Laboratorio de Bioquimica

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Universidad Nacional Experimental de Guayana

Vicerrectorado Académico

Coordinación General de Pregrado

Ingeniería de Producción Animal

Microbiología

MANUAL DE
INSTRUCTIVOS DE
MICROBIOLOGIA
GENERAL
Docente: Elaborado por:

Freitez Florangel

C.I. 27417276

Upata 2023
Glosario de términos
Normas generales de seguridad

Normas de bioseguridad general

a. Mantener el lugar de trabajo en condiciones higiénicas y aseadas.


b. Evitar maquillarse, fumar, comer o beber en el sitio de trabajo.
c. No guardar alimentos en los equipos donde se refrigeran sustancias
contaminantes o químicas.
d. Manejar a todo paciente como si pudiera estar infectado.
e. Lavarse con cuidado las manos antes y después de cada procedimiento.
f. Utilizar de forma sistemática guantes plásticos o de látex en procedimientos
en que se manipulan sustancias biológicas, se maneja instrumental o
equipo contaminado en la atención de los pacientes, o en ambas
situaciones.
g. Abstenerse de tocar con las manos enguantadas alguna parte del cuerpo y
de manipular objetos diferentes a los requeridos durante el procedimiento.
h. Emplear mascarilla y protectores oculares durante procedimientos que
puedan generar salpicaduras, gotitas aerosoles de sangre u otros líquidos
corporales.
i. Usar bata durante la estancia en el laboratorio.
j. Mantener los elementos de protección personal en condiciones óptimas de
aseo, en un lugar seguro y de fácil acceso.
k. Si se tienen lesiones exudativas o dermatitis serosas, evitar la atención
directa de pacientes hasta que éstas hayan desaparecido.
l. Utilizar las técnicas correctas en la realización de todo procedimiento.
m. Manejar con estricta precaución los elementos punzocortantes y
desecharlos en los recipientes indicados, a prueba de perforaciones.
n. Evitar el cambio de los elementos punzocortantes de un recipiente a otro.
o. Evitar el reciclaje de material contaminado, como agujas, jeringas u hojas
de bisturí.
p. Desinfectar y limpiar las superficies y los equipos de trabajo, en caso de
contaminación.
q. En caso de que se rompa material de vidrio contaminado con sangre u otro
líquido corporal, recoger los trozos con escoba y recogedor (nunca con las
manos) y depositarlos en el contenedor para punzocortantes.
r. Los recipientes para transporte de muestras deben ser de material
irrompible y contar con cierre hermético (tapón de rosca).
s. Manipular, transportar y enviar las muestras en recipientes seguros, con
tapa y rotulación adecuada.
t. A su vez, transportar las gradillas en recipientes herméticos, de plástico o
acrílico, que retengan fugas o derrames accidentales. Además, deben
ofrecer facilidad de lavado.
u. Restringir el ingreso a las áreas de alto riesgo biológico a personal no
autorizado, a quien no utilice los elementos de protección personal y a los
niños.
v. Disponer el material patógeno en bolsas resistentes, de color rojo, que se
identifiquen con el símbolo de riesgo biológico.
w. Las personas sometidas a tratamiento con inmunodepresores no deben
trabajar en áreas de riesgo biológico.

Medidas generales de protección

a. Lavarse las manos con frecuencia y al quitarse los guantes.


b. Usar guantes cuando se manejen líquidos biológicos.
c. Establecer y respetar áreas sucias y áreas limpias.
d. No tocar las áreas sin contaminación con guantes contaminados.
e. Utilizar el pipetor para aspirar sustancias corrosivas a través de la pipeta.
f. Ingresar sin maquillaje al laboratorio.
g. Es riesgoso consumir alimentos o masticar chicle en las áreas de trabajo.
h. No fumar en las áreas de trabajo.
i. No tapar de nuevo las agujas.
Materiales y equipos usados en el laboratorio de microbiología

