, 1 y 11. Tiene una ampolla para mezclar que contiene una perla
blanca de vidrio.
Fig. 2 Pipeta de Thoma
FUNDAMENTO.
La muestra de sangre se diluye en solución de ácido acético y violeta de genciana. La solución

hipotónica de ácido acético destruye a los eritrocitos. El violeta de genciana permite reconocer
fácilmente el líquido y observar mejor los glóbulos blancos, a los que tiñe ligeramente
40
MATERIAL EQUIPO.
❖ Pipeta de Thoma para leucocitos ❖ Microscopio

❖ Gradilla para tubos de ensayo ❖ Agitador para pipetas de Thoma para
❖ Torundas con alcohol al 70% leucocitos
❖ Ligadura ❖ Contador manual o mecánico
❖ Papel absorbente ❖ Equipo vacutainer
❖ Tubos al vacio con E.D.T.A ❖ Hemocitómetro (Cámara de Neubauer
REACTIVOS.
Líquido de Turk
DESARROLLO.
1. Una vez obtenida la muestra de sangre con anticoagulante E.D.T.A mezclar durante 2
minutos aproximadamente.
2. Con la boquilla de la manguera de hule conectada a la pipeta de Thoma, introducir el
extremo libre de la pipeta en el tubo de sangre y aspirar la sangre hasta la marcada
0.5 (50 µL). Evitar la formación de burbujas en el interior de la pipeta.
3. Limpiar el exceso de sangre en la superficie exterior de la pipeta con gasa o papel
absorbente, el volumen de sangre debe permanecer en la marca 0.5. Si el volumen
de sangre está por arriba de la marca 0.5; eliminar el exceso por contacto con la
gasa o papel absorbente.
4. Con el extremo libre de la pipeta casi vertical; dentro del contenedor del líquido de Turk
y aspirar lentamente hasta que alcance la marca 11. Dilución 1:20. Evitar la formación
de burbujas.
5. Homogeneizar durante 2 minutos manualmente o en agitador mecánico para
homogeneizar la dilución y completar la hemólisis de los glóbulos rojos.
6. Limpiar la cámara de recuento y el cubrehematimetro con un paño limpio que no deje
pelusa. Puede utilizar etanol al 96%.
7. Colocar cuidadosamente el cubrehematimetro sobre la cuadricula de la cámara
quedando preparada para colocar la muestra.
8. Desconectar la pipeta de la tubería de hule y con el dedo índice obstruir el extremo
superior de la pipeta para evitar la salida de la dilución.
9. Desechar las cuatro primeras gotas del contenido de la pipeta en papel absorbente.
41

10. Colocar el extremo inferior de la pipeta sobre el borde del área cuadriculada de la cámara
permitir el descenso de la dilución hasta llenar exactamente la cámara de Neubauer.
Evitar mover el cubrehematimetro.
Fig. 3 Llenado de pipeta Thoma
11. Dejar en reposo la cámara por 1 minuto para permitir que los leucocitos se sedimenten.
12. Colocar la cámara sobre la platina y enfocar con el objetivo de bajo poder (10 X); los
pequeños puntos oscuros corresponden a los glóbulos blancos.
13. Identificar en la cámara los cuatro cuadrantes donde se deberá realizar el conteo de
leucocitos; comenzar con el cuadro superior izquierdo, hasta terminar con el cuadrante
inferior derecho. Si hay células que lindan con los bordes exteriores del cuadro grande
se cuentan las células que toquen la línea de en medio, pero solamente en dos de los
lados.
Fig. 4 Cuadrantes para la cuenta de Leucocitos
42

Fig. 5
Forma correcta de hacer el conteo
14. Calcule el número de leucocitos por milímetro cúbico como se indica a continuación.
��. �� 3 =��.

��20��10
4
o bien ��. �� 50
Donde:
No. GB: Cantidad de leucocitos en los 4 cuadros

20: Título de la dilución
10: Corrección de profundidad de la cámara para llevar a 1mm3
4: Número de cuadros contados
Valores de referencia
Adultos: 4500 a 11000 X mm3

1. Realiza el procedimiento para el conteo de leucocitos en cámara de Neubauer.
2. Realizar los cálculos correspondientes.
3. Elaborar una tabla por grupo de los resultados de cada equipo.
4. Interpretar el resultado obtenido.
43

RESULTADOS
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS.
CUESTIONARIO.
1. Mencione la importancia que tiene el recuento de leucocitos en el diagnóstico clínico.

