ENZIMAS:

DEFINICIÓN: Son catalizadores producidos por las células y cuya función es incrementar
la velocidad de las reacciones que catalizan sin alterar las constantes de equilibrio.
DEFINICIÓN BIOQUIMICA: Son macromoléculas nitrogenadas biológicas con función
catalítica específica.
IMPORTANCIA:

 Actúan en secuencias organizadas, catalizando miles de reacciones

 Permiten un control coordinado de las rutas metabólicas
 Tienen una inmensa utilidad práctica.
 Algunas enfermedades pueden ser debidas a ausencia parcial o total de una o más
enzimas.
 Algunas enfermedades pueden producirse por actividad excesiva de una enzima.
 La medición de las concentraciones en plasma de enzimas puede ser utilizadas en el
diagnóstico clínico.
 Muchas drogas ejercen su efecto biológico a través de la interacción con las enzimas.
 Tienen utilidad en la industria química, procesamiento de alimentos y en la
agricultura.
CARACTERÍSTICAS
 Tienen gran poder catalítico.
 Son altamente específicas.
 La mayoría de las enzimas son proteínas.
 Su actividad puede ser regulada
 Las enzimas Inter convierten diferentes formas de energía.

ENZIMAS DE NATURALEZA PROTEICA:

 PROTEINAS PURAS: No requieren cofactor (tripsina, quimotripsina, elastasa)
 HOLOENZIMAS: Porción proteica ó Apoenzima
Coenzima: molécula orgánica que está
débilmente unida a la enzima.

Grupo prostético: molécula orgánica o ión

metálico que está covalentemente unido a
la enzima.
Cofactor: Catión metálico, unido débilmente a
la enzima.
 SITIOS DE LA ENZIMA:
SITIO DE UNIÓN AL SUSTRATO:

Contiene Cadenas laterales de aminoácidos que fijan al sustrato formando el Complejo

Enzima – Sustrato.
La unión es reversible y se establece mediante enlaces débiles:

 Electrostáticos
 puentes de hidrógeno,
 fuerzas hidrofóbicas y
 fuerzas de Van der Waals
SITIO ACTIVO:

Contiene los grupos químicos específicos implicados en la catálisis, pudiendo estar

cercanos o alejados en su estructura primaria. Puede integrar o no al sitio de unión al
sustrato.

SITIO ALOSTÉRICO:

Presente en las enzimas regulatorias, en donde se fijan efectores o inhibidores

alostéricos, que provocan un cambio conformacional en el sitio de unión al
sustrato o en el sitio catalítico, regulando la actividad enzimática.

ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA:
Especificidad de sustrato: Absoluta Y Relativa
Especificidad de acción: Absoluta

Especificidad de Sustrato:
Únicamente aquella que tenga la forma específica y complementaria al sitio
activo de la enzima será capaz de ocupar el sitio activo.

Especificidad Absoluta:
DE GRUPO: alcohol, enlace peptídico, enlace éster

ÓPTICA: D, L (D-monosacáridos; L-aminoácidos

El grado de especificidad es variable de una enzima a otra, por ejemplo, la glucocinasa y la hexocinasa
son dos enzimas diferentes que catalizan la misma reacción, fosforilación del sustrato a expensa del
ATP.

Glucocinasa: especificidad absoluta para la glucosa.

Hexocinasa: especificidad relativa, puede ser glucosa, otras hexosas y algunos derivados de las mismas

MODELOS QUE EXPLICAN LA ESPECIFICIDAD ENZIMÁTICA:

 CLASIFICACIÓN DE LAS ENZIMAS:
Oxidorreductasas: Catalizan reacciones de oxido-reducción al adicionar o sustraer hidrógenos o
electrones.

Transferasas: Catalizan reacciones en las que hay una transferencia de grupos de una molécula a
otra
Hidrolasas: Catalizan reacciones en las que se produce la ruptura de enlaces por la adición de agua.

Liasas: Catalizan reacciones de eliminación no hidrolítica de grupos (H2O, CO2 y NH3) para formar un
doble enlace o se añaden grupos para romper un doble enlace.

Isomerasas: Catalizan varios tipos de reacciones en las que hay un reordenamiento intramolecular.

Ligasas: Catalizan la formación de un enlace entre dos moléculas de sustrato. La energía para estas
reacciones es aportada por la hidrólisis de un nucleótido trifosfato.
 NOMENCLATURA:
Las enzimas se identifican con un código de cuatro dígitos, así como un nombre sistemático que consta
del nombre de los sustratos, seguido por el tipo de reacción que cataliza, terminado en asa.