Un laboratorio de microbiología lleva a cabo pruebas, experimentos y estudios que


requieren equipos e instrumentos de laboratorio especializados. Existe una amplia
gama entre los que pueden seleccionar, los principales que no pueden faltar en
sus laboratorios son:
 Microcentrífuga digital. De acuerdo con el modelo pueden incluir rotor de
tipo cerrado, freno eléctrico para una parada inmediata en la apertura de la
tapa y funciones de calibración del usuario. El modelo controlado por
microprocesador permite la visualización de variables digitales y la
configuración de tiempo con la función de memoria de última ejecución.
 Mezclador digital. Es un dispositivo simple, que se utiliza en laboratorios
para mezclar pequeños viales de líquido. El dispositivo consiste en un
motor eléctrico con el eje de transmisión y una pieza de goma ahuecada
montada ligeramente descentrada y configuración del temporizador.
 Quemador de laboratorio con tamaño de llama ajustable. Los mejores
modelos de estos equipos de laboratorio son los que producen una llama
no luminosa, caliente y sin hollín que pueda alcanzar temperaturas de hasta
1,300° C y una capacidad del tanque variable.
 Balanzas analíticas con alta precisión. Están equipadas con puertas de
vidrio transparente para evitar las partículas de polvo en un recipiente de
medición. En la actualidad, las industrias farmacéuticas, biotecnológicas,
químicas y de investigación están bien establecidas y utilizan una amplia
gama de balanzas de clase mundial.
 Agitador magnético resistente a la corrosión. El agitador magnético tiene un
rango de velocidad de 15 a 1500 RPM y es adecuado para el entorno
experimental de rotación de alta velocidad. Están construidos en superficie
superior SS resistente a la corrosión para una mejor resistencia química.
 Microscopio binocular de uso fácil. Han sido diseñados para proporcionar
simplicidad de operación y confiabilidad absoluta, brindan resultados
rápidos, precisos y confiables.
Célula bacteriana partes y funciones

¿Las bacterias son organismos vivos?


Las bacterias son organismos vivos individuales. Las células bacterianas son
similares a tus células en muchas maneras, aunque poseen diferencias distintivas.
Las bacterias tienen muchas adaptaciones únicas que les permiten vivir en
distintos ambientes.

Características de las bacterias

Las bacterias son los organismos más exitosos sobre el planeta. Han vivido en
este planeta por dos mil millones de años antes que las primeras células
eucariotas y, durante ese tiempo, evolucionaron en millones de especies distintas.
Tamaño y forma
Son tan pequeñas que solo se pueden observar en un microscopio. Se pueden
observar tres formas distintas.
1. Bacilos tienen forma de barra.
2. Cocos tienen forma de esfera.
3. Espirilos tienen forma de espiral.

Similitudes con las eucariotas


Al igual que las células eucariotas, las células bacterianas poseen:
1. Citoplasma, el fluido dentro de la célula.
2. Un plasma o membrana celular, la cual funciona como una barrera que rodea a
la célula.

3. Ribosomas, en los que las proteínas se agrupan.

4. ADN. A diferencia de las eucariotas, el ADN bacteriano es contenido en un hilo


largo y circular. Este cromosoma único se localiza en una región de la célula
llamado nucleoide. Muchas bacterias poseen también pequeños anillos de ADN
conocidos como plásmidos.

Rasgos únicos
Las bacterias carecen de muchas estructuras que las células eucariotas sí
poseen. Por ejemplo, no poseen un núcleo. Además, carecen de orgánulos unidos
a la membrana, como las mitocondrias o cloroplastos. El ADN de una célula
bacteriana también es diferente al de las células eucariotas. El ADN bacteriano
está contenido en un cromosoma circular, ubicado en el citoplasma. Las
eucariotas tienen muchos cromosomas lineales. Las bacterias, además, poseen
dos rasgos únicos adicionales: una pared celular y flagelos.
Pared celular
Las bacterias son rodeadas por una pared celular que consiste de
un peptidoglucano. Esta compleja molécula consiste de azúcares y aminoácidos.
La pared celular es importante para proteger a las bacterias. Es tan importante
que algunos antibióticos, como la penicilina, destruyen bacterias previniendo que
se forme la pared celular.
Algunas bacterias dependen de un organismo huésped para obtener energía y
nutrientes. Estas bacterias se conocen como parásitos. Si el huésped comienza a
atacar a la bacteria parasítica, esta produce una capa de mucosa que rodea la
pared celular, dando una capa de protección extra.
Flagelos
Algunas bacterias poseen una estructura con forma de cola llamada flagelo.
El Flagelo permite a la bacteria moverse. A medida que el flagelo rota, gira a la
bacteria y la impulsa hacia adelante. Aunque algunas células eucariotas poseen
flagelo, esto es muy raro.
Técnicas de enfoque microscópico

