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    Práctica 6

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    Diana Vélez
    La práctica tuvo como objetivo extraer los lípidos de semillas de maní, nuez y almendra utilizando la técnica de Soxhlet. Se molieron las semillas y se colocaron en sobres dentro del equipo junto con hexano como solvente. Luego de varios ciclos de sifonado, el solvente con los lípidos extraídos se evaporó y los aceites se recolectaron. Se calculó el rendimiento de extracción, resultando mayor en nuez que en almendra y maní. Finalmente, se investigaron métodos para purificar los ace

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    La práctica tuvo como objetivo extraer los lípidos de semillas de maní, nuez y almendra utilizando la técnica de Soxhlet. Se molieron las semillas y se colocaron en sobres dentro del equipo junto con hexano como solvente. Luego de varios ciclos de sifonado, el solvente con los lípidos extraídos se evaporó y los aceites se recolectaron. Se calculó el rendimiento de extracción, resultando mayor en nuez que en almendra y maní. Finalmente, se investigaron métodos para purificar los ace

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    La práctica tuvo como objetivo extraer los lípidos de semillas de maní, nuez y almendra utilizando la técnica de Soxhlet. Se molieron las semillas y se colocaron en sobres dentro del equipo junto con hexano como solvente. Luego de varios ciclos de sifonado, el solvente con los lípidos extraídos se evaporó y los aceites se recolectaron. Se calculó el rendimiento de extracción, resultando mayor en nuez que en almendra y maní. Finalmente, se investigaron métodos para purificar los ace

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    La práctica tuvo como objetivo extraer los lípidos de semillas de maní, nuez y almendra utilizando la técnica de Soxhlet. Se molieron las semillas y se colocaron en sobres dentro del equipo junto con hexano como solvente. Luego de varios ciclos de sifonado, el solvente con los lípidos extraídos se evaporó y los aceites se recolectaron. Se calculó el rendimiento de extracción, resultando mayor en nuez que en almendra y maní. Finalmente, se investigaron métodos para purificar los ace

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    FORMATO DE INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO / TALLERES / CENTROS DE

    SIMULACIÓN – PARA ESTUDIANTES

    CARRERA: Ingeniería en Biotecnología ASIGNATURA: Bioquímica


    NRO. PRÁCTICA: 6 TÍTULO PRÁCTICA: Extracción de lípidos por técnica Soxhlet

    OBJETIVO ALCANZADO:
    • Determinar el contenido graso de una muestra mediante extracción sólido-líquido (EXTRACCIÓN
    SOXHLET), obteniendo el rendimiento de la extracción.