2. Menciona las causas que provocan una leucopenia
3. Mencione otros métodos de laboratorio para el recuento de leucocitos
4. ¿Cuál es la función del ácido acético en el líquido de turk?
5. ¿Por que se eliminan 3 o 4 gotas de la pipeta de Thoma de leucocitos?
44
PRÁCTICA No. 8
CITOMETRÍA Y HEMOGRAMA
Realiza la Citología Hemática en base a la metodología establecida.
INTRODUCCIÓN
El resultado del análisis hematológico que forma lo que llamamos Biometría Hemática (BH),
Hemograma o Citometría Hemática, es una parte esencial de la descripción clínica de casi
todas las enfermedades. Un número, una distribución normal de las células y una
concentración de hemoglobina normal en la sangre tienen tanta importancia como constantes
fisiológicas para poder diagnosticar una posible enfermedad. Para un diagnóstico diferencial, a
menudo es útil saber que ciertas enfermedades no producen notables cambios en la sangre.
Respecto a las enfermedades de la sangre y los órganos hematopoyéticos, cabe señalar que
muchas veces el hallazgo de anomalías en los parámetros hematológicos más usuales
(descenso de la cifra de hemoglobina, leucocitosis, VSG acelerada) no traduce la existencia
de una enfermedad de la sangre, sino de otro órgano o sistema que, de forma secundaria,
produce tales alteraciones.
La Citometría Hemática o Biometría Hemática; es una prueba de laboratorio clínico que
comprende la determinación de varios parámetros como hemoglobina, hematocrito, glóbulos
rojos, glóbulos blancos, etcétera. En la mayoría de los hospitales, la Citología Hemática
consiste en la determinación:
a) Fórmula roja: Recuento de eritrocitos y plaquetas, determinación de Hb, Hto, Índices

Eritrocitarios y Amplitud de Distribución Eritrocitaria (ADE) en los equipos automatizados.
b) Fórmula blanca: Recuento total de leucocitos y cuenta diferencial.
La Citología Hemática tiene una gran importancia; ya que, además de ser utilizada como
procedimiento de rutina constituye una gran ayuda para el diagnóstico de muchas afecciones.
Sirve de indicador de los progresos del paciente en algunos estados patológicos, como
infecciones y anemias.
FUNDAMENTO
Aunque a veces la presencia de anemia, leucemia, defectos cuantitativos y/o cualitativos de las
plaquetas u otro tipo de trastornos, se pueden sospechar por interrogatorio y exploración física.
La ciiometría Hemática es una medición mucho más definitiva del estado de los tejidos
formadores de sangre.
45
2 Tubos de ensaye de 13 X 100 mm Microscopio

1 Pipeta Pasteur con bulbo Contador mecánico 10 portaobjetos Centrífuga eléctrica 1
Puente de tinción Microcentrífuga 2 Cámaras de Neubauer Agitador para pipetas de
Thoma 2 pipetas de Thoma para glóbulos rojos Contador manual 2 Cajas de petri
Contador mecánico 2 Tubos de Wintrobe Gradilla de sedimentación 2 Capilares Lector
de microhematocrito 2 Pipetas de Sahli Baño maría
2 Pipetas de toma para glóbulos blancos Espectrofotómetro 1 Pipeta
serológica de 5 mL. Reactivos
Celdillas Colorante de Wright Termómetro Solución buffer de fosfatos Gradilla
Aceite de inmersión Equipo vacutainer Oxalato de amonio Torundas con alcohol
al 70% Diluyente de Turk Ligadura o tubo látex Reactivo de Drabkin Franela Azul
brillante de cresilo Papel absorbente Nuevo azul de metileno Escobillón chico
Solución limpiadora Boquilla anticoagulante Papel filtro
Papel parafilm
Aplicadores de madera
Algodón
Cánula metálica
Mechero o lámpara de alcohol
PROCEDIMIENTO.
1. Realizar las diferentes determinaciones que comprenden una Citología Hemática

Completa
2. Anotar los resultados obtenidos en cada una de las pruebas realizadas, así como las
fórmulas y unidades correspondientes a cada una.
46

1. Realizar la fórmula roja y la fórmula blanca de acuerdo a los procedimientos ya conocidos.

2. Realizar una tabla con todos los parámetros de la Citología Hemática por equipo y por
grupo.
3. Interpretar los resultados obtenidos.
RESULTADOS
FÓRMULA ROJA
Hematocrito por macrométodo: __________Hematocrito micrométodo:
V.S.G.: V.C.M.: H.C.M.: C.H.C.M.: Hemoglobina:_______________________
Glóbulos rojos:__________ Reticulocitos: ____________________
FÓRMULA BLANCA.
Cuenta total de leucocitos:__________________
Cuenta diferencial de leucocitos en porcentaje:
N. segmentados: ___________ N. Banda: ______________ Eosinófilos:
Basófilos: Linfocitos: Monocitos:
Valores absolutos de Leucocitos:
N. segmentados: _____________ N. en banda: _____________ Eosinófilos:
Basófilo: Linfocito: Monocito:
47

CUESTIONARIO
1. ¿Qué es una Citología Hemática?