El enfoque de la imagen en el microscopio se realiza separando el objeto a


estudiar de los objetivos. Mediante unos anillos (1 y 2) se puede subir y bajar la
platina para buscar el foco (en los microscopios antiguos la platina permanece fija,
siendo los objetivos los que se desplazan). En este microscopio existe un amilla
"macro" de desplazamiento brusco (1), para aproximar el enfoque, y uno, llamado
"micro" (2), para ajustarlo.

La operación de enfoque requiere seguir unos determinados pasos para realizarla


con seguridad. El procedimiento correcto es el siguiente. Mirando por fuera del
microscopio se lleva el objetivo junto a la preparación y mirando luego por el
ocular se va separando lentamente hasta obtener la imagen. Si se busca el
enfoque acercando el objetivo a la preparación se corre el riego de producir
fracturas (en la preparación o, en lo que es mucho peor, en la lente frontal del
objetivo) si nos pasamos del plano de foco.

Medios de cultivos

Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones


adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los
microorganismos. Estos medios son esenciales en el Laboratorio de Microbiología
por lo que un control en su fabricación, preparación, conservación y uso, asegura
la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos. En los
laboratorios de microbiología se utilizan diferentes tipos de medios de cultivo que
pueden ser preparados en forma líquida o en forma sólida. Usualmente para
preparar un medio sólido, se parte de un medio líquido al que se le añade un
agente solidificante como el agar, la gelatina o la sílicagel. Los medios de cultivo
se pueden clasificar de acuerdo a la naturaleza de sus constituyentes en:
• Medios naturales o complejos: constituidos por sustancias complejas de origen
animal o vegetal, las que son usualmente complementadas por la adición de
minerales y otras sustancias. En ellos no se conocen todos los componentes, ni
las cantidades exactas presentes de cada uno de ellos.

• Medios definidos o sintéticos: son los medios que tienen una composición
química definida cuali y cuantitativamente. Generalmente se usan en trabajos de
investigación. De acuerdo al uso del medio de cultivo, éstos se clasifican en: •
Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que favorecen el crecimiento de
un tipo de microorganismo en particular. Permiten aumentar el número de
microorganismos de ese tipo. Usualmente contienen una o más sustancias
inhibidoras del crecimiento de los microorganismos con excepción de los que se
quieren cultivar.

• Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se diferencian por


ser medios sólidos y están diseñados para el aislamiento de microorganismos
específicos.

• Medios diferenciales: son medios que contienen indicadores de productos


derivados de la actividad microbiana de los microorganismos. No contienen ningún
tipo de sustancia con actividad antimicrobiana. Permiten revelar características
fisiológicas de los microorganismos. Los medios de cultivo se pueden preparar en
el laboratorio a partir de cada uno de sus constituyentes básicos, o por simple
rehidratación de productos asequibles comercialmente (medios de cultivo
deshidratados). Generalmente se prefiere el uso de los medios de cultivo
deshidratados porque, además de simplificar el trabajo, con ellos se tiene mayor
probabilidad de obtener resultados reproducibles. Para su preparación se deben
tener en cuenta los siguientes aspectos:

• Prepararlos sólo a partir de productos que provengan de fabricantes o


proveedores que suministren productos de calidad.

• Utilizar agua destilada o desmineralizada con una calidad microbiológica y


fisicoquímica adecuada.

• Utilizar materiales de vidrio bien lavado y enjuagado con agua destilada o


desmineralizada.

• Controlar el tiempo y la temperatura recomendada durante su esterilización.


