REPASO DE MOLECULAR

1. PARCIAL 1: Introducción
a. Generalidades del ciclo celular
Ciclo celular: Es el ciclo vital de una célula, conjunto de procesos que conducen al crecimiento de la
célula y a la división de dos células hijas.

2 Fases:

● Interfase: Periodo del cc comprendido entre el inicio de la vida celular y el comienzo de la división
celular.
○ G1 (6-12 hrs) --- G0 (Quiescencia)

■ No síntesis de adn. ■ Síntesis proteínas.

■ Célula crece físicamente. ■ Orgánulos se duplican.

○ S (6-8 hrs)
■ Síntesis de ADN
■ Duplicación de ADN y proteínas asociadas. Existen ahora 2 copias de info genética.
○ G2 (4 hrs)
■ Se prepara para la mitosis
● Fase M (Mitosis) división de células. (sólo en eucariotas)

Interfase: Síntesis de proteínas. Anafase: cromosomas se separan por su

Profase: cromatina se condensa, centrómero, viajan a cada polo las
comienza a formarse huso mitótico, cromátidas. Comienza citocinesis.
envoltura nuclear desaparece. Telofase: cromosomas comienzan a
Metafase: se condensan bien los descondensarse
cromosomas, se disponen en el plano Citocinesis: genera dos células hijas.
ecuatorial.

Cinetocoro: región proteica dentro del centrómero

Actina: da estructura y forma.
Miosina: anillo que corta a las dos membranas en la citocinesis.
Proteínas motoras: Dineina y Kinesina
MEIOSIS -- se utiliza para producción de gametos, genera hijas con exactamente la mitad del material
genético (cromosomas)

MEIOSIS I

Profase I (célula inicial diploide) 46

-Leptoteno: No hay cromosomas sólo filamentos

-Cigoteno: Cromosomas homólogos empiezan a emparejarse, se alinearon secuencias de ADN. Complejo
sinaptonémico
-Paquiteno: Crossing over
-Diploteno: Quiasma visible
-Diacinesis: Cromosomas alcanzan máxima condensación
Metafase I
Desaparece membrana nuclear, desaparece huso mitótico, plano ecuatorial, centrómeros hacia el lado
opuesto.
Anafase I
Se separan cada cromosoma bivalente, no. de cromosomas se reduce a la mitad, haploide.
Telofase I
Los dos conjuntos haploides de cromosomas están en cada polo
● Al final 23 cr y 46 cromátidas

MEIOSIS II

Profase II
No haploide, no hay duplicación, estado condensado, se forma el huso
Metafase II
Placa ecuatorial
Anafase II
Centrómeros se separan, YA pueden llamarse cromosomas
Telofase II
Se forma membrana nuclear, citocinesis, 4 CÉLULAS HIJAS CON JUEGO HAPLOIDE
● Al final 92 cr y 184 cromátidas

Proto-oncogen: Gen que favorece.

Supresor de tumor: Gen que frena.
➔ Proteínas que permiten el progreso del ciclo: Complejo CdK-Ciclinas
◆ Cdk: 1,2,4 y 6
◆ Ciclinas: A,B,D y E
➔ Proteínas que frenan la progresión del ciclo:
◆ Ink4: Inhibidoras de la kinasa 4. P16
◆ CIP: Proteínas inhibidoras de las cdks inhiben todos los compuestos conocidos. P21, P27,
P53

b. Regulación del Ciclo celular

G1
➔ Puntos de restricción: CDK4-CDK6 y Aciclina D
P16 lo inhibe
➔ Puntos de control: CDK2-Ciclina E
P53 y P21 lo inhibe
Para pasar de G2 a MITOSIS
➔ Punto de control: P53, P21: LO INHIBEN y LLEVAN A LA APOPTOSIS CEL
◆ CDK1- Ciclina A
◆ Ciclina B
◆ Factor promotor de la mitosis
➔ Punto de control: complejo promotor de anafase. (Ocurre antes de la citocinesis)
Factores externos que pueden dañar/inactivar a P53:
➔ Benzopirenos (Insecticidas).
➔ Virus Hepatitis B
➔ VPH
➔ Luz UV

Transformación del cromosoma durante el ciclo celular

Proliferación: Cuando la célula aumenta en población. Ej: Para reparar.