    ACTIVIDADES DESARROLLADAS
    • Entre los equipos, materiales y reactivos que se utilizaron en la práctica tenemos: cámara de flujo
    laminar, balanza, equipo de extracción Soxhlet, que cuenta con una plancha de calentamiento, balón
    esmerilado, sifón Soxhlet (que tiene un brazo de alimentación de vapor y un brazo de recirculación
    de solvente), un condensador con su entrada y salida de agua, rotavapor, papel filtro, mortero,
    probeta, espátula, frasco de recolección, varilla de agitación, semillas de maní (Arachis hypogaea),
    semillas de nuez (Juglans regia), semillas de almendra (Prunus dulcis), hexano.
    • Se inició moliendo las semillas con ayuda del mortero, cuando estuvieron listas se las llevó a la
    balanza para pesar aproximadamente 30g de semillas molidas para los equipos pequeños, y 97g
    para el equipo grande. Con el papel filtro se realizaron sobres se aproximadamente diez centímetros,
    dentro de estos se colocó las semillas.
    • Se selló los sobres y se los colocó dentro del sifón Soxhlet de manera que las semillas en el sobre
    queden por debajo del brazo de alimentación de vapor, para esto nos ayudamos de una varilla.
    Trabajamos con tres equipos, por lo que en el más grande se colocan las semillas de maní, que
    pesamos una mayor cantidad.
    • En los balones se colocó el solvente que en nuestro caso es éter, en el balón más grande,
    correspondiente a las semillas de maní se colocó 200ml; en el balón para las semillas de nuez y
    para las semillas de almendra se colocó 200ml.
    • El siguiente paso corresponde al montaje del equipo. Cuando esté colocado correctamente se
    enciende la plancha calefactora, se controla hasta que el solvente colocado en los tres casos
    alcance el punto de ebullición, también se da inicio al flujo de agua del condensador.
    • Cuando se alcanzó el punto de ebullición del solvente, éste se evapora y se condensa por acción
    del condensador, el vapor condensado cae en el sifón llenándolo hasta que alcanza el brazo de
    recirculación del solvente, una vez llega ahí recircula el solvente. A este proceso de recirculación se
    lo denomina sifonado, y lo realizamos 3 mínimo.
    • En el caso de las semillas de maní, al ser un equipo más grande (volumétricamente) y utilizar
    mayores cantidades su tiempo de sifonado aumenta, el primer ciclo tardó aproximadamente 15
    minutos, el segundo ciclo tardó también 15 minutos y el tercer ciclo tardó 17 minutos
    aproximadamente. Para las semillas de almendra el proceso tardó en su primer ciclo 19 minutos, y
    por cuestiones de tiempo se finalizó el proceso. En las semillas de nuez se dio un primer y segundo
    ciclo de 15 minutos cada uno, y un tercer ciclo de 18 minutos.
    • Una vez terminados los procesos de sifonado, se apagó el equipo. En el balón se puede observar
    el resultado de la recirculación del solvente. Los balones se llevaron al rotavapor con la finalidad de
    que se evapore el disolvente, este suba al condensador y se recolecte en otro balón, de esta manera
    podemos aislar la grasa del disolvente.
    • Cuando se finalizó este proceso se extrajeron los cartuchos con semillas, las fundas estaban
    húmedas, sin embargo, las semillas permanecieron secas. Al finalizar el proceso en el rotavapor se
    recolectó la grasa resultante en frascos para posteriormente medir su volumen.
    RESULTADO(S) OBTENIDO(S):
    Como resultado se espera obtener el extracto graso del material vegetal procesado. Además, se debe calcular el
    rendimiento, tanto del aceite extraido como de las semillas desgrasadas y comparar los valores obtenidos
    • Se recolectó en los frascos ml de aceite de nuez, ml de aceite de almendra y ml de aceite de
    maní.
    • Para el cálculo del rendimiento del aceite extraído utilizamos la siguiente fórmula:
    Figura 1. Adaptado de: ‘Rendimientos en la reacción’, disponible en:
    http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-75152015000400014
    • Entonces aplicando la fórmula presentada tenemos:

    Figura 2. Cálculos de los rendimientos de los aceites obtenidos.


    • Para el cálculo del rendimiento de las semillas desgrasadas aplicamos la misma fórmula
    considerando otros datos, como lo son el peso de las semillas después del proceso del Soxhlet:

    Figura 3. Cálculo de los rendimientos de las semillas desgrasadas.