Nunca se deben exceder las condiciones señaladas por el fabricante.
Almacenamiento de los medios de cultivo

Los medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados


bajo las condiciones que señale el fabricante. Generalmente se almacenan en un
lugar fresco (entre 15 y 25°), con poca humedad y protegidos de la luz solar
directa. Nunca se deben almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de
calor o vapor. Los medios de cultivo deshidratados son higroscópicos. Cuando los
envases de estos medios de cultivo deshidratados son abiertos para su uso inicial,
se debe tener la precaución de cerrarlos tan pronto como sea posible y
mantenerlos bien cerrados para prevenir la entrada de humedad. La absorción de
agua produce cambios de pH, formación de grumos, decoloraciones del polvo,
etc., lo cual indica que deben ser descartados porque pueden haber sufrido
cambios químicos o estar contaminados. Una vez que el medio de cultivo ha sido
preparado y esterilizado, puede almacenarse a temperatura ambiente por un
periodo máximo de 2 semanas protegido de la luz, o por periodos mayores a 12 -
15ºC. Sin embargo, almacenados bajo refrigeración entre 2 y 8°C se prolonga la
vida útil de los mismos, (nunca por debajo de 0ºC porque se destruye la estructura
del gel). Los medios de cultivo se deben mantener en recipientes bien cerrados
para evitar su deshidratación y cuando se usa tapón de algodón, se debe colocar
por encima una envoltura de papel (Craft). Otro punto importante a tomar en
cuenta, es que cada lote de medio de cultivo preparado debe pasar por un
riguroso proceso de control de calidad, en donde se determinan sus propiedades
fisicoquímicas (apariencia, pH, etc.) y microbiológicas (esterilidad y promoción de
crecimiento) verificando que cumplan con los requisitos de calidad establecidos y
por ende demostrar que son aptos para su uso.

Métodos de siembra y cultivo de microorganismos

Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseñado diversos


métodos que permiten cultivarlos bajo condicione artificiales, en los que es posible
cultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar un solo tipo de
microorganismo. Una de las técnicas más usadas en el laboratorio de
microbiología consiste en transferir una muestra microbiológica de un ambiente
determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener cultivos microbianos. A
l efectuar este procedimiento, es necesario considerar que en el área de trabajo,
existen muchos otros microorganismos; debido a esto, es necesario tomar
precauciones para impedir que éstos penetren y contaminen los cultivos en
estudio. Por otra parte, para considerar no sólo el aspecto nutricional, sino también
las condiciones ambientales de su hábitat natural, por lo que en el medio de cultivo
se debe ajustar el pH y concentración de sales y durante la incubación
condiciones tales como la temperatura, aireación la luminosidad.
La aplicación de estos procedimientos ha permitido propagar a los
microorganismos en cultivos mixtos, así como su aislamiento y la obtención de
cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio, caracterización, aplicación y
control de los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos depende del tipo de
microorganismo y propósito específico del estudio.

Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de


éste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La población
de microorganismos desarrollada en un medio se denomina cultivo. Cuando éste
contiene una sola especie de microorganismo, se denomina cultivo puro oaxénico,
cuando contiene más de una especie de microorganismos se denomina cultivo
mixto. Un cultivo tipo contiene una especie conocida de microorganismos y es
conservada en el laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.
Un cultivo axénico consiste en una sola especie microbiana, proveniente de una
sola célula. Los cultivos axénicos son muy raros en la naturaleza. En los medios
naturales -por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano- existen cultivos
mixtos. En un cultivo mixto, viven muchas y diferentes especies de forma conjunta.
Un cultivo axénico se obtiene artificialmente en el laboratorio. A la hora de obtener
un cultivo axénico se han de tomar precauciones especiales, ya que los
microorganismos están por todas partes, en la naturaleza, en el laboratorio y en
los instrumentos y recipientes usados en los experimentos. Estos
microorganismos no deseados o contaminantes deben ser eliminados de un
cultivo para que éste pueda ser axénico. El segundo paso para obtener un cultivo
axénico es inocular o introducir, una sola célula de un microorganismo en un
medio sólido o liquido, esterilizado previamente. De esta manera, aislamos un solo
microorganismo del resto y se podrá multiplicar en condiciones favorables. Unclon
está constituido por una población de células descendientes de un solo
microorganismo. Una colonia es un clon lo suficientemente grande como para ser
visible sobre la superficie de un medio sólido.
Un cultivo microbiano que ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo
o matraz, debe ser transferido a un medio de cultivo nuevo, de otra manera el
crecimiento y sobrevivencia no pueden continuar. En esta transferencia se deben
considerar dos aspectos básicos referentes a: no introducir microorganismos
indeseables (contaminantes) y concentración o carga microbiana de la muestra
(inóculo) a sembrar.

