EXPRESION GÉNICA.

TRANSCRIPCIÓN DEL ADN

La primera etapa en el flujo de información del ADN al polipéptido es la

transcripción de una secuencia de nucleótidos de ADN en una
secuencia de nucleótidos de ARN. El biólogo Roger Kornberg, de la
Universidad de Stanford, trabajó cuidadosamente los detalles de la
transcripción, por lo que fue galardonado con el Premio Nobel de
Química 2006.

En la transcripción eucariota, la mayor parte de la síntesis de ARN

requiere una de las tres ARN polimerasas, enzimas que están presentes
en todas las células. Las tres ARN polimerasas difieren en los tipos de
síntesis de ARN que catalizan. La ARN polimerasa I cataliza la síntesis de
varias clases de moléculas de ARNr que son componentes del
ribosoma; la ARN polimerasa II de ARN cataliza la producción del ARNm
codificante de proteína; y la ARN polimerasa III cataliza la síntesis de
ARNt y una de las moléculas de ARNr.

Las ARN polimerasas requieren ADN como molde o plantilla y tienen muchas similitudes con las ADN
polimerasas.

Al igual que las ADN polimerasas, las ARN polimerasas realizan la síntesis en la dirección

5´ 3´; es decir, se inician en el extremo 5´de la molécula de ARN sintetizada y continúan agregando
nucleótidos en el extremo 3´hasta que la molécula esté completa.

Recuerde que siempre que las moléculas de ácido nucleico se asocian mediante emparejamiento de bases
complementario, las dos cadenas son antiparalelas. Así como las dos cadenas emparejadas del ADN son
antiparalelas, la cadena codificante del ADN y la cadena del ARN complementaria también son
antiparalelas. Por lo tanto, cuando ocurre la transcripción, conforme el ARN se sintetiza en su dirección

5´ 3´, el código del ADN se lee en su dirección 3´ 5´.

Pasos de la transcripción:

1º) La construcción del ARN es dirigida solo por una

de las dos cadenas del ADN, la dispuesta en
dirección

3´ 5´. Esto permite anticipar que la síntesis del

ARN se inicia en el extremo 5´ de su molécula y
progresa hacía en extremo 3¨.

2º) El ARN no se construye globalmente sino

paso a paso, los ribonucleótidos se van
eslabonando de a uno por vez. Por lo tanto, no es
necesario que el ADN abra en su momento dado su
doble hélice en toda su extensión. Solo se separa y
expone alrededor de 10 pares de nucleótidos.
Esta separación forma en la molécula de ADN unas “burbujas”, la cual se desplaza en dirección 5´ 3´ a
medida que son leídos los nucleótidos.

La enzima denominada ARNpol II comienza la transcripción reconociendo las secuencias de las bases
promotoras.

La ARNpol II separa la cadena de ADN y deja expuesto el primer desoxirribonucleótido que será leído.

Se coloca el 1º ribonucleótido trifosfato que será el primer nucleótido del ARN. Su base establece una unión
no covalente con la complementaria del ADN.

La transcripción concluye:

- Cuando la ARNpol II alcanza la secuencia de

terminación situada en el extremo 3´

- Se libera la enzima

- Se desprende el ARN recién sintetizado que será

el transcripto primario.

- En el extremo 5´, el 1º nucleótido retiene 3 fosfatos

- En el extremo 3´, exhibe grupo OH.

TRADUCCIÓN DEL ARN

La traducción agrega otro nivel de complejidad al proceso de transferencia de información porque implica
la conversión del código de tripletes de bases del ácido nucleico al alfabeto de 20 aminoácidos de los
polipéptidos. La traducción requiere el funcionamiento coordinado de más de 100 tipos de
macromoléculas, incluyendo la proteína y los componentes ARN de los ribosomas, ARNm, y los
aminoácidos unidos a los ARNt.

Los aminoácidos están unidos por enlaces peptídicos para formar proteínas.

El proceso de traducción asegura tanto la formación de enlaces peptídicos como la unión de los
aminoácidos en la secuencia correcta que especifican los codones en el ARNm.