2. Menciona los parámetros que incluye una Citología Hemática completa.
3. ¿Qué importancia tiene la Citología Hemática en el diagnóstico clínico?
48

Clave: AH-P 9 Revisión: Julio 2023 Fecha de emisión: Agosto 2023 Página: 48 de 64
PRÁCTICA No. 9
CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE CÉLULAS INMADURAS EN SANGRE PERIFÉRICA
Conocer las diferentes características morfológicas de las células inmaduras hematopoyéticas

presentes en sangre periférica mediante la elaboración de frotis sanguíneos de muestras patológicas y
su consulta con un atlas de hematología para su clasificación e identificación de diagnósticos
sospechosos de patologías de la sangre.
INTRODUCCIÓN
Línea Eritroide: Las células de la línea eritroide tienen una proporción de cerca del 25% de todas las
células en la médula ósea, guardando una relación gránulo/eritroide de 3:1. Todas las células
hematopoyéticas se encuentran localizadas en forma de cordones cerca de los senos vasculares. Para
el caso de los precursores eritroblásticos estos se encuentran contra la superficie externa de las
capilares sinusoides, en grupos bien diferenciados llamados islas eritroblásticas (unidad anatómica de
la eritropoyesis), formadas por uno o dos macrófagos centrales rodeados de eritroblastos; este
macrófago proporciona los nutrientes requeridos para la maduración de los eritrocitos, los cuales van
alejándose del cuerpo principal hacia la periferia de los macrófagos, conforme maduran. La maduración
inicia a partir del proeritroblasto, el cual genera 2 eritroblastos basófilos, los cuales se dividen en 4
eritroblastos basófilos de 1° generación, estos generan 8 eritroblastos basófilos de 2° generación, que
después de una última división mitótica se transforman en 16 eritroblastos policromátofilos, los cuales
ya no se dividen y se transforman en eritroblastos ortocrómicos, que al expulsar su núcleo originan 16
reticulocitos, los cuales permanecen 48 a 36 horas en la médula ósea antes de salir a torrente
sanguíneo y madurar hasta eritrocitos en un periodo de 24 horas.
Debe señalarse que, aunque cada proeritroblasto puede generar 16 eritrocitos, esto no sucede casi
nunca en la realidad, debido a la existencia de un mecanismo de eritropoyesis ineficaz fisiológico,
genera solo 8 eritrocitos.
48

Los cambios bioquímicos y morfológicos que ocurren en el interior de los eritrocitos durante su
maduración se basan principalmente en la pérdida progresiva de la intensa basofilia del citoplasma y la
compactación de la cromatina del núcleo hasta generar un núcleo picnótico que es expulsado del
eritrocito por la formación de una especie de anillo constrictor. La basofilia del citoplasma en las etapas
más jóvenes del eritrocito se debe a la intensa producción de ribosomas para iniciar la síntesis de
globinas, las cuales van ensamblando la hemoglobina a medida que madura el eritrocito y por tanto al
aumentar su cantidad en el citoplasma disminuye la basofilia del mismo por la propiedad acidófila de la
hemoglobina. El color grisáceo del citoplasma del eritroblasto policromatófilo se debe a que la cantidad
de ribosomas y hemoglobina se encuentra equilibrada dando ese aspecto sucio a la célula. Ocurre algo
similar con los reticulocitos, pues al perder el núcleo permanecen restos de ribosomas y retículo, que
sólo son visibles con una tinción supravital de azul de metileno, sin embargo, con la tinción de Wright
obtienen un color grisáceo por contener material basófilo y acidófilo en su citoplasma.
Línea Mieloide (Granulocitos, Monocitos y Megacariocitos)
Línea granulocítica
49

LINEA ERITROIDE
NUCLEOS
NOMBRE MORFOLOGIA TAMAÑO ( µ ) Redondo,
Proeritr 20-25
oblasto
Eritroblast 16-18 Redondo,

o engrosamiento de cromatina
basófilo
Eritro 12-15 Redondo,

blasto cromatina
policromát irregular y burda
ofilo
Eritroblast 10-15 Picnótico

o
ortocrómic
o
Reticulocit 8-10 Ausente
o
Eritrocito 7-7.5 Ausente
50

LINEA LINFOIDE
51
Las células de la granulopoyesis constituyen un 60-65% de los componentes citológicos medulares.

Los cambios morfológicos evolutivos se resumen en:
● Reducción de la relación núcleo-citoplasma.