Para impedir la contaminación de los cultivos, es necesario tener plena


conciencia de la ubicuidad de los microorganismos, lo que determina que el aíre y
todas las superficies estén densamente pobladas por microorganismos, de este
modo en la transferencia de una muestra microbiológica a otro recipiente, se
deben tener una serie de cuidados que eliminen los riesgos de contaminación.
Estos incluyen el área de trabajo, el lavado de las manos, la esterilización de todos
los utensilios y medios de cultivo a emplear y realizar la transferencia del
microorganismo en una zona estéril, la que se obtiene trabajando cerca de la
flama del mechero. Al conjunto de procedimientos realizados para prevenir o evitar
la contaminación se le llama técnica aséptica; el seguimiento cuidadoso y
detallado de la misma evita accidentes tales como:
o La contaminación y pérdida del cultivo en estudio o La salida y dispersión de
microorganismos del cultivo, lo que ocasionaría la contaminación de utensilios,
productos y del personal. Este último aspecto es particularmente importante
cuando se trabaja con cultivos de microorganismos patógenos.
Con relación a la concentración del inóculo, un error frecuente del principiante
consiste en tomar muestras grandes, lo que es innecesario. Una colonia de
bacterias del tamaño de la cabeza de un alfiler contiene varios millones de
microorganismos, es obvio que con una cantidad pequeñísima (casi invisible) que
se adhiera al asa, será más que suficiente para efectuar una transferencia exitosa.
Dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas: hisopo,
pipeta (para uso microbiológico son terminales y la parte superior o boquilla debe
estar protegida con filtro de algodón), pipeta Pasteur, cable de Kolle o portasa con
alambre de platino dispuesto en forma de: aguja, asa, espátula y/o gancho.
En la transferencia de microorganismos se emplean agujas, asas de inoculación,
hisopos, pipetas o pipetas Pasteur que deberán esterilizarse previamente. La
utilización de estos dispositivos, así como de los diferentes medios de cultivo
tienen aplicaciones específicas. Por ejemplo: los medios líquidos se preparan en
tubos o matraces que se cubren con tapones de algodón o tapones especiales. Un
cultivo líquido puede ser transferido mediante un asa microbiológica, un hisopo,
pipeta o pipeta Pasteur; el inóculo se deposita dentro del caldo o medio líquido. En
este tipo de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se
manifiesta en la superficie o a través de todo el líquido. Una de las ventajas que
presenta este tipo de cultivo se refiere a la posibilidad de agitarlos acelerando la
velocidad de microorganismos anaerobios, por otra parte, en este tipo de cultivos,
las poblaciones se encuentran suspendidas y es fácil homogenizarlas, lo que
permite estandarizar la concentración del inóculo. La desventaja que presentan, e
que en ellos e difícil detectar contaminación a simple vista.
Los medios semisólidos e preparan en tubos, se inoculan con aguja de siembra
(asa recta) o pipeta Pasteur; en este último caso es necesario calentar el medio y
cuando se encuentra en estado líquido y a una temperatura de aproximadamente
42ºC se agrega el inóculo, se homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se
emplean para estudiar la movilidad de los microorganismos y para favorecer la
separación de microorganismos con diferentes requerimientos de oxígeno.
Los medios sólidos e preparan en tubos o matraces dependiendo de la cantidad o
de las necesidades, después de esterilizarlos, estos se inclinan o vierten en cajas
de petri. La siembra se realiza con el asa, inoculando la superficie del agar con
mucha suavidad; en estos medios, los microorganismos al multiplicarse forman
agregados que se hacen visibles a simple vista; a estos agregados se les
denominan colonias, las que presentan características que varían con el tipo de
microorganismo cultivado y el medio de cultivo empleado.