¿Cómo se alinean los aminoácidos en la secuencia adecuada para que puedan unirse? Crick propuso que se
necesitaba una molécula para hacer un puente de unión entre el ARNm y las proteínas. Se determinó que
esa molécula era el ARNt. Cada tipo de molécula ARNt se une a un aminoácido específico. Los aminoácidos
se unen covalentemente a sus respectivas moléculas de ARNt mediante enzimas, llamadas aminoacil-ARNt

sintetasas, que utilizan ATP como fuente de energía.

Los ARNt son cadenas

polinucleótidas de 70 a 80
nucleótidos de largo, cada una
con varias secuencias de bases
únicas y también con algunas
secuencias que son comunes a
todas. A pesar de ser
considerablemente más
pequeñas que las moléculas de
ARNm o ARNr, las moléculas de
ARNt presentan una estructura complicada. Una molécula de ARNt tiene varias propiedades esenciales para
su función: (1) contiene un anticodón, una secuencia de unión complementaria para el correcto codón de
ARNm; (2) es reconocida por un aminoacil ARNt sintetasa que agrega el correcto aminoácido; (3) tiene un
sitio de unión para el particular aminoácido que especifica el anticodón (el sitio está a cerca de 180 grados
del anticodón); y (4) es reconocida por los ribosomas.

La iniciación de la traducción utiliza proteínas llamadas factores de iniciación, que se adhieren a la

subunidad ribosómica pequeña.

El ARNt que transporta el primer aminoácido del

polipéptido es el iniciador ARNt. El aminoácido metionina
se une al iniciador ARNt, y como resultado, el primer
aminoácido en los nuevos polipéptidos es metionina.

El fMet iniciador del ARNt, que tiene el anticodón

3´¬UAC¬5´, se une al codón iniciador AUG, liberando uno
de los factores de iniciación en el proceso. El complejo de
iniciación se completa cuando se une la subunidad
ribosómica grande a la subunidad pequeña y se liberan los
factores de iniciación residuales.

El aminoacil-ARNt apropiado reconoce el codón en el sitio A y se une ahí mediante el emparejamiento de

las bases de su anticodón con el codón de ARNm complementario.

El grupo amino del aminoácido en el sitio A es ahora alineado con el grupo carboxilo del aminoácido
precedente adherido a la cadena polipeptídica en crecimiento, en el sitio P. Se forma un enlace peptídico
entre el grupo amino del nuevo aminoácido y el grupo carboxilo del aminoácido precedente. De esta
manera, se libera el polipéptido del ARNt en el sitio P y se adhiere al aminoacil-ARNt en el sitio A. Esta
reacción es espontánea (no requiere energía adicional) porque el ATP transfirió energía durante la
formación del aminoacil ARNt.

La terminación es la etapa final de la

traducción. En la terminación, la síntesis de la
cadena polipeptídica se finaliza con un factor
de liberación, una proteína que reconoce el
codón de parada en el extremo de la
secuencia codificante.
LOS RIBOSOMAS (ARN RIBOSÓMICO Y PROTEÍNAS RIBOSOMALES)

El reconocimiento entre los tripletes del

mensajero y los anticodones de los ARNt

cargados con su correspondiente aminoácido, así

como el establecimiento de los enlaces
peptídicos entre dos aminoácidos sucesivos tiene
lugar en los ribosomas.

Subunidades de los ribosomas procarióticos y

eucarióticos

Los ribosomas son unas estructuras o partículas

citoplásmicas formadas por ribonucleoproteínas
(unión de ARN ribosómicos con proteínas
ribosomales). Los ribosomas en las células
eucarióticas se encuentran en la membrana del
retículo endoplasmático. La estructura general
de los ribosomas procarióticos y eucarióticos
consta de una subunidad pequeña, una subunidad grande y dos sedes, la sede aminoacídica (Sede A) lugar
de entrada de los ARNt cargados con un aminoácido (aminoacil-ARNt) y la sede peptídica (Sede P) lugar
en el que se encuentran los ARN-t cargados con un péptido (peptidil-ARNt) y la sede exit salida del ARNt.
 LA REPLICACIÓN DEL DNA

La replicación del DNA comienza en una secuencia de nucleótidos particular en el cromosoma: el origen
de la replicación. Ocurre bidireccionalmente por medio de dos horquillas de replicación que se mueven en
direcciones opuestas. Las enzimas helicasas cortan las cadenas por delante de las horquillas de
replicación y las proteínas de unión a cadena simple estabilizan las cadenas separadas. Otras enzimas, las
topoisomerasas, relajan el superenrollamiento de la hélice.

Para que pueda comenzar la replicación se necesita una secuencia de cebador de RNA sintetizado por la
enzima RNA primasa-, con sus bases correctamente apareadas con la cadena molde. La adición de
nucleótidos de DNA a la cadena es catalizada por las DNA polimerasas. Estas enzimas sintetizan nuevas
cadenas sólo en la dirección 5' a 3', añadiendo nucleótidos uno a uno al extremo 3' de la cadena creciente.

La replicación de la cadena adelantada es continua, pero la replicación de la cadena rezagada es

discontinua. En la cadena rezagada, fragmentos de Okazaki se sintetizan en la dirección 5' a 3'.

La enzima DNA ligasa une fragmentos de Okazaki contiguos. En el proceso de replicación del DNA se
pierden nucleótidos en los extremos de las moléculas de DNA lineales. En algunas células eucarióticas,
esta pérdida es compensada por la actividad de la enzima telomerasa.

En el curso de la síntesis de DNA, la DNA polimerasa corrige los errores, retrocediendo cuando es
necesario para eliminar nucleótidos que no estén correctamente apareados con la cadena molde. Otros
errores en el DNA ocurren en forma independiente del proceso de replicación y son usualmente
reparados por distintos mecanismos.

Los nucleótidos, antes de ser incorporados a las cadenas crecientes de DNA, se encuentran en forma de
trifosfatos. La energía requerida para impulsar la replicación proviene de la eliminación de dos fosfatos
"supernumerarios" y la degradación del enlace P ~ P.

Las dos cadenas de la doble hélice de DNA se separan y sirven como moldes para la síntesis de nuevas
cadenas complementarias. Las helicasas, enzimas que operan en las horquillas de replicación, separan las
dos cadenas de la doble hélice original. Las topoisomerasas, evitan el superenrollamiento, catalizando la
formación y resellado de cortes en una o ambas cadenas delante de las horquillas de replicación. Las
proteínas de unión a cadena simple estabilizan las cadenas abiertas.

La DNA polimerasa cataliza la adición de nucleótidos a ambas cadenas operando sólo en dirección 5' a 3'.
Para comenzar a añadir nucleótidos, esta enzima requiere la presencia de un cebador de RNA, unido por
puentes de hidrógeno a la cadena molde que es luego reemplazado por nucleótidos de DNA. El cebador
de RNA es sintetizado por la RNA primasa.
La cadena adelantada se sintetiza en la dirección 5' a 3' en forma continua. En este caso, el único cebador
de RNA está situado en el origen de replicación, que no es visible en este esquema. La cadena rezagada
también se sintetiza en la dirección 5' a 3', a pesar de que esta dirección es opuesta a la del movimiento
de la horquilla de replicación. El problema se resuelve mediante la síntesis discontinua de una serie de
fragmentos, los fragmentos de Okazaki.

Cuando un fragmento de Okazaki ha crecido lo suficiente como para encontrar a un cebador de RNA por
delante de él, otra DNA polimerasa reemplaza a los nucleótidos de RNA del cebador con nucleótidos de
DNA. Luego, la DNA ligasa conecta cada fragmento con el fragmento contiguo recién sintetizado en la
cadena.
UNIVERSIDAD NACIONAL DE ASUNCIÓN Ciencias de la Naturaleza y Salud

COLEGIO EXPERIMENTAL PARAGUAY – BRASIL Tercer curso