Diferenciación: Proceso en el cual, las células de un linaje celular concreto sufren modificaciones en su
expresión génica, para adquirir la morfología y las funciones de un tipo celular específico.

TELOMERASA
Telómero: Es un nudo que forma una triple hebra para evitar que el ADN se deshilache. Se encuentra al
final del ADN nuclear.
Telomerasa: Es el respaldo (Secuencia final de un telómero)
RNA molde: Tiene una copia de la información anterior.
 Transcriptasa reversa: Copia la información y la pega.
Endonucleasa: Enzima que corta el ADN.

Cada que la célula se divide, la polimerasa no puede pasar por el telómero y llega una endonucleasa y
corta el ADN. Y cada que se divide va perdiendo longitud en sus telómeros. Por lo que la telomerasa llega
y pone pegamento para hacer el nudo de nuevo.

Células madre o troncales:

➔ Totipotenciales
◆ Células embrionarias: Estadío de mórula (70 horas)
◆ Capacidad de generar cualquier tejido.
➔ Pluripotenciales
◆ Células embrionarias: Estadio de blástula (4-5 días)
◆ Capacidad de generar tejidos, ya se considera embrión. El disco bilaminar e convierte en
trilaminar.
➔ Multipotenciales
◆ Células madre adultas
◆ Capacidad de generar SÓLO tipos celulares del tejido en el que se encuentran
Células autólogas: origen de la misma persona.
Células Heterólogas: provienen de otra persona.
Obtención de células madre:
➔ Embrionarias: Transferencia nuclear, in vitro, Tejidos fetales.
➔ Adultas: Identificado en hígado, médula ósea, tejido muscular, ojos, intestino, grasa, SN.

c. El DNA
Watson y Crick: 1953 propusieron el modelo de la estructura del DNA.
COMPONENTES:
* Unidad básica para construir DNA es un nucleótido qué es lo siguiente:
● Fosfato
● Azúcar (pentosa)
● Base nitrogenada
○ Purinas: A, G (2 anillo)
○ Pirimidinas: C, T, U (1 anillo)
Tipos de unión:
● Enlace fosfodiester: 5’3’ (fuerte)
● Puente de hidrógeno (débil)

Importancia de la propuesta:
● Almacén de la información genética
● Replicación y herencia
● La expresión del mensaje genético.

ARN
Es el ácido nucleico más abundante en la célula eucariota, donde suele ser 10 veces más abundante que
el ADN.

d. Replicación
*Se lleva acabo en la fase S del CC.
*Direccion 5’3’ la síntesis de las cadenas.
*La replicación es semiconservadora, bidireccional y antiparalela.
*Separación gradual de las cadenas de la doble hélice por la enzima helicasa, una vez separadas, la
proteínas SSB mantienen separadas las cadenas para qué la ADN polimerasa II y III hagan la síntesis de
la cadena complementaria.
*Molde: 3’5’
*Hebra discontinua: fragmentos de okazaki

Proteínas que participan en la replicación:

Helicasa: separa las dos hebras SSB (proteínas de unión a cadena sencilla):
evitan formación de puentes de H y permiten que
se copie
Topoisomerasas y girasa: pueden cortar o formar Ligasa: cataliza la formación del enlace
enlaces fosfodiester ya sea una de las hebras o fosfodiéster entre nucleótidos contiguos.
en las dos. Deshacen el superenrollamiento. Telomerasa: con actividad de adn polimerasa,
Primasa: sintetiza pequeños fragmentos de ARN sintetiza secuencias de ADN, permite alargar
(primers o cebadores) telomeros.
La unión de los cebadores al ADN proporciona un ADN polimerasa: principales, sintetizan nuevas
extremo 3’ necesario para que la ADN polimerasa cadenas de ADN a partir de una hebra. 5’3’
haga su acción.
Rnasa H1: enzima que retira los cebadores de
ARN durante la síntesis de los fragmentos de
Okazaki y en procesos de reparación del ADN.
e. Estructura y función de un gen

