PCR Colony

PCR COLONY
NAYDU GABRIELA SANCHEZ RINCON- 1611807.
BIOLOGÍA MOLECULAR
DOCENTE: ROMINA ESMERALDA FUENTES
DÍAZ.
PCR COLONY
El término "PCR colony" se refiere a las colonias bacterianas que se crean como
resultado de la amplificación de ADN mediante la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés).
E. Coli
FUNDAMENTO
1. Selección de colonias
2. Lisis celular
3. Amplificación del ADN
4. Fases de la PCR
5. Obtención de productos de PCR: Como resultado de la amplificación, se generan muchas
copias de la secuencia de interés a partir de la colonia original.
6. Análisis de productos de PCR: Los productos de PCR se pueden analizar de diversas
maneras, como mediante electroforesis en gel o secuenciación, para confirmar la
presencia y la identidad de la secuencia de ADN amplificada.
VENTAJAS DESVENTAJAS
Amplificación Específica Tiempo consumido.
ClonaciónTÍTULO
de genes. Posibilidad de errores.
Conservación del material Necesidad de selección de colonias.
Análisis subsecuente. Posibilidad de contaminación.
Multiplicación del material Uso de antibióticos.
genético.
ACTUALIDAD
La PCR colony sigue siendo útil en situaciones en las que se requiere una amplificación
específica de NMJM
fragmentos de ADN y la clonación de genes para estudios funcionales,
producción de proteínas recombinantes, creación de bibliotecas genómicas, entre
otros.
Biblioteca genomica
PCR en tiempo real (qPCR): La PCR en tiempo real permite la cuantificación precisa de la
cantidad de ADN amplificado en tiempo real a medida que se lleva a cabo la reacción.
Secuenciación de próxima generación (NGS): La NGS permite la secuenciación masiva y de alta
velocidad de fragmentos de ADN, lo que permite el análisis de múltiples genes o secuencias en
una sola muestra.
PCR multiplex: La PCR multiplex permite la amplificación simultánea de múltiples secuencias de
ADN en una sola reacción.
Técnicas de amplificación isotérmica: Estas técnicas, como la LAMP (Amplificación Isotérmica
Mediante Bucle), permiten la amplificación de ADN a temperaturas constantes.
Nombre: “Resistencia bacteriana a antibióticos hospitalaria y extrahospitalaria”
Autores: Marta Núñez Díaz, Ana Maria Sánchez Sánchez, 2020.
Aislamiento de bacterias: Se recolectaron muestras de diferentes áreas de un hospital
para detectar bacterias resistentes a antibióticos. Se realizaron cultivos bacterianos en
1
placas de agar con meticilina llamado Agar Mueller-Hinton con Meticilina o como medio
slternativo Agar Mueller-Hinton con Oxacilina.
Selección de colonias resistentes: Se observaron colonias que crecieron en presencia de

2
meticilina, lo que indica resistencia. Se seleccionaron varias colonias de interés.
Extracción de ADN: Se extrajo el ADN de las colonias seleccionadas mediante una

3
técnica de lisis celular y precipitación de ADN.
PCR de amplificación: Se realizó una PCR utilizando cebadores específicos para un gen de
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resistencia a antibióticos previamente identificado en estudios anteriores.
Clonación en células bacterianas: Se insertó el producto de PCR en células bacterianas de

5
Staphylococcus aureus mediante transformación
S. Aereus vs Meticilina
Estas colonias fueron analizadas más a fondo y se encontró que el gen de resistencia
confería a las bacterias la capacidad de resistir era la PBP2a (proteína fijadora de
penicilina 2a). Los investigadores también secuenciaron el gen para confirmar su
identidad.
Staphylococcus aureus es una bacteria Gram-positiva que se
encuentra comúnmente en la piel y las membranas mucosas de
los seres humanos.
La PCR puede distinguir entre cepas patogénicas y no patogénicas
de S. aureus mediante la detección de genes de virulencia
específicos, como el gen spa (que codifica la proteína A de
superficie) o genes asociados con la producción de toxinas.
S. Aereus
Detección de resistencia a antibióticos.
Caracterización molecular: La PCR permite la tipificación de
cepas de S. aureus mediante la amplificación de secuencias
genéticas específicas, como el ADN ribosómico (rDNA)
Diagnóstico de infecciones.
CONCLUSIONES
PCR COLONY permite estudios funcionales al clonar genes de interés y analizar su
actividad en un contexto biológico. Esto tiene aplicaciones significativas en la
investigación genética, microbiología y biotecnología, así como en el desarrollo de nuevos
medicamentos y terapias basadas en genes.
Esta técnica es fundamental en la construcción de bibliotecas genómicas, la clonación de
genes y la producción de proteínas recombinantes para su estudio.

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