● Desaparición de los nucléolos.
● Maduración de la cromatina nuclear.
● Desaparición de la basofilia citoplasmática.
● Aparición de la granulación primaria azurófila a partir del promielocito. En esta última etapa es
imposible distinguir con tinciones de Romanowsky si la célula dará origen a un neutrófilo, un
eosinófilo o un basófilo; sin embargo, cada promielocito ya está comprometido hacia alguna de
estas líneas celulares.
● Aparición de la granulación secundaria o específica (neutrófilo, eosinófilo y basófilo) a partir del
mielocito. Reconocibles morfológicamente por tinciones de Romanowsky.
La primera célula de la serie granulopoyética identificable morfológicamente es el mieloblasto, el cual

da origen al promielocito, y éste al mielocito, metamielocito, banda y finalmente al segmentado. Existen
4 etapas mitóticas entre el mieloblasto y el metamielocito, a partir de esta etapa ya no hay divisiones
celulares. Por último, tiene lugar la indentación y segmentación nuclear al llegar a la etapa de
metamielocito y segmentado, respectivamente.
Todo el proceso de granulopoyesis ocurre entre 4 y 7 días. Las principales alteraciones morfológicas
que ocurren en la serie neutrófilica se engloban en 3 grupos:
● Alteraciones de la granulación.
● Inclusiones citoplasmáticas.
Eosinófilos: Tienen un tamaño semejante a los neutrófilos y se caracterizan morfológicamente por

contener en su citoplasma gránulos acidófilos. Tienen una forma redondeada, su tamaño oscila entre
0,5 y 1,5 pm, ocupan todo el citoplasma de la célula, pero no se sobreponen en el núcleo y se tiñen de
color anaranjado-pardo brillante con las tinciones panópticas, siendo muy frágiles. El núcleo en la etapa
final de segmentado solamente alcanza la bilobulación simétrica y en una proporción muy escasa el
eosinófilo puede llegar a formar tres lóbulos perfectamente simétricos unidos por finos puentes de
cromatina.
Basófilos: La maduración de estas células aún no está muy bien esclarecida como en el caso de las
otras células sanguíneas, sin embargo, se sabe que derivan de una célula germinal comprometida
hacia la granulopoyesis basófila. A diferencia de los basófilos tisulares o mastocitos, son células
redondeadas cuyo tamaño oscila entre 10 y 13 pm. El núcleo de cromatina densa posee generalmente
dos o tres lóbulos unidos por puentes cromatínicos, en ocasiones difíciles
52
FUNDAMENTO
Las células progenitoras de la serie roja y blanca y todos sus fases de células inmaduras normalmente
se encuentran en médula ósea, pero en ciertas patologías como leucemias, anemias u otras
alteraciones celulares anormales en médula ósea provocan el paso de estas a sangre periférica antes
de su maduración, haciéndose presente una nueva morfología de células inmaduras en sangre
periférica de pacientes con diferentes patologías, las cuáles requieren ser identificadas en el área de
análisis clínicos hematológicos mediante la observación de un frotis sanguíneo por medio de sus
características morfológicas para su diagnóstico presuncional.

Gradilla Reactivos
Equipo vacutainer/agujas Torundas con alcohol al 70% Gradilla Aceite de
inmersión
MATERIAL BIOLÓGICO: Muestras Sanguíneas de pacientes con

enfermedades patológicas de la sangre.
MATERIAL DE APOYO: Atlas de hematología, líneas hematopoyéticas, Frotis

sanguíneos patológicos.
DESARROLLO:
Tinción de Wright
● Hacer un frotis sanguíneo.
● Colocarlo sobre el puente de tinción.
● Al frotis se le agrega colorante de Wright cubriendo toda la extensión.
● Inmediatamente después se le agrega el buffer, dejando reposar de 5 a 10 minutos. También se
puede agregar los reactivos por separado, primero el colorante de Wright durante 10 minutos,
cubriendo totalmente la extensión y posteriormente la solución buffer durante 8 minutos. El
tiempo para la tinción va a depender de la madurez del colorante, entre más maduro menor es
el tiempo de tinción.
● Con la pipeta Pasteur soplar a la muestra para mezclar el colorante de Wright y la solución buffer
53
Lavar a chorro de agua procurando no dañar la película de sangre.

● Dejar secar el frotis teñido a temperatura ambiente limpiando el excedente de colorante de la
parte posterior con una torunda de alcohol.
● Enfocar con el objetivo de 10X y observar al microscopio con el objetivo de inmersión (100X).
1. Realizar un Frotis sanguíneo y teñirlo con el colorante de Wright.