AÑO 1953
➔ Regla de Chargaff: La proporción de purinas y pirimidinas es la misma.
➔ Difracción de Rayos X: Para visualizar estructuras muy pequeñas.
LINUS PAULING
➔ Descubre estructura a-hélice de la hemoglobina.
FRANKLIN
➔ Estructura helicoidal.

f. Integración del Genoma

g. Transcripción
En la transcripción se va a llevar a cabo el copiado del ADN A ARN, haciendo el cambio de la Timina por el
Uracilo en las bases nitrogenadas.
1. Las enzimas Helicasas llegan y abren las cadenas de ADN.
2. Proteínas de Unión a cadenas sencillas o SSB se adhieren a estas cadenas para evitar la
formación de puentes de hidrógeno.
3. La ADN Polimerasa se va a encargar de hacer la copia ‘sintetizar’ la nueva cadena (ARNm).
a. En la cadena 3’ ➜ 5’: La ADN Polimerasa va a añadir los nucleótidos de forma normal.
b. En la cadena 5’ ➜ 3’: Se van a formar los fragmentos de Okazaki para poder sintetizar la.
4. Se retiran las SSB y la Helicasa para que la cadena de ADN vuelva a su estado normal.

h. Procesamiento del RNA o Etapa postranscripcional

➔ Splicing
➔ CAP
➔ Cadena Poly A

i. Traducción
Se lleva a cabo en los ribosomas, los cuales tienen dos
fragmentos el a y p.
1. Llega el ARNm y se inserta en la porción pequeña del
ribosoma. Este ARNm tiene una cadena enorme de
bases nitrogenadas unidas a él.
2. La porción que se encuentra en el ARNm se le
llama codón y la porción que se le va a adherir del
ARNt (transferencia) se le conoce como anticodón. Se
van a ir uniendo codones y anticodones en las
secciones a y p de la subunidad mayor del ribosoma.
Cada anticodón está formado por 3 bases
nitrogenadas.
a. Codón de inicio: Metionina AUG
b. Codones de terminación: UAA, UAG, UGA.
3. Finalmente se rompe el enlace entre el aminoácido y las bases nitrogenadas, y estos aminoácidos
se van uniendo unos con otros, formando cadenas de polipéptidos.
a. Las cadenas de polipéptidos: se enrollan formando las proteínas.
b. Los ARNt se salen del ribosoma y son hidrolizados por RNasas para reciclarlos y volver a
ser utilizados más adelante.

j. Maduración de proteínas
Las cadenas de polipéptidos van a adquirir una estructura tridimensional para tener funcionalidad. Esto se
lleva a cabo mediante el añadido de grupos o átomos que le dan función.
➔ Fosfatos
➔ Metilos
➔ Hisroxilo Se adicionan a una proteína y se convierte en una proteína
➔ Acetilo funcional
➔ Carboxilo
➔ Amino

k. Epigenética
Cambios heredables en la función del genoma humano qué son extrínsecos a la secuencia primaria de
DNA.

2. PARCIAL 2: Biología Molecular para el diagnóstico

a. Generalidades de la Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
Def: método in vitro de síntesis de ADN con él qué un segmento particular de este es específicamente
amplificado al ser delimitado por un par de cebadores o iniciadores.