MECANISMOS DE ACCIÓN. CATÁLISIS ENZIMÁTICA:

Curso de una reacción espontánea Mecanismo general de la catálisis enzimática
 Mecanismo general de la catálisis enzimática
 En una reacción química, un compuesto con un determinado nivel energético.
 Debe alcanzar un nivel energético más alto que se corresponde con el valor del estado de transición.
 Para ser transformado en producto con un nivel energético, que normalmente es inferior al del estado inicial.
 La formación del estado de transición representa una barrera energética que debe ser aportada por el entorno
para que la reacción tenga lugar. Esa barrera energética es lo que constituye la energía de activación, la cual, en las
reacciones no catalizadas por enzimas, puede ser aportada por incrementos de temperatura o variaciones de pH.
 En presencia de enzimas la unión de la enzima con el sustrato constituye un estado de transición, lo cual favorece
que la reacción se realice sin necesidad de un aporte energético del entorno, esto viene dado a que el complejo
Enzima – Sustrato (ES) atraviesa una serie de barreras energéticas que son producto de los cambios
conformacionales de la enzima y el sustrato a medida que transcurre la reacción.

MECANISMOS QUE UTILIZAN LAS ENZIMAS PARA AUMENTAR LA

VELOCIDAD DE LAS REACCIONES
 Acercan a los reactantes
 Disminuyen la energía de activación
A través de la formación del Complejo Enzima -Sustrato

Las enzimas crean vías alternas de menor energía de activación y lo hacen por dos mecanismos

fundamentales:

Creación de interacciones no covalentes entre la enzima y el sustrato que van acompañada de liberación
de energía (ΔG) que rebaja la energía de activación.

Formación de enlaces covalentes o las transferencias de grupos entre determinados grupos funcionales
de la enzima y del sustrato.
 MECANISMOS QUÍMICOS DE CATÁLISIS:
Catálisis ácido-base general: La aceleración de la reacción se logra por la transferencia de protones desde
o hacia el sustrato.

Catálisis ácida: Cuando la enzima transfiere un protón al sustrato.

Catálisis básica: Cuando la enzima remueve un protón del sustrato.

Presente en las reacciones que involucran transferencia de grupos fosfatos, tautomerización y adición de
grupos carbonilos.

Grupos ácido-base de las enzimas:

 El grupo imidazol de la histidina

 Grupos carboxilo de los aminoácidos ácidos
 Grupos amino de los aminoácidos básicos
 SH de la cisteína
 OH de la tirosina
Catálisis covalente: Ocurre en aquellas reacciones en donde el sustrato o parte de él forma un enlace
covalente con la enzima. La reacción se ejecuta en dos etapas:

Catálisis por iones metálicos:

Los metales participan en la catálisis:

o Sirviendo de enlace con el sustrato, lo cual permite su adecuada orientación en el sitio activo.
 Estabilizan las cargas en un estado de transición inestable.
o Actúan como mediadores en las reacciones de oxidorreducción.
o Cambian la polaridad de ciertos enlaces del sustrato y favorecen el ataque nucleofílico.

CINÉTICA ENZIMÁTICA:
Velocidad de una reacción: Es el cambio de la concentración de un reactante o de un producto por unidad
de tiempo.

Cinética enzimática: se encarga de la medición cuantitativa de los índices de reacciones catalizadas por
enzimas, y del estudio sistemático de los factores que afectan estos índices. Proporciona información sobre
las velocidades de reacción y la afinidad de las enzimas por los sustratos e inhibidores.
Unidades de medida de la actividad enzimática

Unidad Internacional (UI): Número de micro moles de sustrato transformado por miligramo de enzima por
minuto.

Katal: Moles de sustrato transformado por segundo.

Actividad Específica: Micro moles de sustrato transformado por minuto por miligramo de proteína.

EFECTO DEL PH SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN:

A pH alejados del pH óptimo los cambios en los grupos ionizables del sitio activo son tan severos que
impiden la unión del S y la función de la enzima

EFECTO DE IONES METÁLICOS SOBRE LA VELOCIDAD DE LA REACCIÓN:

Participan en el proceso catalítico formando un complejo ternario (enzima, ión metálico y sustrato)
CINÉTICA DE MICHAELIS – MENTEN:
LA ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN ESTÁ BASADA EN CUATRO SUPUESTOS:

1. La enzima tiene un único sustrato.

2. El complejo E-S se encuentra en estado estacionario.

3. Bajo condiciones de saturación, todas las moléculas de enzima intervienen en la formación del
complejo E-S.

4. Cuando toda la enzima se encuentra en forma del complejo E-S la velocidad de la reacción es máxima.

TIPOS DE INHIBIDORES DE LAS ENZIMAS:

INHIBIDORES IRREVERSIBLES: enlazan covalentemente a la enzima.

