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    Factores Que Modifican La Actividad Enzimática

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    Dair Vargas Lopez
    Este documento describe un experimento sobre los factores que afectan la actividad enzimática. El experimento evalúa cómo factores como el pH, la concentración de la enzima amilasa salival y del sustrato almidón afectan la velocidad de la reacción enzimática mediante la hidrólisis del almidón. Los resultados se analizan midiendo la presencia de sustrato residual y productos de la reacción.

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    Factores Que Modifican La Actividad Enzimática

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    Dair Vargas Lopez
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    Este documento describe un experimento sobre los factores que afectan la actividad enzimática. El experimento evalúa cómo factores como el pH, la concentración de la enzima amilasa salival y del sustrato almidón afectan la velocidad de la reacción enzimática mediante la hidrólisis del almidón. Los resultados se analizan midiendo la presencia de sustrato residual y productos de la reacción.

    Descripción original:

    medicina y salud

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    Este documento describe un experimento sobre los factores que afectan la actividad enzimática. El experimento evalúa cómo factores como el pH, la concentración de la enzima amilasa salival y del sustrato almidón afectan la velocidad de la reacción enzimática mediante la hidrólisis del almidón. Los resultados se analizan midiendo la presencia de sustrato residual y productos de la reacción.

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    Factores Que Modifican La Actividad Enzimática

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    Dair Vargas Lopez
    Este documento describe un experimento sobre los factores que afectan la actividad enzimática. El experimento evalúa cómo factores como el pH, la concentración de la enzima amilasa salival y del sustrato almidón afectan la velocidad de la reacción enzimática mediante la hidrólisis del almidón. Los resultados se analizan midiendo la presencia de sustrato residual y productos de la reacción.

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    FACTORES QUE MODIFICAN LA ACTIVIDAD

    ENZIMÁTICA
    GUÍA PRACTICA DE LABORATORIO
    Burmester Moreno, Katherine Lois
    Ortega Floriano, Masiel Joselyn
    Pretell Pérez, Luis Ángel
    Ruiz Ruiz, Victoria Catterine
    Vargas López, Luis Dair
    INTRODUCCION

    LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA PUEDE VERSE AFECTADA POR DIVERSOS FACTORES,


    COMO TEMPERATURA, PH Y CONCENTRACIÓN ASÍ MISMO TENEMOS QUE LAS
    ENZIMAS FUNCIONAN MEJOR DENTRO DE RANGOS DE TEMPERATURA Y DE PH
    ESPECÍFICOS, Y BAJO CONDICIONES QUE NO SON LAS ÓPTIMAS UNA ENZIMA PUEDE
    PERDER SU CAPACIDAD DE UNIRSE A UN SUSTRATO. EN TAL SENTIDO EN ESTA
    INVESTIGACIÓN DE LABORATORIO NOS OCUPAREMOS DE LOS FACTORES QUE
    AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA Y A PARTIR DE ESTO DESCRIBIR CADA UNO
    DE ELLOS COMO LA TEMPERATURA QUE AL AUMENTAR GENERALMENTE ACELERA
    UNA REACCIÓN, Y BAJAR LA TEMPERATURA LA HACE MÁS LENTA. SIN EMBARGO,
    TEMPERATURAS EXTREMADAMENTE ALTAS PUEDEN CAUSAR QUE UNA ENZIMA
    PIERDA SU FORMA (SE DESNATURALICE) Y DEJE DE TRABAJAR, EL PH, QUE EN CADA
    ENZIMA TIENE UN RANGO OPTIMO, CAMBIAR EL PH FUERA DE ESTE RANGO HARÁ
    MÁS LENTA LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA. VALORES DE PH EXTREMOS PUEDEN
    CAUSAR LA DESNATURALIZACIÓN DE LA ENZIMA, LA CONCENTRACIÓN DE LA
    ENZIMA QUE AL AUMENTAR LA CONCENTRACIÓN DE LA ENZIMA ACELERARÁ LA
    REACCIÓN, SIEMPRE QUE SE DISPONGA DE SUSTRATO AL CUAL UNIRSE, LA
    CONCENTRACIÓN DEL SUBSTRATO MISMO QUE AL AUMENTAR LA
    CONCENTRACIÓN, TAMBIÉN AUMENTA LA VELOCIDAD DE REACCIÓN HASTA UN
    CIERTO PUNTO. UNA VEZ QUE TODAS LAS ENZIMAS SE HAN ADHERIDO, CUALQUIER
    AUMENTO DE SUSTRATO NO TENDRÁ EFECTO ALGUNO EN LA VELOCIDAD DE
    REACCIÓN, YA QUE LAS ENZIMAS DISPONIBLES ESTARÁN SATURADAS Y
    TRABAJANDO A SU MÁXIMA CAPACIDAD.
     MATERIALES:

    A. 8 TUBOS DE ENSAYO
    B. 1 GRADILLA
    C. PIPETA
    D. BAÑO MARÍA
    E. PINZAS

    Concentración pH

    Solución de almidón 1%

    Buffer fosfato 0.1M 6.6

    Buffer acetato 0.1M 4.6

    Buffer borato 0.1M 9.0

    Solución de NaCl 2%

    Amilasa salival dializada 0.25%

    Acido Clorhidrico (HCl) 0.05N


    PROCEDIMIENTO:
    REALIZAR EL CONTROL DE LA
    ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE ACUERDO
    AL SUSTRATO RESIDUAL, EL CUAL SE
    REALIZA POR LA REACCIÓN DEL YODO.

    1: CUMPLIDOS LOS 20 MINUTOS DE


    TUBOS DE ENSAYO INCUBACIÓN, SACAR LOS TUBOS Y
    ARMAR UNA SERIE PARALELA
    COMPONENTES I II III IV V VI VII VIII
    AGREGANDO:
    Amilasa salival al 0.25% - 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.2 0.6

    4) Mezclar con inversión y continuar la incubación


    por 20 minutos.
    2. OBSERVAMOS LOS RESULTADOS DE LAS
    REACCIONES DE CADA UNO DE LOS TUBOS, 3. Realizar el control de la actividad enzimática de
    VALORANDO LOS CAMBIOS DE COLORACIÓN (AZUL acuerdo a: LOS PRODUCTOS FORMADOS (maltosa,
    OSCURO, AZUL CLARO, SIN COLOR) glucosa), el cual se en base a la capacidad reductora de
    éstos
    A. Esta determinación sólo se realizará en los
    tubos III y V del incubado preparado en el paso 1.
    CUESTIONARIO:
    IDENTIFIQUE LOS COMPONENTES DEL
    SISTEMA ENZIMÁTICO EMPLEADO EN
    LA PRÁCTICA Y SEÑALE SUS
    PRINCIPALES CARACTERÍSTICAS.
    TUBO I
    COMPONENTES CONCENTRACIÓN FUNCIÓN

    Solución de Almidón 1% (1ml) Sustrato

    Buffer fosfato 0.1M pH 6.6 (5ml) Ph optimo


    Solución de ClNa 2% (1.4ml) Cl es el ion activador de la
    enzima
    Agua destilada 2.6ml Brinda el medio liquido a la reacción

    HCl 0.05N (5ml) Detiene la reacción

    Solución Iodada 0.5ml Es un indicador


    S +pH+Cl+HCl+𝑰𝟐 = No hay producto se tiñe de azul oscuro
    TUBO II
    COMPONENTES CONCENTRACIÓN FUNCIÓN
    Solución de Almidón 1% (1ml) Sustrato

    Buffer fosfato 0.1M pH 6.6 (5ml) Ph optimo


    Agua destilada 3.4ml Brinda el medio liquido a la
    reacción
    Amilasa salival 0.25% (6ml) Enzima

    dializada
    HCl 0.05N (5ml) Detiene la reacción

    Solución Iodada 0.5ml Es un indicador


    S +pH+E+HCl+𝑰𝟐 = Escasos productos se tiñe de color mostaza
    I II III IV V VI VII VIII
    NO SI SI NO SI NO SI NO
    reaccion reaccion reaccion reaccion reaccion reaccion reaccion reaccion
    a a a a a a a a
    2. ¿CÓMO SE PUEDE EVIDENCIAR LA
    PRESENCIA DEL SUSTRATO RESIDUAL
    EN LA PRÁCTICA REALIZADA?

    • PARA ESTE PROCESO DE IDENTIFICACIÓN SE UTILIZÓ


    SOLUCIÓN YODADA, DONDE SU FUNCIÓN FUE
    DETECTAR CARBOHIDRATOS DONDE EN ESTE PROCESO
    EXPERIMENTAL FUE EL ALMIDÓN COMO SUSTRATO
    RESIDUAL.
    •
    3. ¿CÓMO SE PUEDE
    EVIDENCIAR LOS PRODUCTOS
    FORMADOS EN LA REACCIÓN
    ENZIMÁTICA OBSERVADA?