➔ Su copiado se logra a través de ciclos de diferentes periodos y temperaturas en presencia de la

enzima ADN polimerasa.
➔ CARACTERÍSTICAS: Específica, Rápida, Sensible y Versátil.
➔ Bacteria: Thermus aquaticus
➔ 30 ciclos: mil millones de copias. 20 ciclos: 1 millón de copias
➔ PASOS:
◆ Desnaturalización: Calentar a 90°C-95°C por un minuto. Las cadenas de ADN se separan
por la ruptura de los puentes de hidrógeno.Se exponen las bases.
◆ Alineamiento: Hibridación de las cadenas con los cebadores o iniciadores a una
temperatura entre los 55°C y 65°C (40°C-72°C). Crece la cadena complementaria.
◆ Extensión o elongación: La polimerasa comienza a copiar la hebra incorporando
desoxirribonucleótidos monofosfatados. 5’3’. Temp. a 72°C
➔ INGREDIENTES: ADN, cebadores, dNTPS, tampón de reacción para la polimerasa, agua y ADN
polimerasa termoestable.
➔ dNTPS: dATP (adenina), dTTP (timina), dCTP (citosina), dGTP (guanina). Son los ladrillos con los
que se construyen las nuevas cadenas de ADN.
➔ Cebadores: 18-30 nucleótidos. Son complementarios a la cadena molde
➔ ADN: 1ng (clonado), 20 ng (ADN genómico)
➔ Dímeros: artefacto común en la PCR, resultado de un mal diseño en cebadores:

TIPOS DE PCR:
➔ RQ-PCR: Real time / PCR cuantitativa.
◆ Detección y cuantificación de la señal emitida por un reporter fluorescente que aumenta la
cantidad de producto de PCR.
◆ Cuantificación de la expresión de genes o reordenamiento. Es más rápida y menos
laboriosa. Utiliza fluorescencia.
◆ Tipos de cuantificación:
● Cuantificación relativa: Expresión.
● Cuantificación absoluta: N° de copias.
◆ Reactivos fluorescentes:
● Agentes intercalantes (SYBR Green): Se pega y se mete en donde detecta dobles
cadenas y emite fotómetros.
○ Ventajas: Simple y barato. Fácil de usar. Sensibilidad 10-6 Versátil.
○ Desventajas: Sobrestimación de la cantidad molde.
● Sondas de Hidrólisis (Taq Man): Son más específicas. Se diseñan, se adhieren en
donde va el primer. Fotomero en fase de extensión.
○ Ventajas: Especificidad. Librerias de cebadores y sondas (Casas
comerciales)
○ Desventajas: Diseño de cebador y sonda para genes no estudiados.
● Sondas de hibridación.
● Sondas de horquilla.
 ➔ RT-PCR
◆ Detección de la expresión de un gen por presencia de ARNm.
◆ Enzima ARN retrotranscriptasa
◆ ADNm ➝ ADNc ➝ PCR + enzima taq polimerasa

➔ PCR ANIDADA:
◆ Amplificación de fragmentos grandes.
◆ Se aísla y se vuelve a poner en proceso de reacción para una selección más específica a
amplificar.
➔ PCR ALELO ESPECÍFICO
◆ Se basa en SNPs (single-nucleotide polymorfisms)
◆ Requiere conocimiento de una secuencia de ADN, incluyendo las diferencias entre los
alelos.
➔ PCR MÚLTIPLE
◆ Reacciones que consiguen amplificar al mismo tiempo y en un único tubo diferentes
secuencias diana.
◆ Aplicaciones:
● 1) Control de calidad de una muestra.
● 2) Amplificación de una translocación.
● 3) Amplificación de alelos específicos.
➔ PCR IN SITU
◆ Dentro de las células (ej.tumorales) para él dx de virus o agentes intracelulares con fines
diagnósticos.

b. Retrotranscripción en la naturaleza y como técnica de

diagnóstico
La transcripción reversa (RTPCR) es una técnica que permite
sintetizar DNA complementario (cDNA) a partir de moléculas
de RNA usando para ello la enzima transcriptasa reversa. Él cDNA
obtenido es una cadena complementaria de la cadena molde de
RNA. Implica la generación de una cadena de ADN a partir de
ARN.

c. Visualización e interpretación de material genético amplificado

La visualización de los fragmentos amplificados se va a realizar mediante electroforesis que puede ser en
geles de agarosa o de poliacrilamida.

d. Uso en la clínica de la PCR

➔ Aislamiento de genes
➔ Dx de infecciones
➔ Dx de enfermedades hereditarias y cáncer
➔ Mutagénesis dirigidas
➔ Monitorización de terapias de cáncer
➔ Estudios de identidad y filiación
➔ Investigación forense

e. Hibridación de ácidos nucleicos y su utilidad en el diagnóstico

 f. Hibridación Southern, Captura de híbridos, hibridación genómica, cariotipos basados en
biología molecular.
Secuenciación: Es una modificación de la técnica de PCR. Se busca saber la secuencia correcta en
fragmentos, nucleótido a nucleótido.
➔ Método sanger: Secuenciando los fragmentos se arrojan los fluoróforos. Se alinean los resultados.
Finalmente se realiza la revisión visual de los electroferograma.

Microarreglos
Son una nueva herramienta. Conjunto ordenado de genes en una superficie pequeña.
PROCEDIMIENTO:
➔ 1) Se fabrica una sonda para una región específica. Ocurre en cada pozo del chip.
➔ 2) Se coloca en ADN
➔ 3) Emite señal

Southern
Se utilizan sondas de ADNc para identificar qué bandas del gel contienen secuencias complementarias de
la sonda. Enzimas de restricción.

Northern
Muestra ➝ Extracción ARN ➝ Electroforesis ➝ Northern blot ➝ RNA arreglado a membrana con vr ➝ membrana
hibridizada➝ visualización del etiquetado RNA con X-ray film.
Captura de hibridos
ETAPAS
➔ Desnaturalización (45 min)
➔ Hibridación con sondas de ARN (60 min)
➔ Captura de híbridos (60 min) anticuerpos detectan los híbridos (el primero se adhiere al pozo y el
segundo se adhiere a los híbridos y actúan el fluorosforo por un ag-ac.
➔ Detección (60 min)
➔ Lectura (15 min)
PROCESO
1. La muestra se va a desnaturalizar.
2. Se van a añadir las sondas de ARN, se baja la temperatura y se va a dar la hibridación.
3. Viene la captura de híbridos que funciona como un antígeno.
4. Se añade el anticuerpo adherido a la pared del pocillo.
5. Se da la unión del anticuerpo primario con el secundario.
6. Se deja reposar y posteriormente se leen los resultados para obtener un diagnóstico.
DESVENTAJA VENTAJA
No es muy específica Sirve para la detección de VPH
Si la absorbancia es menor ➜ hay más híbridos (más color)
Si la absorbancia es mayor ➜ hay menos hibridos (menos color)
Hibridación genómica
Detección de enfermedades y cáncer
Se necesita una muestra control y una muestra del paciente, estos dos se introducen en un chip con
oligonucleótidos de cobertura genómica variable.
➔ Si se hibrida la muestra del paciente: hay problema
➔ Si se hibrida la de control: Está bien
➔ Si se hibridan ambas: Hay genes tanto buenos como malos.

g. Reacción antígeno-anticuerpo y su utilidad en el diagnóstico

INMUNOENSAYOS
➔ Precipitación: Unión de antígeno + anticuerpo.
➔ Aglutinación: Un anticuerpo se fija en 2 elementos simultáneamente.
➔ Neutralización: Anticuerpo inhibe/ se fija en un antígeno específico y cancela su sitio activo.
➔ Opsonización: Anticuerpos activan fagocitosis.