INHIBIDORES REVERSIBLES: unión no covalentemente con la enzima.

a) Competitivos: Poseen una estructura semejante a la del sustrato, siendo reconocidos por el centro
activo de la enzima. Su efecto puede ser contrarrestado al incrementar la concentración del sustrato
b) No competitivos: Se unen a la enzima por un sitio diferente al que lo hace el sustrato, por lo que puede
unirse tanto a la enzima libre, como al complejo E-S. No afecta la afinidad de la enzima por el sustrato

c) Acompetitivos: Se unen al complejo E-S formando un complejo ternario ESI catalíticamente inactivo.
Aumentan la afinidad de la enzima por el sustrato.
 CONTROL ENZIMÁTICO:
La regulación enzimática desempeña un papel fundamental en el control de todos los procesos
metabólicos.

Razones por las cuales es necesaria la regulación:

Mantenimiento de un estado ordenado: Producción de metabolitos requeridos para el mantenimiento de

la estructura y el funcionamiento celular sin desperdicio de recursos

Conservación de la energía: Las reacciones que generan energía solo son activadas para satisfacer los
requerimientos energéticos de las células.

A. Regulando el número de moléculas de enzimas

1. Inducción - Represión de la síntesis enzimática.

La síntesis de enzimas se produce en respuesta a las variaciones de las necesidades metabólicas, lo cual
permite que la célula responda a las variaciones del ambiente.

Ejemplo: Bacterias que han crecido en un medio con ausencia del disacárido lactosa inicialmente no
pueden metabolizar este azúcar cuando es introducido al medio de cultivo de la bacteria. Luego de la
introducción de la lactosa se activan los genes que codifican las enzimas necesarias para utilizar la
lactosa como fuente de energía.

El producto final de una ruta metabólica puede inhibir la síntesis de enzimas claves de dicha ruta, en un
proceso denominado represión enzimática.

2. HIDROLISIS O Degradación de las enzimas.

Implica la hidrólisis por enzimas proteolíticas, este proceso depende de la ausencia de sustrato y cofactores
lo cual va afectar la conformación de la enzima haciéndola susceptible a la proteólisis.
B Regulando la eficiencia catalítica de las enzimas

1. Disponibilidad de sustratos y cofactores.

Compartimentación: Consiste en la separación espacial de enzimas, sustratos y moléculas reguladoras en

diferentes regiones o compartimentos celulares, permitiéndole a la célula usar de forma eficaz recursos
relativamente escasos.

Asociaciones multienzimáticas: Son organizaciones de varias enzimas que participan en una misma vía
metabólica en asociaciones que pueden ser de naturaleza diversa, con el fin de lograr sistemas de máximo
rendimiento energético.

Tipos de asociaciones multienzimáticas:

 Agregados o complejos multienzimáticos, en el que varias enzimas se agrupan para constituir un

complejo único. Ej: Complejo de la Piruvato deshidrogenasa
 Enzimas unidas a membranas y ordenadas en función de su participación en la vía. Ej: Cadena de
transporte de electrones
 Enzimas multifuncionales o conjugados multienzimáticos, que son moléculas de enzimas asociadas
covalentemente. Ej: Acido graso sintetasa,

2. Regulación alostérica.

Las enzimas alostéricas son invariablemente proteínas, con múltiples lugares activos, presentan
cooperatividad de unión de sustrato (homoalosterismo) y una regulación de su actividad por otras
moléculas efectoras (heteroalosterismo)

El homoalosterismo permite un control más estricto a nivel del sustrato, ya que la unión de una molécula
de sustrato a uno de los sitios catalíticos modifica la estructura de la enzima, aumentando la afinidad de los
otros sitios por el sustrato

En el heteroalosterismo los efectores pueden ser inhibidores o activadores, ya sea que produzcan una
disminución o aumento en la afinidad de la enzima por su sustrato, respectivamente

Características de las enzimas alostéricas

1. Son proteínas con múltiples subunidades y con múltiples sitios activos. (oligoméricas)
2. Presentan en su superficie un sitio catalítico y un sitio alostérico.

3. Su actividad puede estar regulada por metabolitos activadores o inhibidores.

4. Presentan cooperatividad de unión del sustrato.

5. Presentan una ubicación específica dentro de una ruta metabólica

6. No cumplen con la cinética de Michaelis - Menten, sus curvas presentan un comportamiento sigmoideo.

3. Modificación covalente.

Zimógenos o proenzimas: Algunas enzimas se sintetizan en una forma catalíticamente inactiva, llamada
proenzima o zimógeno. Para pasar a la forma activa la proenzima debe sufrir una proteólisis parcial, en la
que pierde un fragmento de su molécula y varía su conformación, de tal manera que se organiza su sitio
catalítico.

Modificación covalente reversible: Fosforilación y desfosforilación : Algunas enzimas se regulan por la

interconversión reversible entre sus formas activa e inactiva. Estos cambios son producidos por diversas
modificaciones covalentes. La actividad de estas enzimas puede ser controlada por la unión reversible de
grupos fosforilo (en mamíferos) o de nucleótidos (en bacterias) en residuos específicos de serina y
treonina.

ENZIMAS EN EL DIAGNÓSTICO CLÍNICO

Marcadores hepáticos: