AGUA PARA CONSUMO HUMANO. Determinación de cloro residual.

Método colorimétrico DPD

1. OBJETO

1.1. Esta Norma Técnica Peruana establece el método colorimétrico DPD para determinar
el cloro residual en aguas naturales y tratada.
1.2. La concentración mínima detectable es de aproximadamente 10 ug de cloro como
Cl2/L. Este límite de detección se consigue en condiciones ideales, los límites de
detección en el trabajo rutinario son más altos.

2. REFERENCIAS NORMATIVAS

Las siguientes Normas contienen disposiciones que al ser citadas en este texto constituyen
requisitos de esta Norma Técnica Peruana. Las ediciones indicadas estaban en vigencia en
el momento de esta publicación. Como toda Norma está sujeta a revisión, se recomienda a
aquellos que realicen acuerdos en base a ellas, que analicen la conveniencia de usar las
ediciones recientes de las normas citadas seguidamente. El Organismo peruano de
Normalización posee la información de las Normas Técnicas Peruanas en vigencia en todo
momento.

2.1. Norma Técnica Peruana

NTP 214.003:1987 AGUA POTABLE. Requisitos

3. DEFINICIONES

Para los propósitos de esta Norma Técnica Peruana se aplica las siguientes definiciones:
3.1. Cloro residual: Cloro remanente en el agua después de la cloración, presente en
forma de cloro libre, cloro combinado y total.
3.2. Cloro libre: Cloro presente en el agua en la forma de ácido hipocloroso, ion hipoclorito
o cloro elemental disuelto
3.3. Cloro combinado: Fracción de cloro total presente en el agua en la forma de
cloraminas y cloraminas orgánicas.
3.4. Cloro total: Cloro presente en el agua en la forma de “cloro libre” o “cloro
combinado” o ambos.

4. PRINCIPIO DEL METODO

La N-N-dietil- p-fenilendiamina (DPD) reacciona con el cloro y forma un compuesto color

rojo, en un rango de ph de 6.2 a 6.5.

5. INTERFERENCIAS

La sustancia más comúnmente encontrada en el agua y que tiene interferencia

significatividad es el manganeso en su forma oxidada, lo que puede minimizarse usando
corrección con arsenito de sodio o tioacetamida.
En general el color y la turbiedad también interfieren, por lo que se debe compensar por
ajuste de la lectura del fotómetro a cero, utilizando un blanco de muestra.
 LA presencia de compuestos orgánicos, así como de oxidantes fuertes como bromo,
dióxido de cloro, iodo, permanganato, cromato, peróxido de hidrogeno y ozono pueden
dar una lectura falsa de cloro.

6. EQUIPOS Y MATERIALES

6.1. Equipos fotométricos: SE precisa uno de los siguientes:

6.1.1.Espectrofotómetro: para uso a longitud de onda de 515 nm con un recorrido de
luz de 1,0 cm o más.
6.1.2.Fotómetro de filtro: provisto de un filtro cuya transmisión máxima se encuentre
en el rango de longitudes de onda de 490 a 530 nm con un recorrido de luz de
1,0 cm o más.
6.1.3.Celdas con tapa: celdas o tubos de diferentes volúmenes.
6.2. Balanza analítica: con precisión de 0.1 mg
6.3. Material de vidrio: para evitar la contaminación con ioduro de las determinaciones de
cloro libre y combinado, utilizar material de vidrio exclusivo, incluidas las celdas del
espectrofotómetro.

7. REACTIVOS

Usar solamente reactivos de grado analítico

7.1. Fosfato acido de sodio anhidro, Na2HPO4
7.2. Fosfato acido de potasio anhidro, KH2PO4
7.3. N, N-dietil-p-fenilendiamina (DPD), Oxalato de DPD, o sulfato de DPD pentahidratado,
o sulfato de DPD anhidro.}
7.4. Sulfato de hierro II y amonio, (SAF), Fe(NH4)2(SO4).6H2O
7.5. Etilendiamina tetracetato de sodio dihidratado, (EDTA)
7.6. Ioduro de potasio, KI en cristales preferentemente
7.7. Tioacetamida, CH3CSNH2
7.8. Permanganato de potasio, KMnO4
7.9. Dicromato de potasio, K2Cr2O7
7.10. Difenilamina sulfonato de bario, (C6H5NHC6H4-4-SO3)2 Ba
7.11. Cloruro de mercurio, HgCl2
7.12. Ácido sulfúrico, H2SO4
7.13. Ácido Fosfórico, H3PO4
7.14. Tiosulfato de sodio, Na2S2O3.5H2O
7.15. Arsenito de sodio, NaAsO2
7.16. Almidón soluble.

8. SOLUCIONES

8.1. Solución amortiguadora de fosfato: Disolver 24 g de fosfato de ácido de sodio anhidro

y 46 g de fosfato acido de potasio anhidro en agua destilada. Combinar esta solución
con 100 ml de agua destilada denla que se ha disuelto 800 mg de EDTA y diluir con
agua destilada hasta 1 L. Añadir 20 mg de HgCl2 para impedir el crecimiento de moho
e interferencias en la prueba del cloro libre, debida atrasas de ioduro en los reactivos.
(PRECAUCION: El HgCl2 es toxico, se debe tener cuidado de evitar su ingestión.)
8.2. Solución indicadora de N,N-dietil-p-fenilendiamina (DPD): Disolver 1 g de oxalato de
DPD, o 1,5 g de sulfato de DPD pentahidratado, o 1,1 g de sulfato de DPD anhidro en
agua destilada exenta de cloro que contenga 8 ml de solución H2SO4 (1+3) y 200 mg
de EDTA. Completar a 1 L y conservar en oscuridad en frasco ámbar con tapón de
vidrio, desechar cuando se decolore. Comprobar periódicamente la absorbancia de
esta solución a la longitud de onda de 515 nm y desecharla cuando exceda de
0,002/cm. (La solución amortiguadora y el indicador sulfato se encuentran
comercialmente como reactivo combinado en forma de polvo estable.) (PRECACION:
El oxalato es toxico, se debe evitar su ingestión o inhalación).
8.3. Solución de sulfato amonio y hierro II, (SAF): Disolver 1,106 g de
Fe(NH4)2(SO4)2.6H2O en agua destilada que contiene 1 ml de solución H2SO4 (1+3) y
completar hasta 1 L con agua destilada recién hervida y enfriada. Esta solución patrón
se puede utilizar durante 1 mes y se comprobara su factor con dicromato de potasio.
Para ello adicionar 10 ml de solución de H2SO4(1+5), 5 ml de H3PO4 y 2ml de solución
del indicador di fenilamina sulfonato de bario al 0,1% a 100 ml de solución de SAF,
titular con solución patrón primario de dicromato de potasio 0,1N hasta punto final
color violeta que persista durante 30 s. La solución titulante equivalente a 100 ug de
cloro como Cl2/ 1ml, requiere 20 ml de solución de dicromato para titulación.
8.4. Solución de ioduro de potasio al 0.5% (m/v): Disolver 500 mg de KI y diluir a 100 ml,
con agua destilada recién hervida y enfriada. Conservar refrigerada en frasco color
ámbar con tapón de vidrio. Descartar la solución cuando presente color amarillo.
8.5. Solución de arsenito de sodio al 0.5% (m/v): disolver 5,0 g de NaAsO2 en agua
destilada y diluir a 1L (PRECACUCION: Esta solución es toxica, evitar su ingestión e
inhalación).
8.6. Solución de tiocetamida al 0.25% (m/v): Disolver 250 mg de CH3CSNH2 en 100 ml de
agua destilada (PRECAUCION: Presunto agente cancerígeno; evitar el contacto con la
piel, inhalación o ingestión).
8.7. Solución de tiosulfato de sodio 0,1 N: Disolver 25 g de Na2S2O3.5H2O en 1L de agua
destilada recientemente hervida y enfriada, estandarizar con dicromato de potasio o
biodatos de potasio después de al menos dos semanas de almacenamiento. Este
almacenamiento es necesario para permitir la oxidación de cualquier bisulfito
presente. Añadir aproximadamente 2 ml de cloroformo para minimizar la
descomposición bacteriana.
8.8. Solución de tiosulfato de sodio 0,025 N o 0,01 N: Diluir la solución almacenada de Na
2S2O3 0,1 N a las concentraciones deseadas, utilizando agua destilada recientemente
hervida y enfriada. Para acentuar su estabilidad, agregar 4g de borato y 10 mg de
ioduro de mercurio por cada litro de solución. Para determinación precisas,
estandarizar diariamente esta solución usando soluciones 0.01 N o 0.025 N de
dicromato de potasio o biiodato de potasio.
8.9. Solución de dicromato de potasio 0,001N: Disolver 0,691 g de K2Cr2O7 en 1l de agua
destilada.
8.10. Difenilamina sulfonato de bario al 0,1 % (m/v): Disolver 0,1 g de
(C6H5NHC&H4-4-SO3)2 Ba en 100ml de agua destilada.
8.11. Solución de Almidón: Colocar 5 g de almidón en un mortero, añadir una
pequeña cantidad de agua fría y triturar hasta obtener una pasta fina. Añadir esta
pasta a 1 L de agua destilada hirviendo, agitar durante quince minutos y dejar en
reposo toda la noche. Usar el sobrenadante. Conservar con 1.25 g de ácido salicílico y
4 g de cloruro de zinc.
 8.12. Agua libre de demanda de cloro: Preparar una solución de 5 mg/L de cloro en
agua destilada o agua des ionizada. Luego de 2 digas de reposo, esta solución debe
contener como máximo 2mg7L de cloro libre. Eliminar el cloro liberado restante
colocando el recipiente a la luz solar o irradiando con una lámpara ultravioleta. Luego
de varias horas, tomar una muestra adicionar KI y medir el cloro total con un método
colorimétrico, usando un tubo Nessler para aumentar la sensibilidad. No utilizar esta
agua hasta haber eliminado las ultimas trazas de cloro libre y combinado.

9. MUESTREO

El cloro en solución acuosa no es estable por lo que el contenido decrecerá rápidamente.

La exposición a la luz o la agitación acelerara la reducción del cloro. La medición debe
realizarse inmediatamente. Si esto no fuera posible, recolectar la muestra en frascos de
polietileno o vidrio borosilicato. Los frascos deben llenarse por completo y taparse de tal
manera que no quede aire en su interior. Transportar en oscuridad y analizar
inmediatamente.

10. PROCEDIMIENTO
10.1. Calibración del equipo fotométrico: Seguir las instrucciones del fabricante para
el manejo del espectrofotómetro. En general, seguir el siguiente procedimiento:
a) Encender el espectrofotómetro;
b) Seleccionar la longitud de onda de acuerdo con 6.1.1;
c) Estabilizar el instrumento;
d) Ajustar el control “O” de absorbancia con la solución de concentración (0 mg/L);
e) Seleccionar el modo de lectura (Absorbancia, concentración o transmitancia); y
f) Leer las soluciones de calibración y registrar los valores de absorbancia o
transmitancia en funcione de la concentración. Hacer una curva de calibración
graficando absorbancia o trasmirtancia en función de la concentración.
10.2. Obtención de la curva de calibración: La curva de calibración se puede obtener
con solución o permanganato de potásico.
10.2.1. Preparación de soluciones de cloro: Preparar soluciones de cloro desde 0,05
mg /L hasta 4 mg/L a partir de agua de cloro de 100 mg/L estandarizada del
modo siguiente: colocar en un frasco Erlenmeyer, 2 ml de ácido acético y de 10 a
25 ml de agua libre de demanda de cloro. Añadir aproximadamente 1 g de KI.
Medir en el frasco Erlenmeyer un volumen adecuado de solución de cloro. Para
elegir este volumen tener en cuenta que 1 ml de solución de Na2S2O3 0,025N
equivale a unos 0,9 de cloro. Titular con solución de Na2S2O3 0,025 N hasta
antes de la desaparición del color amarillo del iodo. Añadir de 1 a 2ml de
solución indicadora de almidón y continuar la titulación hasta desaparición del
color azul.

Corregir el resultado de titulación de la muestra, determinado la contribución del

blanco por las impurezas reductoras u oxidantes del reactivo. El blanco
compensa también la concentración del iodo asociado al almidón en el punto
final.

Determinar el blanco por adición de cantidades idénticas de ácido acético, KI y

solución indicadora de almidón, a un volumen de agua libre de demanda de
 cloro, correspondiente al de la muestra utilizada para titulación. Tomar un
volumen de agua destilada correspondiente a la muestra utilizada para
titulación, añadir 5 ml de ácido acético, 1 g de KI y 1 ml de solución almidón.
Realizar la valoración del blanco según a) o b), la que sea aplicable.

a) Si aparece un color azul, titular con solución Na2S2O3 0,01 N o

0,025N, hasta desaparición del color azul y registrar el resultado. B
es negativo.
b) Si no aparece el color azul, titular con solución de iodo 0,0282 N
hasta aparición del color azul. Titular por retroceso con solución de
Na2S2O3 0,01 N o 0,025 N y registrar la diferencia. B es positivo.

Antes de calcular la concentración de cloro, restar el volumen gastado en la

titulación de la muestra, el volumen del blanco del apartado a) si fuera
necesario, añadir el equivalente neto de la titulación del blanco del apartado
b).

Calcular el contenido de cloro con la siguiente ecuación:

( A + B ) xNx 35.45
mg de cloro como C l 2 /mL=
ml de muestra

Donde:

N= normalidad de solución Na2S2O3,

A= mL de titulante para la muestra,
B= mL de titulante para el blanco (se suman o restan según la titulación del blanco requerida.

10.2.2. Curva de calibración con soluciones de cloro: Utilizar agua libre de demanda de
cloro y material de vidrio limpio para preparar las soluciones de cloro. Desarrollar
el color, poniendo en el frasco Erlenmeyer, primero 5 ml de solución
amortiguadora de fosfato y 5 ml de reactivo indicador DPD, añadir luego 100 ml
de las soluciones de cloro, con agitación completa, como se describe en 10.3.
Llenar la celda del fotómetro o colorímetro con la solución del frasco Erlenmeyer
y leer la absorbancia a 515 nm. Regresar el contenido al frasco Erlenmeyer y
titular con solución patrón SAF, como comprobación de la concentración de
cloro.
10.2.3. Preparación de soluciones de permanganato de potasio: Preparar una solución
patrón que contenga 891 mg de KMnO4/L. Diluir 10 ml de esta solución en un
frasco volumétrico de 100 ml, con agua destilada. Diluir 1 ml de esta solución a
100 ml con agua destilada para producir un equivalente de cloro de 1,00 mg /L
en la reacción de DPD.
10.2.4. Curva de calibración con soluciones de permanganato: Preparar una seria de
soluciones de KMnO4 que comprendan el rango equivalente de cloro desde 0,05
a 4 mg/L. Desarrollar el color, poniendo primero 5 ml de solución amortiguadora
de fosfato y 5ml de reactivo indicador DPD en un frasco Erlenmeyer, añadiendo
100 ml de las soluciones de KMnO4, mezclar completamente, tal como se
 describe en 10.3. Llenar la celda de fotómetro o colorímetro con la solución de la
frase Erlenmeyer y leer la absorbancia a 515 nm. Regresar el contenido de la
celda al frasco Erlenmeyer y titular con solución SAF como comprobación de
cualquier absorción de permanganato por el agua destilada.
Obtener todas las lecturas por comparación con soluciones de color o la curva de
calibración, antes de usarlas en los cálculos.
10.3. Medición de cloro libre y cloraminas: Utilizar un volumen de muestra
apropiado para el fotómetro o colorímetro. El procedimiento que se indica a
continuación se basa en la utilización de volúmenes de 10 ml; ajustar las cantidades
de reactivos de manera proporcional para otros volúmenes de muestra. Diluir la
muestra con agua libre de demanda de cloro, cuando el cloro total supere los 4 mg/L.
10.3.1. Medición de cloro libre: Colocar 0.5 ml de reactivo amortiguador y 0.5 ml de
solución indicadora DPD en la celda del fotómetro. Añadir 10 ml de muestras y
mezclar. Medir la absorbancia inmediatamente (Lectura A)
10.3.2. Medición de monocloramina: Continuar con la adición de un cristal muy
pequeño de KI (alrededor de 0,1 mg) y mezclar. Si se espera una concentración
alta de cloramina, en vez de un cristal pequeño añadir 0,1 ml (2 gotas) de
solución de Ki recién preparada (0,1 g7100 ml). Medir la absorbancia
inmediatamente (Lectura B).
10.3.3. Medición de dicloramina: Continuar con la adición de un cristal muy pequeño
de KI (alrededor de 0,1 g) y mezclar para disolver. Dejar reposar unos 2 minutos y
medir la absorbancia (Lectura C).
10.3.4. Procedimiento simplificado para cloro total: Omitir el paso 10.3.2 para obtener
monocloramina y dicloramina juntos como cloro combinado. Para obtener cloro
total en una sola lectura, añadir la cantidad total de KI al inicio, con las
cantidades especificadas del reactivo amortiguador y el indicador DPD. Medir la
absorbancia a los 2 min.

El cloro libre y cloro total pueden ser determinados por forma rápido, en campo, en
basadas en el mismo principio del método, usando el reactivo DPD y comparadores de
color o colorímetro que tienen longitud de onda fija.

11. EXPRESION DE RESULTADOS

TABLA 1
LECTURA NCl3 ausente NCl3 presente
A Cl libre Cl libre
B-A NH2Cl NH2Cl
C-B NHCl2 NHCl2 + ½ NCl3
N - Cl libre + ½ NCl3
2(N-A) - NCl3
C-N - NHCl2

En el caso de que se encuentre monocloraminas cuando este presente NCl3, este se incluirá en
la lectura N, en cuyo caso NCl3 se obtendrá a partir de 2(N-B).
12. ANTECEDENTE

APHA-AWWA-WEF. Metodo 4500-CL G. Metodo colorimetrico DPD (19 Edicion, 1995).

METODOS ESTANDARIZADOS PARA EL AGUA POTABLE Y RESIDUAL).