    • SE PUDO EVIDENCIAR LOS PRODUCTOS GRACIAS


    AL REACTIVO DE FEHLING, EL CUAL NOS AYUDÓ
    A PRESENCIAR AZUCARES REDUCTORES COMO EN
    ESTE CASO FUERON MALTOSA Y GLUCOSA.
    4. CONFECCIONE UNA LISTA DE LOS FACTORES
    FÍSICO-QUÍMICOS QUE INTERVIENEN
    MODIFICANDO LA VELOCIDAD ENZIMÁTICA EN
    CADA UNO DE LOS TUBOS EMPLEADOS EN LA
    PRÁCTICA.

    • LOS FACTORES QUE MODIFICAN LA REACCIÓN


    ENZIMÁTICA, SON CONCENTRACIÓN DE
    SUSTRATO, TEMPERATURA Y PH. SI EL PH O LA
    TEMPERATURA NO SE ENCUENTRAN DENTRO DE
    SU NIVEL ÓPTIMO, ENTONCES LA ENZIMA SERÁ
    AFECTADA EN SU VELOCIDAD ENZIMÁTICA.
    5. CUÁL FUE EL PH ÓPTIMO
    PARA QUE LA ENZIMA
    EMPLEADA EN LA PRÁCTICA
    PUDIERA ACTUAR?

    • EL PH OPTIMO EMPLEADO FUE DE


    6.6.
    CONCLUSIONES

    • EL TIPO DE REACCIÓN QUE CATALIZAN PRESENTA


    CARACTERÍSTICAS COMUNES EN CUANTO EN LOS FACTORES
    QUE INTERVIENEN FAVORECIENDO, RETARDANDO O
    IMPIDIENDO SU ACTIVIDAD. ESTOS FACTORES SE
    INVESTIGAN TENIENDO EN CUANTA LA VELOCIDAD DE LA
    REACCIÓN ENZIMÁTICA SOBRE UN SUSTRATO ADECUADO Y
    EN DETERMINADAS CONDICIONES. TOMANDO UNA
    DETERMINADA ENZIMA COMO PATRÓN ES POSIBLE TENER
    UNA IDEA MÁS O MENOS CLARA DE LA INFLUENCIA DE LOS
    FACTORES (TIEMPO, TEMPERATURA, CONCENTRACIÓN DE
    ENZIMA, CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO, PH, IONES, ETC.).
    • LA FINALIDAD DE ESTE EXPERIMENTO ES OBSERVAR EL
    EFECTO DE IONES ACTIVADORES, PH, CONCENTRACIÓN DE
    ENZIMA, CONCENTRACIÓN DE SUSTRATO, TIEMPO Y
    TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE UNA REACCIÓN
    ENZIMÁTICA, TOMANDO COMO EJEMPLO LA HIDRÓLISIS
    ENZIMÁTICA DEL ALMIDÓN Y EVALUANDO LAS VARIACIONES
    DEL SUSTRATO TRANSFORMADO Y DE LOS PRODUCTOS DE LA
    REACCIÓN ENZIMÁTICA.
    • REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
    • BEJAMIN FRANKLIN. LAS ENZIMAS. [INTERNET]. [CITADO 2011].
    DISPONIBLE EN:
    HTTPS://ADDI.EHU.ES/BITSTREAM/HANDLE/10810/14292/4%20
    CAP%C3%ADTULO%20I.%20LAS%20ENZIMAS.PDF?SEQUENCE
    =4
    • FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA. QUÍMICA
    BIO – ORGÁNICA. CETP. [INTERNET]. [CITADO 2020].
    DISPONIBLE EN:
    HTTPS://URUGUAYEDUCA.ANEP.EDU.UY/SITES/DEFAULT/FILES/INLIN
    EFILES/FACTORES%20QUE%20AFECTAN%20LA%20ACTIVIDAD%2
    0ENZIM%C3%A1TICA.
    • BRANDAN, NORA. LLANOS, CRISTINA, BARRIOS. BELÉN ITATÍ,
    ESCALANTE MARASSI, ANDREA P., RUÍZ DÍAZ, DANIEL A. N.
    ENZIMAS. [INTERNET]. [CITADO 2008]. DISPONIBLE EN:
    HTTPS://MED.UNNE.EDU.AR/SITIO/MULTIMEDIA/IMAGENES/CKFIND
    ER/FILES/FILES/CARRERA-
    MEDICINA/BIOQUIMICA/ENZIMAS.PDF
    MUCHAS
    GRACIAS

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