Anticuerpos monoclonales: Se obtienen a partir de 1 solo tipo de células

Anticuerpos: son proteínas

h. ELISA, inmunoblot, inmunofluorescencia e inmunohistoquímica

ELISA: Se cuantifican los anticuerpos en el suero del paciente para detectar exposicion a un agente
infeccioso.
1. Antigeno 3. Anticuerpo marcado con cromóforo y se
2. Anticuerpo va a activar al estar en contacto con la
unión ag-ac
Tipos de ELISA:
● Directa: detectan antígenos ● Sandwich: Ac + Ag + Ac
● Indirecta: segundo anticuerpo (detectan ● Competitiva: Incubación previa se le
anticuerpos) añaden los 2 Ac

INMUNOHISTOQUÍMICA: Es cómo ELISA pero insitu (tejido). Basada en la reacción de la enzima.

Pruebas de cáncer de mama.

INMUNOFLUORESCENCIA: En lugar de enzima tiene fluoróforo qué va a dar fluorescencia. Es más

sensible. Se realiza con microscopio.

3. PARCIAL 3: Biología Molecular y Celular en la terapia

a. Ingeniería genética y su uso en biotecnología
Biotecnología: Son técnicas con aplicaciones biológicas, poder utilizar genes de otras especies como
marcador.
Enzimas de restricción: Cortan en sitios específicos. (extremos romos y pegajosos)
Plásmido o promotor: Permite la expresión del gen. Secuencia de ADN circular bacteriano.
Bacteriofagos: Virus de las bacterias.
Proteína recombinante: Proteína de una especie determinada producida en un organismo diferente. ej.
Interferon e Insulina
Secuencias palindrómicas. Secuencias que se leen igual en el sentido 5’ ➜ 3’ y 3’ ➜ 5’.

b. Usos de proteínas recombinantes

ORDEN:
1. E. Coli
2. Levaduras
3. Insectos
4. Mamíferos

c. Anticuerpos Monoclonales
d. Principios de terapia génica
Es el tratamiento o prevención de una enfermedad mediante la inserción de secuencias de nucleótidos
(ADN o ARN) en la célula.
➔ Propósito: Restablecer una función celular que ha sido abolida o defectuosa, para introducir una
nueva función o interferir en una ya existente.
 ➔ El desarrollo de la terapia génica se dirige a células SOMÁTICAS debido a que solo afectaría al
individuo y no a toda su descendencia.
➔ Elementos:
◆ Material genético a transferir: El gen terapéutico debe llevar la función que ayuda a
combatir la enfermedad.
● Los genes terapéuticos cancerígenos: bloquean las capacidades de crecimiento,
diseminación e invasión, angiogénesis y evasión del Sistema inmunitario de las
células cancerosas.
● Ej: Para crear tejido nuevo ➜ Gen del factor de crecimiento.
● Ej: Cáncer ➜ Eliminación de células neoplásicas o restricción del crecimiento.
● EL GEN SIEMPRE VA ACOMPAÑADO DE UN PROMOTOR.
◆ Método de transferencia: Son los vectores.
◆ Tipo de célula objetivo.