    •Obtenemos entonces que las semillas de nuez presentan un mayor porcentaje de rendimiento
    (83,19%) en cuando al aceite obtenido que las semillas de almendra (77,75%) de y las de maní
    (42,27%). Mientras que las semillas de nuez presentan un mayor porcentaje de rendimiento
    (88,75%) en relación a las semillas desgrasadas de maní (70,1%).
    OBSERVACIONES:
    • El proceso de extracción es muy tardado por lo que hay que administrar el tiempo.
    • Al momento de sifonar hay que tomar en cuenta el tiempo entre ciclos.
    • Existe un mayor porcentaje de rendimiento de las semillas desgrasadas que de los aceites
    obtenidos.
    RESOLUCIÓN DEL CUESTIONARIO
    1. Investigue los métodos necesarios para realizar la purificación de la materia grasa obtenida
    con el equipo Soxhlet.
    Existen varios métodos que pueden ser utilizados para la purificación de la materia grasa obtenida, entre
    estos destacan:
    • Decantación: es un proceso útil para separar una mezcla que presente líquidos de distintas
    densidades, o un sólido y un líquido. El componente más denso se separa por influencia de la
    gravedad y queda en la parte inferior de un embudo tradicionalmente usado en estos procesos
    (Decantación - Concepto, métodos y ejemplos, s. f.).
    • Cristalización: proceso que consiste en enfriar gradualmente la materia grasa líquida para inducir
    la formación de cristales sólidos. A medida que los cristales se forman, atrapan impurezas y
    componentes no deseados en su estructura, lo que permite su separación del aceite o la grasa
    purificada (Mettler-Toledo International Inc. all rights reserved, 2023).
    • Filtración por gravedad: es una técnica elemental para la filtración, es la más común en cuanto a
    uso, esto por los pocos materiales que se necesitan y lo sencillo del proceso. Se coloca un filtro, y
    por gravedad, el material líquido atravesará los poros reteniendo otros residuos (Quercusblog,
    2014).
    • Filtración al vacío: este proceso va a requerir de un mecanismo que genere vacío en el interior de
    algún recipiente, con este método se busca incrementar la velocidad de filtración (Quercusblog,
    2014).
    2. Cual es la composición de los lípidos de las semillas utilizadas en la práctica.
    En la práctica se utilizaron tres tipos de semillas grasas, semillas de maní, de nuez y de almendra. En cuanto
    a las semillas de maní (Arachis hypogaea), contienen un porcentaje de lípidos de un 38-60% (Torres, s. f.);
    las semillas de nuez (Juglans regia) poseen un alto porcentaje lipídico, alrededor de un 11% del componente
    de lípidos corresponde a ácidos grasos saturados, 16% a monoinsaturados y 68% a poliinsaturados (Nuez,
    2018); y finalmente, las semillas de almendra presentan una composición lipídica de un 10,7% (Chaparro,
    2015)
    3. Investigue otros métodos de extracción de lípidos de productos naturales.
    - Método de Twisselmann: Es un procedimiento de extracción que ocurre de manera contiua, este
    fenómeno sucede debido al tipo de extractor que se utiliza al momento de realizar esta técnica, es
    muy utiizada para lograr la determinación de ácidos grasos de diversos alimentos. (Guerra, s.f)
    - Extracción en frío con solventes: sirve para cuantificar la grasa total luego de que se caracterizan
    los lípidos. Se puede aplicar a todo tipo de alimento, cuando se requiere la ulterior caracyterización
    de las grasas, de manera especial para identificar gases por cromatografía y como prueba de
    deterioro de lípidos (índice de pH, acidéz, Kreiss, etc.) +. (Guerra, s.f)
    • Métodos con solvente:
    - Folch: Es el procedimiento más confiable al momento de recuperar los lípidos totales sin alterar su
    cantidad ni su calidad, no requiere de una fuente de calor para realizar el proceso de extracción de
    lípidos de la muestra y se basa en la mezcla de dos solventes como el metanol y el cloroformo. Este
    procedimiento subestima concentraciones en las muestras que contienen más de 2% de lípidos.
    - Bligh and Dyer: éste método se fundamenta en un sistema bacífico de equilibrio líquido- líquido.
    Las muestras tienen la posibilidad de ser analizadas de forma directa sinla necesidad de tener que
    pre- secarlas y los lípidos que se obtienen pueden ser usados a futuro.
    - Fluidos supercríticos (FSC): Tiene la capacidad de extraer determinados compuestos químicos
    empleando ciertos solventes específicos bajo la combinación de temperatura y presión, el fluido
    supercrítico más utilizado es el CO2 y se consigue con distintos grados de pureza se puede trabajar
    en bajas temperaturas, después del paso del CO2 este se evapora y se miden los lípidos.
    • Extracción por instrumentos:
    - Extracción asistida por microondas: Se basa en el calentamiento de un solvente en contacto con
    la muestra, este proceso involucra la alteración de los enlaces por puentes de hidrógeno; la principal
    ventaja del microondas es la velocidad con la que se calienta lo que permite ahorrar el tiempo, los
    disolventes disminuyen su volumen por lo que la energía no contamina el medio ambiente.
    - Espectroscopia de infrarrojo cercano (NIR): A través de la medición de luz dispersa en una
    muestra se puede emplear el espectro de reflectancia NIR para determinar las propiedades del
    material, con esta técnica se generan modelos matemáticos que relacionan la composición química
    con los cambios de energía. El NIR se emplea para medir la composición de los lípidos en cereales.
    - Autoclavado: Se puede utilizar una solución salina acuosa y se autoclavan a 300°C en un tiempo
    entre 5 a 60 minutos y luego se purga con nitrógeno el aire residual. una virtud de esta técnica para
    ser usada en la sustracción de lípidos, es que se puede laborar con la biomasa húmeda, lo que
    evade la fase de secado de la biomasa, a lo largo de la cual tienen la posibilidad de degradar los
    lípidos presentes e incrementa los precios globales de proceso. Sin embargo, todos los
    experimentos que usan Autoclavado para la sustracción de aceite, integran una fase adicional de
    sustracción con solvente químico.
    4. ¿Cuáles son las aplicaciones de los lípidos extraídos de fuentes naturales?
    - Algunas de las aplicaciones principales de estos lípidos son dentro de la industria para la fabricación
    de aceites, lubricantes, ceras, entre otros; otra aplicación reconocida es en la fabricación de
    medicamentos y vitaminas.
    - Están presentes en productos con atribuciones medicinales, añaden sabores y aromas
    característicos; presentes también en aceites vegetales, provenientes de la palma, el maíz, el olivo,
    entre otros; se utilizan en emulsionantes y una infinidad de productos cosméticos.
    - La mayoría son de origen vegetal se aplica en la fabricación de esmaltes, pinturas y colas. En el
    ámbito eléctrico como los el aceite de ricino que a diferencia de aceites minerales estos son
    biodegradables
    CONCLUSIONES:
    • El uso de técnicas de extracción nos permite obtener la fracción soluble en solventes orgánicos
    utilizando el quipo Soxhlet sin la pérdida de solventes. Se puede determinar el rendimiento de
    extracción, tomando los pesos extractos del material a utilizar y del residual que queda en el
    cartucho.
    • Con la implementación del extractor Soxhlet posibilita una sustracción alta del pigmento natural. Por
    la implementación de un solvente hidrosoluble es viable obtener un pigmento puro por evaporación.
    Junto con el objetivo planteado en la práctica, se desmostró como transcurre el procedimiente para
    obtener el rendimiento de la extracción y determinar el contenido graso de las muestras.
    • Se incluyen los resultados obtenidos en relación a la grasa obtenida de cada tipo de semilla.