En cualquier medio de cultivo es de primordial importancia ajustar el pH, ya que


aún cuando la mayoría de los microorganismos crecen mejor en pH neutro,
algunos requieren de pH alcalino o ácido, por lo que al proporcionar un pH
adecuado se favorecerá el crecimiento del microorganismo de interés y la
obtención del cultivo. Con este mismo propósito durante la incubación se deben
proporcionar las condiciones adecuadas para el microorganismo en estudio. El
crecimiento óptimo de los microorganismos se presenta a temperaturas que la
mayoría de las veces están relacionadas con la de su hábitat natural.
Algunos microorganismos crecen por debajo de 15ºC, otros requieren
temperaturas más elevadas (30 a 45ºC) y algunos hasta 80ºC. Para alcanzar y
mantener estas temperaturas se puede usar una incubadora microbiológica o un
baño de agua a temperatura constante, en tanto que para lo microorganismos que
presentan su crecimiento óptimo a temperaturas entre 20 y 25ºC se pueden
incubar en la gaveta o cajón del laboratorio, a temperatura ambiente.
En general las incubadoras microbiológicas satisfacen las necesidades en cuanto
a los rangos de temperatura requeridas por los microorganismos. La desventaja
que tienen es que estos aparatos funcionan con aíre seco, lo que determina la
deshidratación de los medios de cultivo. Por lo tanto, el crecimiento de cualquier
cultivo experimental que se realice en incubadora no debe prolongare por más de
nueve días. Con relación a las necesidades gaseosas, no todos los
microorganismo crecen en presencia de oxígeno atmosférico; los que sólo crecen
en presencia de aíre se llaman aerobios obligados; los que sólo crecen en
ausencia de oxígeno se denominan anaerobios obligados o estrictos, un tercer
grupo se adapta a las dos condiciones y se le conoce como facultativos. Existe
una cuarta categoría que comprende bacterias que requieren oxígeno, pero sólo lo
utilizan cuando éste existe en concentraciones reducidas; a estos se les llama
microaerofílicos. El desarrollo de estos diferentes grupos e favorece mediante la
agitación de los cultivos o mediante la exclusión de oxígeno para lo que se
emplean sustancias reductoras o equipos especiales.
Las bacterias son organismos procarióticos, se encuentran ampliamente
distribuidas en la naturaleza, habitan en el agua, el suelo, en la superficie o en el
interior de plantas y animales incluyendo al hombre. Pueden vivir en forma libre o
en simbiosis con otros organismos, ya sea como parásitos, comensales o
mutualistas. Fisiológicamente este grupo presenta características muy variables,
hay bacterias móviles e inmóviles fotosintéticas y quimiotróficas, autótrofas y
heterótrofas; se desarrollan en un rango muy amplio de temperatura, pH y
condiciones gaseosas.
En el estudio de cultivos bacterianos algunos de los criterios que se emplean para
caracterizarlas incluyen: tamaño, morfología celular, forma de agrupación,
reacción a la tinción de Gram, formación de esporas, movilidad, presencia de
inclusiones de reserva y características culturales en medios líquidos y sólidos en
los que presentan patrones de desarrollo en cuanto a la forma, tamaño, elevación
y color de las colonias.
Frotis

Un frotis de sangre es una muestra de sangre que se esparce en una plantilla de


vidrio y se somete a un tratamiento especial. En el pasado, todos los frotis de
sangre se examinaban bajo un microscopio por profesionales de laboratorio.
Ahora, sistemas digitales automáticos pueden usarse para ayudar a examinar el
frotis de sangre.

El frotis de sangre se examina con el propósito de revisar el tamaño, la forma y el


número de tres tipos de células sanguíneas:

 Los glóbulos rojos, que transportan oxígeno de los pulmones al resto del cuerpo
 Los glóbulos blancos, que combaten las infecciones
 Las plaquetas, que ayudan a que la sangre coagule
Muchas pruebas de sangre usan computadoras para analizar los resultados. Con
el frotis de sangre, el profesional de laboratorio busca problemas en las células de
la sangre que no se pueden detectar con una computadora.

Otros nombres: frotis de sangre periférica, extensión sanguínea, extensión,


análisis de extensión sanguínea

El frotis de sangre se usa para diagnosticar y vigilar muchas afecciones,


como trastornos de la sangre, insuficiencia renal repentina y el tratamiento de
ciertos cánceres.

