Práctica 8, Vitamina C - Instrumental

FORMATO GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO
CÓDIGO: VERSIÓN: FECHA: PÁGINA:

FO-A-APL-02-02 1 2018-03-20 1 de 4
PRÁCTICA N°
TÍTULO DE LA PRÁCTICA: Determinación cuantitativa de vitamina C en frutas

Quimica Instrumental
ASIGNATURA: Análisis Analítica e Instrumental SEMESTRE:IV
1. OBJETIVO.
Determinar la concentración de vitamina C en diferentes frutas
2. FUNDAMENTO TEÓRICO
La vitamina C, conocida como ácido ascórbico, es un nutriente hidrosoluble que se encuentra en ciertos
alimentos. En el cuerpo, actúa como antioxidante, al ayudar a proteger las células contra los daños
causados por los radicales libres. Los radicales libres son compuestos que se forman cuando el cuerpo
convierte los alimentos que consumimos en energía. Las personas también están expuestas a los radicales
libres presentes en el ambiente por el humo del cigarrillo, la contaminación del aire y la radiación solar
ultravioleta. Además, el cuerpo necesita vitamina C para producir colágeno, una proteína necesaria para
la cicatrización de las heridas. La vitamina C también mejora la absorción del hierro presente en los
alimentos de origen vegetal y contribuye al buen funcionamiento del sistema inmunitario para proteger al
cuerpo contra las enfermedades. [1]
Las frutas y verduras son las mejores fuentes de vitamina C. Para ingerir las cantidades recomendadas de
vitamina C, consuma alimentos variados como:
• frutas cítricas (por ejemplo: naranjas y pomelos/toronjas) y sus jugos, así como pimientos rojos y
verdes y kiwi, ricos en vitamina C.
otras frutas y verduras, como brócoli, fresas, melón, papas horneadas y tomates, que también contienen
vitamina C.
• algunos alimentos y bebidas fortificadas con vitamina C. Lea la etiqueta del producto para saber si un
alimento contiene vitamina C agregada. El contenido de vitamina C de un alimento podría disminuir al
cocinarse o almacenarse por tiempo prolongado. Es posible que al cocinar los alimentos al vapor o en
hornos de microondas la pérdida de vitamina C sea menor. Afortunadamente, muchas de las mejores
fuentes de vitamina C, como las frutas y verduras, se comen crudas. [2]
La mayoría de los suplementos multivitamínicos contienen vitamina C. Además, esta vitamina se

consigue sola, como suplemento dietético, o combinada con otros nutrientes. En general, la vitamina C
presente en los suplementos dietéticos se encuentra en forma de ácido ascórbico, pero algunos
suplementos contienen otras formas, como ascorbato de sodio, ascorbato de calcio, otros ascorbatos
minerales y ácido ascórbico con bioflavonoides. Los estudios científicos no han demostrado que ninguna
forma de vitamina C sea más eficaz que otras.
La deficiencia de vitamina C es poco común en los Estados Unidos y Canadá. Quienes ingieren escasa o
ninguna cantidad de vitamina C (menos de 10 mg por día) durante varias semanas pueden contraer
escorbuto. El escorbuto causa cansancio, inflamación de las encías, pequeñas manchas en la piel de color
rojo o violeta, dolor en las articulaciones, mala cicatrización de las heridas, y vello ensortijado o en forma
de “sacacorchos”. Otros síntomas de esta enfermedad incluyen depresión, inflamación y sangrado de las
encías y aflojamiento o pérdida de dientes. Las personas que padecen escorbuto también pueden sufrir
anemia. Sin tratamiento, el escorbuto es mortal. [3]
El consumo de vitamina C en concentraciones demasiado elevadas puede causar diarrea, náuseas y

cólicos estomacales. En las personas que padecen hemocromatosis, un trastorno que provoca una
acumulación excesiva de hierro en el organismo, la vitamina C en dosis elevadas podría empeorar el

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exceso de hierro y dañar los tejidos del cuerpo. [4]
3. TRABAJO PREVIO
3.1 ¿Cuál es el contenido teórico de vitamina C presente en las frutas a trabajar?

3.2 Formas que presenta la vitamina C
3.3 porque la vitamina C se puede determinar por espectrofotometría?
4 ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRÁCTICA
4.1 Materiales y Equipos
10 tubos de ensayo
2 beaker 100ml
1 gradilla
1 embudo
Pipetas de 1,2 y 5ml
1 pinza para tubo
Papel filtro
Agitador de tubo
espectrofotómetro
4.2 Reactivos
10 ml acido oxálico 0,15%

3 ml 2-nitroanilina 0,16% (mezcla equimolar de HCl/CH3COOH)
3ml nitrito de sodio 0,08%(preparado en agua)
30ml etanol puro
10ml solución patrón de ácido ascórbico (0,2mg/ml) en acido oxálico al 0,15%
15ml hidróxido de sodio 10%
Frutas (las tiene que llevar el estudiante)
4.3 Elementos de Protección Personal

Gafas
Bata
Guantas
5 DESARROLLO EXPERIMENTAL
Preparación de la muestra
Cortar, exprimir y filtrar la fruta, transferir 1ml de filtrado a un tubo de ensayo y adicionar 4.0 ml de ácido
oxálico al 0,15% y mezclar
Curva de calibración
para realizar la curva de calibración, marque 8 tubos de ensayo ( B,1,2,3,4,5,6 y 7) agregue los siguientes

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reactivos en el orden que se indica en y la tabla:
Reactivo B 1 2 3 4 5 6 Muestra
2-
nitroanilina 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
(ml)
Nitrito de
0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
sodio (ml)
Mezclar bien hasta que ocurra decoloración, si no ocurre al cabo de 1min agregar otra gota de nitrito de
sodio para conseguir el estado incoloro de la solución
Etanol (ml) 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8
Solución
patrón de
ácido 0,0 0,1 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 0,0
ascórbico
(ml)
Acido
1,0 0,9 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 0,0
oxálico (ml)
Muestra
0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 1,0
(ml)
Mezclar bien y dejar reposar 5 min, luego adicionar
NaOH al
1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2
10% (ml)
H2O
destilada 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8
(ml)
Mezclar bien y leer la absorbancia a 540 nm
6 RESULTADOS
Construir una curva de calibración para la vitamina C (concentración vs Absorbancia en mg/ml) a partir
de los datos de concentración y absorbancia de los patones de ácido ascórbico
7 PREGUNTAS
7.1 Que otras técnicas existen para analizar vitamina C? explique una de ellas
7.2 porque es necesario hacer la extracción de la vitamina C con ácido oxálico?
8 BIBLIOGRAFÍA
[1] CHURCH, D. fisiología y nutrición de los ruminates. España, acriba, 1986.
[2] LENINGHER, A.; NELSON, D. y COX, M principles of biochemistry. 2ed. España. Omega, 1993
CONFERENCIAS PARA LABORATORIO DE BIOQUIMICA BIOLOGIA Y FARMACIA. Universidad

[3]
nacional de Colombia. Santa fe de Bogotá, agosto 1993.


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[4] BOHINSKY, Robert. Bioquímica. 5ed Bogotá. Addison-Wesley iberoamericana. 191

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La mayoría de los suplementos multivitamínicos contienen vitamina C. Además, esta vitamina se

El consumo de vitamina C en concentraciones demasiado elevadas puede causar diarrea, náuseas y

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exceso de hierro y dañar los tejidos del cuerpo. [4]

3.1 ¿Cuál es el contenido teórico de vitamina C presente en las frutas a trabajar?

4 ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRÁCTICA

4.1 Materiales y Equipos

10 ml acido oxálico 0,15%

4.3 Elementos de Protección Personal

CÓDIGO: VERSIÓN: FECHA: PÁGINA:

reactivos en el orden que se indica en y la tabla:

[1] CHURCH, D. fisiología y nutrición de los ruminates. España, acriba, 1986.

CONFERENCIAS PARA LABORATORIO DE BIOQUIMICA BIOLOGIA Y FARMACIA. Universidad

nacional de Colombia. Santa fe de Bogotá, agosto 1993.

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[4] BOHINSKY, Robert. Bioquímica. 5ed Bogotá. Addison-Wesley iberoamericana. 191

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