S08.S16. Material - Guia N4 - Determinación de Glucosa en Sangre

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GUÍA N° 4: DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SUERO

FACULTAD CURSO AMBIENTE


FACULTAD DE CIENCIAS DE LABORATORIO
BIOQUÍMICA
LA SALUD MULTIFUNCIONAL

ELABORADO POR WILMER SILVA CASO APROBADO POR DENISSE CHAMPIN


VERSIÓN 001 FECHA DE APROBACIÓN Agosto 2019

1. LOGRO GENERAL DE LA UNIDAD DE APRENDIZAJE

Al finalizar la unidad, el estudiante interpreta los procesos bioquímicos y las principales vías metabólicas
de los lípidos y su regulación en el ser humano, así como el rol que juegan en el ser humano.

2. OBJETIVOS ESPECÍFICOS DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO

• El estudiante determina los niveles de glucosa en diferentes muestras de suero.


• El estudiante analiza los valores obtenidos para las muestras.

3. MATERIALES Y EQUIPOS

- Tubos al vacío
- Tubos de ensayo
- Agujas para tubos al vacío
- Pipetas (de 1 ml)
- Reactivo para la determinación de Glucosa
- Estándar de Glucosa (100 mg/dl)
- Muestras de suero problema
- Espectrofótometro
- Alcohol
- Algodón

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4. PAUTAS DE SEGURIDAD

❖ MANEJO DE RESIDUOS

Una vez culminada la práctica de laboratorio, con ayuda del docente se procederá a la identificación y
segregación de los residuos generados (ejemplo: residuos químicos y/o residuos sólidos) para su manejo,
según se detalla a continuación:

Residuos químicos:

1. El docente verterá el residuo líquido que contiene el matraz en el sistema armado que se encuentra
dentro de la campana extractora o en la mesa indicada por el docente.
2. Agregar agua destilada al matraz, repetir el procedimiento N°01.
3. El alumno verterá el residuo que contiene el tubo de ensayo en el sistema armado indicado por el
docente.
4. Agregar agua destilada al tubo de ensayo (¼ del volumen del tubo), repetir el procedimiento N°03.
Nota:
- Usar guantes de seguridad durante este procedimiento.
- Usar la menor cantidad de agua.

Residuos Sólidos:

Según las indicaciones del docente se realizará la segregación de los residuos sólidos en los tachos
correspondientes para su recolección.

NOTA: En caso de rotura de vidrio utilizar las cajas de bioseguridad correspondientes

❖ SEGURIDAD EN EL LABORATORIO

Para el buen desarrollo de las prácticas de laboratorios todos los presentes dentro del ambiente práctico
deberán respetar las siguientes señales de obligación que tienen una “X” al lado derecho de la imagen, en
algunos casos son EPP o equipos de protección personal los cuales serán de uso obligatorio y en otros casos
serán procedimientos a seguir.

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5. FUNDAMENTO

INTRODUCCIÓN

La sangre es el vehículo por el cual la glucosa es distribuida a los tejidos y esta puede provenir de fuentes
exógenas (realimentación) o de la reserva de carbohidratos.
Cuando es requerido por el organismo, estas reservas pueden ser movilizadas y degradadas rápidamente,
lo que permite una autonomía máxima de 4 a 8 horas dependiendo de la actividad realizada, es por ello
que el ser humano es altamente dependiente de la ingestión de carbohidratos de forma periódica.

Índice glucémico en la sangre

La glucosa se determina por oxidación enzimática.

Durante la actividad física, los músculos del


cuerpo utilizan mayor cantidad de glucosa,
que cuando el cuerpo está en reposo y esto
hace que los niveles de glucosa en la sangre
bajen. Por lo cual, se puede evaluar la
eficiencia del metabolismo de glucosa
cuantificando sus niveles en sangre.

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6. PROCEDIMIENTO (DESARROLLO DE LA PRÁCTICA)

6.1 Cuantificación de glucosa antes del Ejercicio

- Extraer 3 ml de sangre de una persona (por grupo de trabajo)


- Se utilizará como muestra el suero de la sangre extraída.
- Rotular los tubos de ensayos como se indica en el cuadro
- Pipetear los volúmenes correspondientes a cada tubo según como está indicado en el cuadro.

- Mezclar e incubar a 37°C por 10 minutos o a temperatura ambiente (20° a 25°C) por 20 minutos.
- Leer la absorbancia (a 505nm) llevando a cero el espectrofotómetro con el blanco de reactivo.
- El color resultante es estable por lo menos unos 20 minutos.
- Calcular la concentración de la glucosa en las muestras proporcionadas, según la siguiente
fórmula:

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7. ENTREGABLES

Informe de Laboratorio
Instrucciones: Responda adecuadamente cada una de las preguntas que se presentan a continuación:

1. Fundamente la Reacción de la Prueba (Oxidación de Glucosa).


2. ¿Cuál es el intervalo de referencia normal de glucosa en suero según el ADA?
3. ¿Cómo varían los niveles de glucosa con el ejercicio y con el ayuno?
4. ¿Qué factores pueden afectar los niveles de glucosa en la sangre?

8. FUENTES DE INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA

- Devlin T. 2004. Bioquímica. 4ta edición. Editorial Reverte, S.A. México D.F.
- Nelson, D.L. y Cox, M.M. 2005. Lehninger Principios de Bioquímica. 4ª edición. Ed. Omega.
Barcelona.

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