DISOLUCIONES

Una dilución es un procedimiento, cuya finalidad es disminuir la cantidad de


soluto por unidad de volumen de dilución. Este procedimiento se logra mediante la
adición de una cantidad específica de diluyente en una cantidad determinada de
soluto para generar una mezcla homogénea entre dos o más sustancias.

En química, la dilución es la reducción de concentración de una sustancia


química en una disolución.

La dilución consiste en bajar la cantidad de soluto por unidad de volumen de


disolución. Se logra adicionando más diluyente a la misma cantidad de soluto: se
toma una poca porción de una solución alícuota y después esta misma se
introduce en más disolvente.

REPORTE DE RESULTADOS DE MICROBIOLOGIA


La interpretación de los resultados obtenidos en el laboratorio de microbiología
depende de la calidad de las muestras recibidas, siendo el manejo previo a su
recepción en el laboratorio, crítico para la exactitud de los resultados. Esto se
debe a que los microorganismos pueden crecer, multiplicarse o morir rápidamente
cuando existe una indebida recolección, transporte y conservación de la muestra.
Un manejo inadecuado de la muestra puede producir resultados erróneos, los que
afectan directamente la salud del paciente e influencian las decisiones
terapéuticas. Como consecuencia, habrá un impacto en el tratamiento y control de
las infecciones, en la duración de la hospitalización, en los costos hospitalario y en
los costos y rendimiento del laboratorio. Por este motivo, los médicos tratantes son
los responsables de la selección de la muestra y su recolección, aunque pueden
comunicarse con el microbiólogo clínico para su asistencia o consulta. El clínico
debe entregar toda la información necesaria para que el microbiólogo haga una
correcta interpretación del resultado. Así mismo, debe tener los conocimientos
para priorizar la prueba diagnóstica que solicitará en caso de obtener una escasa
cantidad de muestra.
Los mejores resultados para los pacientes derivan de las asociaciones sólidas
entre el médico tratante y el especialista técnico del laboratorio. Se debe fomentar
una comunicación clara y cercana entre médicos, enfermeras y personal del
laboratorio. Es crucial que el clínico se contacte con el director de su laboratorio y
con el médico microbiólogo en las siguientes situaciones: cuando considere que el
tiempo de respuesta no contribuye a la toma de decisiones; cuando las políticas
del laboratorio causen problemas en la salud del paciente; cuando los resultados
sean inconsistentes con la presentación clínica del paciente o; cuando sienta la
necesidad de incorporar nuevas pruebas al laboratorio.
La siguiente revisión describe brevemente las etapas del ciclo diagnóstico de una
enfermedad infecciosa, desde la sospecha clínica hasta la identificación del
agente etiológico que causa la infección, detallando las pruebas relevantes para el
diagnóstico microbiológico, con el fin de dar a conocer al clínico una visión general
de las pruebas diagnósticas y de la labor realizada por el laboratorio de
microbiología.
TECNICAS DE AISLAMIENTO DE HONGOS

En condiciones naturales, algunas plagas tienen sus controladores biológicos


específicos que se encuentran presentes en el aire o en el suelo y se concentran
en las proximidades de las plantas afectadas. Entre los controladores de insectos
están los hongos entomopatógenos. Para el aislamiento de estos hongos, las
muestras se colectan en el hábitat natural del insecto. Colectar consiste en
recoger insectos vivos o muertos, en el follaje, axilas, tallos, corteza de los
árboles, sobre la superficie o en el interior de éstos, en el suelo, inclusive en
crianzas masivas de laboratorio. Si el insecto se encuentra pegado a una
superficie, es necesario cortar la porción del sustrato que lo contiene y colocarlo
en una placa o frasco, pero nunca en sobre de papel o en medio líquido. El
material se conserva mejor si se mantiene a bajas temperaturas. Se deben
colectar insectos en diferentes estados de desarrollo que presenten signos
iniciales o avanzados de estar parasitados