    RECOMENDACIONES:
    • Cuidado, equipo frágil, asegurar el rotavapor, controlar temperatura, que no haya fugas de agua,
    medidas de bioseguridad al trabajar con solventes orgánicos.
    • Trabajar utilizando las medidas adecuadas de protección como guantes, mascarilla, gafas de
    seguridad, mandil, debido a que se utiliza sustancias que pueden resultar peligrosas para la salud.
    • La ventilación adecuada del laboratorio para evitar la saturación del ambiente con los vapores
    producidos en las reacciones.
    • Seguir las reglas de seguridad básicas para evitar accidentes por el uso de sustancias corrosivas.
    • Lavarse las manos antes de abandonar el laboratorio luego de que se concluye la práctica,
    evitando de esta manera la contaminación del medio externo.
    • Utilizar de manera correcta los implementos del laboratorio empleados durante la práctica.
    ANEXOS:

    Figura 4. Se muelen las semillas. Figura 5. Semillas de nuez. Figura 6. Se arma el equipo con los tres tipos de
    Semilas.

    Figura 7. Líquido a punto de Figura 8. Nuevo inicio para Figura 9. Desmonte del equipo.
    Sifonar. sifonar.
    Figura 10. Rotavapor. Figura 11. Montaje del equipo. Figura 12. Solvente recuperado.

    Figura 13. Aceite obtenido de la semillas Figura 14. Semillas molidas Figura 15. Pesaje de las semillas
    de maní. de maní recuperadas. molidas de nuez recuperadas.
    BIBLIOGRAFÍA:
    Decantación - Concepto, métodos y ejemplos. (s. f.). Concepto. https://concepto.de/decantacion/

    Glicerio, L. M. (s. f.). Comparación de dos métodos de extracción del aceite esencial de C itrus sinensis L.

    http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-75152015000400014

    Guerra, J. M. (s.f). Métodos de extracción de lípidos. https://www.studocu.com/ec/document/universidad-

    de-guayaquil/bioquimica-i/metodos-de-extraccion-de-lipidos/9319744

    Martínez Medrano, M. (s. f.). Lípidos (usos y aplicaciones) [Diapositivas]. Prezi.

    https://prezi.com/kprsvkum3ksd/lipidos-usos-y-aplicaciones/?fallback=1

    Mettler-Toledo International Inc. all rights reserved. (2023, 6 junio). Cristalización y precipitación.

    https://www.mt.com/mx/es/home/applications/L1_AutoChem_Applications/L2_Crystallization.html

    Nuez. (2018).

    Procesamiento de los ácidos grasos | Textos Científicos. (s. f.).

    https://www.textoscientificos.com/quimica/acidos-grasos/procesamiento

    Quercusblog. (2014, 26 diciembre). Filtración por gravedad y al vacío. El blog de QuercusLab.

    https://quercuslab.es/blog/filtracion-por-gravedad-y-filtracion-al-vacio/

    Torres, J. M. (s. f.). Importancia nutricional y económica del maní (Arachis hypogaea L.).

    http://portal.amelica.org/ameli/journal/425/4251836018/html/#:~:text=El%20grano%20de%20man

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    Doménica Espinoza, Ana María Gómez, Juan Francisco López y Diana Vélez

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