Espermograma Practica

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8/06/2023

Practica

ESPERMOGRAMA
Liquidos Corporales
Dafne Yamile Aguilera Morales
4°D
Introducción
El análisis del semen o espermograma es una prueba de laboratorio
simple de gran importancia para la evaluación de la infertilidad en
las parejas y para el estudio de las enfermedades genitales
masculinas y de otras patologías, como las causadas por la
exposición a productos químicos, factores ambientales y
medicamentos, entre otras. Muchos de los parámetros y técnicas
descritas hace más de 50 años continúan teniendo validez en la
actualidad.
El espermograma básico evalúa las características generales del
semen, como son la apariencia y el volumen, el número de
espermatozoides, la motilidad, la morfología, la vitalidad y la
presencia de leucocitos. El recuento y la motilidad de los
espermatozoides tienen utilidad para determinar si hay suficientes
espermatozoides que puedan alcanzar el ovocito, en tanto que la
morfología de los espermatozoides se considera como el parámetro
del espermograma que más se asocia con la capacidad de
fertilización. Otros parámetros adicionales a los ya mencionados,
como las pruebas inmunológicas que detectan anticuerpos contra
los espermatozoides y la pruebas funcionales como las de unión del
espermatozoide a la zona pelúcida y penetración al ovocito, se
utilizan como pruebas complementarias en la evaluación de la
pareja infértil. En este módulo se presenta una descripción de los
parámetros que componen un espermograma básico y correlaciona
los resultados con
posibles alteraciones de los órganos genitales masculinos
Objetivo
Conocer y aplicar las metodologías actuales para el análisis básico
de semen de acuerdo a los criterios internacionales de la
Organización Mundial de la Salud en su versión actual 2010

Materiales

Muestra de semen
Pipetas
Tiras de PH
Porta objetos
Cubre objetos
Camara de neubober
Tubo conico
Cristalizador
Puente para tinción
Microscopio
Agua destilada
Campo frio
Procedimiento
1. Optener la muestra
ASPECTOS RELEVANTES A LA OBTENCIÓN DE LA MUESTRA DE SEMEN

1. Acudir al laboratorio con las manos y el pene aseados.


2. Tener de 2 a 7 días de abstinencia sexual (no más de 7 días y no menos de 48 horas).
3. La muestra de semen se debe obtener preferentemente por masturbación.
4. Eyacular dentro de un recipiente de plástico de boca ancha y tapa hermética estéril, el cual deberá
estar en una temperatura entre 20°C y 37°C (para evitar el choque térmico).
5. Obtener la muestra en un lugar privado.
6. La muestra debe obtenerse completamente, no se debe perder ninguna fracción del eyaculado.
7. Se debe informar al paciente que el coito interrumpido no es una medida aceptable para obtener la
muestra, ya que puede perderse la primera fracción del eyaculado y las secreciones vaginales
pueden contaminar la muestra de semen

2. Transportar el semen
Una vez obtenida la muestra de semen, es indispensable que sea transportada inmediatamente
al laboratorio en untiempo máximo de 1 hora, conservándola lo más posible a temperatura
ambiente (20°C-37°C). En algunos casos serecomienda guardarla cerca del cuerpo.

3. Licuefacción del semen


a) Una vez colectada la muestra de semen, se debe de colocar en incubadora o
baño maría a 37°C.
b) La muestra debe observarse cada 10 minutos para saber si la muestra se licuó
completamente. La mayoría se licuan dentro de los primeros 30 minutos.
c) Revisar bien si la muestra contiene coágulos o filamentos.
4. Viscosidad
Homogeneizar la muestra de semen y aspirarla con una pipeta Pasteur o
transfer. Posteriormente la muestra se deja caer y se observa la longitud del
filamento.

• Si la muestra presenta gotas pequeñas bien definidas, cayendo libremente con


cierta consistencia, el semen presenta viscosidad
normal.

• Si la muestra de semen no forma gotas y presenta filancia (filamento mayor a


2 cm de longitud), el semen presenta viscosidad anormal.

5. Aspecto
Inmediatamente después de la licuefacción, debe realizarse el análisis del aspecto del semen, dicha
característica está determinada por la concentración de células espermáticas y/o la presencia de
otros tipos celulares presentes en el eyaculado así como de algunas sustancias secretadas por el
organismo.

6. Volumen
El volumen del eyaculado se mide de la siguiente manera:
a) Pesar el recipiente con la etiqueta.
b) Una vez que el semen es depositado, se pesa el recipiente.
c) Se resta los pesos y por diferencia se obtiene el valor, se considera densidad de 1
gr/mL, por lo tanto el resultado se reporta en mL
d) Otra forma de medir el volumen es mediante una pipeta graduada o un tubo falcon
7. Ph
El pH se debe medir inmediatamente después de la licuefacción,
de preferencia cuando hayan transcurrido 30 a 60 minutos:
a) Se homogeniza la muestra de semen y se toma una gota pequeña de semen.
b) La gota de semen se coloca en una tira reactiva para pH.
c) Después se compara el color de la tira con el control que viene en la caja

8. Concentración
1. Homogeneizar la muestra de semen para la toma de la alícuota.
2. Observar 10 μL de semen en 40x (4 nL) o 20x (16 nL).

3. Contar el número total de espermatozoides por lo menos de 3 campos microscópicos y obtener


la media. De acuerdo a la media de los tres campos contados y de acuerdo al cuadro de diluciones
utilizadas. Se realiza la dilución por duplicado (en 2 tubos diferentes). Para diluir se puede emplear SSF o
un Buffer fosfato.

4. Homogenizar la dilución, y llenar con 10 μL en cada una de las cámaras del hemocímetro, con
cada una de las diluciones utilizadas.
9. Vitalidad
La muestra deberá estar perfectamente licuada.
• Colocar 50 μL de semen homogeneizado y 50 μL de la solución eosina-nigrosina e incubar 30 segundos.
• Transferir de 12 a 15 μL de la mezcla en un portaobjetos limpio y hacer un frotis uniforme sobre el
área completa del portaobjetos.
• Después de secar el portaobjetos deberá ser examinado directamente.
• Examinar al menos 200 espermatozoides. Las cabezas no teñidas (blancas) están «vivas», cualquier tinte
rosa
o rojo en la cabeza significa que están «muertos».

10. Movilidad
1. Homogeneización de la muestra
• La muestra se debe homogeneizar, 10 veces
aproximadamente (No usar vortex).
Preparación de la muestra

2.Tomar una alícuota según el grosor del cubreobjetos


• Para alícuotas de 10 μL usar cubreobjetos de 22x22 mm
• Para alícuotas de 11 μL usar cubreobjetos de 21x26 mm
• Para alícuotas de 6.5 μL usar cubreobjetos de 18x18 mm

3. Observación
• Se evalúan con objetivos de 40x.
• Evaluación de campos al azar, siguiendo el esquema que
se muestra en la parte superior
CLASIFICACIÓN
• Movilidad Progresiva (MP): espermas con movimiento activo: lineal o en círculos
independientes con alta velocidad.
• Movilidad No Progresiva (NP): todos los patrones de movilidad con ausencia de

Progresión.
• Inmóviles (IM): sin movimiento.
CONTEO DE LA MOVILIDAD
• Contar mínimo 200 espermatozoides completos en 5 campos diferentes.
• Se recomienda contar en cada campo el orden de categorías MP, NP e IM.
• Se realizan dos conteos en 2 alícuotas diferentes e independientes.
• Se calcula el promedio y se establecen los criterios de la tabla que se muestra a continuación,
para determinar si es aceptado o rechazado
11. Morfologia
La muestra debe ser mantenida a 37°C hasta su licuefacción total.
Colocar una gota de semen no
menor a 5 o 10 μL sobre un portaobjetos.
• Realizar la extensión con otro portaobjetos limpio evitando ejercer
demasiada presión para no
desprender las colas.
• Realizar una tinción con Wright, Papanicolaou o Hematoxilina-eosina
CÁLCULOS Y RESULTADOS
1. Sólo se cuentan los espermatozoides completos con cabeza y cola, no se
consideran los de cabeza de alfiler.
2. Realizar la observación en forma de guarda griega
3. Evaluar al menos 200 células a 100x con aceite de inmersión.
4. Realizar la evaluación por duplicado.
5. Evaluar la diferencia según la siguiente tabla para validar.

Los resultados se deben expresar de la siguiente forma:


1. Porcentaje de espermatozoides normales y anormales.
2. Porcentaje de anomalías de cabeza, pieza media, cola y exceso
de citoplasma residual
Paciente: Gael Cisneros Castillo
Edad: 16 años
hora de toma de muestra: 6:36

Examenes solicitadas Espermatobiascopia directa


Espermatobiascopia directa
Examen FISICO
Volumen: 2 ml
Color: Gris opalecenie
Olor: Surgenèresis
Aspecto: Normal
Acidez ionica: 7
Viscosidad: Normal
Licuefacción: 45 min aproximadamente
Zooespermas por ml: 109 mill/ml Formas normales: 90%
Maciocefalos: O Microcefalos: O
Persistencia de cromatina: 0%-
Doble cabeza: 0% Doble cola: 0%
Sin cabela: 0 Sin cola: 5%.
Defecto de cola: 0%
Piformes: 0%
Moulidad progresiva rapido. 90%.
Movilidad progresiva lenta: 5. Movilidad no progresiva:
5%
Forma movibles: 90%
Formal inmovible): 5.
Vitalidad al arribo de la muestig Cinetica/vIVOS: 70%
Estatico/muertos: 30%. Leucocitas y entrocitos: Ninguno
Bacterias: Ninguno
Concentracion ml: 109 mill/ ml Concentracion millone)=218 millones

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