2. Observar el Frotis al microscopio a 10X, 40X y 100X.
3. Identificar las características morfológicas y tintoriales de las células inmaduras encontradas. 4.
Hacer esquemas e imágenes claras de las células inmaduras de todas las líneas
hematopoyéticas y reportar las características morfológicas e identificarlas en los esquemas.
RESULTADOS:
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS. (Señalar características morfológicas de las diferentes

estirpes de células inmaduras presentes.
CUESTIONARIO.
1. ¿Cuánto tiempo permanecen los reticulocitos en médula ósea antes de salir a torrente sanguíneo
y madurar?
2. En esta célula granulopoyética el núcleo en la etapa final de segmentado solamente alcanza la
bilobulación simétrica y en una proporción muy escasa puede llegar a formar tres lóbulos: 3.
Escriba dos patologías donde existan proeritroblastos y eritroblastos:
4. Mencione otro método de diagnóstico de laboratorio para la búsqueda de presencia de células
inmaduras propias de médula ósea circundantes en sangre periférica:
54
PRÁCTICA No. 10
CUENTA DE PLAQUETAS
Realiza el recuento de plaquetas por el método directo e indirecto en una muestra de sangre.
INTRODUCCIÓN Las plaquetas o trombocitos, se desprenden del citoplasma de los megacariocitos

adultos. Son los elementos formes más pequeños (1 a 4 micras) y están desprovistas de núcleo, por lo
que no se trata de verdaderas células, sino fragmentos celulares. En los frotis se observan a menudo
aglomeradas, debido a su gran capacidad de agregación. La vida media de las plaquetas es
aproximadamente de 8 a 11 días. En sangre periférica las plaquetas se observan en forma discoidal,
ovalada, redondeada o fusiforme y de superficie lisa. Las plaquetas intervienen fundamentalmente en
varios aspectos de la hemostasia. Forman los llamados tapones hemostáticos primarios y participan en
la hemostasia secundaria. En ocasiones, el recuento de plaquetas puede dar falsos resultados por su
agregación debido a las condiciones de extracción la muestra; de modo que la lectura del contador da
un número bajo de plaquetas de gran tamaño.
FUNDAMENTO Las plaquetas diluidas con solución de oxalato de sodio, adquieren una tonalidad
brillante, se cuentan al microscopio montadas en la cámara de Neubauer.
MATERIAL, EQUIPO Y REACTIVOS:
Material de laboratorio
Equipo Tubos de ensaye de 13 X 100 mm Microscopio.
1 Pipeta Pasteur con bulbo.
Contador mecánico 10 portaobjetos.
Agitador para pipetas de Thoma Puente de tinción Reactivos.
2 Cámaras de Neubauer Solución Buffer de fosfatos.
2 pipetas de Thoma para glóbulos rojos.
Oxalato de amonio.
2 Cajas de petri.
Colorante de Wright.
Gradilla Aceite de inmersión.
Equipo vacutainer.
Torundas con alcohol al 70%.
Ligadura o tubo látex.
Franela, Papel absorbente.
Escobillón chico.
Boquilla, Papel filtro.
55
PROCEDIMIENTO
Método directo
1. Homogeneizar la muestra y llenar una pipeta de Thoma para glóbulos rojos hasta la marca de 0.5. 2.
Limpiar el excedente de sangre y llenar con líquido diluyente (oxalato de amonio al 1%) hasta el aforo
de 101, evitar la formación de burbujas.
3. Homogeneizar la dilución manualmente o en agitador mecánico por 2 minutos.
4. Desechar de 3 a 5 gotas.
5. Cargar la cámara de Neubauer por ambos extremos.
6. Dejar reposar 15 minutos dentro de una caja de petri con papel húmedo para evitar la desecación
(cámara húmeda).
7. Contar el número de plaquetas en todo el cuadro central.
8. El número de plaquetas se calcula por medio de la siguiente fórmula:
��/ ��3 = ��. ��

�� 2000
Método indirecto o de Fonio
1. Realizar frotis sanguíneo en portaobjetos y se deja secar al aire.

2. Teñir con colorante de Wrigth o Giemsa.
3. Enjuagar con agua corriente y dejar secar al medio ambiente.
4. Contar 1000 eritrocitos y simultáneamente las plaquetas que se encuentran entre estos. 5. El
número de plaquetas contadas, se relacionan con el número total de eritrocitos contenidos en 1 mm
cúbico de sangre. El número de glóbulos rojos se obtiene realizando un micro hematocrito. 6. Para
calcular el número de plaquetas por mm se aplica la siguiente fórmula:
�� 3 = ��. ��

�� . ��. ��. (��
�� 3)/1000
Si en el campo observado se presentan grumos de plaquetas, podemos afirmar que su número no está
por debajo de lo normal ya que hay una cantidad suficiente de estos elementos para permitir su
agregación.
VALORES DE REFERENCIA: 150 000 a 450 000 plaquetas por mm3.
56
Fig. 1 Plaquetas en extendido de sangre

TRABAJO A DESARROLLAR POR EL ALUMNO.
1. Hacer la cuenta de plaquetas por ambos métodos y anotar sus resultados.

2. Hacer un esquema de las plaquetas observadas en ambos métodos.
3. Observar las características morfológicas de los eritrocitos en cuanto a forma y tamaño.
4. Hacer una tabla de resultados por grupo.
5. Interpretar el resultado.
CUESTIONARIO
1. ¿Qué importancia tiene el recuento de plaquetas?
2. Menciona el concepto de trombocitosis.
3. Menciona tres funciones de las plaquetas.
4. Mencione los términos que se le da al aumento y disminución de plaquetas. 5. ¿Qué ventajas y
desventajas tiene el método directo con respecto al método indirecto para el recuento de plaquetas?
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
57

PRÁCTICA NO. 11
TIEMPO DE SANGRADO.
APRENDIZAJES ESPERADOS.
Medir la habilidad de los pequeños vasos para responder a una lesión, lo que depende de la integrida
de la pared vascular, de su capacidad constrictora y del numero y calidad de las plaquetas que
formaran el tapon hemostático.
INTRODUCCIÓN.
Tiempo de sangrado (TS).
El tiempo de sangrado se define como el tiempo entre la realización de una pequeña incisión en la piel
que produce sangrado y el momento en que éste se detiene.
El tiempo de sangrado mide la interacción de las plaquetas con la pared de los vasos sanguíneos y la
subsecuente formación del coágulo. Por lo tanto, el tiempo de sangrado mide las etapas tempranas de
la hemostasia: las fases vascular y plaquetaria. Un tiempo prolongado se presenta por varias razones:
cuando hay inflamación de los vasos(vasculitis), cuando el nivel de plaquetas circulantes disminuye,
cuando la función de las plaquetas no es la adecuada o cuando las plaquetas no pueden interactuar
con las paredes de los vasos sanguíneos. El tiempo de sangrado puede prolongarse también cuando
existe una disminución o anormalidad en ciertos factores plasmáticos que intervienen en la
adhesividad y agregación plaquetarias, como el factor de von Willebrand, el fibrinógeno o el factor V.
Fig. 1 Tiempo de sangrado

58

FUNDAMENTO.
Tiempo de sangrado (Método de Duke)
La lesión estandarizada de un número pequeño de capilares, nos permite observar la retracción del
capilar, la cantidad y calidad de las plaquetas, al medir el tiempo en cesar la hemorragia. Se efectúa
una punción a través de la piel del lóbulo de la oreja o del antebrazo y se mide exactamente el tiempo
durante en el que sangra.
MATERIAL.
1. Lancetas.
2. Papel filtro
3. Torundas con alcohol al 70%
4. Cronómetro.
DESARROLLO:
1. Dar masaje suave en el lóbulo de la oreja, limpiar con alcohol al 70% y dejar secar. 2. Con una
lanceta esteril y desechable hacer una punción capilar de 3 mm de profundidad en el lóbulo de la
oreja (con movimiento rápido y firme). Tan pronto como se realice la punción capilar se pone en
marcha el cronómetro.
3. Permitir que la sangre salga de la herida sin presión, absorbiendo la sangre con papel filtro sin
tocar la piel cada 15 segundos hasta que cese la hemorragia (esta maniobra es para evitar que
se forme un coágulo en la gota de sangre sobre la herida).
4. Cuando el papel filtro ya no absorba sangre, detener el cronómetro y registrar el tiempo
De 1 a 3 minutos.
TRABAJO A DESARROLLAR POR EL ALUMNO
1. Realizar las pruebas: Tiempo de sangrado

2. Elaborar un cuadro de resultados por grupo.
RESULTADOS.
59
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS.
CUESTIONARIO.
1. ¿Cuál es el tiempo de vida de las plaquetas?

2. ¿Cómo es el tiempo de sangrado en la hemofilia?
3. ¿Cómo serían los resultados de las pruebas de coagulación si los tubos al vació se llenan con
menos sangre?
4. ¿Cuál sería el efecto en las pruebas de hemostasia si la muestra está hemolizada?
5. Defina los siguientes conceptos: Hematoma, petequia y hemartrosis.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.
60

PRÁCTICA NO. 12
TIEMPOS DE COAGULACIÓN
APRENDIZAJES ESPERADO.
Realiza la medida del sistema Intrinseco y Extrinseco de la coagulación TTP y TP depende de la
totalidad de factores de la coagulaciojn involucrados en las fases, excepto calcio y plaquetas.
INTRODUCCIÓN:
Hemostasia.
La hemostasia es un proceso por el cual cesa la hemorragia. El proceso completo se asocia con el
control de la hemorragia de un vaso sanguíneo traumatizado y el cese final de la hemorragia. La
hemostasia es un mecanismo dinámico complejo caracterizado por una serie de fenómenos físicos y
bioquímicos que originan la producción fisiológica de un trombo o coágulo que obtura el vaso
lesionado. Cuando hay una lesión vascular, la hemostasia se activa de inmediato para impedir la
hemorragia. En primera instancia hay una vasoconstricción e inmediatamente se forma el coágulo
plaquetario que necesita una malla de fibrina que le de firmeza. La hemostasia se divide en
hemostasia primaria, cierre inmediato de la lesión por vasoconstricción y activación plaquetaria sin que
se forma fibrina y hemostasia secundaria, formación de fibrina por medio de la fase fluida y cuya
función es hacer más estable el coágulo.
De acuerdo con el modelo celular de la coagulación, la vía intrínseca es un amplifi cador iniciada por la
vía extrínseca a través de la expresión del factor tisular y la subsecuente cadena de eventos
propiciados por la expresión de macropartículas en las superfi cies celulares que favorecen la unión,
activación e inhibición de las proteasas procoagulantes y anticoagulantes. El modelo celular identifi ca
a la membrana de células expresadoras de FT (fi broblastos, monocitos y neutrófi los), principalmente
las plaquetas, como los sitios donde la activación de la coagulación tiene lugar, enfatizando en la
interacción entre los factores y los receptores celulares. Así mismo determina la importancia del
complejo TF/FVIIa en la activación del sistema, considerando un proceso en tres fases simultáneas:
a. Iniciación: pequeñas cantidades de factores de coagulación son generados.
b. Amplifi cación: la cantidad de factores se eleva y se activan.
c. Propagación: los factores se adhieren a las plaquetas y se forman los coágulos de fibrina
61

La iniciación comienza con la exposición del Factor Tisular conlleva a la formación delm complejo
tenasa extrínseco, en estaw etapa se forman trazas de trombina, amplificación; la trombina activa a las
plaquetas y otros factores como el Factor V, Factir VIII y el Factor IX, Propagacion; la formación de los
complejos Tenasa intrínseco y Protrombinasa, aseguran la generación de grandes cantidades de
tr4ombina, esta fase culmina con la formación de fibrina entrecruzada, resultando en un coagulo
estable.
FUNDAMENTO.
Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (TTPa).
Se agrega al plasma descalcificado cloruro de calcio y un concentrado de fosfolípidos histícos o

plaquetarios, debiendo coagular esta muestra en menos de 45 segundos, si existe integridad en los
factores que intervienen en la vía intrínseca de la primera fase de la coagulación.
Tiempo de protrombina (Técnica de Quick).
Se valora principalmente la segunda fase de la coagulación, en virtud de que la protrombina es el

precursor inactivo de la trombina, enzima proteolítica activa. Al plasma descalcificado se agrega cloruro
de calcio y una tromboplastina comercial, observándose el tiempo de coagulación.
Material de laboratorio
1. Gradilla para tubos de ensayo

2. Cinco tubos de ensaye de 13 X 75 mm
3. Pipeta Pasteur con bulbo
4. Tubo al vacio con citrato de sodio al 3.8% (tapón de color azul)
5. Equipo vacutaines.
6. Torundas con alcohol al 70%
7. Ligadura o tubo látex
Equipo.
1. Baño maría eléctrico

2. Termómetro
3. Cronómetro
Reactivos.
1. Reactivos para TP y TTPa
62
Tiempo de protrombina(TP)
1. Obtener una muestra de sangre en un tubo al vació con tapa de color azul que contiene
anticoagulante de citrato de Sodio al 3.8 %
2. Centrifugar la muestra de sangre a 3500 r.p.m y separar el plasma en tubos de vidrio siliconado
o plástico.
3. Precalentar a 37±1ºC la cantidad necesaria de reactivo de Tromboplastina y la muestra durante
no más de 10 min.
4. Mezclar en tubos de vidrio de 13x75mm 200µl de reactivo precalentado con 100µl de plasma
citrado precalentado.
5. Empezar a contar en el momento de la mezcla
6. Con un aplicador de madera agite el tubo dentro del baño de agua durante 2 a 3 segundos,
después déjelo reposar hasta los 10 seg.
7. En seguida examine el tubo hasta que aparezca el coágulo, en este momento pare el
cronómetro y anote el tiempo transcurrido.
8. Se repite el procedimiento para que se obtengan por lo menos dos registros para cada
problema y muestra control. Las medidas de los dos tiempos equivalen al tiempo de
protrombina de la muestra.
Tiempo de Tromboplastina Parcial Activada (TTPa)
1. Obtener una muestra de sangre en un tubo al vació con tapa de color azul que contiene
anticoagulante de citrato de Sodio al 3.8 %
2. Centrifugar la muestra de sangre a 3500 r.p.m y separar el plasma en tubos de vidrio siliconado
o plástico.
3. Incubar a baño maría a 37°C la tromboplastina parcial activada, el Cloruro de calcio 0.02M y la
muestra de plasma.
4. Colocar en un tubo 100 microlitros de plasma y 100 microlitros de tromboplastina parcial
activada 5. Mezclar bien e incubar 5 minutos a 37°C.
6. Adicionar 0.1 mL. de Cloruro de Calcio 0.02 M, iniciar el conteo del tiempo en elcronómetro; a los
20 segundos observar cuidadosamente la muestra removiendo con un aplicador parar el
cronometro hasta la aparición de los primeros hilos de fibrina.
VALORES DE REFERENCIA.
TTPa: Menos de 45 segundos.
TP: De 12 a 13 segundos
63

