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    Práctica 11 - Cámara de Neubauer y CC - Ejercicios

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    Silvia Muñoz Consuelo
    La curva de crecimiento microbiano tiene 4 fases: lag, logarítmica o exponencial, estacionaria y de muerte. La fase logarítmica es cuando el número de bacterias crece exponencialmente, mientras que en la fase estacionaria no hay aumento neto debido a que la aparición de nuevos microorganismos se compensa con la muerte de otros. El tiempo de generación y la constante específica de velocidad de crecimiento son parámetros importantes para calcular el crecimiento bacteriano en cada fase.

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    Práctica 11 - Cámara de Neubauer y CC - Ejercicios

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    La curva de crecimiento microbiano tiene 4 fases: lag, logarítmica o exponencial, estacionaria y de muerte. La fase logarítmica es cuando el número de bacterias crece exponencialmente, mientras que en la fase estacionaria no hay aumento neto debido a que la aparición de nuevos microorganismos se compensa con la muerte de otros. El tiempo de generación y la constante específica de velocidad de crecimiento son parámetros importantes para calcular el crecimiento bacteriano en cada fase.

    Descripción original:

    Microbiología

    Título original

    Práctica 11 . Cámara de Neubauer y CC - Ejercicios

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    La curva de crecimiento microbiano tiene 4 fases: lag, logarítmica o exponencial, estacionaria y de muerte. La fase logarítmica es cuando el número de bacterias crece exponencialmente, mientras que en la fase estacionaria no hay aumento neto debido a que la aparición de nuevos microorganismos se compensa con la muerte de otros. El tiempo de generación y la constante específica de velocidad de crecimiento son parámetros importantes para calcular el crecimiento bacteriano en cada fase.

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    Silvia Muñoz Consuelo
    La curva de crecimiento microbiano tiene 4 fases: lag, logarítmica o exponencial, estacionaria y de muerte. La fase logarítmica es cuando el número de bacterias crece exponencialmente, mientras que en la fase estacionaria no hay aumento neto debido a que la aparición de nuevos microorganismos se compensa con la muerte de otros. El tiempo de generación y la constante específica de velocidad de crecimiento son parámetros importantes para calcular el crecimiento bacteriano en cada fase.

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    CÁMARA DE NEUBAUER

    • Curva de crecimiento
    microbiano
    OBJETIVO
    Conocer:
    • Curva de crecimiento de microorganismos.
    Para graficar cambios
    poblacionales se emplean
    escalas logarítmicas.
    CURVA DE CRECIMIENTO

    20 , 21 , 22 , 23 , …… , 2�
    n= número de duplicaciones
    Fase lag: el microorganismo se adapta a las nuevas condiciones y pone en
    marcha su maquinaria metabólica para poder crecer activamente. La duración de
    esta fase es variable y en general
    es mayor cuanto más grande sea el cambio en las condiciones en las que se
    encuentra el microorganismos.
    Fase log.: El número de bacterias crece en forma exponencial en un tiempo
    relativamente corto.
    Fase estacionario : fase en la que no hay aumento neto de microorganismos, lo
    que no significa que no se dividan algunos, sino que la aparición de nuevos
    individuos se compensa or la muerte de otros.
    Fase de muerte : fase en la que el número de microorganismos vivos disminuye
    de forma exponencial, lo cual depende de diferentes circunstancias.
    Fase exponencial, para cultivo en
    lote N0: Número inicial de células.
    N: Número de células.
    t : Tiempo de duplicación celular(min. o
    horas).
    u:Velocidad específica de crecimiento
    (representa la velocidad de crecimiento
    por unidad de biomasa ℎ−1 )
    k: velocidad de crecimiento.
    g: tiempo de generación.(tiempo que
    tarda en duplicarse la población)
    Mt: Biomasa ( máximo obtenido)
    St: Cantidad de sustrato en el tiempo
    que se obtiene el número de células
    más elevado.
    Relación curva de
    crecimiento vs
    Sustrato
    Tipos de cultivo
    CULTIVO EN LOTE CULTIVO CONTINUO
    Ejercicios
    1. Si partimos de 104 UFC/ml en un cultivo que tiene un tiempo de generación de 2 h,
    ¿cuántas células cultivables tendremos al cabo de 4, 24 y 48 h de cultivo?

    2. ¿Cuál es el tiempo de generación de un cultivo que tiene una constante específica de


    velocidad de crecimiento de 0,01 min-1? ¿Cuál será su velocidad de duplicación?

    3. Si se quiere conseguir que un cultivo crezca hasta una densidad celular de 108
    células/ml en 3 h, y el tiempo de generación es de 30 min., ¿cuál debe ser la densidad
    celular al comienzo del cultivo?

    4. Tenemos un cultivo de densidad 108 células/ml, con un tiempo de generación de 30


    min. Si la densidad inicial fue de 106 células/ml, ¿que tiempo de incubación ha sido
    necesario para alcanzar la densidad final mencionada?
    • Solución
    1.
    N0 = 104 UFC/ml, g = 2 h, ¿cuántas células cultivables tendremos al cabo de 4, 24 y 48 h de cultivo?

    g =0,693/u
    u = 0,693/ g
    Log N-logN0 =u/2,303 x (t-t0)
    u=0,3465 ℎ−1
    Log N=(u/2,303 x (t-t0)) + logN0

    ���
    4h: Log N=(0,3465/2,303 x (4)) + 4 N= 4 x 104
    ��

    24h: Log N=(0,3465/2,303 x (24)) + 4 N = 4,08 x 107


    ���
    ��

    48h: Log N=(0,3465/2,303 x (48)) + 4 ���


    N = 1,67 x 1011
    ��
    2.

    • µ = 0,01 min-1¿g? ¿K?

    g = 0,693/u
    g= 69,3 min = 1,155 h
    K=1/g
    K =0,8685 ℎ−1
    3.
    N = 108 células/ml t = 3 h, g = 30 min.¿N0?

    g = 0,693 /u
    Log N-logN0 =u/2,303 x (t-t0) u = 0,693/ g
    Log N - (u/2,303 x (t-t0)) = logN0 U =1,386 ℎ−1

    N = 1,56 106 células /mL


    4.
    • N0 = 106 células/ml, N = 108 células/ml g = 30 min. ¿t?

    Log N-logN0 =u/2,303 x (t-t0) g = 0,693 /u

    t =3,323 h
    5. Supongamos un cultivo en fase exponencial que en un momento dado tiene 10 000
    células/mL y cuatro horas más tarde 100 000 000 células/mL. Calcular u y g.

    6. En una comida campestre se contaminó la frejolada con 46 células de Propionibacterium


    acnes tiene un tiempo de generación de 90 minutos y una fase de latencia (fase lag) de
    1.5h ¿Cuántas células de esta bacteria estarán presentes en la frejolada al cabo de
    10h?

    7. Un carnicero, portador asintomático de Salmonella, picó carne sin proteger sus manos
    con guantes. La carne picada se contaminó con 25 células de Salmonella spp. y con 32
    células de S. entérica. Sabiendo que Salmonella spp. tiene un tiempo de generación de 30
    minutos y una fase de latencia de 3h y que la constante específica de la velocidad de
    crecimiento de S. entérica en la carne es 0,17ℎ−1 y la duración de su fase de latencia 5h
    calcule el número d células del género Salmonella que habrá en la carne 10h después de
    ser picada.
    8. Se produce un vertido de aguas residuales urbanas en una playa. La densidad de E.coli
    y de Enterocus faecalis en las aguas residuales es de 7,8 1010 y 6,2 109 células/100mL,
    respectivamente. El factor de dilución del vertido al incorporarse a la playa es de 1/1000.
    Dado que la concentración de nutrientes en la playa es baja, el crecimiento de ambos
    microorganismos está ralentizado. El tiempo de generación de E. coli es de 3 horas
    mientras que la constante específica de la velocidad de crecimiento de Ent. Faecalis es de
    0,11 ℎ−1 . Con los datos que se indican ¿Podría indicar cual será el número de células por
    mililitro, de cada una de estas bacterias, en el agua de la playa 24 horas después del
    vertido?

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