e. Vectores para terapia génica

Vectores virales:
➔ Retrovirus (VIH,MMLV): Integración.
◆ Material genético en forma de ARN.
◆ Infecta a una célula huésped. Introducirá su ARN junto con enzimas (transcriptasa inversa y
la integrasa).
◆ Proceso:
● 1) Producir una copia de ADN de su ARN antes de integrarse.
● 2) El material genético se inserta en el genoma celular y se convierte en parte de
material genético.
● 3) Sus descendientes tendrán nuevos genes insertados.
◆ Problemas:
● Coenzima integrasa: Puede insertar el material genético del virus en cualquier
ubicación del genoma de la célula.
◆ Vectores lentivirales: Modificación de células dendríticas y producen respuesta inmunitaria
mediadas por las células T. Pueden afectar estén o no en división activa.
➔ Adenovirus: NO integración.
◆ Más utilizados contra el cáncer. Tipo 5 más utilizado y hay más de 51 serotipos.
◆ Contrapartes:
● Causan enfermedades en el tracto respiratorio.
● Gastroenteritis.
● Conjuntivitis/cistitis.
● Infecciones (tomar en cuenta que son pacientes inmunodeprimidos)
◆ Ingresan a través de proteínas virales con receptores celulares.
◆ Pueden infectar gran variedad de tipos celulares (ventajoso)
◆ Gen clave: E1A
➔ Virus adenoasociados: Integración. (algunos no se integran)
◆ Son virus pequeños con un genoma de ADN monocatenario.
◆ No genera respuesta inmune.
◆ Pueden infectar células en división o no.
◆ Tratamiento de enfermedades que requieren actividad a largo plazo.
◆ Principales enfermedades:
● Musculares
● Oculares
➔ Poxvirus: Vaccinia: NO integración.
◆ No genera respuesta inmune.
◆ Vaccinia es la vacuna de la viruela.
◆ Pueden infectar una amplia gama de células, tener genoma que puede acomodar grandes
insertos de ADN, replicarse completamente en el citoplasma.
◆ Vacunas para: Prevención y tratamiento de VIH y Cáncer.
➔ Herpes simplex: NO integración
◆ Consisten en un genoma de ADN lineal grande de doble hebra.
◆ Es altamente infeccioso (vectores del VHS eficientes)
◆ Vectores no patógenos, incapaces de reactivarse y persistir a largo plazo.
◆ Vectores HSV ideales para el sistema neural
◆ Amplicones: vectores defectuosos y no integradores derivados de VSH-1
 ◆ No llevan genes virales en el genoma del vector por lo que no son tóxicos.

Vectores no virales:
DNA “desnudo”: NO integración
Liposomas

f. Usos actuales de la terapia génica y su futuro

ETAPAS de un medicamento o estrategia terapéutica.
➔ FASE 1: Toxicología y farmacocinética. Pocos pacientes muy bien supervisado en un estudio de
aumento de dosis y análisis cuidadoso de los efectos tóxicos
➔ FASE 2: Dosis y efectividad. Mayor número de pacientes y análisis de los efectos adversos y
beneficios.
➔ FASE 3: Eficiencia y riesgo / beneficio. Gran número de pacientes para evaluar utilidad y seguridad
con exactitud.
➔ FASE 4: Efecto a largo plazo. El medicamento ya está en el mercado, aunque sus beneficios y
efectos secundarios continúan siendo evaluados.
g. Generalidades de Viroterapia
h. Principios de medicina regenerativa
Se aborda desde 3 puntos de vista:
➔ Celular: A Partir de células pluripotenciales, totipotenciales y multipotenciales.
➔ El andamiaje: ‘Matrices’ la célula va a trepar en ellas para estar más segura.
➔ Bioestimulación: célula adquiere características para inducir diferenciación.
Tipos de cultivo de células de mamífero:
➔ Líneas celulares establecidas
◆ Tumorales e inmortalizadas
➔ Cultivos primarios:
◆ Células madre y células adultas.
RNA de intertransferencia: Bloquea la expresión de manera casi irreversible.

i. Generalidades de Ingeniería de tejidos

Células: Autólogas y heterólogas
Matrices: sintéticas o naturales
Señales moleculares:
Factores de crecimiento Morfogenetica
Hormonas Proteínas
Pequeñas moléculas iRNA
Formas de obtener células madre: clonación terapéutica, fertilización in vitro, tejidos fetales humanos y
células reprogramadas.
Cultivo primario: células se extraen directamente de una biopsia y se comienzan a propagar.

j. Ética y regulación
La terapia génica está bajo la regulación del código de Nuremberg (1947) y la declaración de Helsinki
(1964) que estableció la principal etica de investigación sobre la vulnerabilidad y el interés del paciente, así
como el beneficio de la revisión independiente.
➔ Comites de etica:
◆ Comité asesor de ADN Recombinante de los EE.UU. (RAC)
◆ Comité Asesor de Terapia Génica del Reino Unido (GTAC)
◆ Panel Asesor de Investigación de Terapias Génicas de Australia (GTRAP)
*Terapia génica con células germinales está prohibida*