1. Determinar el TP y TTP de la muestra obtenida
2. Calcular el INR del TP
3. Elaborar un cuadro con los resultados obtenidos por grupo.
4. Anotar al final la bibliografía de consulta.
RESULTADOS
CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la función de la hemostasia?

2. ¿Cuáles son las pruebas más importantes para evaluar la hemostasia?
3. ¿Cuál es la vía de la coagulación afectada en la hemofilia?
4. ¿Cuál es la manifestación clínica más frecuente en la hemofilia
5. ¿Cuál es el órden de llenado de los tubos al vació para la toma de sangre cuando se realizan
varias pruebas incluyendo las de coagulación?
64

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CENTRO DE ESTUDIOS CIENTÍFICOS Y TECNOLÓGICOS NO.

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PROFESOR TITULAR: _________________________________________

PROFESOR (ES) DE LABORATORIO:

NOMBRE DEL ALUMNO:

No. DE BOLETA: ____________ GRUPO: _______ EQUIPO No.:

_______ CICLO ESCOLAR:

ELABORADO POR REVISADO POR APROBADO POR AUTORIZADO POR

Angélica Cadena Esp. En Odont. L. en E. Dr. Rafael

Docentes Presidente de Jefe de Área Director del C E C y

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

LINEAMIENTOS DE TRABAJO PARA LOS LABORATORIO DE LAS UNIDADES DE

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

1. Reporte de práctica: 10% 1. Reporte de práctica: 10%

2. Evaluación continua: 10% (Guía de 2. Evaluación continua: 10%

3. Examen de laboratorio: 30% 3. Examen de laboratorio: 20%

Aspecto a evaluar Puntaje

1. Titulo y aprendizaje esperado 1 pto

TECNOLÓGICOS NO. 15 “DIÓDORO ANTÚNEZ

1. Toma de muestra venosa y capilar con diferentes

2. Tinción y características morfológicas de los

3. Determinación de hemoglobina, hematocrito e

4. Recuento de Reticulocitos y determinación de

5. Leucopoyesis y morfología de los leucocitos 32 6. Cuenta diferencial

de Leucocitos 35 7. Cuenta total de leucocitos 39 8. Citometria hematica

9. Reconocimiento de algunas características

10. Cuenta de plaquetas. 53

13. Tiempo de coagulación. EXAMEN PRÁCTICO C

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

LABORATORIO DE: ANÁLISIS HEMATOLÓGICOS

APRENDIZAJE ESPERADO: Describe las generalidades de análisis hematológicos, las etapas

La sangre es una suspensión de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en un líquido de compleja

Fig. 1 Zonas de recolección venosa

1. Yema de los dedos

3. Talón (solo neonates

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2. Arteria braquial o humeral

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Fig. No. 4 Jeringas.

1. Agujas: Son estériles y presentan varias longitudes y anchos (calibre o apertura).

3. Tubos al vacío: Son de plástico o vidrio, contienen una cantidad preestablecida de un

4. Equipos de infusión alados (mariposas = butterflies) Dispositivos intravenosos que

Fig. 5 Elementos empleados en los sistemas al vacío.

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Tabla 1 Tubos al vacío

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Obtención de sangre venosa con jeringa o sistema al vacío

Fig 6 Toma de muestra venosa

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1. Producir un flujo sanguíneo libre mediante calentamiento o ligero masaje de la zona

TRABAJO DEL ALUMNO:

RESULTADOS: Registra el éxito en la toma de muestra

Describe las características morfofisiológicas normales para la identificación de las

El frotis de sangre periférica es un examen para el diagnóstico hematológico que conduce a

No. DE BOLETA: ______ GRUPO: _ EQUIPO No.:

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