Los insectos colectados deben ir con los datos respectivos de: 1. Nombre del
colector. 2. Nombre del insecto colectado (familia, género, especie). 3. Lugar (en
este caso no es suficiente poner el nombre del área, hay que incluir el lugar
preciso). 4. Hospedante, cultivo o ambiente. 5. Altitud. 6. Fecha. 7. Observaciones
adicionales (estado del insecto, signo, síntomas, condiciones climáticas, etc.)
Una vez en el laboratorio, las muestras son procesadas como sigue (Figura 7):
1. Remojar el insecto en hipoclorito de sodio (0.5% del producto activo) durante 5
minutos. 2. Enjuagar tres a cuatro veces con agua destilada estéril. 3. Colocar
papel de filtro estéril en una caja Petri esterilizada y agregar agua destilada estéril.
4. Colocar el insecto sobre el papel de filtro dentro de la caja. 5. Sellar la placa con
parafilm®. 6. Incubar a 20 o C durante 7 días (Figura 8). 7. Con una aguja de
siembra, en la cámara de flujo laminar, tocar levemente el cuerpo del insecto
donde se vea crecimiento fungoso y transferir su contenido a medio de cultivo

ANALISIS MICROBIOLOGICO DEL AGUA, AGUA DE BIDONES, AGUAS


ESTANCADAS

Un análisis microbiológico del agua es una técnica para conocer la calidad del
agua determinando cuáles son los microorganismos que hay presentes en la
misma. Dependiendo del uso que le demos a esa agua, hay que determinar las
bacterias que afectan a la salud. Así evitaremos enfermedades e infecciones
bacterianas que repercuten en nuestro intestino.
En Laboratorio Alazor somos especialistas en análisis microbiológicos del
agua para conocer el estado del agua potable, residuales, piscinas, etc.
Respetando los tiempos adecuados para realizar un análisis de calidad y conocer
las bacterias en cuestión.

Tipos de análisis microbiológicos del agua

Revisar la composición del agua para detectar parásitos y microorganismos


nocivos para la salud es clave. Existen varios tipos de análisis para conocer la
relación del agua con otros seres vivos:
 Análisis de la potabilidad del agua: en este análisis buscamos que el agua
sea de calidad y no se encuentre contaminada por ningún agente externo
perjudicial para nuestra salud. Debe estar libre de microorganismos, parásitos
y sustancias tóxicas. Es el análisis microbiológico del agua más común y se
rige por el Real Decreto 140/2003.
 Análisis del agua en piscinas y jacuzzis: al ser un agua que se encuentra
en contacto directo con la piel también debe ser analizada. Se toman
muestras y se comprueban los índices de composición del agua de piscinas y
jacuzzis para comprobar que se encuentra en los intervalos correctos. Por
ejemplo, que no haya exceso de cloro.
 Análisis de aguas residuales: las aguas residuales están contaminadas,
ahora bien, es importante conocer qué tipo de contaminación han sufrido para
así saber donde puede proceder el problema. Normalmente, han sufrido
contaminación por residuos domésticos, industriales, agua de lluvia o
filtraciones en la tierra. En un análisis microbiológico de aguas residuales se
busca la presencia de estaño, pH elevado, níquel y selenio.
 El objetivo principal de un análisis microbiológico del agua es identificar y
omitir los microorganismos que son dañinos para nuestra salud, alimentos,
cultivos, entre otros. Garantizando la salubridad del agua e inocuidad frente
a enfermedades que trasfieren las bacterias.
 Los análisis para la detección de microorganismos presentes en el agua no
únicamente buscan la seguridad alimentaria y de productos. Si no que es
un requisito para contribuir al cumplimiento de las normas sanitarias a nivel
nacional.
 Las pruebas microbiológicas pueden darnos información acerca de fallos en
un proceso de fabricación, un entorno contaminado, filtración del agua en
ríos o tierra contaminada, lotes de alimentos que han sufrido daños, etc. Se
trata de una herramienta más para obtener unas prácticas y protocolos de
limpieza y desinfección en industria, hoteles, piscinas, cultivos, entre otros.
 En Laboratorios Alazor realizamos análisis de agua para asegurar la
salubridad de la misma. Puedes consultarnos cualquier duda o sugerencia
sobre cómo se desarrollan los tipos de análisis del agua.
Bibliografía

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